TEMA 1:VARIACIONES EN LAS MEDIDAS DEL LABORATORIO PROF.ADJ.DRA. CRISTINA MIER
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TEMA 1:VARIACIONES EN LAS TEMA 1:VARIACIONES EN LAS MEDIDAS DEL LABORATORIOMEDIDAS DEL LABORATORIO
PROF.ADJ.DRA. CRISTINA MIER
LICENCIATURA DE LABORATORIO CLÍNICO
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IMPORTANCIA DEL TEMA
• El nivel de calidad de la fase preanalítica condiciona el nivel de calidad de las fases siguientes. la obtención correcta de la muestra es la primera condición de un resultado correcto
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Def preanalitica :ISO 15.189 3.10
Todos los pasos a seguir en orden cronológico, partiendo desde la solicitud del clínico, incluyendo solicitud, preparación del paciente obtención de la muestra primaria, transporte hacia y dentro del laboratorio y finaliza cuando el procedimiento analítico comienza .
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ETAPA PREANALÍTICA
atención al usuario
solicitud del examen,
preparación del paciente,
toma de muestra,
transporte
almacenamiento
separación y centrifugación
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Secuencia recomendada en el uso de tubos
• Tubo de separación de suero• Tubo de coagulación • Tubos con anticoagulantes:• citrato de sodio• EDTA• Heparina• Facilitar el reconocimiento de los tubos/tapones
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% DE ERROR
Preanalítico Analítico Postanalítico
46% 7% 47% (Rose,Boone)
68,2% 13,3% 18,5% (Plebani)
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RECHAZO DE MUESTRA• Datos incompletos o ilegibles• Discordancia entre datos solicitud y muestra• Proporción inadecuada de sangre-anticoagulante• Muestra incorrecta. Uso de anticoagulante incorrecto• Transporte inapropiado• Presencia de interferentes como hemólisis, turbidez• Cantidad insuficiente de muestra• Tiempo de recolección incorrecto
MUESTRA NO VÁLIDA
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% de error preanalíticoError en nombre paciente 2,6%Error identificación unidad hosp 19,0%Extravío orden 18,1%Orden malinterpretada 3,2%Envase inapropiado 2,6%Toma incorrecta de muestra 2,1%Toma de via de infusión 20,6%
68,2%
129/40490 Clin Chem 1997,43:1348
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Errores relacionados con la solicitud
Examen ordenado pero no realizado 1,4%Examen realizado pero no ordenado 1,1%Discrepancias con nombre médico 1,9%Errores en urgencia 0,8%
4,8% con error en ingreso de solicitud
Arch Path Lab Med 1999; 123:1145
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Preparación del paciente Objetivo:
Establecer una correcta preparación del paciente, tratando de evitar cualquier factor externo que pueda influír en las determinaciones y lograr un estado “basal”para que el resultado obtenido pueda ser comparable con su estado real de salud en ese instante y con otros resultados obtenidos bajo las mismas condiciones en otros momentos de la vida del paciente
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5.4.6 Control de traslado de muestras
• tiempo apropiado
• temperatura especificada
• seguridad del transportador, público en general y laboratorio que la recibe
• cumpliendo con los requisitos regulatorios nacionales, regionales, o locales.
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5.4.14
• Almacenaje por tiempo especificado
• Condiciones que aseguren estabilidad de las propiedades para repeticiones o análisis adicionales
SISTEMAS BIOLÓGICOS SON INESTABLES
ADSORCIÓN,DESNATURALIZACIÓN,EVAPORACIÓN,
CONGELACIÓN LENTA,ALÍCUOTAS,
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3.3análisisconjunto de operaciones que tienen el objeto de determinar el valor o características de una propiedad. NOTA En algunas disciplinas (ejemplo: microbiología) un análisis es la actividad total de un conjunto de ensayos/pruebas, observaciones o mediciones.
ISO 15189 :2003
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MÉTODOS ANALÍTICOS (DE MEDICIÓN)
MÉTODO ANALÍTICO: CONJUNTO DE PROCEDIMIENTOS (CONJUNTO DE INSTRUCCIONES ESCRITAS) Y TÉCNICAS PARA REALIZAR UNA ACTIVIDAD ORDENADO EN FORMA SISTEMÁTICA.
FORMAN PARTE DEL PROCESO ANALÍTICO
INEVITABLEMENTE EL INSTRUMENTO EMPLEADO ESTÁ INVOLUCRADO EN EL MÉTODO
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VARIACIÓN ANALÍTICA
INCERTIDUMBRE ( DE LA MEDICIÓN):
ES EL PARÁMETRO ASOCIADO A UN RESULTADO QUE CARACTERIZA LA DISPERSIÓN DE VALORES QUE PODRÍA TENER ESA MEDICIÓN
ENGLOBA TODAS LAS POSIBLES FUENTES DE VARIACIÓN
ESTIMADORES:
C.V. s INTERVALO DE CONFIANZA I.C.
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ERROR ANALÍTICO O ERROR DE LA MEDICIÓN:
TIPOS DE ERROR:
ERROR SISTEMÁTICO
ERROR ALEATORIO
ERROR TOTAL
ES CONSTANTE O VARÍA EN FORMA PREDECIBLE
SE CONOCE SU EXISTENCIA
SE PRODUCE AL AZAR
ERROR SISTEMÁTICO + ERROR ALEATORIO
EQUIPO,REACTIVOS,METÓDICA,
CALIBRACIÓN
REACTIVOS ,EQUIPO, PIPETEO,TRANSCRIPCIÓN
ES VARIABLE
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Tiempo entre toma de muestra y procesamiento
Sangre con EDTA Hasta 48 horas aTºA Hasta 7 días a 4ºC
Sangre con heparina Hasta 24 horaTºASangre sin anticoagulante Hasta 24 horas a TºASuero Hasta 48 horas a 4ºC.
Meses a -20ºC o -70ºC
Tº Ambiente 18-22 ºC
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CARACTERÍSTICAS DE DESEMPEÑO ANALÍTICO
PRECISIÓN :GRADO DE CONCORDANCIA ENTRE RESULTADOS INDEPENDIENTESDE LA MISMA MUESTRA
ESPECIFICIDAD ANALÍTICA:CAPACIDAD DE PRODUCIR UNA SEÑAL EXCLUSIVAMENTE CON UN ANALITO ENPRESENCIA DE OTROS COMPONENTES (MATRIZ)
SENSIBILIDAD ANALÍTICA:CAPACIDAD DE PRODUCIR UNA SEÑAL DISTINTA FRENTE A CANTIDADES DISTINTAS DEL ANALITO
LINEALIDAD:CAPACIDAD DE PRODUCIR SEÑALES CUYA INTENSIDAD VARÍE PROPORCIONALMENTE CON LA CANTIDAD DEL ANALITO
REPETIBILIDAD:CUANDO SE MANTIENEN LAS CONDICIONES ANALÍTICAS
REPRODUCTIBILIDAD : CUANDO ALGUNAS DE ELLAS VARÍAN(PRECISIÓN INTERMEDIA)
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LÍMITES DE DETECCIÓN Y CUANTIFICACIÓN
EXACTITUD:GRADO DE CONCORDANCIA ENTRE UN RESULTADO Y EL VALOR VERDADERO:
VERACIDAD: GRADO DE CONCORDANCIA ENTRE EL PROMEDIO DE UNA SERIE DE RESULTADOS DE LA MISMA MUESTRA Y EL VALOR VERDADERO
VALIDACIÓNVALIDACIÓN
característica estimador
veracidad Sesgo( bias, error sistemático)
precisión s(desvío estándar),C.V.
exactitud s acumulado
VALOR CONSISTENTE CON LA DEFINICIÓN DE UNA CANTIDAD PARTICULAR DADA.
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NECESIDAD DE CALIBRACIÓN:
CONJUNTO DE OPERACIONES QUE ESTABLECEN LA RELACIÓN ENTRE LA RESPUESTA DEL SISTEMA Y LA CANTIDAD DEL ANALITO
UTILIZA UN MATERIAL DE REFERENCIA (CALIBRADOR)
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BALANZABALANZA:DETERMINACIÓN DE MASA –PESADA
EQUILIBRAR UNA MASA DESCONOCIDA CON OTRA CONOCIDA
CAPACIDAD -SENSIBILIDAD –PRECISIÓN
USO,EN LA PREPARACIÓN DEUSO,EN LA PREPARACIÓN DE:
MATERIALES DE REFERENCIA(ESTÁNDARES)
REACTIVOS
SOLUCIONES (1º PASO)
CALIBRACIÓN DE EQUIPAMIENTO VOLUMÉTRICO
PESO = MASA . GRAVEDAD
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INSTRUMENTOS MAS PRECISOS DEL LABORATORIO
UBICACIÓN EN LUGARES LIBRES DE VIBRACIONES Y PROTEGIDOS DE LA LUZ SOLAR
PESAS CALIBRADAS:ESPECIFICACIONES DEL N B S
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1-COMPROBAR EL NIVEL2-VERIFICARLA SITUACIÓN DE MOVIMIENTO3-FIJAR EL PUNTO 0 (TARAR),VENTANAS LATERALES CERRADAS.4-ABRIR, COLOCAR LA MUESTRA (NO DIRECTAMENTE),CERRAR5-EQUILIBRAR HASTA EL REPOSO6-REGISTRAR7-RETIRAR LA MUESTRA8-EQUILIBRAR (RETIRAR LAS PESAS)9-VERIFICAR EL CERO (VENTANAS LATERALES CERRADAS)
ELECTRÓNICA: COMPENSACIÓN ELECTROMAGNÉTICA
RELACIÓN ENTRE LA MASA(FUERZA) Y LA CORRIENTE DE COMPENSACIÓN (CORRELACIÓN)
PASOS
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MEDICIÓN DE VOLUMEN
MATERIAL DE VIDRIO VOLUMÉTRICO (CALIBRADO, NO CALENTAR) :PIPETAS ,MATRACES AFORADOS, VASOS
NO VOLUMÉTRICO- NO CALENTAR A LA LLAMA DIRECTA
JARRAS,BOTELLAS,VASOS, MATRACES
CLASE A – CAP
PIPETAS-AFORADAS:TD-TC(SE SOPLA)
GRADUADAS:TD-TC
ELEGIR LA ADECUADA
TODO EL MATERIAL:SANO, LIMPIO, SECO Y DESENGRASADO
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PASOS
1-COLOCAR PROPIPETA O PERA DE GOMA AL EXTREMO
2-INTRODUCIR LA PIPETA EN LA SOLUCIÓN
3- SUCCIONAR LENTAMENTE(NO DEBE ENTRAR AIRE),HASTA UN NIVEL POR ENCIMA DE LA MARCA DE CALIBRACIÓN
4-RETIRAR LA PIPETA
5- ENJUAGAR LA PUNTA(ERROR)
6-VACIARLA EN POSICIÓN VERTICAL HASTA QUE EL EXTREMO INFWERIOR DEL MENISCO LLEGUEA LA MARCA DE CALIBRACIÓN
7-DRENARLA EN EL RECIPIENTE DEFINITIVO EN POSICIÓN VERTICAL, SI ES TC, TOCAR LA PARED DEL RECIPIENTE
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PIPETAS AUTOMÁTICAS
ASEGURA UN VERTIDO EFICAZ DE VOLÚMENES IGUALES (DILUCIÓN) POR DESPLAZAMIENTO DE AIRE
CALIBRACIÓN
MANTENIMIENTO
LUBRICACIÓN
PRECISIÓN (COEFICIENTE DE VARIACIÓN 0.1%- 1%)
VERIFICACIÓNVERIFICACIÓN
SECAR LA PUNTA DE ARRIBA HACIA ABAJOSECAR LA PUNTA DE ARRIBA HACIA ABAJO
PUNTEROS CALIBRADOSPUNTEROS CALIBRADOS
INSTRUCCIONES
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SOLUCIONES- PREPARACIÓN
1-PESAR EL SOLUTO SÓLIDO EN UN VASO(GUANTES)
2-AGREGAR SOLVENTE AL VASO EN CANTIDAD SUFICIENTE PARA DILUÍR
3-COLOCAR UNAVARILLA DE VIDRIO( O UN EMBUDO DE VIDRIO) EN EL MATRÁZ. (EN EL QUE SE VA A MEDIR EL VOLUMEN FINAL DE SOLUCIÓN)
4-VERTER EL CONTENIDO DEL VASO EN EL MATRÁZ A TRAVÉS DE LA VARILLAO EL EMBUDO(PUEDE SER POR LA PARED CON PIPETA O GOTERO)
5-AGREGAR SOLVENTE AL VASO Y REPETIR LA OPERACIÓN HASTA QUE NO RESTE MAS SOLUTO Y EL NIVEL CASI ALCANCE LA MARCA DEL MATRÁZ(ENRASE)
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6-AÑADIR SOLVENTE GOTA A GOTA POR EL CUELLO DEL MATRÁZ PARA ARRASTRAR SOLUTO7-TAPAR EL MATRÁZ Y MEZCLAR INVIRTIÉNDOLO Y AGITANDO 4 VECES 8-DEJAR REPOSAR (QUE DESCIENDA TODO )Y AJUSTAR EL ENRASE
AGITADOR MAGNÉTICO , CORRECCIÓN DE PH SI ES NECESARIO
TRASVASE O TAPADO PARA ALMACENAR EVITANDO EVAPORACIÓN
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CENTRIFUGACIÓN
DISPOSITIVO QUE ACELERA LA SEPARACIÓN GRAVITACIONAL DE LAS SUSTANCIAS QUE DIFIEREN SIGNIFICATIVAMENTE EN SUS MASAS
LABORATORIO:SEPARAR PARTÍCULAS EN SUSPENSIÓN(CÉLULAS)
SEPARAR DOS LÍQUIDOS
UTILIZA LA FUERZA CENTRÍFUGA RELATIVA = FCR
FCR = 1.118*10 – 5 * radio * rpm
( RADIO EN CENTÍMETROS,REVOLUCIONES POR MINUTO,VELOCIDAD ROTATORIA)
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PRECAUCIONES :PRECAUCIONES :
TUBOS EN EQUILIBBRIO (DISPOSICIÓN GEOMÉTRICA, PESAR)
TUBOS TAPADOS
INSTRUCCIONES Y ESPECIFICACIONES
REFRIGERADAS, TIPO DE CABEZALES
PLASMA FCR: 850-1000g 10 MINUTOS