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Protocolo de Pasteurización Química de S ustratos E nriq uecidos
p ara el C ultiv o de Pleurotus ostreatus
I. Entidades Intervinientes en el Proyecto
Entidad Autora del Proyecto:
Tipo de entidad Nombre Actividades a desarrollar
Organismos del estado Provincial
Centro PyME Unidad de transferencia de los servicios, por medio de la técnica desarrollada, al grupo de productores de hongos.
Equipo Técnico:
NOMBRE Y APELLIDO PROFESION
ORGANISMO DEL
CUAL DEPENDE FUNCION EN EL PROYECTO
Cristian Starik Ing. Agrónomo. CISPHoCoMe Centro PyME Investigador
Leticia Villalba Lic. Biotecnología CISPHoCoMe Centro PyME Investigador
II. Diagnóstico:
La producción de hongos comestibles crece a pasos afianzados y la
elaboración del sustrato es uno de los cuellos de botella más importante de la
producción.
El desarrollo de microorganismos contaminantes en el sustrato durante la
etapa de incubación (crecimiento) es uno de los principales problema a afrontar
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por el productor. Estos hongos contaminantes (en su mayoría Deuteromycetes)
aparecen invadiendo el sustrato y ocupando el un espacio que debería ser
ocupado por Pleurotus ostreatus var. Florida. Dependiendo de la especie
contaminante, el tipo de antagonismo que genere entre ambos
microorganismos (contaminante & Pleurotus), la presión de inóculo en el
sustrato, las condiciones químicas del sustrato y ambientales de las salas;
pueden causar grandes perdidas a los productores.
Normalmente para disminuir la incidencia de las contaminaciones se
pasteuriza el sustrato a temperaturas que van desde los 66 ºC a los 90ºC
durante varias horas. Este método es efectivo pero es económicamente
oneroso para productores pequeños cuyo nivel de producción dejo de ser
artesanal pero no es lo suficientemente alto como para encarar grandes
inversiones.
Así es que se presenta la posibilidad de realizar una disminución de la
presencia de microorganismos indeseables en el sustrato por medio de la
utilización de una o varias sustancias químicas que combinando distintos
efectos logre la desinfección del sustrato sin afectar la producción y el
crecimiento de Pleurotus y sin producir contaminación ambiental o riesgo para
la salud humana.
III. Objetivos del Proyecto
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El objetivo del proyecto es la búsqueda de algún sistema de desinfección
que remplace la tradicional pasteurización por vapor logrando buenos
rendimientos y minimizando los problemas de contaminación, sin afectar al
medio o producir metabolitos tóxicos para la salud. En este trabajo se persigue
que el método de desinfección sea económico, simple, no contaminante e
inocuo.
IV. Descripción Detallada del Método y Fundamento Teórico.
Las Gírgolas, pertenecientes al género Pleurotus spp., son hongos de la
“Podredumbre Blanca”, clasificados también como descomponedores
primarios, debido a que cuentan con un paquete enzimático especifico que los
ayuda a degradar la lignina y la celulosa, ambos componentes estructurales de
los tejidos vegetales. Estos hongos típicamente son lignívoros pero no sólo
degradan lignina, debido a que para acceder a ella deben atravesar la celulosa
con su consecuente degradación complementaria.
La formulación de un sustrato debe ser desarrollada considerando, las
características de los residuos disponibles en la zona, los requerimientos
nutricionales de la especie con que se trabajará y la eficacia del tratamiento de
descontaminación a utilizar.
En cuanto a la utilización de residuos de la zona es fundamental
establecer su homogeneidad, disponibilidad y estacionalidad, ya que de esto
depende el plan anual de elaboración de substrato.
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Las formulaciones simples están formadas por uno o, a lo sumo, dos
componentes que garantizan cubrir los requerimientos nutricionales mínimos
del hongo aportando principalmente carbono y nitrógeno.
Una formulación compleja generalmente esta compuesta de un substrato
base, aditivos e inertes. Se denomina substrato base al componente que aporta
mayoritariamente la fuente de carbono producto de la degradación de la lignina
y la celulosa. Por ello, en el caso de las formulaciones complejas, el sustrato
base seleccionado debe ser capaz de aportar grandes cantidades de carbono
en una relación carbono/nitrógeno de entre aproximadamente 150 y 350.
Los aditivos son componentes que se utilizan para mejorar el contenido
total de nitrógeno y fósforo en la formulación y algunos microelementos como
manganeso y cobre. Estos pueden ser orgánicos o inorgánicos. Los aditivos
generalmente representan menos del 40 % de la formulación. Los inertes
cumplen funciones físicas y químicas, como es el ajuste de la densidad y el
control del pH.
Preferentemente, la relación C/N de la formulación debería estar ente 50
y 80 y el contenido de nitrógeno total entre 0,8 % y 1,3 %. El componente
utilizado como sustrato base generalmente representa entre el 60 % y el 80 %
de la formulación y, en algunas casos, hasta el 100 % para formulaciones
simples.
Para un normal crecimiento, las Gírgolas deben disponer de agua en su
medio. La humedad del sustrato debe ajustarse entre 60 % y 70 % y la técnica
de hidratado dependerá de la velocidad y de la capacidad de absorción del
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agua de cada uno de los componentes. Es decir, se debe establecer una
cronología de hidratación para aquellos componentes con distintas
características de hidratado.
En términos generales el pH del sustrato debe ser ligeramente ácido, el
óptimo para el crecimiento de esta especien está entre 5,6 y 6,5. En este punto
es importante advertir acerca de la habilidad de algunas cepas para crecer y
desarrollarse a pH extremos, gracias a su capacidad de modificación del mismo
del medio.
Algunos ejemplos de sustrato base pueden ser: paja de cereales, virutas
y aserrines de maderas blandas, y cáscara de girasol.
Preferentemente, como sustrato se emplean virutas de maderas blandas
que deben cumplir con determinadas características.
Desde un punto de vista químico, se deben evitar las virutas de aquellas
maderas que contengan compuestos antifúngicos naturales que limiten el
crecimiento de Pleurotus spp., como las resinas o los compuestos fenólicos
presentes en ciertos tipos de maderas.
Respecto de su características físicas, no se deben emplear virutas de
maderas de elevada dureza, es decir especies de crecimiento lento de
maderas muy densas.
Por ultimo, teniendo en cuenta su aspecto biológico, no pueden ser
utilizadas aquellas virutas que, producto del mal almacenamiento o inadecuado
manejo, al momento de ser utilizadas contengan más de 10.000 unidades
formadoras de colonias (UFC) de hongos contaminantes por gramo seco, a
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saber: Trichoderma spp., Penicillum spp., Verticillum spp., Aspergillus spp.,
Cladosporium spp., Rizopus spp., Mucor spp. y Alternaria spp., entre los más
destacados.
Concretamente, pueden ser utilizadas virutas de maderas de especies
de rápido crecimiento con alburas blandas y poco densas, carentes de resinas
y sin elevadas cantidades de compuestos fenólicos. Preferentemente pueden
utilizarse entonces las virutas de madera de álamo (Populus spp.), sauce (Salix
spp.), morera (Morus spp.), haya (Fagus spp.), nogal (Juglans spp.), cerezo
(Prunus spp.), abedul (Betuna spp.), roble o encina (Quercus spp.), lenga
(Notofagus pumilio) entre otros. Mas preferentemente, se pueden emplear las
virutas de madera de álamo (Populus spp.) y sauce (Salix spp.).
Algunos ejemplos de aditivos orgánicos pueden ser: salvado de trigo,
harina de maíz, melaza, heno de alfalfa y urea, y entre los aditivos inorganicos
podemos nombrar: nitrato de potasio y nitrato de calcio.
Algunos ejemplos de aditivos inorgánicos inertes pueden ser perlita,
carbonato de calcio y sulfato de calcio.
Preferentemente, al sustrato de la presente invención se agrega
afrechillo como fuente nitrogenada primaria. Este agregado sirve para corregir
conjuntamente con la harina de maíz la deficiencia de nitrógeno de la viruta de
madera de forma tal que la formulación final cubra los requerimientos de
nitrógeno de Pleurotus spp.
Preferentemente también, se agrega al sustrato harina de maíz como
fuente nitrogenada secundaria y además fuente de hidratos de carbono
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fácilmente asimilables (HCFA), o sea de energía. La importancia de los HCFA
está dada por la necesidad de transformar rápidamente el contenido de
nitrógeno presente en la formulación en proteína fúngica, para lo que el
metabolismo demanda “energía rápida” provista por los HCFA. De lo contrario
el alto contenido de nitrógeno, el elevado pH del sustrato y la elevada
temperatura que se desarrolla dentro del mismo facilitarían en gran medida la
generación de amoniaco gaseoso dentro del sustrato que se encuentra
embolsado tornándose tóxico para Pleurotus spp. e inhibiendo su crecimiento.
Preferentemente, se agrega yeso, que cumple la función de encapsular
o generar un microambiente de reacción ácida en torno a las fuentes
nitrogenadas tanto primaria como secundaria, lo que también disminuye la
generación de amoniaco.
Es por esta razón de generar un microambiente que estos tres
componentes, afrechillo, harina de maíz y yeso, se mezclan en seco
previamente antes de ser incorporados a la viruta tratada.
La eficacia del tratamiento de descontaminación a utilizar está
directamente relacionado con la riqueza nutricional del la formulación ya que
tratamientos más agresivos y eficaces, los que logran una marcada reducción
de los microorganismos contaminantes, permiten trabajar con formulaciones de
mayor riqueza en nutrientes.
La posibilidad de que se desarrollen en colonias los microorganismos
que trae consigo el sustrato formulado y que tienen la capacidad de degradar el
mismo, debe reducirse al mínimo. Esto puede hacerse por disminución del
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número de microorganismos viables presentes en el sustrato o por inhibición
temporaria de su capacidad de desarrollo. De ambas formas se limita la
posibilidad de que ocupen el nicho las colonias de microorganismos
contaminantes.
La pasteurización Térmica es la más utilizada y consiste en someter a la
formulación de sustrato a temperaturas elevadas de entre 65 ºC y 85 ºC
utilizando vapor de agua que se genera por medio de una caldera y es
inyectado en un túnel de pasteurizado en el que se encuentra alojado el
sustrato. Generalmente el proceso dura entre 6 a 10 horas dependiendo de la
cantidad de sustrato pasteurizado, la capacidad de la sala y la temperatura de
pasteurización. Durante este lapso es necesario la quema de algún tipo de
material combustible (gas, Gas oil, etc.) para la generación del vapor. Este
método reduce la carga de microorganismos contaminantes viables por debajo
de un umbral determinado que permite el eficaz desarrollo de Pleurotus spp.
La presente invención considera los siguientes factores como punto de
partida para el desarrollo de la misma:
1.- la utilización de sustrato selectivos para Pleurotus spp;
2.- la capacidad de algunas cepas expuestas a medios alcalinos para
modificar valores de pH extremos y crecer satisfactoriamente;
3.- la posibilidad de minimizar la generación de amoníaco dentro de la
bolsa, a pesar de trabajar con sustratos enriquecidos, a través del uso de
compuestos de reacción ácida y el agregado de HCFA;
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4.- los efectos de un compuesto altamente alcalino, a saber: lisis de la
membrana celular, desnaturalización de proteínas y efecto quimiostático, sobre
supervivencia de los microorganismos contaminantes; y, por último,
5.- la posibilidad de forzar la salida de un estado de resistencia y pasaje
a un estado vegetativo más vulnerable de los microorganismos contaminantes
presentes en el sustrato.
6.- la búsqueda de métodos alternativos en los que no se utilicen
combustibles para la pasteurización de sustratos.
Es de vital importancia la selección de las cepas a cultivar dado que
distintas cepas pueden adaptase a distintas rangos térmicos de crecimiento así
como requerir distintas temperaturas de inducción. Las características en
cuanto a requerimientos térmicos de cada cepa repercuten directamente en
costo de producción ya que las distintas salas deben ser climatizadas de
acuerdo a las exigencias biológicas de la cepa en cuestión. Algunas cepas
pueden ser más productivas que otras y al mismo tiempo su habilidad
saprofita competitiva puede variar.
Muchas veces el mercado exige determinadas características de
producto, como por ejemplo color, forma, tamaño, y éstas deben ser tenidas en
cuenta al momento de seleccionar la cepa.
Preferiblemente, la presente invención puede ser utilizada para
descontaminar sustratos para la producción de distintas especies del género
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Pleurotus spp., a saber: Pleurotus sajor-caju, Pleurotus ostreatus, Pleurotus
ostreatus variedad Florida, Pleurotus pulmonarius, entre las más destacadas.
Según una forma preferida de la presente invención, se propone un
proceso para pasteurizar un sustrato determinado para utilizarlo para el cultivo
de hongos comestibles del género Pleurotus spp. que comprende las etapas
de:
a) prefermentar viruta de madera blanda o semiblanda;
b) interrumpir la prefermentación mediante el agregado de una
suspensión alcalina;
c) escurrir la viruta;
d) mezclar en la viruta prefermentada con una mezcla de aditivos secos;
e) inocular el sustrato obtenido en el punto d) con semilla del hongo a
cultivar;
f) embolsar el sustrato y perforar las bolsas;
g) incubar el sustrato inoculado.
Preferentemente, la etapa a) del proceso para cultivar hongos de
acuerdo con lo anterior comprende los subetapas de:
i) humedecer viruta de madera; y
ii) airear la viruta de madera.
Como puede observarse, en primer lugar se debe realizar una
prefermentación de la viruta que tiene una duración aproximada de 24 a 48
horas. El proceso se completa cuando se obtiene una diferencia de
temperatura entre el centro de la pila y el ambiente de aproximadamente 10 ºC.
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Al efecto se dispone preferiblemente la viruta de madera en una pileta o
contenedor con un adecuado sistema de drenaje y desagote o, en su defecto,
en recipientes de menor tamaño o contenedores que sumen la capacidad
requerida y que estén preparados de alguna manera permitiendo realizar, luego
del correspondiente tratamiento químico, un eficaz escurrido de la viruta. Con
una herramienta adecuada, una vez humedecida la viruta, ésta se mezcla para
homogeneizar la humedad de la misma. Se debe contar con una balanza para
cuantificar las cantidades necesarias de viruta y agua de manera de lograr una
humedad en la pila de aproximadamente un 65 a 70 %, o con un recipiente
cubicado para manipular la adición de agua. Con un termómetro de escala
adecuada se controla la diferencia de temperatura entre el centro de la pila y el
medio ambiente, durante el transcurso del proceso de prefermentación.
La prefermentación es una activación primaria del crecimiento de los
microorganismos presentes en la viruta. Se trata de un evento aislado que
luego es interrumpido, con el objetivo de que aquellos microorganismos que se
encuentran protegidos por estructuras de resistencia o bajo estados de latencia
sostenidos, sean activados e inicien su crecimiento vegetativo convirtiéndose
en una masa biótica vulnerable para luego ser sometidos al tratamiento
químico.
Una vez transcurridas las 24 horas., se deberá realizar un mezclado,
removiendo la viruta húmeda con la ayuda de una horquilla o una herramienta
semejante. Es recomendable que esta tarea se realice dentro de los mismos
contenedores en que se va a realizar el tratamiento químico para ahorrar mano
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de obra y equipamiento. Una vez removida, la viruta es tapada y permanece en
estas condiciones durante otras 24 horas buscando lograr una diferencia de
temperatura entre el centro de la pila y el ambiente de aproximadamente 10 ºC.
Luego de transcurridas aproximadamente 48 horas se detiene el proceso
de fermentación por acción del tratamiento químico mediante el agregado de
una suspensión alcalina. La suspensión preferentemente es una suspensión de
hidróxido de calcio o cal comercial. Para esto se prepara preferentemente una
suspensión de cal en agua al 3 % peso en peso que es agregada al/los
recipiente/s que contiene/n la viruta húmeda.
La suspensión así obtenida es agregada a la viruta luego de
prefementarla. Una vez que se agrega la suspensión es necesario
homogenizar la mezcla para que el tratamiento sea efectivo y debe dejarse
transcurrir al menos aproximadamente 18 horas. por lo que normalmente se
deja hasta el día siguiente.
El efecto quimiostático y desinfectante de la suspensión de Ca(OH)2 es
fundamentalmente por modificación del pH. Esto provoca dos efectos sobre los
microorganismos presentes en activo crecimiento: i) los iones hidroxilo inducen
una peroxidación lipídica dando como resultado la ruptura de los fosfolípidos
que componen la membrana celular; y ii) el optimo funcionamiento de las
enzimas se obtiene a un pH neutro, mientras que la alcalinización que provee
el hidróxido de calcio produce la desnaturalización de las proteínas.
En forma paralela e independiente del tratamiento de la viruta de
madera, se prepara una mezcla de componentes secos, para lo cual se pesan
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en una balanza adecuada las cantidades necesarias de afrechillo, harina de
maíz y yeso, y se mezclan en seco con una mezcladora por gravedad en las
proporciones correspondientes.
Cabe mencionar en este punto que a partir del momento en que la viruta
recibe el tratamiento químico debe ser tratada como un producto pasteurizado,
por lo que no debe ser expuesta a condiciones que puedan generar posteriores
contaminaciones manteniendo rigurosamente su asepsia.
Una vez efectuado el tratamiento químico y luego de aproximadamente
18 horas, la viruta debe ser escurrida. Es muy importante que la viruta quede
bien escurrida por lo que se recomienda un escurrido de al menos una hora o
más. Previo al escurrido, conviene humedecer el suelo circundante para
minimizar la posibilidad de que la viruta tratada se contamine con polvillo.
Una alternativa para el escurrido es emplear una malla o “media sombra”
con la que se reviste internamente los contenedores antes de agrega la viruta,
luego la viruta es prefermentada y tratada químicamente, y por ultimo se toman
los extremos de la malla o “media sombra” y se eleva junto con su contenido
con la ayuda de un aparejo o por medio de la torre de un tractor,
manteniéndose la viruta elevada escurriendo durante al menos una hora. Es
durante este tiempo que la viruta debe ser protegida del viento si lo hubiera y
del polvillo.
Una vez escurrida la viruta, se deposita en una plataforma ubicada en la
entrada de la sala de inoculación, y cuyo piso tenga preferentemente un declive
que permita continuar el escurrido mientras se fracciona e ingresa a la sala de
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incubación. Esta plataforma debe estar previamente desinfectada. Una vez
efectuado el escurrido de la viruta tratada químicamente, se procede a
mezclarla con la mezcla de los componentes secos ya preparada.
Cuando la viruta está bien escurrida, la misma debe ser mezclada con el
resto de los componentes del sustrato. En esta instancia se mezcla la viruta
húmeda ya escurrida con la mezcla de componentes secos, a saber afrechillo,
harina de maíz y yeso, que fuera preparada previamente. Es muy importante
homogenizar la mezcla lo mayor posible.
Al efecto, esto puede realizarse en una mezcladora con una capacidad
de aproximadamente 1 m3 o un contenedor plástico con la misma capacidad en
donde realizar el mezclado manualmente, mientras que los operarios deben
cubrirse con guantes, barbijo y cofia usando al mismo tiempo ropa adecuada,
para evitar contaminaciones. Una vez preparado el sustrato, se prosigue con la
inoculación con la cepa de Pleurotus spp. que se desea cultivar.
Durante la inoculación del sustrato se deben extremar los controles de la
asepsia. La inoculación debe realizarse en una sala completamente
desinfectada y con la mayor cantidad de recaudos posible, preferentemente a
sala cerrada, es decir, sin corrientes de aire; los utensilios a utilizar se deben
desinfectar; se deben usar guantes, barbijo y cofia o similar, junto con ropa
adecuada y limpia.
La tasa de inoculación se establece en aproximadamente el 8 % peso en
peso de semilla respecto del sustrato pasteurizado empleado, es decir
aproximadamente 80 kg de semilla por tonelada de sustrato.
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La Inoculación se efectúa en un recipiente adecuado con capacidad para
contener cómodamente el sustrato. Para realizar la inoculación se carga
sustrato formulado a un recipiente que preferentemente pueda contener
holgadamente de aproximadamente 20 a 22 kg de sustrato, de manera de
poder mezclar en él el contenido de una unidad de inóculo una vez
desgranado.
Se denomina unidad de inóculo al tamaño de presentación entregado
por el laboratorio proveedor cuando se habla de “semilla”, la que generalmente
pesa alrededor de 2,1 kg. Una vez más, es de suma importancia la
homogenización de la mezcla.
A continuación, se realiza el embolsado del sustrato inoculado.
Preferentemente, el embolsado se realiza manualmente por medio de una
palita diseñada para tal fin. Se utilizan bolsas de 20 cm de diámetro de
polietileno de baja densidad de 50 micrones de espesor. Las bolsas llenas
alcanzan una longitud de aproximadamente 70 cm y un peso de
aproximadamente 7,5 kg, lo que determina una densidad de aproximadamente
0,34 g/cm3.
Las bolsas llenas de sustrato son colocadas en pinches. Éstos están
construidos con hierro liso nº 12 a 14 con punta en el extremo superior y con un
apoyo tipo “trípode” situado en el extremo inferior, confeccionados
generalmente con planchuela o hierro liso. Se colocan tres bolsas por pinche y
con un rodillo perforador se procede al perforado de las bolsas en toda su
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superficie e inmediatamente son incubadas en una sala a una temperatura de
aproximadamente 27 ºC durante por lo menos los primeros tres días.
En la siguiente Tabla se esquematizan las actividades llevadas a cabo
durante el proceso en función del tiempo empleado en concretarlas.
Tabla 1
El periodo de incubación puede durar entre 20 a 30 días dependiendo de
las características del sustrato, del tipo y vigor de la cepa, y de las condiciones
ambientales brindadas. Durante el periodo de incubación no es necesaria la
iluminación de la sala pero si deben controlarse la temperatura y la
concentración de CO2 en la misma.
La temperatura optima de crecimiento de estos hongos ronda entre
aproximadamente 25 y 27 ºC. Es importante destacar que este rango de
DÍAS PROCESO ACTIVIDADES
1 2 3 4 5 6 7
Humedecido de la viruta PREFERMENTADO
Aireado de la viruta
TRATAMIENTO
QUIMICO
Interrupción de la pre-fermentación
Agregado de hidróxido de calcio
Escurrido de la viruta
Mezclado de la viruta con el resto de
los componentes secos
ELABORACIÓN E
INOCULACIÓN
Inoculación del sustrato
Embolsado
Pinchado de las bolsas EMBOLSADO
Micro-perforado de las bolsas
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temperatura debe ser logrado en el interior de la bolsa y que ésta, al comienzo
de la incubación, está fría mientras que luego de aproximadamente 8 días
comienza a generarse calor metabólico por el crecimiento propio del
organismo, lo que incrementa a la temperatura interna de la bolsa. Conociendo
esto es que la temperatura de la sala de incubación debe manipularse para
lograr el rango óptimo de temperatura en el interior de la bolsa. Por ejemplo,
preferentemente durante los primeros 4 días de debe mantener entre
aproximadamente 27 y 28 ºC, desde el quinto hasta el décimo segundo día
entre aproximadamente 19 y 22 ºC, y desde aquí en adelante
aproximadamente 25 ºC. Esto varia dependiendo de la intensidad del calor
metabólico generado.
Si bien Pleurotus spp. tiene una extraordinaria capacidad para crecer en
medios con una muy elevada concentración de CO2 atmosférico soportando sin
inconvenientes hasta 20.000 ppm = 2,0 % , en el interior de la bolsa pueden
alcanzarse valores de 500.000 ppm o más si no se permite el intercambio
gaseoso del interior de la bolsa con el medio y no se recambia el aire de la
sala, lo que inhibiría su crecimiento. Generalmente se efectúan de 1 a 2
recambios diarios del volumen total de la sala dependiendo de la cantidad de
sustrato alojado en ella.
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PROTOCOLO
Preparación de un sustrato para el desarrollo de Gírgolas por
pasteurización química.
En la siguiente Tabla 2 se detallan las materias primas y sus cantidades
empleadas:
Tabla 2
COMPONENTE para preparar 2.500 kg de
sustrato húmedo
Cantidad en Kg.
Viruta de álamo 570,0 (67,3 %)
Afrechillo 97,5 (11,5 %)
Harina de maíz 82,5 (9,7 %)
Yeso (sulfato de calcio) 97,9 (11,5 %)
Cal (Hidróxido de calcio) 133,0
Agua 220 lts(1) + 4.446 lts(2)
(1): agua utilizada durante la prefermentación.
(2): agua empleada para preparar la suspensión de cal.
Prefermentación.
Se mezclaron 220 litros de agua con 100 kg de viruta seca de madera de
álamo y se dispusieron en contenedores usados como recipientes de
prefermentación. La viruta fue remojada de manera uniforme hasta lograr una
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humedad cercana al 68 % peso en peso. Una vez humedecida y mezclada la
viruta permaneció en estas condiciones sin más intervenciones durante 24
horas. Luego de este periodo fue removida y aireada buscando favorecer la
activación de los microorganismos presentes y así lograr el aumento de la
temperatura del interior de la pila. Obteniendo una temperatura en la pila
superior a 22 ºC y una diferencia de 10 °C entre el interior de la pila y el
ambiente, luego se efectuó el tratamiento químico.
Tratamiento químico.
Se preparó una suspensión de hidróxido de calcio para agregarla en la
siguiente proporción: 780 litros de suspensión de hidróxido de calcio la 3% por
cada 100 kg de viruta seca en cada recipiente de fermentación.
Para tratar los 570 kg de viruta seca se requirieron 4.446 lts de agua y
133 kg de cal. Una vez que se agregó la suspensión, se homogeneizó la
mezcla y se dejó transcurrir 18 horas.
Mezclado de los componentes secos.
En forma paralela, se pesaron y se mezclaron los componentes secos
del sustrato, afrechillo, harina de maíz y yeso, según las cantidades necesarias
en este caso para la obtención final de 2.500 kg de sustrato, a saber: 97,5 kg
de afrechillo, 82,5 kg de maíz molido y 97,9 kg de yeso.
Elaboración e Inoculación.
Transcurridas 18 horas desde el tratamiento químico, la viruta se
escurrió durante una hora colgada en mallas de media sombra. Durante este
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tiempo el sustrato se alojó en una zona protegida donde las contaminaciones
con otros microorganismos se controlaron al máximo.
Una vez escurrido, el sustrato se depositó en una plataforma
previamente desinfectada, cuyo piso con declive permitió que el escurrido del
sustrato continuara a la espera de ser mezclado con el resto de los
componentes. Luego, se agregaron 49 kg de “mezcla seca” por cada 100 kg de
viruta seca tratada para luego seguir con su inoculación, fraccionamiento y
posterior ingreso a la sala de incubación. Transcurridos aproximadamente 20
días fueron puesto a fructificar bajo las condiciones antes detalladas.
Marco para el análisis de los resultados:
Para la validación de este protocolo se tubieron en cuenta los siguientes
parámetros a analizar:
• Números de bolsas desechadas durante la incubación, ya sea por
problemas de contaminación o por ineficiente invasión del micelio
de Pleurotus spp.
• Eficiencia Biológica (E.B.) general de cada uno de los lotes
tomados estos como repeticiones de unidades experimentales y
medida en: Kg. de hongos frescos brutos / Kg. de materia seca
orgánica del sustrato.
Se establecerá los siguientes valores medio a alcanzar por cada
parámetro:
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<7% de descarte de bolsas
>60 % de Eficiencia Biológica.
Estos valores de referencia fueron establecidos luego del análisis de
distintas fuentes bibliográficas y de la experiencia personal del equipo técnico
que desarrollo el Proyecto.
V. Resultados:
Los siguientes datos fueron recolectados luego de realizar la experiencia
en establecimientos de productores.
PRODUCTOR: Alba Ortiz
ESTABLECIMIENTO: “Las Delicias”
DOMICILIO: Neuquen, San Patricio del Chañar, picada 1.5.
Este establecimiento produce hongos desde enero del 2008. El
productor dispone de una cámara de fructificación de 50 m2 y una sala de
incubación de 20 m2 ambas salas cuentan con el equipamiento necesario para
lograr proporcionar la condiciones ambientales requeridas para el desarrollo del
cultivo. Es decir, cuenta con control de; temperatura (equipo de frío-calor),
humedad (humidificadores), luz (sistema de iluminación) y ventilación
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(extractores) para la remoción del CO2. También cuenta con un galpón en
donde dar condiciones de acopio necesarias para los insumos empleados. Este
establecimiento tiene una capacidad productiva actual de 200 kg/mes y un
potencial que alcanza los 500 kg de hongos mensuales.
DETALLE DE PRODUCCIÓN 2008
Tabla 1:
LOTE*
día/mes/año
MSO**
(Kg.)
Sustrato
Húmedo
(Kg.)
Pn. Bruta
de Hongos
(Kg.)
E.B.
(%)
DESCARTE DE BOLSAS
(%)
181207 205 740 159.750 77.9 4.2
210108 178 632 109.770 61.6 5.3
200208 247 882 197.300 79.8 7.0
300408 300 1067 216.950 72,3 6.0
230708 447 1613 256.860 57,3 4.3
250908 440 1588 263.210 59.8 6.0
* Corresponde a la fecha de inoculación del sustrato
** MSO: Materia Seca Orgánica.
PRODUCTOR: Lusa Brandt
ESTABLECIMIENTO: “Mujeres de Campo”
DOMICILIO: Río Negro, General Roca, Bº Chacra Monte, Las Araucarias 4455
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Este establecimiento produce hongos desde enero del 2009. El
productor dispone de una cámara de fructificación de 20 m2 y una sala de
incubación de 12 m2 ambas salas cuentan con el equipamiento necesario para
lograr proporcionar la condiciones ambientales requeridas para el desarrollo del
cultivo. Es decir, cuenta con control de; temperatura (equipo de frío-calor),
humedad (humidificadores), luz (sistema de iluminación) y ventilación
(extractores) para la remoción del CO2. Este establecimiento tiene una
capacidad productiva actual de 110 kg/mes y un potencial que alcanza los 350
kg de hongos mensuales.
DETALLE DE PRODUCCIÓN 2009
Tabla 1:
LOTE*
día/mes/año
MSO**
(Kg.)
Sustrato
Húmedo
(Kg.)
Pn. Bruta
de hongos
(Kg.)
E.B.
(%)
DESCARTE DE BOLSAS
(%)
260109 221 796 139 62.8 7.0
130309 227 809 141 62.1 4.9
Total
* Corresponde a la fecha de inoculación del sustrato
** MSO: Materia Seca Orgánica.
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