Serie Roja

MANUAL DE HEMATOLOGIA

FORMULA ROJA

INTRODUCCION:La eritropoyesis es el proceso a la generacin de los glbulos rojos (tambin conocidos como eritrocitos o hemates). Los eritrocitos son los elemento formes cuantitativamente ms numerosos de la sangre. La hemoglobina es uno de sus principales componentes y su objetivo es transportar el oxgeno hacia los diferentes tejidos del cuerpo, los eritrocitos humanos carecen de ncleo y de mitocondrias por lo que deben obtener su energa a travs de la fermentacin lctica.

FUNDAMENTO: Este tipo de prueba consiste en el estudio cualitativo y cuantitativo de los eritrocitos es por eso que se lleva a cabo diferentes pruebas que son: determinacin de la hemoglobina, hematocrito, recuento de glbulos rojos e ndices hematocritos: que estos a su vez nos ayudan a descartar enfermedades que con estos estudios se pueden realizar.

OBJETIVO:Determinar la frmula roja en el analizador ADVIA 120, evaluar la importancia del hematocrito, hemoglobina y volmenes eritrocitarios en el diagnstico de algunas enfermedades.

Equipo:

Agitador de tubos ADVIA 120

Material:

Tubos con anticoagulante EDTA Torunda con alcohol Jeringas desechables Torniquete Vacutainer Bolsa roja para RPBI Contenedor de plstico rojo para RPBI Bolsa verde

Reactivo:

Minipack para ADVIA 120

Tcnica:

1. Toma de muestra de sangre venosa en ayuno. 2. Colocar los tubos en el agitador de tubos. 3. Colocar la muestra de sangre previamente agitada en el ADVIA 120.3.- accesar informacin del paciente.5.- 4. Esperar resultados y anotar.

FORMULA BLANCA

INTRODUCCIN:

La serie blanca est formada por los leucocitos o glbulosblancos. Sus funciones principales son la defensa del organismo ante las infecciones y la reaccin frente a sustancias extraas.El recuento de leucocitos tiene dos componentes. Uno es la cifra total de leucocitos en 1 mm3 de sangre venosa; el otro, la frmula leucocitaria, mide el porcentaje de cada tipo de leucocitos, que son: segmentados o neutrfilos, monocitos, linfocitos, eosinfilos y basfilos. .

FUNDAMENTO:

OBJETIVO:Determinar los leucocitos presentes en una muestra sangunea mediante la utilizacin del analizador ADVIA 120.

Equipo:

Agitador de tubos ADVIA 120

Material:

Tubos con anticoagulante EDTA Torunda con alcohol Jeringas desechables Torniquete Vacutainer Bolsa roja para RPBI Contenedor de plstico rojo para RPBI Bolsa verdehttp://laboratorio-clinico-612.blogspot.com/2012/06/hemograma-en-medicina-el-hemograma-o.htmReactivo:

Minipack para ADVIA 120

Tcnica:

1. Toma de muestra de sangre venosa en ayuno. 2. Colocar los tubos en el agitador de tubos. 3. Colocar la muestra de sangre previamente agitada en el ADVIA 120. 4. Esperar resultados y anotar.

CUENTA DE RETICULOCITO

INTRODUCCIN:Los reticulocitos se consideran glbulos rojos inmaduros, prcticamente indiferenciables de los glbulos rojos maduros, a menos que se les tia con tincin supravital. El colorante azul de cresil o azul de metileno tie los restos de cido ribonucleico en forma de red muy fina, los cuales permanecen en el citoplasma del eritrocito algunos despus de haber perdido su ncleo. Los reticulocitos tienen una duracin de 24-48 horas despus de que ha salido de la mdula sea para as convertirse en un eritrocito maduro en sangre perifrica.

FUNDAMENTO:La investigacin de reticulocitos es una de las pruebas ms tiles en la investigacin de la causa de la anemia, pues nos da idea del estado de la produccin de glbulos rojos por la mdula sea. Los reticulocitos contienen una fina red de ARN y protoporfirina que se puede teir con el azul de cresil brillante. Este colorante en combinacin con una misma cantidad de sangre anticoagulada se mezcla y con la ayuda de la temperatura (bao mara) se produce la coloracin de estos eritrocitos jvenes visualizndose en los frotices sanguneos por microscopa.

OBJETIVO:El examen se realiza para determinar si los glbulos rojos sanguneos se estn produciendo en la mdula sea a una tasa apropiada. El nmero de reticulocitos en la sangre es un signo de la rapidez con la cual estn siendo producidos y liberados por parte de la mdula sea.

Equipo:

Microscopio Bao mara a 37C

Material:

Tubos de ensayo Portaobjetos Pipetas de Pasteur con bulbo Sangre con EDTA

Reactivo: Azul de metileno

Tcnica:

1.- Colocar en un tubo dos gotas de sangre (aproximadamente 50l por cada gota) y dos gotas de colorante.

2.- Agitar la mezcla sangre-colorante e incubar 15 minutos a temperatura ambiente.

3.- Hacer una extensin en un portaobjetos con una gota de la mezcla.

4.- Dejar secar y observar en objetivo de inmersin 100x.

5.- Contar 500 eritrocitos, anotando el nmero de reticulocitos observados dentro de ese conteo

Ejemplo:

Al realizar el conteo observamos 10 reticulocitos por cada 500 eritrocitos, el porcentaje de reticulocitos se realiza de la siguiente manera:

% de reticulocitos = Nmero reticulocitos en 500 eritrocitos 5

% de reticulocitos = 10 = 2 5

Nota:

Los resultados de reticulocitos en pacientes anmicos debern corregirse debido a que se presenta en una anemia una falsa impresin del nmero nuevo de eritrocitos que son producidos por el paciente anmico.

Ejemplo:

Si en un paciente obtuvimos reticulocitos no corregidos (observados) de 5%, 1 x 106 glbulos rojos, hematocrito de 9. Empleando la siguiente frmula obtenemos el porcentaje de reticulocitos corregido.

Valores de referencia: Recin nacidos: 3 6 % Adultos: 0.5 1.5 %

http://campus.um.edu.mx/fesja/display.aspx?idCol=32&idItem=83&tipoItem=Documento

VELOCIDAD DE SEDIMENTACION GLOBULAR (VSG)

INTRODUCCIN:La membrana de los glbulos rojos tiene una carga electrosttica negativa (potencial zeta). Esta carga electrosttica negativa da lugar a unas fuerzas de repulsin entre los hemates que hacen que los eritrocitos tiendan a permanecer en suspensin. Sin embargo, con el tiempo, los glbulos rojos acaban depositndose debido a la fuerza de la gravedad en el fondo del recipiente que los contiene.

FUNDAMENTO:La prueba puede aplicarse para detectar enfermedades no sospechadas, muchos clnicos emplean la VSG con esa idea en la evaluacin rutinaria de sus pacientes, Otros la consideran inespecfica y poco til como estudio rutinario. La VSG puede ser til en ocasiones para diferenciar entre entidades patolgicas. Por ejemplo, en el paciente con dolor torcico, la VSG estar aumentada en caso de infarto de miocardio, mientras que ser normal en caso de angina.

OBJETIVO:Consiste en medir la velocidad con la que sedimentan (decantan, caen) los glbulos rojos o Eritrocitos de la sangre, provenientes de una muestra de plasma sanguneo (Citratado o con EDTA), en un periodo determinado de tiempo, habitualmente una hora.

Equipo:

Cronmetro

Material:

Muestra de sangre Pipeta Pasteur Cronmetro Tubos de wintrobe Gradilla de sedimentacin

Tcnica:

1.- Tome Sangre del Tubo con anticoagulante (EDTA) con una Pipeta Pasteur

2.- Transfirala a un tubo de Wintrobe y llnelo hasta la marca de "0".

3.- Debe Procurar que al vaciar la muestra con la jeringa de metal la punta de esta quede al fondo del tubo e ir vaciando la sangre suavemente, al mismo tiempo que se va retirando la jeringa del fondo

4.- Lleve el Tubo De Wintrobe a La gradilla e Inicie el conteo de tiempo, dejando reposar la muestra durante una hora

5.- Transcurrida una hora, mida el espacio que ocupa el sobrenadante, desde la superficie hasta el borde superior de los eritrocitos sedimentados, haga la lectura en mm.

A mayor edad, es mayor el rango del lmite de valores normales: Hombres: hasta 15mm/ Mujeres: hasta 20mm/h Nios: hasta 10mm/h Recin nacidos: 0-2mm/h Embarazadas: 40mm/h a 45mm/h

Dato importante:La muestra debe estar libre de hemlisis. La determinacin se realizar antes de que pasen 2 horas desde la extraccin, hasta un mximo de 6 horas si se conserva la muestra a 4C. Hay que realizarla a temperatura ambiente, ya que a mayor temperatura asciende la VSG y a menor temperatura disminuye.

http://dentizta.ccadet.unam.mx/Instrumenta/contenido/practicas/biometriahematica/vse_vsg.htm#tec_1

GRUPOS SANGUINEOS.

INTRODUCCIN:Un grupo sanguneo es una clasificacin de la sangre de acuerdo con las caractersticas presentes o no en la superficie de los glbulos rojos y suero de la sangre,

FUNDAMENTO:Los eritrocitos humanos pueden o no tener en su superficie alguna combinacin de los antgenos del sistema ABO y Rh. De la misma forma, algunos individuos tendrn en el suero isoanticuerpos dirigidos contra alguno de los antgenos del sistema ABO; solamente tendrn en el suero isoanticuerpos anti-D aquellos individuos que hayan sido previamente sensibilizados a este antgeno. En consecuencia, los sueros que contengan isoanticuerpos anti-A aglutinarn a los eritrocitos que tengan al antgeno A y suceder lo propio en otros casos.

OBJETIVO:Este examen se hace para determinar el tipo de sangre de una persona, los mdicos necesitarn conocer su tipo de sangre cuando le vayan a hacer una transfusin de sangre o un trasplante, debido a que no todos los tipos de sangre son compatibles entre s.

Material:

Placa Palillos para agitar Muestra de sangre

Reactivos:

Anti-suero A Anti-suero B ANTI- (RH)

Tcnica:

1.- Colocar 1 gota de la sangre 1(tapn rojo) en 3 lugares diferentes de la placa, es conveniente que se identifique cada con la muestra a analizar.

2.- Aadir 1 gota de Anti-suero A (lquido azul) en la gota de sangre.

3.- Aadir 1 gotas de Anti-suero B (lquido amarillo) en la gota de sangre.

4.- Aadir 1 gota de Anti-suero (Rh) (lquido transparente) en la gota de sangre.

5.- Utilizando un palillo diferente para cada reaccin, mezclar la gota de sangre con las de Anti-suero durante 20 segundos. Evitar la contaminacin entre reacciones.

6.- Examinar las mezclas, si se forman grnulos, la aglutinacin ha tenido lugar, o si por el contrario la mezcla es homognea, no hay aglutinacin.

http://www.facmed.unam.mx/fm/pa/2010/practicas/practicas_inmuno.pdf

http://www.bioted.es/bioted%20protocolos/PROTOCOLO%20ABO%20 unicach.mx/_/.../Manual%20de%20Bioquimica%20Clinica%20QFB%20

TINCION DE WRIGHT MODIFICADA.

INTRODUCCIN:Es una tincin modificada del mtodo de Romanosky, los colorantes cidos se unen a los componentes bsicos de las clulas afines al citoplasma e inversamente los colorantes bsicos son atrados por los componentes no cidos, sea al ncleo, es decir que esta tincin es la mezcla de un colorante cido que es la eosina y uno bsico que es el azul de metileno, tambin llamados colorantes policromatfilos o neutros.

FUNDAMENTO:La tincin de Wright es unatincin de tipo Romanowsky. Una tincin de Romanowsky consiste enazul de metilenoy sus productos deoxidacin, as comoeosinaY o eosina B .La accin combinada de estoscolorantesproduce el efecto Romanowsky que da una coloracinprpura alosncleosde losleucocitosy a los grnulos neutroflicos y da color rosado a los eritrocitos.

OBJETIVO:Facilitar la diferenciacin de los tipos de clulas de la sangre, principalmente para teir frotis de sangre y punciones medulares, para ser examinadas al microscopio, en citogentica se usa para teir cromosomas para facilitar el diagnstico de sndromes y enfermedades.

Equipo:Microscopio

Material:PortaobjetosLaminerotincionesAceite de inmersin

Reactivos:

Buffer de salesColorante de WrightAgua bidestilada

Tcnica:

1.- Colocar una gota de sangre en un portaobjetos.

2.- Realiza un extendido con un ngulo de 180.

3.- Secar al aire sin soplar.

4.- Agregar el colorante de Wright, hasta cubrir completamente el frotis, durante 7 minutos aproximadamente.

5.- Despus se agrega el Buffer de sales, hasta cubrir completamente el frotis, durante 12 minutos aproximadamente.

6.- Se enjuaga el frotis con agua bidestilada para evitar que se deshidraten las clulas.7.- Dejar secar el frotis al aire libre, para observar con objetivo de 100 x inmersin.

PREPARACION DE COLORANTE DE WRIGHT.

1.- Pesar en una balanza analtica 2 gramos de polvo de colorante de Wright.2.- Medir en un matraz aforado un litro de metanol absoluto.3.- En un mortero de mano, machacar el polvo del colorante, agregndole poco a poco el metanol.4.- Vaciar el colorante ya machacado y bien diluido en el frasco mbar5.- Dejar madurar el colorante, para utilizarlo aproximadamente de 5 a 7 das.

PREPARACION DE BUFFER.

INTRODUCCIN:Muchas de las reacciones qumicas que se producen en solucin acuosa necesitan que el pH del sistema se mantenga constante, para evitar que ocurran otras reacciones no deseadas. Las soluciones ""reguladoras"" o Buffer son capaces de mantener de acidez o basicidad de un sistema dentro de un intervalo reducido de pH, por lo cual tienen mltiples aplicaciones, tanto en la industria como en los laboratorios.

FUNDAMENTO:Una solucin buffer debe contener un cido dbil y una sal de ste cido; por ejemplo cido actico/acetato de sodio, donde el CH3COOH es el cido y el Ion CH3COO- es la base o una base dbil y una sal de sta base; por ejemplo amonaco/cloruro de amonio, donde el NH3 es la base y el Ion NH4+ es el cido. Las soluciones buffers trabajan removiendo los iones H+ o los iones OH- de la solucin.

OBJETIVO:Determinar las caractersticas especiales de cada sustancia por medio de la determinacin del pH y la de observar la capacidad amortiguadora o de resistencia a los cambios bruscos de pH que poseen algunas sustancias presentes en los organismos vivos.

Equipo:

Balanza de precisin bien calibrada y en gramos

Material:

Matraz aforadoMortero de porcelanaFrasco mbarPizetasAgua destiladaReactivos:

Sal de Fosfato de potasio monobsicoSal de Fosfato de sodio dibasico Solucin buffer pH6.!6."Tcnica:

1.- Pesar en una balanza analtica la sal de Fosfato de Potasio Monobsico(KH2PO4 PM =136.09), 3.77 gramos para un litro.

2.- Pesar en una balanza analtica la sal de Fosfato de Sodio Dibsico(NA2HPO4 PM.=141.96), 3.42 gramos para un litro.

3.-Medir en un matraz aforado las sales ya pesadas y distribuirlas en un litro de agua bidestilada.

4.- Despus de hacer la dilucin de las sales utilizar el buffer, que sirve como mordente para fijar el colorante de las clulas sanguneas.

5.- La solucin amortiguadora o buffer que se debe utilizar para la coloracin tiene un pH de 6.4

TECNICA PARA EL CONTEO DE ESPERMATOZOIDES.

INTRODUCCIN:La causa ms frecuente de esterilidad es infeccin de conductos genitales, aunque a veces los tubos seminferos testiculares pueden ser destruidos parcial completamente por parotiditis, tifus, radiacin por rayos X nuclear. Algunos varones tienen testculos con deficiencia congnita y son incapaces de producir espermatozoides normales, o cuando el numero de espermatozoides eyaculado es demasiado bajo (Oligozoospermia), aunque todos ellos sean normales.

FUNDAMENTO:La cuantificacin de los espermatozoides se recomienda hacerla por medio de prediluyente, donde su activo sea un detergente, capaz de modificar la acidez inica e inmovilizar a los zoospermas, sin alterar su morfologa. Con el uso del tergitol se logran preparaciones limpias y zoospermas morfolgicamente intactos. Adems, las diluciones as preparadas se pueden conservar durante una semana en refrigerador, sin alteracin significativa, ni el nmero, ni en la morfologa.

OBJETIVO:El objetivo principal del examen de lquido seminal es determinar en caso de esterilidad, si la causa reside en alteraciones de los espermatozoides.

Equipo:

Cmara de NeubauerCmara hmedaMicroscopio

Material:

Tubos de ensaye de 12x75 mmPipeta para recuento de leucocitos Reactivos:

Prediluyente Cat. 90228 Tensoactivo atoxicado 9% Conservador y estabilizador 0.15%Excipiente cbp 100 mlTincin de Wright Tcnica:

1.- En un tubo de ensaye de 12x75 mm se depositan 0.9 ml de prediluyente para espermatozoides. Mediante una pipeta de 0.1 ml, se adiciona 0.1 ml de la muestra bien mezclada. La pipeta se enjuaga varias veces, aspirando y expulsando la mezcla y agitando de esta manera durante 30 segundos.

2.- De la dilucin 1:10, se aspira con una pipeta para recuento de leucocitos hasta la marca 1, aspirando despus Oxalato de amonio al 1% hasta la marca 11. La dilucin final de esta en el bulbo es de 1:100. Si los espermatozoides son muy escasos, se haran diluciones menores, sin son muy abundantes se hacen diluciones mayores, tenindose presente la dilucin empleada en el calculo.

3.- Se agita la pipeta en un agitador mecnico hasta que el liquido en el bulbo de la pipeta sea homogneo.

4.- Se desecha el lquido del tallo, y con las precauciones habituales se pasa la dilucin del semen a una cmara de recuento de Neubauer.

5.- Una vez cargada la cmara, hay que esperar cuando menos unos 15 minutos para que los zoospermas sedimenten y puedan ser contados exactamente. Para evitar la desecacin, se puede mantener la cmara hmeda, evitndose as errores de conteo inherentes al amontonamiento de los zoospermas y evitar la evaporacin que acarrea concentraciones falsas de los elementos.

6.- Se observa al microscopio y se cuentas los zoospermas presentes en la cuadricula de leucocitos, es decir, en los 4 cuadros grandes de las esquinas de la cuadricula, de 1 mm2 de rea de cada uno.

Clculos:

Contando los espermatozoides presentes en las reas consideradas y relacionndolas con la dilucin empleada, se obtiene la cuenta se zoospermas por ml, despus de hacer la conversin de litros a ml.El volumen en que se contaron los elemento es de 0.4 mm3, de tal manera que para determinar el nmero de elementos por litro, hay que multiplicar por 2.5 (1/0.4).El resultado se multiplica luego por 1,000 para referir a ml y despus por 100 para corregir la dilucinZoospermas por ml = Numero de elemento contados x 250,000

Valores de referencia esperados:

Hombres adultos: 60 millones de espermatozoides ml

VITALIDAD ESPERMATICA

INTRODUCCIN:La fertilidad en los varones ha disminuido en las ltimas dcadas las principales causas de infertilidad en las parejas se atribuyen a la disminucin de la calidad del semen, esta condicin se encuentra relacionada con mltiples factores como el consumo de alcohol y tabaco, el medio ambiente, la obesidad, la disminucin del tamao testicular, las enfermedades de transmisin sexual, entre otros factores causales.

FUNDAMENTO:La vitalidad espermtica se calcula considerando la proporcin de espermatozoides vivos. Cuando se encuentran que ms del 50% de estos estn inmviles, la vitalidad se determina utilizando tincin supravital porque en las clulas muertas se altera permeabilidad de membrana permitiendo el paso libre de los fluidos, las tcnicas de tincin son las que hacen posible diferenciar los espermatozoides inmviles vivos de los muertos, adems la presencia de una gran proporcin de clulas inmviles pero vivas puede ser indicativa de defectos estructurales en los espermatozoides.

OBJETIVO:El anlisis se realiza cuando existen dudas sobre la fertilidad del paciente, bien para determinar si existe un problema de produccin de esperma o si la calidad del esperma es la causa de la infertilidad.

Equipo:

Microscopio

Material:

PortaobjetosCubreobjetos

Reactivos:

Colorante de Eosina-nigrosina al 5%

Tcnica:

1.- Se prepara la solucin de eosina-nigrosina:

2.- Sobre un portaobjetos se coloca una gota de semen y una gota de la solucin de eosina-nigrosina, se coloca un cubreobjetos.

3.- Luego de 1 a 2 minutos, se observan los espermatozoides rojos y no coloreados, sobre el fondo oscuro.

4.- La diferencia de coloracin se debe a que los espermatozoides vivos -como tienen su membrana plasmtica intacta-, no se colorean. El colorante puede penetra, sin embargo, la membrana de los espermatozoides muertos y los colorea.

5.- Con microscopio ptico, recorrer el frotis en forma de guarda griega y contar 200 clulas distribuidas en el preparado.

6.-Estimar el porcentaje de vivos (o muertos), a partir de las 200 clulas contadas.

Clculos:

200 espermatozoides contados x 100 / 1000 = % de espermatozoides vivos y muertos

NOTA:Lavitalidadespermticaseevaladentrodelosprimero30minutosinmediatamentedespusdelicuadala muestra, pero en algunos casos se puede evaluar hasta dentro de una hora cuando la muestra no se a licuado completamente, nunca despus de la hora para evitarencontrarun elevadonumerode espermatozoides muertospor efectosde deshidratacin o cambios de pH o temperatura que puedan afectar a lamuestra.

https://www.google.com/#q=calculos+vitalidad+espermatica+eosina

TECNICA DE CIDO PERYDICO DE SHIFF (PAS)

INTRODUCCIN:La reaccin del PAS ha perdido utilidad en el diagnstico hematolgico despus de la aparicin de mejores marcadores. Sigue teniendo inters en la diferenciacin de diferentes tipos de leucemias linfoblsticas, en la eritroleucemia y en diversas mielodisplasias.

FUNDAMENTO:La reaccin de PAS o del cido perydico de Schiff se basa en la rotura de los enlaces -C-C- presentes en los carbohidratos por la accin del cido perydico, potente agente oxidante, liberndose grupos aldehdo que al combinarse con el reactivo de Schiff dan un compuesto de color rojo prpura intenso. Identifica al glucgeno en el citoplasma celular.

OBJETIVO:La tcnica de PAS se utiliza en los preparados para microscopa ptica, permitiendo la tincin de componentes celulares que contienen hidratos de carbono, por ejemplo algunas membranas celulares, clulas caliciformes en la mucosa del intestino, fibras reticulares que estn rodeados por hidratos de carbono.

Equipo:

Microscopio

Material:

PortaobjetosCubreobjetosAguaLaminero

Reactivos:cido perydico de SchiffHematoxilina de Gill.Resina sintticaXilol

Tcnica:

1.- Fijar los frotis por 5 minutos (utilizar la solucin fijadora a temperatura ambiente).

2.- Lavar con agua corriente.

3.- Secar al aire.

4.- Colocar en cido perydico durante 10 minutos.

5.- Lavar con agua de la llave y secar perfectamente.

6.- Sumergir en el reactivo de Schiff por 20 minutos.

7.- Lavar con agua de la llave.

8.- Contrateir con hematoxilina de Gill por 10 minutos.


10.-Secar al aire.

11.- Cubrir con resina sinttica, xilol y cubreobjetos del No. 1.

TCNICA PARA MIELOPEROXIDASA

INTRODUCCIN:La defensa del organismo est mediada por las clulas del llamado sistema retculo endotelial, de las cuales los polimorfonucleares neutrfilos constituyen la primera lnea de defensa inespecfica. La mieloperoxidasa es la protena ms abundante en los neutrfilos y es la nica peroxidasa que cataliza la conversin del perxido de hidrgeno y cloruro a cido hipocloroso.

FUNDAMENTO:La reaccin de la peroxidasa es positiva en las clulas de serie granuloctica en todos sus estadios de maduracin y dbil o negativa en los monocitos, y esta determinacin se puede usar para diferenciar clulas de estas lneas, de clulas linfoides o eritroides que son peroxidasa negativa.

OBJETIVO:Por medio de esta tincin mejorar la localizacin de enzimas y sustancias inorgnicas., logrando as la diferenciacin celular y en algunos casos tambin sirven para el diagnstico de ciertas leucemias.Equipo:Microscopio

Material:

PortaobjetosCubreobjetosAguaLaminero

Reactivos:

Perxido de hidrgenoCloruro a cido hipoclorosoSafranina 1%Resina sintticaXilol

Tcnica:

1.- Fijar los frotis por un minuto (utilizar la solucin fijadora a temperatura ambiente).


3.- Secar al aire perfectamente.

4.- Sumergir en la solucin colorante por 30 segundos.


6.- Secar al aire.

7.-Contrateir por 30 segundos con solucin de contratincin acuosa de Safranina al 1%.


9.- Secar al aire.

10.- Cubrir con resina sinttica, xilol y cubreobjetos del No. 1.Evitar la formacin de burbujas.

LQUIDO CEFALORAQUDEO.

INTRODUCCIN:El LCR, es un fluido metablicamente activo, que normalmente es transparente, acta como un amortiguador, protegiendo el cerebro y la columna de una lesin. El examen tambin se utiliza para medir la presin en dicho lquido.

FUNDAMENTO: El LCR se produce de modo continuo, tiene una baja densidad (1.004 1.008), es pobre en protenas y contiene cantidades relativamente elevadas de NaCl y K, adems posee cierta cantidad de clulas en descamacin y linfocitos. Estas caractersticas se pueden ver alteradas fundamentalmente en patologas de las reas ms externas del SNC, mientras que afecciones ms profundas no producen ninguna alteracin.

OBJETIVO:La obtencin de este lquido es importante debido a que es un de diagnstico de enfermedades neurolgicas, como pueden ser los sndromes menngeos, las hemorragias subaracnoideas, los tumores cerebro-espinales.

Equipo:

MicroscopioCentrifugaCmara de Neubauer

Material:

Cubre HematimetroPipeta para glbulos rojosPortaobjetosTubos de vidrio de 13x100Aceite de inmersinCapilaresLaminero

Reactivos:

Solucin salinaColorante de Wright

Tcnica:

1.- La muestra ha de mezclarse bien antes del anlisis.

2.- Colocar una gota de LCR, en la cmara de Neubauer, cubrir con el cubre hematimetro.3.- Hacer el conteo de los cuatro cuadrantes de la cmara con el objetivo de 40 x.

4.- Realiza los clculos de nmero de clulas contadas x 10 que es un factor de la cmara y dividir entre cuatro que son los cuadrantes contados.

5.- Si el recuento de clulas nucleadas es demasiado elevado se debe proceder a diluir la muestra En una pipeta para glbulos rojos y diluir con solucin salina.

6.- Realizar tincin de Wrigth, para morfologa celular.

Valores normales:

Protena total en LCR: 15 a 60 mg/100 mLGlucosa 50 a 80 mg/100 mL

El conteo normal de glbulos blancos esta entre 0 y 5, no se recomiendan contadores electrnicos.Anlisis cuantitativo de protenas totales y glucosa

LIQUIDO SINOVIAL

INTRODUCCIN:El anlisis del lquido sinovial es un procedimiento habitual en la mayora de los laboratorios, sin embargo algunas de las magnitudes estudiadas, son poco sensibles e inespecficos, slo el estudio de microbiolgico y el anlisis de microcristales son de utilidad diagnstica manifiesta, mientras que el recuento celular es til a la hora de clasificar las artropatas aunque est sometido a una importante variabilidad entre evaluadores.

FUNDAMENTOEl estudio de este lquido tiene gran importancia en la valoracin de la artritis, junto con la exploracin fsica y el estudio radiolgico, es especialmente importante en las artritis monoarticulares, en las que tiene que establecerse el diagnstico diferencial entre el origen infeccioso y otras posibles causas.

OBJETIVO:La finalidad del estudio del lquido sinovial es ayudar a diagnosticar las enfermedades reumatolgicas e infecciosas que afectan a las articulaciones, ya que su alteracin refleja la patologa de la membrana sinovial y del cartlago articular subyacente.

Anlisis macroscpico Un lquido sinovial no patolgico ha de ser incoloro y transparente, la presencia de turbidez se debe asociar a un incremento de su celularidad. Muy a menudo puede tener un color amarillento plido que suele deberse a la diapdesis de algunos eritrocitos e incluso puede estar asociada a un pequeo traumatismo

Equipo:

MicroscopioCentrifuga

Material:

Cmara de NeubauerCubre HematimetroPipeta para glbulos rojosPortaobjetosTubos de vidrio de 13x100Aceite de inmersinCapilaresLaminero

Reactivos:


Tcnica:


2.- Colocar una gota de lquido Sinovial, en la cmara de Neubauer, cubrir con el cubre hematimetro.

3.- Hacer el conteo de los cuatro cuadrantes de la cmara con el objetivo de 40 x.

4.- Realizar los clculos de nmero de clulas contadas x 10 que es un factor de la cmara y dividir entre cuatro que son los cuadrantes contados.

5.- Para morfologa celular usar la tincin de Wright, en el lquido sinovial se observan los mismos elementos celulares que en la sangre, aunque en diferentes proporciones y con morfologa variable en funcin de la intensidad de la respuesta inflamatoria articular.

Anlisis cuantitativo de protenas totales, glucosa, albmina y DHL

LIQUIDO PLEURAL

INTRODUCCIN:El derrame pleural es un acumulacin patolgica de materia prima en el espacio pleural, tambin se le conoce como pleuresa o sndrome de interposicin lquida. Es una enfermedad frecuente con ms de 50 causas reconocidas incluyendo enfermedades locales de la pleura, del pulmn subyacente, enfermedades sistmicas, disfuncin de rganos y frmacos.[1]

FUNDAMENTO

El acumulo o incremento del lquido pleural se denomina derrame pleural. Cuando ste existe, en cantidad apreciable, en general est indicado su estudio, en el laboratorio. En condiciones normales, el espacio pleural contiene de 1 a 10ml de fluido. Se considera patolgico un volumen de lquido pleural que pueda ser detectado radiolgicamente.

OBJETIVO:El anlisis del lquido pleural es un examen con el que se analiza el lquido que se ha acumulado en el espacio pleural, que es el espacio entre el revestimiento de la parte externa de los pulmones (pleura) y la pared torcica.

Anlisis macroscpico:Su aspecto normal suele ser ambarino claro o con una leve turbidez asociada al grado de contenido celular o de triglicridos. El lquido puede ser de color amarillento transparente, turbio por su contenido elevado de clulas, hemtico por la presencia de hemates o quiloso por aumento de grasas en forma de triglicridos.

Equipo:MicroscopioCentrifugaCmara de Neubauer

Material:


Reactivos:


Tcnica:1.- La muestra ha de mezclarse bien antes del anlisis.

2.- Colocar una gota de Liquido en la cmara de Neubauer, cubrir con el cubre hematimetro.




6.- Realizar tincin de Wright, para morfologa celular

Anlisis bioqumico:El estudio bioqumico puede ser muy amplio pero en general es suficiente la valoracin de pH, protenas, glucosa, urea, amilasa, LDH y colesterol. Cuando se presume un quilotrax es conveniente medir los triglicridos.

LIQUIDO ASCITIS

INTRODUCCIN:La ascitis causada por el cncer se llama ascitis maligna y es el tipo que afecta al 10% de las personas con ascitis. La ascitis maligna ocurre con mayor frecuencia en personas con cncer de mama, colon, tubo digestivo (estmago e intestinos [en ingls]), ovario, pncreas y tero (en ingls).

FUNDAMENTO:El lquido asctico, tambin denominado peritoneal, es un fluido que se acumula en la cavidad peritoneal normalmente debido a la existencia de cirrosis heptica y con menor frecuencia secundaria a patologas malignas. La cavidad peritoneal contiene los rganos abdominales y las membranas serosas que a recubren se denominan peritoneo y son las ms extensas del organismos.

OBJETIVO:Es una prueba de laboratorio para examinar el lquido que se ha acumulado en el rea del abdomen que contiene los rganos gastrointestinales, un rea denominada espacio peritoneal.

Anlisis macroscpico: En general un lquido asctico no patolgico es transparente. Un aspecto turbio o purulento indica la presencia de abundantes leucocito. Los lquidos con recuentos de leucocitos inferiores a 1000/mm3 suelen ser claros. Por encima de 50000/mm3 se observa un lquido de aspecto purulento. Una elevada concentracin de triglicridos da al lquido un aspecto opalescente-lechoso

Equipo:MicroscopioCentrifugaCmara de Neubauer

Material:


Reactivos:


Tcnica:


2.- Colocar una gota de lquido de ascitis en la cmara de Neubauer, cubrir con el cubre hematimetro.




6.- Realizar tincin de Wrigth, para morfologa celular

Anlisis bioqumico Glucosa, Protenas, LDH, Amilasa, Albmina.

BIBLIOGRAFIA:

.wikipedia.org/wiki/Tincion de Wright.bescience.com/hycel/buffers-53/1317-buffer-de-fosfato-ph-6-4-para-wrightINSTITUTO DE HEMATOPATOLOGIA, Especialidad en Hematolgia Diagnostica por Laboratorio, Manual de Tcnicas.ANALISIS CLINICOS DE BEATRIZ BAYONA , Pg. 695 - 704 .KolmanandRonhBioqumica Textoy Atlas3a.Ed.RevisadayAmpliadaEd Panamericana (2004)

Susankingstrasinger.2007.Lquidoscorporalesy anlisis de orina. Editorial el manual moderno 21

Serie Roja

Documents

Transcript of Serie Roja