RESULTADOS

"Efecto de la temperatura"

Las absorbancias fueron leídas a 450nm y se obtuvieron los siguientes resultados:

Tubos Blanco 1 (0 C) 2 (37 C) 3 (100C)

Absorbancia 0,210 0,193 0,003 0,198

Se calculó la actividad enzimática restando la lectura del tubo blanco menos

la lectura de los otros tres tubos (correspondientes a cada temperatura).

T1: 0,21 - 0,193= 0,017

T2: 0,21- 0,003= 0,207

T3: 0,21- 0,198= 0,012

Contraste de los resultados:

Mesa Absorbancia Act. Enz. a 0°C Act. Enz. a 37°C Act. enz. 100° C

1 0,223 0,21 0,156 0,004

2 0,317 0,141 0,310 0,133

3 0,210 0,017 0,207 0,012

4 0,392 0,100 0,379 0,047

5 0,320 0,162 0,266 0,009

6 0,359 0,045 0,312 0,149

7 0,202 0,011 0,047 0,016

Con estos valores se procede a graficar en el papel milimetrado:

Se observa que a temperatura óptima hay mayor actividad enzimática.

"Efecto del pH"

A los tubos 1 y 2 se les agregó HCl 1 N para obtener un medio ácido,

entonces:

1N= MӨ M= 1

CIx VI = CFx VF

T1 1M x 2ml= C1x 10 ml

C1 = 0,2 M

T2 1M x 0,5ml= C1x 10 ml

C1 = 0,05 M

Para obtener los respectivos pH se hizo uso de esta fórmula:

pH= -log [H+]

pH1= 0,69

0,017

0,207

0,012

Actividad enzimática vs Temperatura

pH2= 1,3

En el caso del tubo 3

H2O

[H+] = [OH-]

1 x 10-7 M

pH3= -log [H+] = 7

Para los tubos 4 y 5:

Se agregó Na2CO3 al 10%, hacemos la conversión a M:

M= n/V = (10g/106g) mol/ 0,1L = 0.94M

CIx VI = CFx VF

Para log[C]

C4

0,94 x 0,5ml= C4x 10 ml

C4= 0,04711

C5 0,94 x 2ml= C5x 10 ml

C5 = 0,188 M

pH= 1 ( pka2+ pkw + log[C])

Kw [OH-] [H+] = 1x 10 -14 a 25°C

pKa= 10,3

pH4= 11,4

pH4= 11,7

2

Contraste de los resultados:

A un pH de 0, 69 se percibió un error, por lo cual para realizar la gráfica se

promedió las lecturas de la mesa 1(0.185), mesa 4 (0.162) y mesa 5 (0.102)

0.14966

Mesa Absorbancia 0,69 1,3 7 11,4 11,7

1 0,368 0,185 0,299 0,031 0,114 0,142

2 0,368 0,200 0,207 0,095 0,118 0,092

3 0,188 0,003 ? 0,123 0,003 0,1 0,053

4 0,270 0,162 0,268 0,004 0,063 0,078

5 0,265 0,102 0,262 0,064 0,051 0,056

6 0,275 0,094? 0,261 0,024 0,093 0,058

7 0,242 0,061? 0,191 0,016 0,044 0,057

A partir de los resultados se pudo realizar el siguiente gráfico

Absorbancia vs pH

0,149 0,123

0,0010,003

0,053