Práctica de Laboratotio 604

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 Universidad Nacional Autónoma de México Escuela Nacional Preparatoria 2 “Erasmo Castellanos Quinto” Práctica de laboratorio INTEGRANTES: Alcocer Ramírez Andrea. Barranco García Luis Enrique. Cruz Reyes Miguel Ángel. Prieto Herrera Antonio. Ramírez Reyes Daniel de Jesús Reyes Velázquez Bruno David GRUPO: 604 MATERIA: Biología V “Identificación de glucosa mediante Lugol y Reactivo Benedick”

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Universidad Nacional Autónoma de México

Escuela Nacional Preparatoria 2

“Erasmo Castellanos Quinto”

Práctica de laboratorio

INTEGRANTES:

• Alcocer Ramírez Andrea.

• Barranco García Luis Enrique.

• Cruz Reyes Miguel Ángel.

• Prieto Herrera Antonio.

• Ramírez Reyes Daniel de Jesús

• Reyes Velázquez Bruno David

GRUPO: 604

MATERIA: Biología V

“Identificación de glucosa mediante Lugol y Reactivo Benedick”

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FECHA DE ENTREGA: 28 de septiembre de 2011

“Identificación de glucosa mediante Lugol y Reactivo Benedick”

INTRODUCCIÓN:

El almidón, es un carbohidrato complejo, su formula general es (C6H10O5)n, es

inodoro e insípido, en forma de polvo, abundante en las semillas de los cereales y

en bulbos y tubérculos. “Hay dos tipos de moléculas de almidón. El primero es la

amilosa, que constituye el 20% del almidón ordinario, aquí los grupos C6H10O5

están dispuestos en forma de cadena continua y rizada, semejante a un rollo de

cuerda; el segundo la amilopectina, aquí se produce una importante ramificación

lateral de la molécula.” (Starr, 2008) Es fabricado por las plantas verdes durante la

fotosíntesis. Forma parte de las paredes celulares de las plantas y de las fibras de

las plantas rígidas. Sirve de almacén de energía en las plantas, liberando energía

durante el proceso de oxidación en dióxido de carbono y agua. Los gránulos de

almidón de las plantas presentan un tamaño, forma y características específicos

del tipo de planta en donde se ha formado el almidón. La digestión del almidón en

el cuerpo humano sigue el siguiente proceso: la hidrólisis comienza en la boca con

la acción de la ptialina, una enzima presente en la saliva, y se completa en elintestino delgado. El cuerpo humano no consume toda la glucosa producida en la

digestión del almidón, sino que transforma una gran parte de ella en glucógeno

que almacena en el hígado. (Holum, 1990)

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Figura 1. El almidón se encuentra en muchos alimentos que consumimos

cotidianamente (Extraída de Ocampo J. E., 2011)

La glucosa, es un carbohidrato de tipo monosacárido, su fórmula general es

(C6H12O6)n. Se encuentra en la miel y en el jugo de frutas, además está presente

en la sangre de los animales. Se produce en la hidrólisis de numerosos glucósidos

naturales, como la sacarosa, maltosa, celulosa, almidón y glucógeno. Es un sólido

cristalino de color blanco, un poco menos dulce que el azúcar de consumo

(sacarosa). Industrialmente, se utiliza como agente edulcorante en la elaboración

de alimentos, en curtidos y tintes, y en medicina para el tratamiento de la

deshidratación y alimentación intravenosa. (Holum 1990)

Figura 2. Representación cíclica de la glucosa (Extraída de Ocampo, 2011)

La papa, es un tubérculo harinoso comestible producido por ciertas plantas de un

género de la familia de las Solanáceas. La planta se cultiva como herbácea anual,

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el tallo crece hasta casi 1 m de altura, erguido o tendido, con hojas acuminadas y

flores de color entre blanco y púrpura. El fruto es una baya con numerosas

semillas, de tamaño parecido al de la cereza. Igual que los tallos y las hojas, el

fruto contiene cantidades sustanciales de solanina, un alcaloide tóxico

característico del género. Es nativa de los Andes peruanos, fue introducida enEuropa en el siglo XVI por los exploradores españoles. Recién recolectada

“Contiene un 78% de agua, un 18% de almidón, un 2.2% de proteínas, un 1% de

cenizas (elementos inorgánicos) y un 0,1% de grasas” (Egúsquiza, 2000). “Casi el

75% del peso seco son carbohidratos. Es importante fuente de almidón para la

fabricación de adhesivos y alcohol. Se clasifica como: especies diversas del

género Solanum, de la familia de las Solanáceas (Solanaceae). La papa blanca

común corresponde a la especie Solanum tuberosum.” (Oñate, 2008)

La saliva, “Es una mezcla homogénea de secreciones producidas por las

glándulas salivales, que desempeña dos funciones importantes, una participar en

el proceso de la digestión con los carbohidratos y dos, facilitar la deglución del

alimento” (Higashida, 2008). Es un líquido claro, viscoso, alcalino (pH entre 6 y 7),

que contiene un 95% de agua, un 3% de sustancias orgánicas y un 2% de sales

minerales (grandes cantidades de iones de potasio y bicarbonato, y menos de

iones cloro y sodio). Además, contiene dos tipos de secreción proteica: una

secreción serosa rica en ptialina (una alfa-amilasa), que contribuye a la digestión

del almidón, y una secreción mucosa, que contiene mucina, elemento lubricante

que facilita la masticación y el paso del bolo alimenticio hacia el esófago tras la

deglución. Cada minuto se secreta unos 0.5 ml. de saliva, excepto durante el

sueño, donde la secreción es escasa. Tiene un papel importante en el

mantenimiento de los tejidos bucales, ya que ejerce un efecto de limpieza y

arrastre de sustancias alimenticias y de gérmenes patógenos que contribuirían en

ese caso a la aparición de caries dentales e infecciones, así como al deterioro de

los tejidos. Además, contiene iones tiocianato, enzimas proteolíticas y anticuerpos

proteicos que destruyen las bacterias bucales. (Higashida, 2008).

El lugol, es una disolución preparada con 5 g. de I2 (Yodo) y 10 g. de KI (Ioduro de

Potasio) diluidos con 85 ml. De agua destilada, tiene un color marrón y una

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concentración total de yodo de 150 mg./ml. El KI hace el I2 soluble en agua, debido

a la formación de iones I3-. Se utiliza como indicador en la prueba del yodo, que

sirve para identificar polisacáridos como el almidón, glucógeno y ciertas dextrinas 

(glucosas), formando un complejo de inclusión termolábil que se caracteriza por 

presentar distintos colores según las ramificaciones que presente la molécula. “Enuna reacción especifica con el almidón, se intercala con la molécula de almidón y

esto se detecta por la coloración azul violeta (véase Figura 3) que toma la mezcla.

Esta coloración se debe a que el yodo se introduce entre las espiras de la

molécula de almidón. No es una verdadera reacción química, sino que se forma

un compuesto de inclusión que modifica las propiedades físicas de la molécula”

(Palma, 2007).

Figura 3. El lugol es una sustancia que nos ayuda a identificar la presencia

de almidón (Extraído de Prácticas de Biología para bachillerato, n.d.)

El reactivo de Benedict, “Está constituido por una disolución de sulfato cúprico (de

cobre II), citrato de sodio y carbonato de sodio” (Herrera, 2003). Se utiliza para la

prueba de Benedict, que sirve para identificar azúcares reductores, es decir,

aquellos que tienen su OH- anomérico libre, como la lactosa, la glucosa y

la maltosa. El fundamento de esta reacción radica en que en un medio alcalino,

el ión cúprico Cu2+ de color azul (otorgado por el sulfato cúprico) es capaz de

reducirse por efecto del grupo aldehído del azúcar a su forma del ión Cu+. Este

nuevo se observa como un precipitado rojo ladrillo correspondiente al óxido

cuproso (Cu2O). El medio alcalino facilita que el azúcar se posicione de forma

lineal, así el grupo aldehído puede reaccionar con el ion cúprico en la disolución.

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Es posible cuantificar la cantidad de glucosa de una disolución; si está se colorea

verde, la concentración es baja; si se colorea amarillo, la concentración es media;

y si se colorea de rojo/naranja la concentración es alta. El grupo aldheido se oxida

con facilidad, lo que permite la detección de su prescencia con reactivos que no

afectan a otros grupos, entre ellos, la prueba de Tollens, la de Benedict y la deFehling,. El más usado es la solución Benedict ya que puede almacenarse

fácilmente sin descomponerse. (Holum, 1990)

JUSTIFICACIÓN: Este experimento se realiza con el propósito de relacionar lo

visto en clase, en cuanto al tema de carbohidratos, específicamente la glucosa y el

almidón, con los métodos y sustancias de identificación de glúcidos, para así

ampliar el conocimiento de la materia.

HIPÓTESIS.

• 1ª Hipótesis: Si agregamos lugol al almidón debe cambiar a un tono de

coloración morado, al igual que si se lo agregamos a la papa, ya sea cruda o

cocida.

• 2ª Hipótesis: Si agregamos reactivo de Benedict a la glucosa debe cambiar 

a un tono de coloración anaranjado.

OBJETIVO: Se busca identificar la presencia de glucosa, para ello se emplean

dos reactivos: el lugol y el de Benedict, los cuales al reaccionar con ella, producen

un cambio de color visible en la sustancia, debido a las interacciones moleculares

que se dan entre los elementos.

METODOLOGÍA: Se tienen seis tubos de ensayo colocados en una gradilla.

Primero se procederá a enumerar los tubos para llevar un mejor orden de estos.

En el primer tubo se colocará un poco de almidón y enseguida se procederá adiluirlo con agua, aproximadamente hasta la mitad del tubo de ensaye, después

se introducirá el lugol en la disolución, aproximadamente 3 gotas, y se revolverá

con el agitador en la disolución, al cabo de unos segundos se podrá observar el

cambio de color de la disolución que al inicio tenía un color blanquecino por el

almidón y que después por la reacción del lugol se tornó azul-violeta.

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En el tubo numero dos se colocará una disolución de papa (preparada con un

trozo de papa cocida previamente cortada por el bisturí y machacada en el

mortero, y agua) inmediatamente después se colocará el lugol en la disolución,

se deberá revolver con el agitador , y al igual que en el tubo número uno se

observará el cambio de color que la disolución presentó, que en este caso será untono azul-violeta.

En el tubo numero tres se repetirá el proceso anterior, con la diferencia de que el

batido se realizará a partir de una papa cruda, se verterá lugol y se diluirá con el

mezclador, aquí también se notará un color azul-violeta.

En el tubo número cuatro se colocará un poco de almidón y un poco de saliva,

se completará la disolución con agua y enseguida se introducirá el reactivo de

Benedict, se diluirá con el mezclador y se dejara reposar durante 10 minutos.

Pasado el tiempo de reposo, se calentará la disolución, para ello se tomará el tubo

de ensaye con ayuda de las pinzas, luego se prenderá la lámpara de alcohol con

un encendedor, y posteriormente se colocará el tubo cerca del fuego, procurando

no dejarlo mucho tiempo sobre la flama, al cabo de un rato se podrá observar una

tonalidad amarillo-naranja en la disolución.

En el tubo número cinco se introducirá un poco del batido de papa

anteriormente preparado, se agregará un poco de saliva y unas gotas del

reactivo Benedict; se diluirá con el mezclador y al igual que en el tubo número

cuatro se dejara reposar 10 minutos. Pasado el tiempo de reposo, se repetirá el

proceso del tubo anterior, donde se calienta la disolución, aquí también se podrá

observar una tonalidad amarillo-naranja en la disolución.

En el ultimo tubo se colocará un poco de glucosa y se diluirá con agua, luego se

verterán unas gotas del reactivo de Benedict, se deberá revolver con el

mezclador. Aquí nuevamente se deberá calentar la disolución, para obtener como

resultado un tono amarillo-naranja.

RESULTADOS:

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A continuación en la siguiente tabla se muestran resumidos los resultados de cada

uno de los tubos.

Tabla 1. Tabla de resultados por número de tubos

No. De Tubo Resultados Imagen

1. Almidón + Lugol Se obtiene un color azulque significa presenciade almidón.

2. Papa cruda +Lugol

Se obtiene un color azulque significa presenciade almidón.

3. Papa cocida +Lugol

Se obtiene un color azulque significa presenciade almidón, pero debidoal factor de la papa

cocida la tonalidadcambió a un azul másoscuro.

4. Almidón +Saliva +

Reactivo deBenedict

Se obtiene un color amarillo que significapresencia de glucosa,pero que debido alfactor del tiempo dereposo y de la velocidad

de la reacción latonalidad cambió.

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5. Papa + Saliva+Reactivo de

Benedict

Se obtiene un color amarillo que significapresencia de glucosa,pero que debido alfactor del tiempo dereposo y de la velocidadde la reacción latonalidad cambió.

6. Glucosa +Reactivo de

Benedict

Se obtiene un color naranja que significapresencia de glucosa.

DISCUSIÓN: Durante la práctica, los colores cambiaron en una saturación distinta

al color de los tubos de ensayo modelo. En algunos casos la variación de color fue

muy grande, como en el caso del tubo de ensayo número 5. Al quedar muy

perplejos, había una notable variación de color; dicha diferencia en la tonalidad se

debe, a que la persona donadora de saliva ya había ingerido alimentos, por lo que

en su saliva se encontraba una cantidad muy pequeña de enzimas que

degradarán la papa. Además que la cantidad de almidón y glucosa no era la

misma y el tiempo de reacción varió de la saliva, al lugol y al reactivo de Benedict,

ya que a estos últimos dos se les aplicó calor para acelerar la reacción. Cabe

aclarar que en ningún caso los colores de las mezclas de los tubos de ensaye,

fueron diferentes al color de los tubos modelo. Lo único que cambio, fue la

saturación de color, debido a lo ya mencionado. Tomaremos lo que dice Holum

(1990) El grupo aldheido se oxida con facilidad, lo que permite la detección de su

prescencia con reactivos que no afectan a otros grupos, entre ellos, la prueba deTollens, la de Benedict y la de Fehling,. El más usado es la solución Benedict ya

que puede almacenarse fácilmente sin descomponerse, es por ello que en esta

práctica se facilitó la solución Benedict para así evitar algún otro factor que pueda

alterar la práctica. Por otro lado se menciona que “En una reacción especifica con

el almidón, se intercala con la molécula de almidón y esto se detecta por la

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coloración azul violeta que toma la mezcla. Esta coloración se debe a que el yodo

se introduce entre las espiras de la molécula de almidón. No es una verdadera

reacción química, sino que se forma un compuesto de inclusión que modifica las

propiedades físicas de la molécula” (Palma, 2007). Por ello es que nuestras

solusiones tuvimos tres muestras diferentes con una tonalidad semejante a lo yamencionado pero el cambio de tonalidad se debe a varios factores como es el

tiempo de reacción de la amilasa contenida en la saliva en los tubos cuatro y

cinco, sobre el almidón y la papa respectivamente, demás que puede variar la

temperatura que haya alcanzado en el caso de las sustancias que se calentaron

(tubos 4, 5 y 6) como el factor de la saliva y la velocidad de reacción en los tubos

restantes.

CONCLUSION: Durante la práctica, los colores cambiaron en una saturacióndistinta al color de los tubos de ensayo modelo. En algunos casos la variación de

color fue muy grande, como en el caso del tubo de ensayo número 5. Al quedar 

muy perplejos, había una notable variación de color; dicha diferencia en la

tonalidad se debe, a que la persona donadora de saliva ya había ingerido

alimentos, por lo que en su saliva se encontraba una cantidad muy pequeña de

enzimas que degradarán la papa. Además que la cantidad de almidón y glucosa

no era la misma y el tiempo de reacción varió de la saliva, al lugol y al reactivo de

Benedict, ya que a estos últimos dos se les aplicó calor para acelerar la reacción.

Cabe aclarar que en ningún caso los colores de las mezclas de los tubos de

ensaye, fueron diferentes al color de los tubos modelo. Lo único que cambio, fue la

saturación de color, debido a lo ya mencionado. Además como ya mencionamos

en la discusión y lo menciona Holum (1990) los grupos aldheído se oxida

fácilmente lo que provocó en nuestra soluciones que gracias al reactivo Benedict

la soluciones se oxidaron lo que permitió al ión Cu+2 que es el agente oxidante,

formar un óxido de cobre Cu2O que es en el que la muestra da el color brillante del

precipitado de óxido de cobre a la sustancia que por lo general inicia en un color 

azul brillante.

AUTOEVALUACIÓN:

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Integrantes Participación

(práctica)

Material

(práctica)

Participación

(informe)

Informació

(búsqueda

• Alcocer Ramírez Andrea 10 10 10 10

• Barranco García Luis Enrique 10 10 10 10

• Cruz Reyes Miguel Ángel 10 10 10 10

• Prieto Herrera Antonio 10 10 10 10

• Ramírez Reyes Daniel deJesús

10 10 10 10

• Reyes Velázquez BrunoDavid

10 10 10 10

BIBLIOGRAFIA:

• Prácticas de Biología para bachillerato, (n.d.), Extraído el 25 de septiembre

de 2011 desde

http://www.juntadeandalucia.es/averroes/recursos_informaticos/concurso200

1/accesit_4/glucidos.html

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laboratorio. Universidad de Costa Rica. Costa Rica. pp. 140.

• Higashida, B. (2008). Ciencias de la salud. McGraw-Hill Interamericana.

México. pp. 448.

• Hollum, J. R. 1990 Principios de Físicoquímica, Química orgánica y

Bioquímica Limusa, México 420-430, 486-496.

• Egúsquiza, B. (2000). La papa: producción, transformación y

comercialización. International Potato Center. pp. 192.

• Ocampo J. E., 2011 Macromoléculas naturales y sintéticas. Extraída el 25

de septiembre de 2011 desde http://enrique-ocampo.blogspot.com/2011/06/las-macromoleculas-naturales-y.html

• Oñate L. (2008) Biología Ceangage Learning, México.

• Palma, A. y Sánchez, A. (2007). Técnicas de ayuda odontológica y

estomatológica. Thomson-Paraninfo. España. pp. 335.

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• Starr, C. Taggart R. (2008). Biología: la unidad y la diversidad de la vida

Thomson México.