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UNIVERSIDAD DE CUENCA AUTORAS: MARÍA BELÉN GORDILLO SIGUENCIA MARÍA DE LOURDES GUZÑAY BARBECHO. 1 RESUMEN Esta investigación se realizó en el Centro de Diagnóstico de la Facultad de Ciencias Médicas, donde se determinó la frecuencia del subgrupo sanguíneo A 1 durante el periodo de febrero a agosto de 2011. La población en estudio estuvo constituido por todos los donantes de sangre y pacientes de los grupos sanguíneos A y AB que acudieron al Banco de Sangre de la Cruz Roja Ecuatoriana del Cantón Cuenca en un total de 200 muestras sanguíneas, donde no se efectuó diferenciación racial ni otras variantes infrecuentes del grupo sanguíneo A. Cabe resaltar que el sistema ABO se consideró como dato adicional. Las muestras fueron recolectadas tanto de pacientes externos como de donantes en el Banco de Sangre de la Cruz Roja Ecuatoriana, mediante la técnica de venopunción; la cantidad requerida fue de 3 a 5 ml de sangre recogida con anticoagulante, los cuales fueron procesados en el laboratorio clínico del Centro de Diagnóstico de la Facultad de Ciencias Médicas. Para la determinación del subgrupo sanguíneo se realizaron técnicas y procedimientos establecidos, con resultados satisfactorios de tipo semicuantitativo en la prueba directa en tubo. El 67% del total de personas investigadas pertenecen al sexo masculino y el 33% al sexo femenino. De acuerdo al tipo de sangre de las personas que participaron en el estudio, se encontró que el 93% pertenecen al grupo sanguíneo A+ y el 0.5% al grupo sanguíneo AB-. En relación al subgrupo sanguíneo A 1 el 81% resultó positivo y el 19% negativo, los mismos que fueron relacionados con el grupo sanguíneo. Al relacionar el tipo de sangre con el subgrupo sanguíneo A1, se observó que el mayor número de casos se encontraron en el grupo sanguíneo A+, de los cuales el 93.8% son subgrupo A1 positivo y el 89.4% son subgrupo A1 negativo (p=0.679).

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AUTORAS: MARÍA BELÉN GORDILLO SIGUENCIA MARÍA DE LOURDES GUZÑAY BARBECHO. 1

RESUMEN

Esta investigación se realizó en el Centro de Diagnóstico de la Facultad de

Ciencias Médicas, donde se determinó la frecuencia del subgrupo sanguíneo

A1 durante el periodo de febrero a agosto de 2011. La población en estudio

estuvo constituido por todos los donantes de sangre y pacientes de los grupos

sanguíneos A y AB que acudieron al Banco de Sangre de la Cruz Roja

Ecuatoriana del Cantón Cuenca en un total de 200 muestras sanguíneas,

donde no se efectuó diferenciación racial ni otras variantes infrecuentes del

grupo sanguíneo A. Cabe resaltar que el sistema ABO se consideró como dato

adicional.

Las muestras fueron recolectadas tanto de pacientes externos como de

donantes en el Banco de Sangre de la Cruz Roja Ecuatoriana, mediante la

técnica de venopunción; la cantidad requerida fue de 3 a 5 ml de sangre

recogida con anticoagulante, los cuales fueron procesados en el laboratorio

clínico del Centro de Diagnóstico de la Facultad de Ciencias Médicas.

Para la determinación del subgrupo sanguíneo se realizaron técnicas y

procedimientos establecidos, con resultados satisfactorios de tipo

semicuantitativo en la prueba directa en tubo.

El 67% del total de personas investigadas pertenecen al sexo masculino y el

33% al sexo femenino. De acuerdo al tipo de sangre de las personas que

participaron en el estudio, se encontró que el 93% pertenecen al grupo

sanguíneo A+ y el 0.5% al grupo sanguíneo AB-.

En relación al subgrupo sanguíneo A1 el 81% resultó positivo y el 19%

negativo, los mismos que fueron relacionados con el grupo sanguíneo.

Al relacionar el tipo de sangre con el subgrupo sanguíneo A1, se observó que

el mayor número de casos se encontraron en el grupo sanguíneo A+, de los

cuales el 93.8% son subgrupo A1 positivo y el 89.4% son subgrupo A1 negativo

(p=0.679).

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No existe ninguna relación significativa entre sexo con el subgrupo A1

(p=0.185) ni con el tipo de sangre (p=0.679), en razón de que el grupo

sanguíneo no se ve afectado por el sexo, edad, ni el tipo de paciente ya que

cada persona nace con un tipo de sangre definido.

Palabras claves: grupo sanguíneo, subgrupo sanguíneo A1.

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ABSTRACT:

This research was realized in Diagnostico´s Center of Ciencias's Faculty

Medical where determined the frequency of the sanguine subgroup A1, during

the period from February to August 2011. The population in study was

constituted by all blood donors and patients of the blood groups A and AB that

they attended to the Blood Bank of Ecuadorian Red Cross of Cuenca City in a

total of 200 sanguine samples, where we do not realize racial differentiation

neither others infrequent variants of the blood group A. Being necessary clearly

the ABO system was considered as additional date.

The samples were recollected mean while or out patients as donors in Blood

Bank of Ecuadorian Red Cross mediating the technique of venipuncture the

quantity requisite was of 3 to 5ml of blood picked up with anticoagulant, which

was processed at the clinical Medical Laboratory of Diagnostico´s Center of

Ciencias Faculty.

To determination of sanguine subgroup we worked with technical and method

established, with satisfactory results of semi-quantitative in the direct try in tube.

The 67% of the total people investigation belong to the made sex and 33% of

female sex. According to blood group of people who participate in the research

we found that 93% belong to the blood group A+ and 0.5% al blood group AB-.

In relation to the sanguine subgroup A1 the 81% was positive and 19% was

negative, the some that related with blood group.

When we relation the blood group with sanguine subgroup A1 we observed that

major number of cases were found in the blood group A+, of which the 93.8%

are sanguine subgroup A1 positive and the 89.4% are sanguine subgroup A1

negative (p=0.679).

In conclusion do not exist relation between the sex with sanguine subgroup A1

(p=0.185) neither with sanguine blood, in reason of that blood group is not

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affected by sex, age neither patient type, because each person was born with a

blood group definite.

Key Words: blood group, sanguine subgroup A1.

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INDICE

CAPITULO I

RESUMEN

ABSTRACT

1. INTRODUCCIÓN

2. PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

3. JUSTIFICACIÓN

CAPITULO II

4. MARCO TEÓRICO

4.1 GRUPO SANGUINEO

4.1.1 Descubrimiento

4.1.2 Concepto

4.1.3 Otros grupos sanguíneos

4.2 SISTEMA ABO

4.2.1 Introducción

4.2.2 Importancia

4.2.3 Antígenos del Sistema ABO

4.2.4 Bioquímica y Desarrollo de los Antígenos A,B y H

4.2.4.1 Precursores

4.2.4.2 Sustancia H y antígenos A, B

4.2.5 Estructura Antigénica

4.2.6 Anticuerpos Sanguíneos

4.2.7 Antígenos ABO Adquiridos

4.2.8 Herencia del Tipo ABO

4.2.9 Frecuencia

4.3 FACTOR Rh

4.3.1 Descubrimiento

4.3.2 Concepto

4.3.3 Herencia del Factor Rh

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4.3.4 Compatibilidad Sanguínea

4.4 SUBGRUPOS SANGUINEOS DE A

4.4.1 Importancia

4.4.2 Otros Subgrupos de A

CAPITULO III

5. OBJETIVOS

5.1 OBJETIVO GENERAL

5.2 OBFETIVOS ESPECÍFICOS

CAPITULO IV

6. METODOLOGÍA 6.1 TIPO Y DISEÑO GENERAL DEL ESTUDIO

6.2 UNIVERSO

6.3 MUESTRA

6.4 CRITERIOS DE INCLUSION

6.5 CRITERIOS DE EXCLUSION

6.6 METODOS, TÉCNICAS Y PROCEDIMENTOS

6.6.1 PRIMER OBJETIVO

6.6.2 SEGUNDO OBJETIVO

6.6.3 TERCER OBJETIVO

6.7 CONTROL DE CALIDAD

6.8 PLAN DE ANALISIS DE LOS RESULTADOS

CAPITULO V

7. ANALISIS DE LOS RESULTADOS

CAPITULO VI

8. DISCUSIÓN

9. CONCLUSIONES

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10. RECOMENDACIONES

11. BIBLIOGRAFÍA

CAPITULO VII

12. ANEXOS

ANEXO No 1 CONSENTIMENTO INFORMADO

ANEXO No 2 CONSENTIMENTO INFORMADO (menores de

edad)

ANEXO No 3 TARJETA DE RESULTADOS

ANEXO No 4 RECURSOS HUMANOS y MATERIALES

ANEXO No 5 CONTROL DE CALIDAD…

ANEXO No 6 TRIPTICO

ANEXO Nº 7 FOTOS

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UNIVERSIDAD DE CUENCA

FACULTAD DE CIENCIAS MÉDICAS ESCUELA DE TECNOLOGÍA MÉDICA AREA DE LABORATORIO CLÍNICO

FRECUENCIA DEL SUBGRUPO SANGUÍNEO A1 EN LOS PACIENTES QUE ACUDEN AL BANCO DE SANGRE DE LA CRUZ ROJA ECUATORIANA

CUENCA - ECUADOR 2011.

TESIS PREVIA A LA OBTENCIÓN DEL

TÍTULO DE LICENCIADA EN

LABORATORIO CLÍNICO

AUTORAS:

MARÍA BELÉN GORDILLO SIGUENCIA

MARÍA DE LOURDES GUZÑAY BARBECHO.

DIRECTORA:

DRA. MARÍA ÁLVAREZ HERRERA.

ASESORA:

DRA. MARTHA TORRES.

CUENCA – ECUADOR

2011

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RESPONSABILIDAD

Los criterios vertidos en el presente trabajo investigativo son de

responsabilidad de las siguientes autoras.

-------------------------------------------

MARÍA BELÉN GORDILLO SIGUENCIA

----------------------------------------------

MARÍA DE LOURDES GUZÑAY BARBECHO.

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AGRADECIMIENTO

Doy gracias a Dios en primer lugar porque

él me ha dado la vida, sabiduría y la

inteligencia suficiente para llegar a la

culminación de este escalón.

Por toda la confianza y el apoyo brindado

antes y durante la realización de esta tesis

quiero agradecer a mis padres Zoila y

Estuardo que han sido los pilares

fundamentales para llegar hasta donde

estoy.

Por el amor y la paciencia dada por parte

de mi esposo y mi bebé, también quiero

agradecerles ya que ellos han sido la

fuerza para lograr este objetivo cumplido.

Y también quiero agradecer a mi Directora

y Asesora de tesis, quienes han dedicado

su tiempo y brindado sus conocimientos

para culminar la misma.

María Belén Gordillo S.

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DEDICATORIA

Está tesis la quiero dedicar a mis padres por el apoyo incondicional y el amor brindado cada día.

A mi esposo que es mi ayuda idónea en todo momento, a mi nena preciosa que se ha convertido en mi razón de ser.

Y a todas las personas que de una u otra manera aportaron para la realización de la misma.

María Belén Gordillo S.

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AGRADECIMIENTO

Quiero comenzar dando gracias a Dios

principalmente, por haberme concebido la

vida y la salud necesaria para haber

alcanzado este objetivo.

Agradecer a mis profesores, quienes a

través de estos años me han ido forjando

y trasmitiéndome sus conocimientos

para poder llegar a ser una excelente

profesional. De una manera muy especial

a la Dra. María Álvarez y Dra. Marta

Torres quienes contribuyeron con su

tiempo y dedicación para el desarrollo de

esta tesis.

Igualmente a todos mis amigos con los

que he compartido esta etapa de mi vida.

María de Lourdes Guzñay B.

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DEDICATORIA

La culminación de este proyecto la

dedico con todo mi amor y cariño a mis

padres María y Bolívar, quienes a través

de este tiempo pudieron brindarme su

apoyo moral y económico; y enseñarme

que para poder triunfar en la vida es

necesario esfuerzo y dedicación en los

objetivos que me he planteado.

A mis hermanos Fernando y Diana por

haber compartido las alegrías y tristezas

de mi vida.

María de Lourdes Guzñay B.

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CAPÍTULO I

1.- INTRODUCCIÓN

Es un hecho de vital importancia que cada individuo conozca su tipo de

sangre, no menos importante es conocer la distribución porcentual del

subgrupo sanguíneo en nuestra sociedad y el presente trabajo destaca tal

distribución en los pacientes que acuden al Banco de Sangre de la Cruz Roja

Ecuatoriana del Cantón Cuenca. Como el tipo de sangre está dado por la

presencia de aglutinógenos en los glóbulos rojos, el grupo A integra

moléculas con estas variaciones dando origen a los subgrupos A1, A2 y otros;

por tanto reconocer subgrupos sanguíneos como los del grupo A, que

pueden dar aglutinación negativa o muy débil con Anti-A y por tanto

interpretarse como O, resulta peligroso sobre todo si son células del

donador más aun si se transfundiera sangre A1 en un paciente A2. Con esta

determinación se está inmunizando al paciente transfundido y en una

segunda transfusión puede reaccionar con anticuerpos dirigidos contra las

determinantes antigénicos propias de A1 que no están en los eritrocitos A2

con consecuencias fatales. (1)

La falta de conocimiento sobre los subgrupos llevan consigo riesgos para la

salud como en las transfusiones de sangre entre grupos incompatibles

pudiendo provocar una reacción inmunológica que puede desembocar en

hemolisis, anemia, fallo renal, shock e incluso la muerte.

Este estudio de carácter descriptivo tuvo como propósito determinar la

frecuencia del subgrupo sanguíneo A1, se trabajó con una muestra

conformada por 200 pacientes del grupo sanguíneo A y AB que acudieron al

Banco de Sangre de la Cruz Roja Ecuatoriana, a los mismos que mediante

una punción capilar y venosa se obtuvo la muestra a ser analizada y se

determinó el tipo de grupo sanguíneo y el subgrupo al que pertenecen. Las

variables de edad, lugar de procedencia y otras no son consideradas de

importancia ya que los grupos sanguíneos están presentes desde el

nacimiento.

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La mayoría de laboratorios clínicos cumplen un papel importante en la

determinación del sistema ABO por ser el más conocido, pero también es

necesario llegar a la identificación de los subgrupos sanguíneos ya que en la

actualidad se puede contar con los reactivos necesarios. El uso de técnicas

adecuadas, personal capacitado y controles de calidad son necesarios para

obtener resultados veraces y confiables.

2.- PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

Un grupo sanguíneo es una clasificación de la sangre de acuerdo con las

características presentes o no en la superficie de los glóbulos rojos y en el

suero de la sangre. Las dos clasificaciones más importantes para describir

grupos sanguíneos en humanos son los antígenos del sistema ABO y el factor

Rh. (2)

El sistema ABO fue descubierto por Karl Landsteiner en 1901, en donde se ha

descrito cuatro combinaciones esenciales de hematíes y plasma, que definen

los cuatro grupos sanguíneos que se conocen con las letras O, A, B y AB.

En cada uno de los grupos descubiertos, los hematíes tienen en su superficie

una sustancia (antígeno), que es diferente en cada grupo. El grupo A tiene el

antígeno A, el grupo B tiene el antígeno B, el grupo AB tiene los dos antígenos y

el grupo O no tiene antígeno. (3)

La determinación de grupos y subgrupos sanguíneos son necesarios para

conocer el tipo de sangre al momento de someterse a una transfusión o a un

trasplante, debido a que no todos los tipos de sangre son compatibles entre sí.

Trabajos de investigación realizados en la Habana Cuba, mediante un estudio

realizado en 1301 muestras reportan los siguientes datos: 703 O (54,04 %); 468 A

(35,97 %); 106 B (8,15 %); 18 A1B (1,38 %) y 6 A2B (0,46 %). Las muestras A se

subdividieron en: 346 A1 (73,93 %); 82 A2 (17,52 %) y 40 Amt (8,55 %). Entonces el

reconocimiento de subgrupos débiles del grupo A reviste importancia en la

práctica forense y en el estudio de la dinámica de poblaciones. (4)

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En Costa Rica, se investigó en el Laboratorio de Ciencias Forenses y en los

principales Bancos de Sangre del país los subgrupos de A en 1000 muestras de

sangre, reportándose: A (897) y AB (103). La proporción de los subgrupos,

fueron las siguientes: A1 884 (88.4%), Aint 79 (7.9%), A2 36 (3.6%), A3 1 (0.1%).

(5)

En Bolivia La Paz, se estudiaron los grupos sanguíneos de 720 pacientes de

ambos sexos pertenecientes a una clase socio-económica media y alta, de

origen mestizo y blanco. El estudio se llevó a cabo desde el primero de enero al

31 de diciembre de 1999 en donde se obtuvieron los siguientes resultados: 402

O (55.83%), 234 A (32.52%), 76 B (10.55%), 8 AB (1.1%). (6)

En Ecuador en la ciudad de Cuenca, en el Banco de Sangre en el año 2010 se

realizaron tipificaciones sanguíneas a 21.599 pacientes de los cuales 15916 son

O+ (73.69%); 411 O- (1.90%); 3521 A+ (16.30%); 146 A- (0.67%); 1365 B+

(6.32%); 45 B- (0.21%); 187 AB+ (0.87%) y AB- 8 (0.04%). (7)

No se han realizados estudios en nuestro medio de subgrupos “A” o “AB”, de

ahí la importancia de este trabajo de investigación que nos ayudará a

establecer tan importantes parámetros en una población seleccionada.

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3.- JUSTIFICACIÓN

Este trabajo de investigación brindará un aporte a la sociedad ya que permite

conocer los porcentajes de grupos y subgrupos sanguíneos de los pacientes

que acuden a la Cruz Roja Ecuatoriana del Cantón Cuenca, pues en la

actualidad no se han realizado estudios sobre este tema y los resultados

obtenidos ayudarán a los pacientes a conocer no solo su grupo sanguíneo sino

también al subgrupo al que pertenecen; y así saber con certeza ¿qué tipo de

sangre pueden recibir o donar?, sin problemas de incompatibilidad que

conllevan a riesgos para su salud.

Es importante reconocer que la población asignada para este estudio son de

diferentes edades, resaltando sobre todo a las futuras madres y a personas

que en algún momento lleguen a donar o recibir sangre y mediante este trabajo

deseamos además transmitir la información necesaria sobre estos problemas

de incompatibilidad sanguínea que pueden presentarse al momento de ser

receptores en una transfusión.

Las técnicas utilizadas para la determinación de los grupos y subgrupos

sanguíneos no implican solamente seguir los procesos a cabalidad, sino

también el conocimiento y las destrezas del operador, razón por la cual

mediante esta investigación tendremos la oportunidad de adquirir

conocimientos nuevos y reducir errores en el trabajo de laboratorio utilizando

adecuados controles de calidad, que permitan entregar resultados veraces y

confiables.

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CAPÍTULO II

4.- MARCO TEORICO

4.1 GRUPOS SANGUÍNEOS

4.1.1 DESCUBRIMIENTO

La posibilidad de trasfundir sangre de un individuo a otro, quizás fue

seriamente discutida por primera vez en la primera mitad del siglo XVII, aunque

ya desde un tiempo más antiguo se había pensado en los poderes vitales de la

sangre y en su capacidad rejuvenecedora. Dice la historia, por ejemplo, que los

egipcios tomaban baños de sangre y algunas enfermedades se trataban con la

ingestión de sangre de animales.

La era fisiológica de la historia de la transfusión sanguínea comenzó con el

descubrimiento de la circulación de la sangre por Harvey en 1616.

Los primeros experimentos fueron hechos con transfusiones homólogas entre

animales y en 1667 se efectuó la primera transfusión en un humano al cual se

le inyectaron 9 onzas de sangre de carnero. Después de los primeros

accidentes y del descrédito del procedimiento, hubo un receso de casi 150

años en que no hubo ningún avance en la transfusión de sangre. En 1818

James Blundell, obstetra y fisiólogo inglés, hizo la primera transfusión de

hombre a hombre y para 1875 ya se habían hecho unas 350 transfusiones en

humanos. (8)

Karl Landsteiner, médico austriaco, enseñaba entonces anatomía patológica en

la Universidad de Viena. Uno de sus campos de investigación fue la genética

de la sangre humana que comparó con la de los simios. Landsteiner observó

que al mezclar la sangre de dos personas había ocasiones en que los glóbulos

rojos se aglutinaban formando grumos visibles.

Analizó la sangre de un total de 22 personas, incluyendo la suya y la de cinco

colaboradores de su laboratorio, para lo cual procedía a separar el suero de la

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sangre total, lavaba después los glóbulos rojos y los sumergía en una solución

de suero salino fisiológico. A continuación ensayaba cada suero con los

diferentes glóbulos rojos obtenidos y finalmente tabulaba los resultados.

Llegó así a descubrir tres tipos distintos de hematíes, denominados A, B y O,

que daban lugar a reacciones de aglutinación. Estos hallazgos los realizó en

Viena hacia 1901. Dos años más tarde,

dos discípulos suyos, Alfredo de Castello y Adriano Sturli, analizando 155

muestras (de 121 pacientes y 34 controles sanos), descubren un cuarto grupo,

al que llaman AB, sin poder aglutinante. (8)

Gracias a sus trabajos pioneros en inmunohematología se estableció la

compatibilidad sanguínea entre las distintas sangres de los seres humanos. El

descubrimiento de los grupos sanguíneos por Karl Landsteiner, del que ahora

se cumple el primer centenario, facilitó la labor de la justicia al permitir los

análisis periciales en casos de litigio de paternidad y lo que es más importante,

hizo posible las transfusiones sanguíneas seguras basadas en criterios

científicos, evitando los temibles accidentes postransfusionales (hemólisis o

destrucción de los glóbulos rojos y lesiones renales) por la falta de

compatibilidad sanguínea. (9)

4.1.2 CONCEPTO

Es el conjunto de antígenos genéticamente determinados, que se encuentran

presentes en la superficie de la membrana de las células sanguíneas y que

pueden producir, con una transfusión o con el embarazo una inmunización. (10)

4.1.3 OTROS GRUPOS SANGUÍNEOS

Existen actualmente 30 grupos sanguíneos reconocidos por la Sociedad

Internacional de Transfusión de Sangre (ISBT), clasificados por letras como, por

ejemplo M, N, S y P descrito en 1927 por Landsteiner y Le- vine, hay otros

conocidos por el nombre de las personas en las que se identificaron los

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anticuerpos por primera vez (Kell, Duffy, Diego,etc.), los cuales, aunque de inte-

rés genético y antropológico, pueden influir en el aspecto transfusional. (11)

4.2 SISTEMA ABO

4.2.1 INTRODUCCIÓN

El sistema ABO fue el primer grupo sanguíneo descubierto por Landsteiner, su

nombre proviene de los tres tipos de grupos que se identifican: los de antígeno

A, de antígeno B, y "O".

Landsteiner demostró que los glóbulos rojos contenían por lo menos dos

factores, designados como aglutinógenos A y B, con los cuales se podía

explicar los cuatro grupos que existían y así postuló que cada persona podía

tener uno de ellos (A o B), ambos (AB) o ninguno (O). (12)

Gráfico Nº 1

SISTEMA ABO

Fuente Nº 11

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4.2.2 IMPORTANCIA

Cada individuo posee un conjunto diferente de antígenos eritrocitarios; existen

en la actualidad cerca de 27 sistemas antigénicos conocidos, más algunos

antígenos diferenciados que aún no han sido atribuidos a ningún sistema

específico. Es difícil encontrar dos individuos con la misma composición

antigénica; de ahí la posibilidad, de la presencia en el suero de anticuerpos

específicos (dirigidos contra los antígenos que cada individuo no posee), lo que

resulta en aglutinación o hemólisis cuando ocurre una transfusión incompatible.

Diferentes sistemas antigénicos se caracterizan por inducir a la formación de

anticuerpos en intensidades diferentes; por lo que algunos son más comunes y

otros, más raros. (25)

La determinación de los grupos sanguíneos tiene importancia en varias

ciencias:

En Hemoterapia, se vuelve necesario estudiar al menos alguno de estos

sistemas en cada individuo para garantizar el éxito de las transfusiones.

Así, antes de toda transfusión, es necesario determinar, al menos el tipo

ABO y Rh del donador y del receptor.

En Ginecología/Obstetricia, se puede diagnosticar DHRN a través de su

estudio, adoptándose medidas preventivas y curativas.

En Antropología, se puede estudiar diversas razas y sus interrelaciones

evolutivas, a través del análisis de la distribución poblacional de los

diversos antígenos, determinando su predominancia en cada raza

humana y haciéndose comparaciones. (12)

4.2.3 ANTIGENOS DEL SISTEMA ABO

Así, ha quedado establecido que los antígenos del sistema ABO son los únicos

para los cuales existe el correspondiente anticuerpo, siendo ello una

característica constante y predecible en el suero de individuos normales. (13)

Grupo A: en la membrana plasmática de los glóbulos rojos posee

aglutinógenos A y en el plasma, aglutininas anti B (contra el aglutinógeno B).

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Grupo B: con aglutinógenos B en los eritrocitos y aglutininas anti A (contra el

aglutinógeno A) en el plasma sanguíneo.

Grupo O: este grupo carece de aglutinógenos en la superficie de sus eritrocitos

y en el plasma contiene dos tipos de aglutininas, las anti A y las anti B (contra

ambos tipos de aglutinógenos).

Grupo AB: a diferencia del grupo O, el grupo AB posee los dos aglutinógenos

A y B en las membranas plasmáticas de los glóbulos rojos, pero carece de

aglutininas plasmáticas. (14)

Gráfico Nº 2

ANTÍGENOS Y ANTICUERPOS DEL SISTEMA ABO

Grupos

sanguíneos

Antígenos Anticuerpos Genotipo

0 H Anti-A, B OO

A A Anti-B AO-AA

B B Anti-A BO-BB

AB A y B Ninguno AB

Fuente Nº 15 Modificado por las autoras.

4.2.4 BIOQUÍMICA Y DESARROLLO DE LOS ANTÍGENOS A, B

Y H

Los antígenos A, B y H de los hematíes son glicoproteínas o glucolípidos; sin

embargo, algunos autores consideran que las sustancias de los grupos

sanguíneos son glucolípidos sobre los eritrocitos, pero estos aparecen como

glucoproteínas en la forma secretoria que se encuentra en los líquidos

orgánicos.

La especificidad antigénica está determinada por los glúcidos en los extremos

no reductores del componente hidrato de carbono. Los principales

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determinantes estructurales de la especificidad de los grupos H, A y B son los

siguientes:

H: alfa - L - fucosa

A: alfa - N - acetilgalactosamina

B: alfa - D – galactosa

Los productos primarios del gen del locus de grupo sanguíneo son glucosil -

transferasas, que dirigen el agregado de las unidades de glúcidos adecuadas a

los sustratos aceptores preformados.

Las enzimas son específicas, no sólo para el tipo de glúcido agregado, sino

también para el sustrato y el tipo de unión. (16)

4.2.4.1 Precursores

Existen dos tipos posibles de sustancias para los antígenos A, B, H: Tipo I y

Tipo II. Ambos constan de azúcares idénticos, pero la unión de los mismos en

el extremo terminal es diferente.

El precursor Tipo I, tiene una galactosa terminal unida a una N-

acetilglucosamina subterminal por una unión 1 – 3. En el precursor Tipo II, este

enlace es 1 – 4.

El gen H codifica para la producción de alfa-L-fucosiltransferasa que cataliza la

adición de L-fucosa, el aminoazúcar dominante del antígeno H, a dos

estructuras ligeramente diferentes conocidas como cadenas precursoras 1 y 2.

(16)

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Gráfico Nº 3

PRECURSORES DE LOS ANTÍGENOS

Fuente Nº 16

4.2.4.2 Sustancia H y antígenos A, B

La sustancia H se forma por adición de una fucosa a la galactosa terminal. Si la

cadena es de tipo I, se forma H tipo I y si es de tipo II, la estructura se

denomina H de tipo II.

Gráfico Nº 4

SUSTANCIAS H

Fuente Nº 16

Fuente Nº 16

Una vez que actúa el gen H, las enzimas codificadas por los genes A y B,

pueden añadir los monosacáridos correspondientes (que dan especificidad) a

las cadenas H preformadas.

Las enzimas transferasas son los productos de los genes A y B. La substancia

precursora está constituida por glucosa-galactosa-Nacetilglucosamina-

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galactosa. En la substancia H existe una L-fucosa insertada en la D-galactosa

terminal, la L-fucosa es el azúcar inmunodominante.

En la substancia A el azúcar inmunodominante en la N-acetil D-galactosamina

insertada en la D-galactosa terminal; en la B es D-galactosa-insertada en la D-

galactosa terminal. (26)

Gráfico Nº 5 ESTRUCTURA DE LOS ANTÍGENOS A Y B

Fuente Nº 16

4.2.5 ESTRUCTURA ANTIGÉNICA

Los antígenos del grupo ABO son de naturaleza hidrocarbonada. Los

determinantes antigénicos de los antígenos A, B y 0 son azúcares terminales

de cadenas de oligosacáridos ancladas en glucoproteínas o glucolípidos de la

membrana eritrocitaria.

Los antígenos A y B difieren solo en el azúcar terminal del oligosacárido. El

antígeno A se caracteriza por un residuo N-acetilgalactosamina en posición

terminal, mientras que el antígeno B se caracteriza por un residuo terminal de

galactosa. El fenotipo 0 ocurre cuando no hay azúcares terminales propios del

A y del B.

La sustancia precursora, a la cual se añaden los residuos azucarados propios

del A y B, se llama sustancia H. La sustancia H también tiene poder antigénico

caracterizado por una fucosa, unida de forma covalente al azúcar subterminal

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(una galactosa), a la cual también se unen los residuos propios del A y B si

están presentes.

Las personas del grupo A añaden una N-acetilgalactosamina a la sustancia H

para generar el epítope A, y las del grupo B añaden una galactosa a la

sustancia H para generar el epitope B. Las del grupo 0 no añaden ningún

azúcar a la sustancia H, y por lo tanto expresan el antígeno H, pero no el A o el

B. (17)

Los genes del grupo ABO intervienen en la codificación de las

glucosiltransferasas que catalizan la adicción de los azucares terminales

específicos en el oligosacárido precursor, no en la generación de la sustancia

antigénica en sí. Hay dos copias o alelos de cada gen, correspondientes a cada

par de cromosomas. Los genes que codifican las glucosíltransferasas están en

el cromosoma 9 (9q34.1-q34.2) mientras que el gen que codifica la H

fucosiltransferasa está en el cromosoma 19. (21)

4.2.6 ANTICUERPOS SANGUÍNEOS

La mayoría de las pruebas serológicas en inmunohematología dependen de

reacciones entre antígenos en los glóbulos rojos y anticuerpos en el suero. Los

anticuerpos sanguíneos son usualmente Ig G y/o IgM y en casos raros IgA. La

capacidad de fijar complemento por algunos de estos anticuerpos es también

importante para el entendimiento de algunos fenómenos in vitro e in vivo.

Usualmente los anticuerpos IgG tienen mayor significado clínico y en

Enfermedad Hemolítica del recién nacido son los anticuerpos IgG los

responsables de la enfermedad.

Por otro lado, reacciones hemolíticas transfusionales causadas por

anticuerpos IgM con fijación de complemento pueden causar hemolisis

intravascular severa (ej. Incompatibilidad de grupo ABO) y reacciones

transfusionales hemolíticas causadas por anticuerpos IgG pueden causar

hemólisis extravascular y reacción menos severa (Ejemplo la incompatibilidad

Rh). (8)

4.2.7 ANTIGENOS ABO ADQUIRIDOS

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En algunas situaciones como en carcinoma, infecciones gastrointestinales u

otras como en personas de grupos A u O puede ocurrir adquisición de

"antígeno B", el mismo que desaparece cuando el proceso patológico ha

concluido. Esta anormalidad puede crear problemas en el tipiaje ABO. (8)

4.2.8 HERENCIA DEL TIPO ABO

Este tipo de herencia está controlado por un solo gen con tres alelos: O (SIN,

por no poseer los antígenos ni del grupo A ni del grupo B), A y B.

El alelo A da tipos A, el B da tipos B y el alelo O da tipos O, siendo A y B alelos

dominantes sobre O. Así, las personas que heredan dos alelos OO tienen tipo

O; AA o AO dan lugar a tipos A; y BB o BO dan lugar a tipos B. Las personas

AB tienen ambos genotipos debido a que la relación entre los alelos A y B es

de codominancia. Por tanto, es imposible para un progenitor AB, tener un hijo

con tipo O, a excepción de que se de un fenómeno poco común conocido como

"fenotipo Bombay" o diversas formas de mutación genética relativamente

extrañas. (12)

4.2.9 FRECUENCIA

En 1914, Hirszfeld señaló que el sistema ABO tenía una distribución variable

en los diferentes grupos étnicos y desde entonces, múltiples estudios que se

han realizado y publicado en cada parte del mundo, señalan su importancia

como marcadores genéticos y antropológicos.

Para el Banco de Sangre es importante conocer la distribución de los grupos

sanguíneos en la población general, con el fin de establecer las reservas de

sangre que de cada grupo se deben mantener y poder atender de manera

eficiente las demandas que se presenten. (13)

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Gráfico Nº 6

DISTRIBUCIÓN MUNDIAL DE LOS GRUPOS SANGUÍNEOS

Fuente Nº 18 Modificado por las autoras.

4.3 FACTOR RH

4.3.1 DESCUBRIMIENTO

El diminutivo "Rh" es usado para abreviar la palabra rhesus, la cual significa

mono en griego. Su origen se encuentra en 1940, cuando Karl Landsteiner

junto con Alexander Solomon Wiener, descubrieron un antígeno en los

hematíes al que bautizaron como factor Rh, al haber sido hallado en el suero

de conejos inmunizados con sangre procedente de un mono de la India de la

especie Macacus rhesus. (19)

4.3.2 CONCEPTO

El factor Rh es una proteína integral de la membrana aglutinógena que está

presente en todas las células. Un 85% de la población tiene en esa proteína

una estructura dominante, que corresponde a una determinada secuencia de

aminoácidos que en lenguaje común son denominados habitualmente Rh+.

Tener Rh- significa que se tiene la misma proteína pero con modificaciones en

ciertos aminoácidos que determinan diferencias significativas en la superficie

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de los glóbulos rojos, y hacen a los humanos Rh- disponer de anticuerpos

(aglutininas) en el plasma que reaccionan con los glóbulos rojos Rh+.

Existe la posibilidad del Rh nulo (Rh null), rarísimo; esta sangre no reacciona

con ninguno de los antisueros Rh descritos y puede considerarse como

ausencia de estos antígenos en los eritrocitos de la persona. (19)

4.3.3 HERENCIA DEL FACTOR RH

El antígeno D posee la mayor capacidad antigénica. Los genes responsables

de este sistema se localizan en el cromosoma 1.

Existen dos teorías sobre el control genético:

Teoría de Fisher: Tres genes C, D, E (presentan antígeno D aquellas

combinaciones que contengan el alelo D como por ejemplo cDe.).

Teoría de Wiener: En determinados casos se expresa un antígeno D débil Du

(rh-) como consecuencia de:

1. La represión del gen D por un gen C en posición trans (cromosoma

opuesto).

2. La existencia de un alelo Du.

3. La formación de un antígeno D incompleto.

En 1986 Tippet, emite la teoría de la existencia de dos genes RHD y RHCD,

que fueron secuenciados en 1990 por Colin y colaboradores.

La enfermedad del Rh es provocada por una madre Rh- que concibe un hijo

Rh+. Los anticuerpos de la sangre materna destruyen el Rh+ del bebé. Si la

madre piensa tener un segundo hijo debe aplicarse una vacuna que elimina los

anti-Rh, que químicamente es una gammainmunoglobulina, la misma que debe

ser aplicada dentro de las 72 horas después del primer parto, ya que si se tiene

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un segundo bebé con Rh+ la madre producirá anti-Rh en exceso que destruirá

la sangre del hijo, produciendo la enfermedad llamada Eritroblastosis fetal

(anemia severa), en otros casos por la producción en exceso de los anti-Rh, el

hijo puede morir intrauterinamente. (19)

Gráfico Nº 7

EJEMPLO DE HERENCIA DEL FACTOR RH

Fuente Nº 19

4.3.4 COMPATIBILIDAD SANGUINEA

Los donantes de sangre y los receptores deben tener grupos compatibles. El

grupo O- es compatible con todos, por lo que, quien tiene dicho grupo se dice

que es un donante universal. Por otro lado, una persona cuyo grupo sea AB+,

podrá recibir sangre de cualquier grupo, y se dice que es un receptor universal.

Por ejemplo, una persona de grupo A- podrá recibir sangre O- o A- y donar a

AB+, AB-, A+ o A-.

Cabe mencionar que al recibirse la sangre de un donante, ésta se separa en

distintos hemocomponentes y ahí se determina la compatibilidad con los

debidos grupos sanguíneos.

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Actualmente ya casi no se realizan transfusiones de sangre entera, si así fuera

no se debe utilizar el término "donante o receptor universal" ya que es

necesario tener en cuenta que la sangre entera está compuesta principalmente

por glóbulos rojos (con sus antígenos) y por plasma (con sus anticuerpos). De

ese modo, si se transfundiera a una persona de grupo A la sangre de un

supuesto dador universal de grupo O, estaría ingresando anticuerpos anti A

(del donante que es grupo O), que como se mencionó, tiene anticuerpos anti-A

y anti-B a la persona a transfundir provocando una incompatibilidad ABO

pudiendo provocar incluso la muerte.

Como se aclaró, la sangre se separa en distintos hemocomponentes, los

glóbulos rojos, plasma, y plaquetas. De esta manera, se pueden transfundir los

glóbulos rojos de un donante O a cualquier grupo sanguíneo ya que no cuenta

con antígenos para el sistema ABO en sus glóbulos rojos. Por el contrario, se

puede transfundir su plasma a un individuo solamente con el mismo grupo

sanguíneo, teniendo en cuenta que el grupo O cuenta con anticuerpos anti-A y

anti-B. Lo mismo sucede con el grupo AB. (12)

Gráfico Nº 8

TABLA DE COMPATIBILIDAD ENTRE GRUPOS SANGUÍNEOS

Fuente Nº 12

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4.4 SUBGRUPOS SANGUÍNEOS DE A

El problema de las transfusiones se agrava debido a la existencia de

subgrupos, dentro de un grupo sanguíneo, así el fenotipo A puede dividirse en

dos principales subgrupos A1 y A2 aunque existen otros subgrupos que son el

resultado de mutaciones en la glucosiltransferasa y reducen su actividad o

modifican la especificidad del sustrato sobre el que actúan. El resultado es una

cantidad menor de sustancia A, y a veces, una estructura antigénica alterada.

4.4.1 IMPORTANCIA

Conocer los subtipos de A es importante porque pueden interferir con la

determinación correcta del grupo sanguíneo de un donante o de un receptor de

sangre. A veces, se detectan por discrepancias entre el grupo sérico y el

hemático, en los que se necesitan pruebas adicionales hasta identificar

correctamente el grupo. (14)

Es importante porque:

Pueden dar aglutinación negativa o muy débil con Anti-A y por lo tanto

interpretarse como 0, lo que es peligroso sobre todo si son células del

donador.

Si se transfunde sangre A1 en un paciente A2, se está inmunizando a

este paciente y en una segunda transfusión puede reaccionar con

anticuerpos dirigidos contra las determinantes antigénicos propias de A1

que no están en los eritrocitos A2.

El 2% de la población A2 y 25% de la A2B, tienen anti-A1 y por lo tanto si

requieren transfusión deben recibir sangre A2 y A2B respectivamente.(8)

Es más corriente encontrar subgrupos de A que subgrupos de B. Mientras el

80% de los individuos A son A1, nada menos que el 20% son A2.

Las personas del subgrupo A2; tienen menos antígeno A en la superficie de sus

eritrocitos, e incluso algunas producen un anticuerpo anti-A1, clínicamente poco

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significativo, excepto en las raras ocasiones que actúa a 37°C. El hecho de

producir anti-A1 significa que también hay diferencias cualitativas entre el A1 y

el A2. Parece ser que en los eritrocitos A1 el antígeno A esta muy ramificado.

Los individuos A1 producen antígeno A, a partir de todas las cadenas H de tipo

II (H1, H2, H3, H4). Los individuos A2 producen antígeno A solamente a partir

de los precursores H1 y H2. Por lo tanto, los individuos A1 presentan más

cantidad de antígeno A por eritrocito que los individuos A2. (20)

Los eritrocitos A2 aglutinan mas débilmente que los A1 con los antisueros

habituales, pero prácticamente igual con los monoclonales, y no aglutinan nada

con la lectina procedente de la planta Dolichos biflorus, cosa que los

eritrocitos A1 si lo hacen.

Los glóbulos rojos de los individuos A1 presentan aproximadamente 106 sitios

antigénicos por célula; en cambio, los A2 sólo poseen entre 0,2 a 0,4 x 106 sitio

por glóbulo rojo. La distinción entre A1 y A2 corresponde a una diferencia en el

número y distribución de los receptores A en la membrana eritrocitaria y a una

diferencia cualitativa de estructura.

La diferenciación entre ambas se realiza mediante la utilización de anticuerpos

monoclonales y lectinas específicas de grupo sanguíneo Dolichos biflorus (anti-

A1) y Ulex europaeus (anti-H).

Se definen como A intermedio (Aint) aquellos hematíes en los que se observan

ciertos caracteres A1 y ciertos caracteres A2.

Diferentes grupos de trabajo han utilizado diversos criterios para clasificar el

Aint. Algunos clasifican como Aint aquellas células con reacciones débiles con

Dolichos, pero con reactividad H más fuerte que las A2, mientras que otros las

clasifican por su fuerte reactividad con Dolichos y Ulex.

Dentro de los AB también hay subgrupos de A, en su mayoría A1B y algunos

A2B. Entre el 22% y el 35% de los A2B tienen anti-A1 en el suero. Es de

suponer que la mayor incidencia de anti-A1 en los A2B, comparándolos con los

A2, tiene que ver con el nivel mas bajo del antígeno A1 en las células A2B que

en las A2. (14)

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No es necesario en la rutina determinar si una persona es A1 o A2, a menos

que en su suero exista un anticuerpo con especificidad anti-A1 que esté

causando una discrepancia en la interpretación del grupo inverso, o que se

presente incompatibilidad en la prueba cruzada. (13)

Gráfico Nº 9

SUBGRUPOS SANGUÍNEOS DE A

Fuente Nº 14

4.4.2 OTROS SUBGRUPOS DE A

Existen otros subgrupos A considerados débiles A3, Ax, Aend, Am, Ael, en los que

la reactividad antigénica es inferior a la de los glóbulos A2. (4)

A3: estos hematíes presentan un modelo característico de aglutinación cuando

reaccionan con el suero anti-A: algunos de los hematíes son aglutinados

mientras que otros no lo son, es decir, ofrecen una imagen de doble población.

El fenotipo A3 presenta una frecuencia de 1:1000. (20)

Aint: su reacción con anti-A y anti-A1 es más débil que los eritrocitos A1 y más

fuerte con anti–H que los eritrocitos A2, producen un patrón de campo mixto

característico de pequeños aglutinatos entre muchas células libres en las

pruebas con anti-A y anti-B.

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Ax: Las células tienen una reacción muy débil con anti-A, o no la presentan. En

el suero, el anti-A no existe o es muy débil y habitualmente contiene anti-A1. En

saliva, cuando es secretor, sólo se detecta el antígeno H.

Am: reacción negativa o débil con anti-A y anti AB. En suero, no se detecta

anti- A o anti-A1; en saliva de secretor se encuentran antígenos A y H. Aend: A

débil debido en apariencia a un alelo de ABO, pero que no se cataloga como

Ax ni Am. La saliva contiene H, pero no A.

Ael: No son aglutinados por anti-A ni por anti-A,B de ningún origen, Ael es aún más débil que Aend. La saliva de los secretores contiene H pero no A.

Los grupos débiles de A como Ax, Am y Ael no pueden ser identificados en

forma confiable sólo sobre la base de las pruebas tipificación de sangre. Los

estudios de la saliva, transferasas nos ayudan a identificarlos. (29)

Estos subgrupos pueden ser el resultado de:

Genes alelos situados en el locus ABO, que comprende menos del 1%

del total de genes del grupo A.

Genes modificadores situados en otros locus, que alteran la expresión

de los genes normales ABO.

Mezclas de sangre.

Cambios en la fuerza de reacción del antígeno A, causado por

enfermedades.

Antígeno A adquiridos. (13)

Anti A1:

Este anticuerpo reacciona con los hematíes A1, pero no reacciona con los

hematíes A2. Es posible que el anti - A1 reaccione con el antígeno A que se

forma a partir de las cadenas H3 y H4. Anti-A1 se considera clínicamente

significativo cuando reacciona a 37°C. (21)

Anti-A1 Lectin.

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Anti-A1 lectina es un reactivo estabilizado preparado a partir de un extracto

purificado de semillas Dolichos biflorus que es cuidadosamente calibrado para

una diferencia de las células del grupo sanguíneo A. Contiene una

fitohemaglutinina contra los subgrupos A1 y A1B; prácticamente específicos

para un antígenos en las células rojas de la sangre humana.

La determinación de subgrupos A no debe realizarse durante el primer año de

vida ya que el antígeno A no se encuentra plenamente desarrollado (20)

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CAPÍTULO III

5.- OBJETIVOS

5.1 OBJETIVO GENERAL

♣ Determinar la frecuencia del subgrupo sanguíneo A1 en los pacientes

que acuden al Banco de Sangre de la Cruz Roja Ecuatoriana de la

ciudad de Cuenca en el año 2011.

5.2 OBJETIVOS ESPECÍFICOS

♣ Identificar a los pacientes que pertenezcan al grupo sanguíneo A o AB.

♣ Determinar el subgrupo sanguíneo A1 y los resultados obtenidos

relacionarlos con el grupo sanguíneo y el tipo de paciente.

♣ Brindar información a los pacientes sobre las complicaciones de la

incompatibilidad

sanguínea mediante el empleo de trípticos.

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CAPÍTULO IV

6.- METODOLOGÍA

6.1 TIPO Y DISEÑO GENERAL DEL

ESTUDIO

El presente estudio es de tipo

descriptivo

6.2 UNIVERSO

En este estudio, el universo lo conformaron 3862 pacientes, quienes acudieron

al Banco de Sangre de la Cruz Roja Ecuatoriana del Cantón Cuenca en el año

2010 del grupo sanguíneo A y AB, los mismos que fueron obtenidos por datos

proporcionados por la misma Institución.

GRUPO

SANGUINEO FRECUENCIA

A+ 3521

A- 146

AB+ 187

AB- 8

TOTAL 3862

6.3 MUESTRA

Muestra no probabilística, prospectiva conformada por 192 pacientes que

acudieron al Banco de Sangre de la Cruz Roja, de acuerdo a la siguiente

fórmula:

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Tamaño Muestral:

Donde:

N = Total de la población = 3862

Za2 = 1.962 (si la seguridad es del 95%)

p = proporción esperada (en este caso 5% = 0.05)

q = 1 – p (en este caso 1-0.05 = 0.95)

d = precisión (en este caso deseamos un 3%).

n= 3862 x (1.96)2 x 0.05 x 0.95 = 192

0.032 x (3862 – 1) + (1.96)2 x 0.05 x0.95

Para aumentar la representatividad y la posibilidad de pérdidas al momento del

levantamiento de datos de la investigación se incluyó en el estudio a 200

pacientes.

6.4 CRITERIOS DE INCLUSIÓN

En el presente estudio estuvieron incluidos:

• Pacientes que acudieron al Banco de Sangre de la Cruz Roja

Ecuatoriana del Cantón Cuenca y que pertenecieron al grupo

sanguíneo A o AB.

• Pacientes de cualquier condición socio-económica, peso, talla, edad,

procedencia y residencia.

• Pacientes que firmaron el consentimiento informado y los que tuvieron la

autorización de sus representantes al ser menores de edad.

6.5 CRITERIOS DE EXCLUSIÓN

No fueron incluidos:

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• Pacientes que no firmaron el consentimiento informado.

• Pacientes que presentaron alguna resistencia para colaborar con el

estudio.

6.6 METODOS, TÉCNICAS Y PROCEDIMIENTOS

6.6.1 PRIMER OBJETIVO

Para identificar a los pacientes del grupo sanguíneo A o AB, objeto de nuestro

estudio, se solicitó el permiso correspondiente para la realización de la tesis

que lleva por título “Frecuencia del subgrupo sanguíneo A1 en los pacientes

que acuden al Banco de Sangre de la Cruz Roja Ecuatoriana del Cantón

Cuenca 2011”, permitiéndonos tener acceso a la información necesaria para la

realización de nuestro estudio.

Luego se solicitó la colaboración del personal que labora en la Institución para

que nos permita realizar el grupo sanguíneo a todos los pacientes que acuden

a dicho centro y obtener el consentimiento informado, requisito necesario para

el desarrollo del estudio.

Finalmente, con el apoyo del personal del Banco de Sangre de La Cruz Roja,

se procedió a la recolección de las muestras sanguíneas y su adecuado

transporte al Centro de Diagnostico de la Facultad de Ciencias Médicas, lugar

en el que se llevo a cabo la investigación.

TÉCNICA DE LABORATORIO CLÍNICO PARA LA DETERMINACIÓN DEL

GRUPO SANGUÍNEO:

Toma de muestra

Muestra Capilar

1. Colocar al paciente en la posición adecuada (sentado). La punción se

realiza en la yema del dedo índice preferiblemente.

2. Provocar una hipertermia local, mediante frotación y apretar el pulpejo

del dedo seleccionado de manera tal que la extremidad muestre

congestión venosa.

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3. Desinfectar el sitio de la punción con algodón empapado en alcohol.

Dejamos secar la piel sin soplar.

4. Tomar una lanceta nueva, estéril, desechable y realizar una punción

rápida y segura.

5. Recolectar las gotas de sangre necesarias en la placa evitando

presionar demasiado fuerte. (22)

Determinación del Grupo Sanguíneo

1. En una lámina de vidrio limpia y rotulada colocar tres gotas de sangre

separadas.

2. Añadir una gota de cada reactivo (Anti A, Anti B y Anti D) sobre cada

gota de sangre depositada.

3. Mezclar con un palillo el reactivo dentro de un área de unos 2 cm de

diámetro, moviendo la lámina en forma suave y continua por 2

minutos.

4. Interpretación, leer macroscópicamente por aglutinación. (23)

RESULTADOS

Anti - A Anti - B Anti - D

A+ Aglutina Aglutina

A- Aglutina

B+ Aglutina Aglutina

B- Aglutina

AB+ Aglutina Aglutina Aglutina

AB- Aglutina Aglutina

O+ Aglutina

O-

6.6.2 SEGUNDO OBJETIVO

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Para determinar el subgrupo sanguíneo A1, empleamos la técnica de

aglutinación con el reactivo anti-A1, el período estimado para el análisis de las

muestras fue de 3 meses.

TÉCNICA DE LABORATORIO CLÍNICO PARA LA DETERMINACIÓN DEL

SUBGRUPO SANGUÍNEO A1:

Toma de muestra

Muestra venosa

1. Colocar al paciente en posición adecuada (sentado). Se coloca el brazo

extendido sobre el soporte.

2. Colocar el torniquete de 8 a 10 cm por encima del lugar de la punción, al

dificultarse el retorno venoso edematiza las venas y por tanto mejora su

palpación.

3. Examinar exhaustivamente las venas (cefálica, basílica o mediana),

visualizando la zona y palpándola. Una vez localizada la vena limpiamos

la zona con alcohol y se deja secar sin soplar.

4. Situar la aguja con el bisel hacia arriba aproximadamente 20º sobre la

piel, al mismo tiempo con la mano izquierda se fija los tejidos.

5. Una vez extraída la sangre el paciente abre la mano y se descomprime

la vena. Una vez terminada la extracción y antes de extraer la aguja se

debe retirar el torniquete.

6. Retirar la aguja y colocar en el punto de punción algodón o gasa estéril

ejerciendo presión. (24)

Determinación del subgrupo sanguíneo A1

1. Colocar en un tubo 0.5 ml de sangre total.

2. Adicionar al tubo de ensayo con la sangre total 4 ml de suero fisiológico.

3. Centrifugar por un minuto y descartar el sobrenadante.

4. Realizar este procedimiento por dos ocasiones más.

5. Eliminar el sobrenadante y colocar una gota del reactivo anti – A1 a la

muestra.

6. Mezclar y centrifugar por 15 segundos a 1000 rpm.

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7. Agitar suavemente el tubo y resuspender el botón celular,

8. Interpretar. Si a una agitación suave los hematíes se despegan en uno o

varios bloques, la reacción es positiva y si formar una suspensión

homogénea, la reacción es negativa.(26)

RESULTADOS

NEGATIVO Ausencia de aglutinación.

POSITIVO Presencia de aglutinación.

6.6.3 TERCER OBJETIVO

Para realizar este objetivo, se entregó un folleto el cual describe la información

de los grupos sanguíneos, factor Rh, problemas de incompatibilidad, la

importancia de conocer el tipo de sangre y subgrupos sanguíneos de A. (Anexo

Nº6)

6.7 CONTROL DE CALIDAD

El aseguramiento de la calidad de las investigaciones del laboratorio implica

todo un conjunto de medidas encaminadas a lograr una adecuada confiabilidad

de los resultados. En este trabajo de investigación, se realizó un control interno

interlaboratorio e intralaboratorio

CONTROL INTERNO INTRALABORATORIOS

Control interno de calidad significa una serie de actuaciones encaminadas a

evaluar diariamente la fiabilidad de las determinaciones analíticas rutinarias

(27). Para lo cual se utilizan muestras especialmente preparadas para cumplir

el rol de “muestras testigo”. Estas muestras pueden prepararse en el mismo

laboratorio o adquirirse comercialmente. (28)

Este control lo realizamos por semana un total de 5 controles negativos,

utilizando glóbulos rojos lavados de un grupo sanguíneo “O”, previamente

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verificado, ya que esté al reaccionar con el reactivo anti A1 no produce ninguna

aglutinación. También se realizaron semanalmente 5 controles positivos

comerciales, para los que se utilizó células de grupo sanguíneo A1 que dieron

aglutinación con el reactivo anti A1. (Anexo Nº5 parte b)

CONTROL INTERLABORATORIOS

Para confirmar los resultados obtenidos, se procedió a enviar 15 muestras al

Banco de Sangre de SOLCA y 15 muestras al Banco de Sangre de la Cruz

Roja Ecuatoriana, dando un total de 30 muestras entre positivas y negativas

para subgrupo A1, los resultados de estas instituciones fueron exactamente

iguales a los resultados obtenidos en nuestra investigación. (Anexo Nº 5 parte

a)

6.8 PLAN DE ANÁLISIS DE LOS RESULTADOS

En el análisis de la información se utilizó los siguientes programas estadísticos:

SPSS VERSION 15.0 EN ESPAÑOL y EXCEL.

Y se determinó frecuencia, porcentaje y chi cuadrado. Los resultados son

presentados en cuadros y gráficos.

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CAPÍTULO V

7.- ANÁLISIS DE RESULTADOS

TABLA # 1

DISTRIBUCIÓN DE GRUPOS SANGUINEOS DE LOS PACIENTES DE LA

CRUZ ROJA ECUATORIANA DEL CANTÓN CUENCA DEL AÑO 2010.

GRUPO

SANGUINEO FRECUENCIA PORCENTAJE

O+ 15916 73,69

O- 411 1,9

A+ 3521 16,3

A- 146 0,67

B+ 1365 6,32

B- 45 0,21

AB+ 187 0,87

AB- 8 0,04

TOTAL 21599 100

FUENTE: Formulario de Recolección de Datos

ELABORACIÓN: Las Autoras

Se observa un 73.69% del grupo sanguíneo O+, 16.3% del grupo A+ y el

0.04% del grupo sanguíneo AB-.

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GRAFICO # 1

FUENTE: Tabla # 1.

ELABORACION: Las Autoras.

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TABLA # 2

DISTRIBUCIÓN DE 200 PACIENTES DE ACUERDO AL SEXO

CRUZ ROJA ECUATORIANA DEL CANTÓN CUENCA 2011.

SEXO Frecuencia Porcentaje

FEMENINO 66 33,0

MASCULINO 134 67,0

Total 200 100,0

FUENTE: Formulario de Recolección de Datos

ELABORACIÓN: Las Autoras

Del total de pacientes que conformaron este estudio el 67 % pertenecen al

sexo masculino frente al 33% del sexo femenino.

GRAFICO # 2

FUENTE: Tabla # 2.

ELABORACION: Las Autoras.

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TABLA # 3

DISTRIBUCIÓN DE 200 PACIENTES SEGÚN SU TIPO DE SANGRE.

CRUZ ROJA ECUATORIANA DEL CANTÓN CUENCA 2011.

TIPO DE

SANGRE Frecuencia Porcentaje

A- 6 3,0

A+ 186 93,0

AB - 1 ,5

AB+ 7 3,5

Total 200 100,0

FUENTE: Formulario de Recolección de Datos

ELABORACIÓN: Las Autoras

De acuerdo al tipo de sangre el porcentaje más alto se encuentra en los

pacientes de tipo A + con el 93% y el más bajo en los pacientes de tipo AB –

con el 0.5 %.

GRAFICO # 3

FUENTE: Tabla # 3.

ELABORACION: Las Autoras.

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TABLA # 4

DISTRIBUCIÓN DE 200 PACIENTES DE ACUERDO AL SUBGRUPO

SANGUÍNEO A1. CRUZ ROJA ECUATORIANA DEL CANTÓN CUENCA

2011.

SUBGRUPO

A1 Frecuencia Porcentaje

NEGATIVO 38 19,0

POSITIVO 162 81,0

Total 200 100,0

FUENTE: Formulario de Recolección de Datos

ELABORACIÓN: Las Autoras

Al realizar la prueba para determinar el subgrupo sanguíneo A1 el 19% de los

casos son negativos y el 81% son positivos.

GRAFICO # 4

FUENTE: Tabla # 4.

ELABORACION: Las Autoras.

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TABLA # 5

DISTRIBUCIÓN DE 200 PERSONAS DE ACUERDO AL TIPO DE PACIENTE

CRUZ ROJA ECUATORIANA DEL CANTÓN CUENCA 2011.

TIPO DE

PACIENTE Frecuencia Porcentaje

DONANTE 104 52,0

TIPIFICACION 96 48,0

Total 200 100,0

FUENTE: Formulario de Recolección de Datos

ELABORACIÓN: Las Autoras

De acuerdo al tipo de paciente que acudió a la Cruz Roja Ecuatoriana del

Cantón Cuenca, la mayor frecuencia se encuentra en los donantes de sangre

con el 52% frente al 48% que acudió para realizarse una tipificación.

GRAFICO # 5

FUENTE: Tabla # 5.

ELABORACION: Las Autoras.

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TABLA # 6

RELACIÓN DEL SUBGRUPO A1 CON EL TIPO DE SANGRE EN 200

PACIENTES

CRUZ ROJA ECUATORIANA DEL CANTÓN CUENCA 2011.

SUBGRUPO A1 - TIPO DE SANGRE

TIPO DE SANGRE

A- A+ AB- AB+ TOTAL

SUBGRUPO

A1 # % # % # % # % # %

NEGATIVO 2 5,3 34 89,4 0 0 2 5,3 38 100

POSITIVO 4 2,5 152 93,8 1 0,6 5 3,1 162 100

TOTAL 6 3 186 93 1 0,5 7 3,5 200 100

FUENTE: Formulario de Recolección de Datos

ELABORACIÓN: Las Autoras

El mayor número de pacientes son de tipo A+, de los cuales el 89.4% son

subgrupo A1 negativo y el 93.8% son subgrupo A1 positivo.

CHI CUADRADO = 0,679 No significativo.

GRAFICO # 6

FUENTE: Tabla # 6.

ELABORACION: Las Autoras.

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TABLA # 7

RELACIÓN DEL SUBGRUPO SANGUÍNEO A1 CON EL TIPO DE PACIENTE

EN 200 MUESTRAS. CRUZ ROJA ECUATORIANA DEL CANTÓN CUENCA

2011.

SUBGRUPO A1 - TIPO DE PACIENTE

TIPO DE PACIENTE

DONANTE TIPIFICACIÓN TOTAL

SUBGRUPO A1 # % # % # %

NEGATIVO 16 42,1 22 57,9 38 100

POSITIVO 88 54,3 74 45,7 162 100

TOTAL 104 52 96 48 200 100

FUENTE: Formulario de Recolección de Datos

ELABORACIÓN: Las Autoras

El mayor número de casos positivos está en donantes con un 54.3 %, en tanto

que el menor porcentaje está en los pacientes que acudieron para una

tipificación con el 45.7%.

CHI CUADRADO = 0,175 No significativo

GRAFICO # 7

FUENTE: Tabla # 7.

ELABORACION: Las Autoras.

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CAPÍTULO VI

8.- DISCUSIÓN

El sistema de grupos sanguíneos ABO fue el primer sistema descubierto hace

un siglo, pero la aparición de sus variantes más débiles debido a la

heterogeneidad de los alelos A y B están siendo todavía estudiadas.

Las frecuencias encontradas de los grupos sanguíneos en este estudio son

similares a las observadas en otros estudios realizados en Bancos de Sangre

de otros países.

En este trabajo no se enfrentaron todas las muestras a los reactivos

hemoclasificadores anti-A1 y anti-H, por lo que no se pudo clasificar

separadamente al antígeno A en A1 y A2, por lo tanto, se investigó solamente el

subgrupo A1. (30)

Aunque se conoce que el subgrupo A2B y otros fenotipos débiles del grupo

sanguíneo A son más frecuentes en individuos de la raza negra, en este

estudio no se consideró este aspecto, debido a que no se utilizaron muestras

seleccionadas de acuerdo con los parámetros antropológicos establecidos, en

razón de que la población del Cantón Cuenca está constituida generalmente

por mestizos, por lo que no es posible establecer las etnias por el color de la

piel sin cometer errores en la clasificación.

Conociendo ya el porcentaje del grupo sanguíneo de nuestra sociedad, hemos

considerado el estudio de subgrupos sanguíneos de A basándonos en

estudios que sean realizado en otros países como Costa Rica en donde la

muestra fue más grande, se observa que el porcentaje de A1 es 88.4%, Aint

7.9%, A2 3.6% y A3 0.1%. (5) En la Habana Cuba reportan resultados de A1

73,93 %; A2 17,52 %y 40 Aint 8,55 %; A1B (1,38 %) y A2B 0,46% (4) y en

nuestra investigación se obtuvieron porcentajes de A1 de 81% y de As de 19%

en una muestra de 200 personas de grupo sanguineo A y AB que acudieron al

Banco de sangre de la Cruz Roja; con lo que podemos decir que no existe una

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diferencia significativa entre los dos estudios. Linares en su publicación de

“Imnunohematologia y Transfusiones” menciona que 80% de los individuos A

son A1, y el 20% son A2 con un porcentaje similar para los AB; que son

semejantes a los resultados de nuestro estudio. (13)

El Dr. Salomón Grispan en su obra titulada “Grupos sanguíneos ABO y Rh”

señala lo siguiente: “La mayoría (80%) de la población a la que conocemos

como "grupo A" son A1 y con menos frecuencia A2 (18-19 %) y muy rara vez

otros subgrupos de A. (1)

No encontramos estudios relacionados con los subgrupos en nuestro país, por

lo que no es factible realizar una comparación con los resultados obtenidos en

nuestra investigación.

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9. CONCLUSIONES

Al término de nuestro trabajo de investigación concluimos lo siguiente:

En los datos obtenidos del Banco de Sangre de la Cruz Roja

Ecuatoriana se encontró el predominio del grupo sanguíneo "O" en un

75,59% y una escasa frecuencia del grupo sanguíneo "AB" con un

porcentaje de 0.91%, que está de acuerdo a los resultados obtenidos a

nivel mundial.

De los 200 pacientes de todas las edades, se observa un predominio del

sexo masculino con el 67% frente al 33% del sexo femenino.

El mayor porcentaje del tipo de sangre de las personas A y AB

sometidos a nuestro estudio pertenecen al grupo sanguíneo A+ con el

93% y el menor porcentaje es el grupo sanguíneo AB- con el 0.5%.

Se encontraron 162 casos positivos para el subgrupo sanguíneo A1 con

el 81% y 38 casos para el subgrupo A1 negativo que es el 19%.

Al comparar el subgrupo sanguíneo con algunas variables se observó

que no existe ninguna significación estadística con el grupo sanguíneo-

subgrupo (p=0.679) y tipo de paciente (p=0.234).

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10 RECOMENDACIONES

Conociendo que el 52 % de las personas que formaron parte de este

estudio eran donantes, es importante hacer un seguimiento a las

personas que reciben transfusiones con la finalidad de evitar problemas

de incompatibilidad por la presencia de Anti A1.

Para nuevos estudios sobre este tema, sería de utilidad contar con todos

los reactivos para determinar además los subgrupos sanguíneos A2 y A

intermedio.

Los resultados de esta investigación deberían ser difundidos a nivel

Institucional y extra Institucional, ya que son muy pocos los estudios

realizados sobre este tema y los mismos pueden servir de base para

futuras investigaciones.

Las pruebas de grupo sanguíneo y subgrupo deberían estar dentro de

los exámenes de rutina que se realizan en los laboratorios del banco de

sangre para evitar futuras complicaciones que puedan presentar las

personas que se sometan a una transfusión sanguínea.

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&prev=/search%3Fq%3Dlectina%2Banti-

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22. MOSCOSO G, Johanna. “TOMA DE MUESTRA PARA

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23. “REACTIVOS TIPIFICADORES MONOCLONALES PARA

TIPIFICACIÓN DE GRUPOS SANGUÍNEOS ANTI - A, ANTI - B, ANTI -

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26. ORTIZ, Miguel Ángel; otros.” INMUNOHENATOLOGIA” Universidad de

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27. FARINATI, Zulema “CONTROL DE CALIDAD EN LABORATORIOS

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Disponible en: http://www.coyunturaonline.com.ar/?p=1612

28. PINA A, José. Hematología. CONCEPTOS RELACIONADOS CON EL

CONTROL DE CALIDAD. Libro Editorial. Paraninfo Pág. 631 IES Miguel

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A&url=http%3A%2F%2Fcentros5.pntic.mec.es%2Fmiguel74%2Fhemato

%2Fpina%2F61_CONTROL_CALIDAD_Definic_58.ppt&rct=j&q=tipos%2

0de%20control%20interno%20de%20calidad%20interlaboratorio&ei=NM

AVTp_2KIrAgQfDnqX0Dw&usg=AFQjCNHoqgSd1twXffVqEp61lj1SSPdb

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29. NIETO R, Araceli. “DETECCIÓN, ANÁLISIS Y RESOLUCIÓN DE

DISCREPANCIAS EN EL GRUPO SANGUÍNEO ABO”, Banco de

Sangre del Hospital Gonzalo Castañeda, Instituto de Seguridad y

Servicios Sociales de los Trabajadores del Estado. Revista Médica del

Instituto Mexicano de Seguro Social 2006; pág. 32-33. Disponible en:

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30. GONZÁLEZ S, Reneé. BENCOMO H, Antonio y otros.” FENOTIPOS DÉBILES DEL ANTÍGENO A (sistema ABO de grupos sanguíneos) EN DONANTES DE SANGRE” Instituto de Hematología e Inmunología Ciudad de La Habana. 1996 Disponible en: http://bvs.sld.cu/revistas/hih/vol14_2_98/hih05298.htm

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CAPÍTULO VIII

ANEXOS

ANEXO Nº 1. CONSENTIMIENTO INFORMADO.

UNIVERSIDAD DE CUENCA

FACULTAD DE CIENCIAS MÉDICAS

ESCUELA DE TECNOLOGÍA MÉDICA

FRECUENCIA DEL SUBGRUPO SANGUÍNEO A1 EN LOS PACIENTES QUE ACUDEN AL BANCO DE SANGRE DE LA CRUZ ROJA

ECUATORIANA. CUENCA - ECUADOR 2011

Reciba un cordial saludo de parte de las integrantes María Belén Gordillo Siguencia y María de Lourdes Guzñay Barbecho del proyecto de investigación de tesis: “Frecuencia de los subgrupos sanguíneos de A en los pacientes que acuden al Banco de Sangre de la Cruz Roja Ecuatoriana Cuenca - Ecuador 2011”, la misma que se llevará a cabo en los pacientes de grupo sanguíneo A y AB que acuden al Banco de Sangre de la Cruz Roja de la ciudad de Cuenca, razón por la cual, queremos darle a conocer sobre este estudio:

Esta investigación se llevará a cabo será sin ningún costo ni remuneración económica y es estrictamente voluntaria.

Si usted decide participar de este estudio se procederá a tomarle una muestra de sangre capilar, la misma que consiste en realizarle un pequeño pinchazo en el pulpejo de su dedo índice para realizar el grupo sanguíneo, utilizando todas las normas de asepsia, existiendo un leve dolor al momento del pinchazo.

Al entregarle su resultado y verificar que su grupo de sangre es de tipo “A o AB”, se procederá a tomar una muestra de sangre venosa para la determinación de subgrupos sanguíneos A1 y otros subgrupos de A, que se realizará en el laboratorio del Centro de Diagnóstico de la Facultad de Ciencias Médicas de la Universidad de Cuenca , la cantidad extraída es de unos 3 cc que no afectará de ninguna manera su estado de salud, la misma será tomada con todas las medidas adecuadas libres de contaminación en el Banco de Sangre. Los riesgos serán mínimos existiendo un leve dolor al momento del pinchazo y un posible moretón en el lugar de la extracción.

Agradeciéndole por su colaboración, ya que si Ud accede a participar de la misma será de gran importancia ya que aportará con la información necesaria para determinar el porcentaje de los grupos y subgrupos sanguíneos y a cumplir con nuestros objetivos.

Expreso mi consentimiento para participar de este estudio dado que he recibido toda la información necesaria de lo que incluirá el mismo y tuve la oportunidad

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de formular todas las preguntas necesarias para mi entendimiento, las cuales fueron respondidas con claridad y profundidad.

Yo…………………………………………………….. después de haber conocido sobre este proyecto de investigación doy mi autorización para que se me incluya en el estudio.

---------------------------------------- ---------------------------------

Firma Nº de cédula

Fecha: Día / Mes / Año

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ANEXO Nº 2 CONSENTIMIENTO INFORMADO.

UNIVERSIDAD DE CUENCA

FACULTAD DE CIENCIAS MÉDICAS

ESCUELA DE TECNOLOGÍA MÉDICA

FRECUENCIA DEL SUBGRUPO SANGUÍNEO A1 EN LOS PACIENTES QUE ACUDEN AL BANCO DE SANGRE DE LA CRUZ ROJA

ECUATORIANA. CUENCA - ECUADOR 2011

Reciba un cordial saludo de parte de las integrantes María Belén Gordillo Siguencia y María de Lourdes Guzñay Barbecho del proyecto de investigación de tesis: “Frecuencia de los subgrupos sanguíneos de A en los pacientes que acuden al Banco de Sangre de la Cruz Roja Ecuatoriana Cuenca - Ecuador 2011”, la misma que se llevará a cabo en los pacientes de grupo sanguíneo A y AB que acuden al Banco de Sangre de la Cruz Roja de la ciudad de Cuenca, razón por la cual, queremos darle a conocer sobre este estudio:

Esta investigación se llevará a cabo será sin ningún costo ni remuneración económica y es estrictamente voluntaria.

Si usted permite que su representado (a) participe de este estudio se procederá a tomarle una muestra de sangre capilar, la misma que consiste en realizarle un pequeño pinchazo en el pulpejo de su dedo índice para realizar el grupo sanguíneo, utilizando todas las normas de asepsia, existiendo un leve dolor al momento del pinchazo.

Al entregarle su resultado y verificar que el grupo de sangre de su representado (a) es de tipo “A o AB”, se procederá a tomar una muestra de sangre venosa para la determinación de subgrupos sanguíneos A1 y otros subgrupos de A, que se realizará en el laboratorio del Centro de Diagnóstico de la Facultad de Ciencias Médicas de la Universidad de Cuenca , la cantidad extraída es de unos 3 cc que no afectará de ninguna manera su estado de salud, la misma será tomada con todas las medidas adecuadas libres de contaminación en el Banco de Sangre. Los riesgos serán mínimos existiendo un leve dolor al momento del pinchazo y un posible moretón en el lugar de la extracción.

Agradeciéndole por su colaboración, ya que si Ud. Accede que su representado (a) participe de la misma será de gran importancia ya que aportará con la información necesaria para determinar el porcentaje de los grupos y subgrupos sanguíneos y a cumplir con nuestros objetivos.

Expreso mi consentimiento para que mi representado (a) participe de este estudio dado que he recibido toda la información necesaria de lo que incluirá el mismo y tuve la oportunidad de formular todas las preguntas necesarias para mi entendimiento, las cuales fueron respondidas con claridad y profundidad.

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Yo…………………………………………………….. después de haber conocido sobre este proyecto de investigación de tesis doy mi autorización para que mi representado (a) ………………………….……………………… se incluya en el estudio.

---------------------------------------- ---------------------------------

Firma Nº de cédula

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ANEXO Nº 3

TARJETAS DE RESULTADO.

UNIVERSIDAD DE CUENCA

FACULTAD DE CIENCIAS MÉDICAS

ESCUELA DE TECNOLOGÍA MÉDICA

Grupo Sanguíneo “A”

Subgrupo: ______________________________

Factor Rh: ______________________________

Nombre: ______________________________

UNIVERSIDAD DE CUENCA

FACULTAD DE CIENCIAS MÉDICAS

ESCUELA DE TECNOLOGÍA MÉDICA

Grupo Sanguíneo “AB”

Subgrupo: ______________________________

Factor Rh: ______________________________

Nombre: ______________________________

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Anexo Nº 4.

RECURSOS:

A) RECURSOS HUMANOS

♣ Estudiantes: Maria Belen Gordillo Siguencia, María de Lourdes Guzñay

Barbecho

♣ Directora de tesis: Dra. María Álvarez Herrera.

♣ Asesora de tesis: Dra. Martha Torres

♣ Pacientes que acuden al Banco de Sangre de la Cruz Roja Ecuatoriana.

♣ Personal que labora en el Banco de Sangre.

♣ Personal que labora en el Centro de Diagnostico de La Facultad de

Ciencias Medicas.

B) RECURSOS MATERIALES

REACTIVOS Y MATERIALES.

Alcohol 1 litro Algodón

Anti A-1 Pipeta automática de 50 ul

Anti-A; Anti-B; Anti-D Pipeta serológica 10 ml

Suero fisiológico Portaobjetos

Cápsula

Tubos vacutainer Palillos

Agujas vacutainer Gradilla

Tubos de ensayo pequeños

Guantes

Curitas Torniquete

Puntas amarillas Papel absorbente

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Anexo Nº 5.

CUADROS DE CONTROL DE CALIDAD

A) CONTROL INTERLABORATORIOS

Para que el presente trabajo de investigación tenga la validez que exigen sus

resultados se realizó un control de calidad interlaboratorios. En total fueron

procesadas 20 muestras las cuales fueron enviadas a Banco de Sangre de

SOLCA y al Banco de Sangre de la Cruz Roja.

LABORATORIOS DERIVADOS

RESULTADO

S DEL

PROYECTO.

FECHA

N.

MUESTRA

GRUPO

SANGUNEO

SUBGRUPO LUGAR

1 14/03/2011 3 A

SUBGRUPO

AS

BANCO

DE

SANGRE NEGATIVO

2 14/03/2011 5 A

SUBGRUPO

AS

BANCO

DE

SANGRE NEGATIVO

3 14/03/2011 8 A

SUBGRUPO

AS SOLCA NEGATIVO

4 14/03/2011 17 AB

SUBGRUPO

A1 SOLCA POSITIVO

5 18/03/2011 25 A

SUBGRUPO

AS SOLCA NEGATIVO

6 18/03/2011 44 A

SUBGRUPO

A1 SOLCA POSITIVO

7 21/03/2011 20 A

SUBGRUPO

A1

BANCO

DE

SANGRE POSITIVO

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8 21/03/2011 52 A

SUBGRUPO

AS

BANCO

DE

SANGRE NEGATIVO

9 21/03/2011 64 A

SUBGRUPO

AS

BANCO

DE

SANGRE NEGATIVO

10 30/03/2011 37 AB

SUBGRUPO

A1

BANCO

DE

SANGRE POSITIVO

11 30/03/2011 38 A

SUBGRUPO

AS

BANCO

DE

SANGRE NEGATIVO

12 01/04/2011 78 A

SUBGRUPO

A1 SOLCA POSITIVO

13 01/04/2011 105 A

SUBGRUPO

AS SOLCA NEGATIVO

14 01/04/2011 90 A

SUBGRUPO

A1

BANCO

DE

SANGRE POSITIVO

15 07/04/2011 120 A

SUBGRUPO

A1

BANCO

DE

SANGRE POSITIVO

16 07/04/2011 122 A

SUBGRUPO

AS

BANCO

DE

SANGRE NEGATIVO

17 07/04/2011 130 A

SUBGRUPO

A1

BANCO

DE

SANGRE POSITIVO

18 14/04/2011 143 A

SUBGRUPO

AS SOLCA NEGATIVO

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19 14/04/2011 151 A

SUBGRUPO

A1 SOLCA POSITIVO

20 18/04/2011 149 A

SUBGRUPO

AS

BANCO

DE

SANGRE NEGATIVO

21 18/04/2011 150 A

SUBGRUPO

A1

BANCO

DE

SANGRE POSITIVO

22 26/04/2011 166 A

SUBGRUPO

AS SOLCA NEGATIVO

23 26/04/2011 168 AB

SUBGRUPO

A1 SOLCA POSITIVO

24 26/04/2011 173 A

SUBGRUPO

A1 SOLCA POSITIVO

25 27/04/2011 167 A

SUBGRUPO

AS

BANCO

DE

SANGRE NEGATIVO

26 27/04/2011 180 A

SUBGRUPO

AS

BANCO

DE

SANGRE NEGATIVO

27 05/05/2011 179 A

SUBGRUPO

A1 SOLCA POSITIVO

28 05/05/2011 186 A

SUBGRUPO

A1 SOLCA POSITIVO

29 05/05/2011 197 A

SUBGRUPO

AS SOLCA NEGATIVO

30 05/05/2011 200 A

SUBGRUPO

A1 SOLCA POSITIVO

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Al realizar una comparación entre los resultados podemos decir que no existe

variación alguna entre nuestros resultados y los procesados en los

laboratorios derivados, por lo que se puede concluir que los resultados de la

investigación son válidos.

B) CONTROL INTERNO

Para la valoración de los reactivos empleados se realizó un control de calidad

interno con muestras positivas y negativas ya conocidas.

FECHA

N° Células

A1

Células O

14/03/2010 5 Positivo 5 Negativo

21/03/2010 5 Positivo 5 Negativo

28/03/2010 5 Positivo 5 Negativo

04/04/2010 5 Positivo 5 Negativo

11/04/2010 5 Positivo 5 Negativo

18/04/2010 5 Positivo 5 Negativo

25/04/2010 5 Positivo 5 Negativo

02/05/2010 5 Positivo 5 Negativo

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Anexo Nº 6.

Información del Tríptico.

SABES QUE ES EL GRUPO SANGUINEO?

Es el conjunto de antígenos genéticamente determinados, que se encuentran

presentes en la superficie de la membrana de las células sanguíneas y que

pueden producir, con una transfusión o con el embarazo una inmunización.

Se han identificado alrededor de 20 antígenos del grupo sanguíneo siendo de

mayor importancia en la practica transfuncional el sistema ABO y el factor Rh.

El sistema ABO fue descubierto por Karl Landsteiner en 1901, convirtiéndolo en

el primer grupo sanguíneo conocido. Las transfusiones de sangre entre grupos

incompatibles pueden provocar una reacción inmunológica que puede

desembocar en hemólisis, anemia, fallo renal, shock, o muerte.

Sólo se necesita una muestra de sangre para determinar el grupo sanguíneo y

factor Rh.

EL FACTOR Rh

Es una proteína que se encuentra en la superficie de los glóbulos rojos. Si está

presente se designa como factor Rh positivo (+) y si no está presente Rh

negativo (-). Esta proteína se encuentra en más del 85% de la población de

todo el mundo.

El factor Rh (Rhesus) fue descubierto por Karl Landsteiner y Wiener en 1940,

en los glóbulos rojos de una especie de monos de la India, el Macacus Rhesus.

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LA IMPORTANCIA DE CONOCER SU GRUPO SANGUINEO.

Conocer tu grupo sanguíneo es de vital importancia ante una situación de

urgencia ya que puede ayudar a salvar la vida a otra persona en una situación

de emergencia, en donde no es posible esperar a tipificar la sangre del donante

y del receptor. Si sabemos cuál es su grupo sanguíneo podremos ayudarle con

mayor rapidez. Siguiendo las normas básicas de transfusión no existirán

incompatibilidades en la transfusión de sangre de un ser humano a otro.

Se aconsejan a todas las personas llevar siempre la identificación del grupo

sanguíneo y factor Rh.

Se puede estudiar diversas razas y sus interrelaciones evolutivas, a través del

análisis de la distribución poblacional de los diversos antígenos, determinando

su predominancia en cada raza humana y lo que permite hacer comparaciones.

COMPATIBILIDAD

En toda transfusión hay un donante que es la persona que haciendo uso de su

libertad, decide ofrecer su sangre en las condiciones sanitarias legalmente

establecidas con el fin concreto de ayudar a salvar la vida de un ser humano, y

un receptor que es el individuo capaz de recibir sangre de cualquier tipo sin

que se produzca aglutinación de los eritrocitos.

Por lo tanto, los donantes de sangre y los receptores deben tener grupos

sanguíneos compatibles.

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No se pueden introducir antígenos que un paciente no tenga en su sangre,

dado que provocará una reacción de sensibilización alertando el sistema

inmunológico y provocando una reacción transfusional.

SUBGRUPOS SANGUÍNEOS.

Los grupos sanguíneos está distribuidos entre la población aproximadamente

en los siguientes porcentajes; 0 43%; A 40%; B 12% y AB 5%.

Diversas investigaciones han revelado que existen, dentro de un mismo grupo

sanguíneo, subgrupos dependiendo de la cantidad y calidad de los antígenos

presentes en los glóbulos rojos. Es más corriente encontrar subgrupos de A

que subgrupos de B. Conociendo que el porcentaje del grupo sanguíneo A es

del 40%, resulta importante identificar los subgrupos de A, porque pueden

interferir con la determinación correcta del grupo sanguíneo de un donante o de

un receptor de sangre. Mientras el 80% de los individuos A son A1, nada

menos que el 20% son A2 o As.

Este trabajo de investigación brindará un aporte a la sociedad permitiendo

conocer los porcentajes de grupos y subgrupos sanguíneos de los pacientes

que acuden a la Cruz Roja de la ciudad de Cuenca, ya que en la actualidad no

se han realizado estudios sobre este tema y los resultados obtenidos ayudarán

a los pacientes conocer sobre su grupo sanguíneo y a la vez en un futuro saber

¿qué tipo de sangre puede recibir o donar?, para evitar problemas de

incompatibilidad los mismos que pueden causar problemas en su salud.

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Anexo Nº 7.

♣ Identificación de los pacientes de grupo sanguíneo A y AB

(Tipo de sangre) (Donante)

♣ Recolección de la muestra.

(Tipo de sangre) (Donante)

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♣ Materiales y Reactivos.

(Anti-A1, Anti –B, Anti-A)

Procedimiento.

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1. Muestras de sangre recolectadas con EDTA.

2. Identificar los tubos con el número correspondiente (grupo y subgrupo).

3. Añadir la muestra de sangre a cada tubo y suero fisiológico para el lavado

los glóbulos rojas.

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4. Centrifugar por 1min. a 3000rpm.

5. Descartar el sobrenadante y realizar este procedimiento por 2 ocasiones

más.

6. Añadir una gota (50ul) de reactivo Anti- A1Lectin en el tubo marcado A1 y una

gota del Anti-A en el tubo marcado A.

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7. Centrifugar por 1min. a 3000rpm.

8. Resuspender con cuidado los eritrocitos y observar macroscópicamente si

se produce aglutinación.

Subgrupo=A1 Grupo=A Subgrupo=AS Grupo=A

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Subgrupo=AS Grupo=AB

As y A1