Tp extracción de adn
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Biología 3er año B y D – M. Amor
Trabajo Práctico Laboratorio N°1
Extracción de ADN de banana
IMPORTANTE
Leer la práctica antes de concurrir al laboratorio
Formar 8 grupos. Traer papel con nombres al ingresar al laboratorio será
designado el número de grupo
Definir las palabras del glosario y las que no conozcas
Determinar y escribir el objetivo de esta práctica
Reconocer todo el material a utilizar
Ver el video
Traer materiales no disponibles en el laboratorio
Imprimir Trabajo práctico
Al finalizar el práctico completar la actividad párrafos – pasos
Escribir conclusiones
Objetivo:
Materiales:
• 1 tazas, vaso de plástico (por grupo) o vaso de precipitado
• Licuadora
• Una cuchara para medir y mezclar
• 1 filtros de papel
• Agua destilada
• Shampoo de color claro o detergente
• 1 banana
• Sal de mesa
• 1 embudo
• 2 tubos de ensayo
• 1 conservadora con hielo para enfriar los tubos con alcohol
• 1 varilla de vidrio o 1 pipeta Pasteur
• etanol
• 1 gradilla
• 1 vidrio reloj
Biología 3er año B y D – M. Amor
Procedimiento para la extracción del ADN
Preparar una solución de banana procesada con sal, agua destilada y shampoo
(detergente) mediante los siguientes pasos:
1. En una licuadora, mezclar una banana por taza de agua destilada (250ml).
2. Licuar por 15-20 segundos, hasta que la solución se mezcle. Dejar reposar.
Preparado 1
3. En una vaso de precipitado, preparar una solución consistente en una
cucharadita de té de shampoo y dos pizcas de sal.
4. Agregar al shampoo 20 ml (4 cucharaditas) de agua destilada.
5. Disolver la sal y el shampoo revolviendo lentamente con la cuchara de plástico
evitando formar espuma. Preparado 2
6. A la solución del Preparado 2 , agregar tres cucharaditas de té de la mezcla de
banana del Preparado 1.
7. Mezclar la solución con la cuchara por 5-10 minutos.
8. Mientras uno de los miembros del grupo mezcla la solución de banana, otro
miembro pondrá el filtro dentro del embudo.
9. Volcar la mezcla obtenida en el paso 6, vertiéndola dentro del filtro y dejar que
la solución drene por algunos minutos hasta que sean 5 ml aproximadamente de
filtrado para testear, recoger en un tubo de ensayo
10. Tomar un tubo de ensayo con alcohol frío.
11. Verter el alcohol frio sobre los 5 ml del filtrado del paso 9. Tener mucho
cuidado de vertel el alcohol sobre las paredes del tubo o ayudado por una varilla
de vidrio.
12. Dejar que la solución repose por 2 a 3 minutos sin mover. Es importante no
batir el tubo de ensayo
.13. Cuando se obtienen buenos resultados, habrá suficiente ADN para levantar
con una varilla de vidrio (el ADN se enrolla a la varilla). El ADN tiene la apariencia
de mucus blanco y fibroso. Se introduce la punta de una varilla estrecha hasta
justo debajo de la separación entre el alcohol y la muestra. Remover la varilla
Biología 3er año B y D – M. Amor
hacia delante y hacia atrás y poco a poco se irán enrollando los fragmentos de
mayor tamaño de ADN. Pasado un minuto retirar la varilla atravesando la capa de
alcohol con lo cual el ADN quedará adherido a su extremo con el aspecto de un
copo de algodón mojado
Relaciona los siguientes párrafos con los pasos seguidos en la experiencia
a) El ADN no es soluble en alcohol. Cuando el alcohol se agrega a la mezcla,
los componentes, excepto el ADN, permanecen en la solución mientras el
ADN precipita en la capa de alcohol y permite que no se degrade con el
aire.
b) El detergente disuelve los lípidos (moléculas grasas) y las proteínas de la
membrana celular, rompiendo las uniones que mantienen la integridad de la
misma. De esta forma se libera el contenido celular
c) La sal permite que el ADN precipite en una solución fría
de alcohol y que las cadenas de ADN no se corten.
d) El frio impide que las enzimas, nucleasas, degraden el ADN.
e) AL cortar se obtienen fragmentos de tejidos
f) Neutraliza las cargas negativas de los grupos fosfatos del ADN
g) Permite separar restos del vegetal, como membranas y proteínas, de
sustancias en solución
Glosario: ADN, Precipitar, Solución, Agua destilada, Etanol.
Video realizado por un grupo escolar, en forma casera
https://www.youtube.com/watch?v=vTAseSpQZmY
Paso…………………….
Paso…………………….
Paso…………………….
Paso…………………….
Paso…………………….
Paso…………………….
UNA VEZ FINALIZADA LA TAREA, LAVAR TODOS LOS MATERIALES, DEJARLOS DENTRO DEL
CANASTO BOCA ABAJO PARA QUE SE SEQUEN Y LIMPIAR LA MESADA