Las Técnicas de Manipulación Genética

Su importancia

¿Que es el Clonaje de Genes?

• Consiste en Extraer el DNA• Cortarlo de una manera controlada separando fragmentos que

contienen genes.• Insertar cada fragmento en una unidad de autorreplicación (vector).

Cuando esto ocurre, se ha obtenido un DNA recombinante.• Introducir el vector en un hospedador (normalmente una bacteria)• Dentro del hospedador, el vector se multiplica (copias idénticas).• El hospedador se multiplica, y el vector pasa a las células hijas. El

vector se siguie replicando.• Finalmente se genera una colonia compuesta de células idénticas

genéticmente (clones). Todas contienen al menos una copia del vector.• Se dice entonces que el gen ha sido clonado.

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¿Qué es el PCR?

• Componentes: DNA (doble cadena), oligonucleótidos cebadores o iniciadores (primers), nucleótidos y Taq polimerasa.

• Se calienta la mezcla a 94ºC el DNA se desnaturaliza.

• Se reduce la temperatura a 50-60ºC los oligonucleótidos se unen en sitios específicos.

• La temperatura se sube a 74ºC para activar la polimerasa.

• Acabado el ciclo, se desnaturaliza el DNA a 94ºC y se cierra el ciclo.

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¿Porqué son importantes?

• El clonage de genes es importante porque al final del proceso se puede encontrar el gen deseado en un proceso de clonación. Lo veremos en este curso.

• El PCR es importante porque, sabiendo las carácterísticas de un gen, podemos amplificarlo sin clonarlo.

• Hay otras muchas aplicaciones de estas técnicas.

Lectura

• Gene Cloning & DNA Analysis. T.A. Brown Blackwell

• http://www.dnai.org/