TÉCNICAS DE CARACTERIZACIÓN TÉCNICAS DE CARACTERIZACIÓN MOLECULAR EN AISLAMIENTOS DE MOLECULAR EN AISLAMIENTOS DE M.bovisM.bovis

EN REBAÑOS DE LIDIA.EN REBAÑOS DE LIDIA.

CONCLUSIONES:CONCLUSIONES:1.1. Se demuestra la existencia de un grupo de cepas que agrupan la mayoría de los casos de tuberculosis bovina Se demuestra la existencia de un grupo de cepas que agrupan la mayoría de los casos de tuberculosis bovina

de la Comunidad Autónoma independientemente de la aptitud o sistema de explotación de la ganadería.de la Comunidad Autónoma independientemente de la aptitud o sistema de explotación de la ganadería.2.2. La epidemiología de la tuberculosis bovina en ganado de lidia parece no tener , si consideramos el indicador La epidemiología de la tuberculosis bovina en ganado de lidia parece no tener , si consideramos el indicador

de cepas implicadas , variaciones sustanciales con respecto al resto de aptitudes productivas, de cepas implicadas , variaciones sustanciales con respecto al resto de aptitudes productivas, fundamentalmente del bovino de carne.fundamentalmente del bovino de carne.

3.3. La existencia de un pequeño grupo de cepas compartidas por un altísimo porcentaje de explotaciones, La existencia de un pequeño grupo de cepas compartidas por un altísimo porcentaje de explotaciones, indican que las fuentes de contagio para el ganado bovino de Castilla y León son compartidas por todas las indican que las fuentes de contagio para el ganado bovino de Castilla y León son compartidas por todas las explotaciones sin distinción en la aptitud productiva de las mismas.explotaciones sin distinción en la aptitud productiva de las mismas.

MARQUÉS PRENDES, S.; GRAU VILA, A.; MÍNGUEZ GONZÁLEZ, O.; DIEZ GALLEGO, M.; MARQUÉS PRENDES, S.; GRAU VILA, A.; MÍNGUEZ GONZÁLEZ, O.; DIEZ GALLEGO, M.; FERNÁNDEZ-MARDOMINGO FERNÁNDEZ-MARDOMINGO BARRIUSO. B; BARRIUSO. B;

INTRODUCCIÓN:INTRODUCCIÓN:A partir del año2006 y en cumplimiento de lo establecido en los distintos Programas Nacionales de Erradicación de la Tuberculosis Bovina (PNETB), la Junta de Castilla y León viene aplicando la técnica del gamma interferón en aquellas explotaciones en las que ,mediante microbiología, se confirme la infección por M..bovis, . Un porcentaje de dichas explotaciones pertenecen a ganaderías de Lidia. Tradicionalmente se ha venido manteniendo que en las ganaderías de lidia, debido a su particular idiosincrasia, se deberían aplicar métodos de erradicación de la tuberculosis adaptados a las mismas. Una cuestión a clarificar de manera previa a establecer dicha diferenciación es si la enfermedades objeto de erradicación en estas ganaderías están producidas por cepas tuberculosas claramente diferenciadas del resto de la población bovina. El objetivo de este estudio es establecer si existen diferencias significativas entre las distintas cepas de M.bovis aisladas en el ganado bovino de Castilla y León, en función de si pertenecen a explotaciones de aptitud productiva lidia u a otro tipo de aptitudes.

MATERIAL Y MÉTODOS:MATERIAL Y MÉTODOS:Se comparó la frecuencia de aparición de cepas tuberculosas , determinadas mediante la técnica del spoligotipado, presentes en las ganaderías de Castilla y León, y se realizó una comparativa entre las cepas aisladas en rebaños de lidia y el resto de aptitudes.•EXPLOTACIONES:EXPLOTACIONES:•Se realizó el estudio utilizando los datos de microbiología, de los años 2007-2008, de 35 explotaciones con aptitud lidia,según el registro general de explotaciones ganaderas (REGA).

•MUESTREO Y ANALÍTICA LABORATORIAL:MUESTREO Y ANALÍTICA LABORATORIAL:•Las muestras utilizadas para este estudio, corresponden a las recogidas en mataderos de Castilla y León donde se procede a un protocolo de muestreo específico para la detección de tuberculosis en bovino ( ganglios retrofaríngeos, mediastínicos y bronquiales, así como de lesiones compatibles si se observan en la canal ).Dichas muestras son remitidas al Laboratorio Regional de Sanidad Animal donde se procede al aislamiento mediante cultivo microbiológico (BACTEC-MGIT-960) e identificación de M.bovis por RT-PCR . Posteriormente se remiten las muestras PCR+ al Laboratorio Europeo de Referencia para la confirmación de la especie y determinación del spoligotipo (SPB) de la micobacteria aislada.

RESULTADOS:RESULTADOS:•Se han aislado 27 spoligotipos distintos en ganaderías de lidia (TABLA Nº 1). Un 75% (20/27) de estos spoligotipos se han aislado también en ganado de aptitud no lidia.

•Los spoligotipos aislados en explotaciones de lidia y no aislados en las otras aptitudes representan menos del 3% de los aislamientos (8 muestras).

•Excepto en un caso (SPB323), en todas las explotaciones de lidia donde se aislaron spoligotipos no aislados también en otras aptitudes, se aislaron simultáneamente alguno de los 20 spoligotipos compartidos.

SPB1º 43,2% SPB-007 44,5% 1º2º 10,1% SPB-013 0,8% 11º3º 7,2% SPB-016 7,2% 3º4º 6,6% SPB-006 22,6% 2º5º 3,8% SPC-003 0,0% ---6º 3,2% SPB-003 1.51% 8º7º 3,1% SPB-034 0,4% 13º

77,2% total 75,5%

AISLAMIENTOS NO LIDIA (muestras)

AISLAMIENTOS LIDIA (muestras)

SPB1º 34,9% SPB-007 71,4% 1º2º 6.98% SPB-013 2,9% 11º3º 6,7% SPB-016 17,1% 3º4º 3,6% SPB-006 11,4% 2º5º 3,4% SPC-003 0,0% ---6º 3,3% SPB-003 5,7% 8º7º 2,0% SPB-034 2,9% 13º

AISLAMIENTOS NO LIDIA

(explotaciones)AISLAMIENTOS LIDIA

(explotaciones)•Mas del 75% de los aislamientos en ambos tipos de ganaderías pertenecen únicamente a 7 spoligotipos. El SPB-007 por sí solo supone más del 43% de los aislamientos independientemente de la aptitud productiva del ganado. Los SPB-007 y SPB-006 aumentan esta cifra hasta valores del 50% en aptitud no lidia y 67% en aptitud lidia.

•El spoligotipo más común en Castilla y León(SPB-007) se ha aislado en el 71,5% de las explotaciones de lidia en las que se ha podido realizar cultivo y aislamiento microbiológico en los años 2007-2008.

Tabla Nº 1

SPOLIGOTIPO Nº animales SPOLIGOTIPO Nº animales SPOLIGOTIPO Nº animales SPB- 001 11 SPB- 093 33 SPB- 218 1

SPB- 002 4 SPB- 105 1 SPB- 223 1

SPB- 003 49 SPB- 108 1 SPB- 226 3

SPB- 005 4 SPB- 111 1 SPB- 227 1

SPB- 006 101 SPB- 119 5 SPB- 237 3

SPB- 007 664 SPB- 125 1 SPB- 243 1

SPB- 008 25 SPB- 127 2 SPB- 244 1

SPB- 009 23 SPB- 128 8 SPB- 257 1

SPB- 013 155 SPB- 130 4 SPB- 276 4

SPB- 016 111 SPB- 138 1 SPB- 277 1

SPB- 019 2 SPB- 153 1 SPB- 278 2

SPB- 021 5 SPB- 158 16 SPB- 279 5

SPB- 022 4 SPB- 162 2 SPB- 288 1

SPB- 026 6 SPB- 168 2 SPB- 289 6

SPB- 027 1 SPB- 170 1 SPB- 290 1

SPB- 028 4 SPB- 172 1 SPB- 296 1

SPB- 030 5 SPB- 175 3 SPB- 297 1

SPB- 031 35 SPB- 176 1 SPB- 301 1

SPB- 032 3 SPB- 177 5 SPB- 309 1

SPB- 034 47 SPB- 178 4 SPB- 329 1

SPB- 035 2 SPB- 179 11 SPB- 335 1

SPB- 036 5 SPB- 181 1 SPB- 337 1

SPB- 042 12 SPB- 183 9 SPB- 338 1

SPB- 045 1 SPB- 187 1 SPC- 001 7

SPB- 047 1 SPB- 195 1 SPC- 002 2

SPB- 049 1 SPB- 199 5 SPC- 003 59

SPB- 056 3 SPB- 203 1 SPC- 009 3

SPB- 065 1 SPB- 209 3 SPC- 012 1

SPB- 072 1 SPB- 210 4 SPC- 013 1

SPB- 075 4 SPB- 214 4 SPC- 021 1

SPOLIGOTIPOS AISLADOS EN CASTILLA Y LEÓN EN ESTABLOS DE APTITUD NO LIDIA 2007-2008

Nº DE SPOLIGOTIPOS: 90 Nº DE MUESTRAS SPOLIGOTIPADAS: 1537

SPOLIGOTIPO SPB- 003 SPB- 005 SPB- 006 SPB- 007 SPB- 008 SPB- 009 SPB- 013 SPB- 016 SPB- 026 SPB- 028 SPB- 030 SPB- 031 SPB- 034 SPB- 035

Nº Animales 4 1 60 118 1 7 2 19 16 1 5 1 1 1Nº Explotaciones 2 1 4 25 1 1 1 6 2 1 2 1 1 1% MUESTRAS 1,51 0,38 22,64 44,53 0,38 2,64 0,75 7,17 6,04 0,38 1,89 0,38 0,38 0,38

SPOLIGOTIPO SPB- 065 SPB- 162 SPB- 163 SPB- 183 SPB- 199 SPB- 214 SPB- 234 SPB- 282 SPB- 291 SPB- 310 SPB- 321 SPB- 323

Nº Animales 11 1 1 1 3 1 1 1 1 1 1 2Nº Explotaciones 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1% MUESTRAS 4,15 0,38 0,38 0,38 1,13 0,38 0,38 0,38 0,38 0,38 0,38 0,75

Total

spoligotipos

27Total

muestras

2651,13

SPOLIGOTIPOS AISLADOS EN REBAÑOS DE LIDIA EN CASTILLA Y LEÓN .2007-2008

SPC- 001

32

Spoligotipos de M.bovis más frecuentes en

aislamientos de bovino en Castilla y León 2007-2008

0

5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

SPB-007 SPB-013 SPB-016 SPB-006 SPC-003 SPB-003 SPB-034