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Instituto de Formación en Seguridad Pública del Estado

Guanajuato

Nombre de la actividad:

Primer reporte de práctica

“Identificación de manchas de sangre”

Curso:

Bioquímica Forense

Tutora:

Maestra Berenice Noriega Luna

Alumno:

Gilberto León Verdín

Matrícula:

M-016

07 de marzo del 2015

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Objetivos

Conocer la aplicación de las sustancias químicas en la investigación

criminalística.

Visualizar manchas de sangre a través de la aplicación de Bluestar sobre prendas

tratadas.

Investigar la reacción química involucrada en el proceso de luminiscencia del

Bluestar.

Investigar los parámetros en cámaras fotográficas para la toma de fotografías en

la aplicación del Bluestar (ISO, abertura y exposición).

Marco Teórico

Reactivo Revelador para Manchas de Sangre oculta

BLUESTAR® es un nuevo reactivo cuyo objetivo es revelar manchas de sangre

que han sido lavadas, limpiadas o son invisibles a simple vista. El objeto de este

producto es para utilizarlo en un escenario de investigación de un crimen. La

formulación de BLUESTAR® está basada en la quimioluminiscencia. Esta fórmula ha

sido calificada como el revelador más efectivo de sangre humana disponible en el

mercado, tanto para la escena de un crimen como para los departamentos de

criminalística. El BLUESTAR® no altera el ADN de la sangre revelada, lo cual facilita

el subsiguiente análisis del genotipo.

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La Química del BlueStar ® FORENSE

Un nuevo luminol basado en la fórmula original BLUESTAR® FORENSIC es

un agente de visualización de sangre, sobre la base de luminol, una molécula que es bien

conocida entre la criminalística forense. La constitución del BlueStar® ha hecho

posible eliminar los inconvenientes de los elementos asociados al luminol.

Luminol ¿Cómo reacciona?

Luminol (3-Aminophthalhydrazide) fue sintetizado por primera vez en 1853. Su

propiedad para producir una reacción quimio-luminiscente en una solución básica en

presencia de un agente oxidante en contacto con la sangre fue observada por primera vez

por Albrecht en 1928.

Los principales componentes capaces de catalizar esta reacción de emisión de

luz son los metales de transición y hem peroxidasa. Hem es una estructura bioquímica

que forma parte integrante de la peroxidasa. Esta estructura esta igualmente presente en

la hemoglobina. De esta manera, la presencia de hemoglobina (de la sangre) puede ser

revelada por el aprovechamiento de la capacidad de haem/hem para catalizar la

propiedad quimio-luminiscentes del luminol. En otras palabras, una mezcla de luminol +

agente oxidante + agente alcalino, cuando se pongan en contacto con la sangre, se

emiten luz.

Una breve historia

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Los primeros experimentos realizados con miras a utilizar luminol como una

herramienta en las ciencias forenses se llevaron a cabo en 1937 por Spech't, que fuera

probado en una variedad de bases como el césped, ladrillos, piedras o paños con sangre.

En 1939, Moody & Proesher probaron la omposición de Spech't en la sangre humana y

animal.

En 1951, Grodsky propone una mezcla de polvo hecho de compuesto de luminol,

carbonato de sodio, y perborato de sodio mezclado con agua destilada. Esto

posteriormente se convirtió en la fórmula que es la más comúnmente utilizada por los

investigadores de hoy para detectar rastros de sangre en la escena de un crimen.

Sin embargo, el uso de carbonato de sodio produce una lenta reacción en el

proceso de oxidación de la hemoglobina. Por lo tanto, no es muy luminoso y de breve

duración. Por otra parte, una vez que los agentes reactivos se disuelven en el agua, la

vida de la solución obtenida es muy corta. Esta fórmula es muy inestable y es tóxica,

debido a la presencia de perborato de sodio.

En 1966, Weber propuso una composición hecha de luminol, hidróxido de sodio

o hidróxido de potasio, agua oxigenada diluida en agua destilada. La solución así

obtenida debe mantenerse en un lugar fresco lejos de la luz directa. Su vida es breve. La

reacción luminosa obtenida por esta composición se pueden fotografiar en total

oscuridad o filmada con una cámara con visión nocturna.

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En el año 2000, Jean-Marc Lefebvre-Despeaux, presidente de BlueStar, encargo

a Loic Blum, Ph.D., profesor de bio-química en la Universidad Claude Bernard-Lyon y

director de enzimática e ingeniería biomolecular del laboratorio, encontrar una nueva

fórmula que sería a base de luminol y eliminara todos los numerosos inconvenientes.

Como resultado de ello, Blum descubrió esta nueva fórmula que fue posteriormente

llamado BlueStar ® FORENSIC

Esta nueva formulación no afecta el posterior análisis del ADN y no presenta

ningún peligro para el operador, dado que no es carcinogénico y es biodegradable.

Hay que tener en cuenta, que únicamente es ligeramente corrosivo, dado que su

pH es algo superior a 11.

Las manchas invisibles de sangre reaccionan inmediatamente al BLUESTAR®

provocando una intensa reacción azulada luminiscente, visible en la oscuridad

directamente por el ojo humano, a 430nm de Longitud de Onda.

Su sensibilidad evidencia trazas de sangre en cantidades más pequeñas del

mínimo requerido para realizar una tipificación de ADN.

La reacción dura varios minutos y el reactivo de BLUESTAR® pueden

pulverizarse varias veces sobre una misma zona, sin afectar el ADN y tomando

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fácilmente evidencias visibles mediante cámaras fotográficas de tipo estándar, lo cual

elimina la necesidad de utilizar equipos sofisticados.

Características más destacables del BlueStar ®

Mayor sensibilidad.

Mayor intensidad de luz luminiscente.

Mayor duración de la luminiscencia.

La luminiscencia no requiere obscuridad total.

Puede usarse varias veces sobre una misma muestra.

No requiere ningún tipo de equipos especiales para tomar evidencias

fotográficas.

No interfiere la tipificación del ADN.

Estable a lo largo del tiempo.

No es tóxico.

Fácil de usar.

Descripción del BlueStar®

El BLUESTAR® se utiliza para la detección de sangre humana, para examinar

zonas, que han sido previamente lavadas con varios tipos de detergentes. Esta nueva

formulación no impide, ni interfiere el subsiguiente análisis de ADN por PCR.

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Esto concuerda con los resultados obtenidos con el Luminol, pero la diferencia con el

BLUESTAR® estriba en que dicha formulación da una luminiscencia azulada más

potente y de más larga duración.

Metodología.

Las pruebas se llevan a cabo sobre las siguientes muestras:

Colocar una cantidad proporcional de sangre en cuatro trozos de tela

respectivamente. Se toman tres muestras de la tela manchada con sangre. Una se

lava una vez, otra se lava tres veces y otra se lava 5 veces, una tela manchada de

sangre no deberá de ser lavada, esto con la finalidad de usarla como control

positivo. Todos los lavados son a mano con agua fría y jabón de lavandería. Se

dejan secar las muestras al aire libre.

Colocar una cantidad proporcional de sangre en 3 trozos de tela respectivamente.

En uno de ellos se aplica el blanqueador; en otro se aplica el limpiador de pisos,

y en el último se deberá realizar un lavado (paso anterior) y además aplicar

limpiador de pisos y blanqueador.

Preparación de la Solución Bluestar:

En un atomizador de aspersión fina, medir 125 mililitros de agua destilada y

agregar el par de tabletas de Bluestar Forensic (tableta blanca y tableta beige).

Colocar la tapa del atomizador y sellar firmemente.

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Con movimientos circulares suaves agitar el atomizador para llevar a disolución

completa ambas pastillas. NO AGITAR EL ATOMIZADOR BOCA ABAJO.

Procedimiento para el uso de BLUESTAR.

Usar equipo de protección personal necesario.

Preparación de la solución Bluestar Forensic.

Hacer pruebas de su efectividad con una muestra de sangre como control

positivo.

De preferencia, la aplicación se debe hacer en un espacio oscuro.

Rociar Bluestar sobre las telas con ayuda del atomizador. Rociar la mezcla desde

una distancia de por lo menos 50 centímetros. Una luminiscencia azulosa

comienza a desvanecerse después de un minuto y se puede volver a lograr con

una nueva rociada.

Toma de fotografías de la luminiscencia.

La luminiscencia que produce el Bluestar dura varios minutos, y se puede rociar

varias veces sobre la misma área, facilitando así la observación y toma de fotografías.

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Experimentación

Materiales y Reactivos

• Solución Bluestar Forensic

• Guantes de látex.

• Cubrebocas

• Atomizador

• Tela negra y blanca de algodón

• Limpiador de pisos

• Blanqueador (hipoclorito de sodio)

• Detergente o Jabón de lavandería

• Cronómetro

• Cámara fotográfica semiprofesional

• Sangre humana

En fecha 6 de Marzo de 2015, siendo las 20:00 hrs. El equipo de laboratorio de

criminalística dimos inicio a la práctica de detección de manchas de sangre, como

primer paso, tomamos muestras de tela negra y blanca de algodón, misma que rociamos

con sangre que previamente había sido obtenida por extracción de uno de los integrantes

del equipo “imagen 1”. La tela, una vez manchada, la cortamos para obtener muestras

de aproximadamente 5x5 cm. Cada uno de los fragmentos fue lavado conforme a la

descripción que se detalla:

1. Un lavado con detergente

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2. Tres lavados con detergente

3. Cinco lavados con detergente

4. Un lavado con solución comercial de hipoclorito de sodio “Cloralex”

5. Un lavado con solución de limpiador para pisos “fabuloso”

6. Un lavado con peróxido de hidrógeno “agua oxigenada” al 3 %

7. Un lavado con detergente, cloro, limpiador para pisos y agua oxigenada

8. Tres lavados con detergente, cloro, limpiador para pisos y agua oxigenada

9. Ningún lavado

Las muestras, una vez identificadas se dejaron secar sobre un pliego de papel

kraft. (Galería fotográfica 2)

También se depositó una muestra de sangre humana sobre la mesa de trabajo del

laboratorio.

Al día siguiente, 7 de marzo, el equipo se presentó nuevamente en el laboratorio

donde procedimos a preparar en un atomizador con 125 ml. De agua, la solución

bluestar, misma que consiste en la disolución de 2 pastillas, disolución que se consigue

al cabo de aproximadamente 5 minutos de agitación sin invertir el frasco en que se

diluyen los reactivos.

Con la solución preparada, llevamos las muestras a una zona oscura del

laboratorio y fueron rociados con la solución bluestar, detectando, en todos los casos

una luminiscencia característica, misma que tenía mayor o menor duración dependiendo

de la muestra que se analizaba y que, solo en el caso de la mancha de sangre depositada

sobre la mesa de trabajo del laboratorio, tuvo una duración superior al minuto, cuando se

depositó sobre la tela, la duración máxima de la luminiscencia fue de más de 30

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segundos, pero menos de un minuto. La tabla de observaciones se agrega en el apartado

de resultados y las imágenes en la galería fotográfica 3.

Resultados

Registrar resultados y observaciones en una tabla.

Características de la muestra Tiempo de

quimioluminiscencia Observaciones

V = visible N = sin luminiscencia

VI = visible e intensa PV = poco visible 1 lavado con detergente 30 segundos VI

3 lavados con detergente 20 segundos V

5 lavados con detergente 15 segundos PV

1 lavado con solución comercial de

hipoclorito de sodio “Cloralex”

20 segundos V

1 lavado con solución de limpiador

para pisos “fabuloso”

20 segundos V

1 lavado con peróxido de hidrógeno

“agua oxigenada” al 3 %

15 segundos V

1 lavado con detergente, cloro,

limpiador para pisos y agua oxigenada

20 segundos VI

3 lavados con detergente, cloro,

limpiador para pisos y agua oxigenada

15 segundos VI

Ningún lavado 45 segundos VI

Análisis e Interpretación de Resultados

El grupo hem, al contener hierro, catalizador de la reacción de quimioluminiscencia del

luminol, concede a este la capacidad de detectar cerca de 1 µL de sangre en 1 L de

disolución. La visibilidad de la luminiscencia en todos los casos, permite establecer que

el método es altamente confiable.

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La reacción entre moléculas de sangre y el bluestar es la siguiente:

Las propiedades fisicoquímicas del luminol son las siguientes:

PROPIEDADES FÍSICAS Y QUÍMICAS

Estado físico sólido

Aspecto polvo

Olor inodoro

Color Amarillo a verdoso

Propiedades explosivas No hay información disponible

Propiedades comburentes No hay información disponible

ESTABILIDAD Y REACTIVIDAD

Reactividad No es aplicable

Estabilidad química Estable en las condiciones de almacenamiento

recomendadas.

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Sensibilidad a impactos mecánicos No hay información disponible.

Sensibilidad a descargas estáticas No hay información disponible.

Posibilidad de reacciones peligrosas

pH No hay información disponible

Punto de fusión/punto de congelación 325 °C

Punto de ebullición 467.05 °C

Punto de inflamación No hay información disponible

Densidad 1.4 g/cm3

Tasa de evaporación No hay información disponible

Límites de inflamabilidad superiores No hay información disponible

Límite inferior de inflamabilidad No hay información disponible

Presión de vapor No hay información disponible

Densidad de vapor No hay información disponible

Densidad relativa No hay información disponible

Solubilidad en el agua No hay información disponible

Solubilidad en otros disolventes No hay información disponible

Coeficiente de partición -0.46

Temperatura de autoignición No hay información disponible

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Temperatura de descomposición No hay información disponible

Viscosidad cinemática No hay información disponible

Conclusiones personales

La química es considerada fundamental en las ciencias forenses, porque su campo

de aplicación, al tratarse de una ciencia experimental, proporciona herramientas, métodos y

técnicas altamente confiables para el trabajo del perito en la detección e investigación del

crimen y autor del crimen.

Para tomar buenas fotografías de una prenda con luminiscencia catalizada en

luminol por la presencia de manchas de sangre pre-lavadas o no, los parámetros que se

requieren son: para el ISO=400, la apertura 2.4 ft.; exposición?

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Referencias

Fuente: http://www.cienciaforense.cl/csi/content/view/29/2/

Autor externo, consultado en http://criminalistica.mx/areas-forenses/hematologia-y-

serologia/872-herramientas-para-la-investigaciriminal el 12 de marzo 2015

Suastes Torales, Francisco, hoja técnica de reactivo, consultado en

http://reactivosmeyer.com.mx/pdf/reactivos/hds_1556.pdf el 12 de marzo 2015

http://datasheets.scbt.com/sds/EGHS/ES/sc-362181.pdf consultado el 12 de marzo 2015

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Anexo 1

Galería fotográfica de la práctica

Imagen 1.

Extracción de sangre

Galería 2. Proceso de lavado de tela manchada de sangre

humana

Galería 2.1 Las telas lavadas, se dejaron secar sobre un pliego de papel Kraft

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Galería 3 Luminiscencia química en todas las muestras de tela manchadas de sangre

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Galería 3.1 la presencia de sangre en la mesa fue evidente con la reacción de

quimioluminiscencia del reactivo Blue star