UNIVERSIDAD TÉCNICA DE MACHALA
UNIDAD ACADÉMICA DE CIENCIAS QUÍMICAS Y DE LA SALUD
CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA
LABORATORIO DE TOXICOLOGÍA
Alumno: Gisella Denisse López Tinoco
Curso: Quinto Bioquimica y Farmacia Paralelo: "B"
Profesor: Bioq. Farm. Carlos García
Grupo N°1
Fecha de Elaboración de la Práctica: Martes 30 de junio del 2015
Fecha de Presentación de la Práctica: Martes 14 de julio del 2015
PRÁCTICA N° 5
TÍTULO DE LA PRÁCTICA:
INTOXICACIÓN POR CETONA
- Animal de Experimentación: Rata wistar.
- Tóxico: acetona
- Vía de Administración: Vía Intraperitoneal
- Volumen suministrado: 10 ml
TIEMPOS
- Inicio de la práctica: 08:08 am
- Deceso del animal: 08:26 am
- Diseccion del animal: 8:30 am
- Final de la práctica: 10:30 am
SINTOMAS
- Vomito - Convulsiones - Vértigo - Cefaleas - Nauseas
TODO ES TOXICO, NADA ES TOXICO, TODO DEPENDE DE LA DOSIS 1
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OBJETIVOS:
1. Observar las manifestaciones que presenta la rata Wistar ante la intoxicación por
acetona.
2. Controlar el tiempo en que actúa la acetona en el animal de experimentación.
3. Reconocer en medios biológicos la presencia de acetona.
MATERIALES:
o Jeringa de 10 cc
o Varilla
o Espátula
o Probeta
o Campana
o Panema
o Papel filtro
o Embudo
o Fosforo
o Pinzas
o Cocineta
o Porta tubo
o Tabla de disección
o Cronómetro
o Perlas de vidrio.
o Equipo de disección
o Bisturí
o Vasos de precipitación 200 y
500 ml.
o Equipo de destilación.
o Tubos de ensayo
o Pipetas
o Guantes de látex
o Mascarilla
o Mandil
o Gorro
o Zapatones
SUSTANCIAS:
- Yodo mercúrico - Yodo yodurada - Hidróxido de potasio - Carbonato de sodio o hidróxido de
sodio - Ácido clorhídrico concentrado5% - Ramnosa (lactosa)
EQUIPO:
Balanza analitica
Equipo de destilacion
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PROCEDIMIENTO:
1. Preparar el mesón de trabajo y con ello materiales y sustancias, además de
implementos de bioseguridad.
2. Preparar la solución de acetona, colocar en una jeringuilla.
3. Administrar 8 ml de solución de formaldehido por vía intraperitoneal al animal de
experimentación
4. Colocarlo en la panema y observar las manifestaciones antes de su deceso..
5. Atar el cobayo a una tabla de disección y procedemos a rasurarle toda la parte
abdominal donde se hará la incisión.
6. Seguido abrir el abdomen para colocar las vísceras en un vaso de precipitación,
recogiendo todo.
7. Preparar la solución de ácido tartárico en agua destilada y agregar las vísceras.
8. Agregar las 50 perlas de vidrio, y llevar a destilación por 20 minutos a fuego lento.
9. Una vez finalizada la destilación, realizar las reacciones de identificación con la
solución madre.
10. Desarmar y lavar el equipo de destilación.
REACCIONES DE RECONOCIMIENTO:
Después de destilar el material de investigación, en el destilado se
realizan las reacciones de reconocimiento.
1. Reacción de Nessler.- La acetona reacciona con el reactivo yodo-mercúrico en
medio alcalino un precipitado blanco, formado por un producto de adición.
2. Reacción de Yodoformo.- Al calentar una pequeña cantidad de la muestra
con una solución yodo-yodurada en medio alcalino con KOH se produce
yodoformo reconocible por su olor particular y su color amarillo.
I2 + 2KOH INA + IOK + H2O
CI3
CH3 CI3
CO + 3IOK CO + 3KOH
CH3 CH3
CO + KOH CHI3 + CH3-COOK
CH3
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3. Con nitroprusiato de Sodio.- Con este reactivo, al que se le añade solución de
carbonato de sodio o NaOH, orina una coloración amarilla-rojiza que al agregarle
ácido acético, dará un color violeta.
4. Reacción de Fritsh.- Se mezcla la solución problema con un volumen igual de
ácido clorhídrico concentrado que contiene 5% de ramnosa, se calienta en baño
de vapor. Aparece un color rojo, apreciable aún en concentración de 0.01 g de
acetona por ml de solución.
5. Reacción de Frommer.- La muestra problema, al ser condensada con
aldehído salicílico en medio alcalino, produce un color rojo que permite su
determinación colorimétrica o fotométrica por su gran sensibilidad y
especificidad.
6. Con la 2:4 Dinitrofenilhidracina: Disuelva una ó dos gotas del compuesto
que se va investigar en 2 ml de etanol y añada a 3ml del reactivo de 2,4-
dinitrofenilhidracina. Agite vigorosamente y si no se forma inmediatamente Un
precipitado de color amarillo, anaranjado o rojo, deje reposar la solución
durante 15 minutos.
Reactivo. El reactivo se prepara disolviendo 3 g de 2,4-dinitrofenilhidracina en 15
ml de ácido sulfúrico concentrado. Entonces se añade esta solución, a 20 ml de agua
destilada y 70 ml de etanol al 95%. Se mezcla perfectamente la solución y se filtra.
Comentarios: La mayoría de las cetonas producen dinitrofelhidrazonas que son
sólidos insolubles. Al principio, el precipitado puede ser aceitoso y al reposar,
volverse cristalino. Sin embargo, algunas cetonas dan dinitrofenilhidrazonas que son
aceites.
GRÁFICOS:
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1 Preparar la rata wistar 2 inyectar 10 ml de acetona
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7 destilar gota a gota 8 Solución madre
5 colocar las vísceras en un vaso 6 cortar lo más
3 observar sintomatología 4 realizar disección
GRÁFICOS DE REACCIONES DE RECONOCIMIENTO EN EL DESTILADO
REACCIÓN DE NESSLER
Reacción positivo no característico (formación de precipitado blanco)
nos dio un precipitado naranja
REACCIÓN DE YODOFORMO
Reacción positivo característico (se produce yodoformo
reconocible por su olor particular y su color amarillo.)
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DESPUÉS ANTES
DESPUÉS ANTES
CON NITROPRUSIATO DE SODIO:
Reacción positivo característico (coloración violeta al agregar acido)
REACCIÓN DE FRITSH:
Reacción positivo no característico (aparición de color rojo)
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DESPUÉS
DESPUÉS ANTES
ANTES
REACCIÓN DE FROMMER:
Reacción positivo no característico (formación de coloración rojiza)
CON LA 2:4 DINITROFENILHIDRACINA
Reacción positivo característico (color amarillo)
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DESPUÉS
ANTES
DESPUÉS ANTES
OBSERVACIONES:
Se observó la presencia de convulsiones en el animal de experimentación.
Así también dificultad en respirar y cefaleas
Al realizar la disección de la rata se observó inflamación de los intestinos.
CONCLUSIÓN
Se concluye manifestando que se logró cumplir los objetivos de esta práctica, es decir se observó las manifestaciones que presenta la rata wistar ante la intoxicación por acetona, se controló el tiempo en el cual se dio el deceso del animal siendo rapida lo que nos da a entender que es altamente toxico, se determinó que la cetona está presente en las vísceras del animal y la cual fue causante de su muerte mediante reconocimiento en medios biológicos.
RECOMENDACIONES
La acetona es un toxico volátil, por ello se recomienda usar implementos de
bioseguridad.
Tener cuidado con las sustancias de uso restringido o peligroso, para evitar
accidentes en el laboratorio.
Preparar correctamente las soluciones en las concentraciones indicadas.
Se debe desechar los restos de la rata en su correcto lugar para evitar daños a la
sociedad.
GLOSARIO:
Anestésico: son fármacos universalmente utilizados por multitud de profesionales
de salud(anestesiólogos, cirujanos, enfermeros, odontólogos, podólogos,
dermatólogos, internistas, médicos veterinarios,etc.) a diario que, a
concentraciones suficientes, evitan temporalmente la sensibilidad en el lugar del
cuerpo de su administración.
Fosfogeno: el fosgeno es un gas venenoso. Si es enfriado y presurizado, el gas de
fosgeno puede ser convertido en líquido, de forma que pueda ser transportado y
almacenado. Cuando se libera fosgeno líquido, éste se transforma rápidamente en
gas que permanece cerca del suelo y se propaga con rapidez (es más denso que el
aire y por esa razón se expande hacia áreas más bajas). Al fosgeno también se le
conoce por su denominación militar.
Hipoxia: es un estado en el cual el cuerpo completo (hipoxia generalizada), o una
región del cuerpo (hipoxia de piel loca), se ven privado del suministro adecuado de
oxígeno.
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CUESTIONARIO: ¿Qué es la acetona? La acetona o cuerpos cetónicos son sustancias creadas por el hígado cuando la glucosa se encuentra en niveles muy bajos y que a grandes dosis resultan tóxicas. El organismo halla en ellas una fuente alternativa de energía hasta que los niveles de azúcares vuelven a la normalidad.
¿Cómo se reconoce en el niño? El aliento de un niño con acetona tiene un olor particular a manzanas ácidas, tipo reineta, especialmente a primera hora de la mañana. A veces el niño con acetona también se encuentra muy cansado y vomita. Si no estás segura, lo mejor es que utilices unas tiras reactivas que se venden en las farmacias sin receta médica, que te confirmarán o no la presencia de acetona en su orina. ¿Por qué se produce la acetona? Porque las necesidades de glucosa del niño son entre dos y cuatro veces superiores a las de un adulto, mientras que sus reservas son mucho más limitadas. Así, sucede que ante largos periodos de ayuno, provocados por algún trastorno digestivo, por alguna molestia que le impida comer con normalidad o por una infección, el niño es capaz de generar azúcar a través de las grasas (y las grasas generan acetona) para que su organismo tenga suficiente energía y pueda hacer frente a una posible crisis de hipoglucemia o bajada del azúcar en sangre. ¿Cómo puedo tratar la acetona del niño en casa? Ofrece al niño bebidas azucaradas (agua con azúcar, zumos...) o un refresco de cola, si tiene edad para tomarlo. Si lo tolera bien, dale un yogur con azúcar o unas galletas, para mantener los niveles de glucosa hasta la siguiente comida. No des al niño agua con bicarbonato o leche condensada, estos remedios tradicionales no le ayudarán a dejar de producir acetona. ¿Qué hago si no para de vomitar? Ésta es una situación muy común en niños con acetona, porque a partir de ciertos niveles, los cuerpos cetónicos provocan vómitos por sí solos. Estos vómitos impiden que el niño coma o beba y, por tanto, termine con la situación de ayuno, que es la causante del aumento de acetona. La solución es ofrecerle el zumo en pequeñas dosis, cucharaditas de entre 5 y 15 cc cada 5-10 minutos, para evitar que cantidades mayores provoquen vómitos y la situación empeore.
BIBLIOGRAFÍA:
Matute, M. cloroformo disponible en emergencias urbanas y rurales
emergency.cdc.gov/agent/cyanide/basics/espanol/facts.asp.
Pinta, H Intoxicación por cloroformo disponible en :
historico.medicosypacientes.com/noticias/2008/11/08_11_2 cloroformo
Gisella Denisse López Tinoco Estudiante
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ANEXOS
Fig.1. DATOS OBTENIDOS CON EL MONITOREO D E LA RATA Y LOS ANALISIS
COLORIMÉTRICOS.
Fig.2. INTEGRANTES DEL GRUPO
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MI INVESTIGACION:
¿Cuáles pueden ser los efectos de la acetona en la salud?
La acetona se encuentra presente normalmente a niveles bajos en el cuerpo debido a la
degradación de la grasa. El cuerpo utiliza la acetona en procesos normales del cuerpo para
producir azúcar y grasas que generan energía para realizar las funciones normales del cuerpo.
Muchas situaciones pueden hacer que en el cuerpo estén presentes cantidades más altas que el
promedio. Por ejemplo, los bebés, las mujeres embarazadas, los diabéticos y las personas que
hacen ejercicio, dietas, sufren un trauma físico o beben alcohol pueden tener cantidades más
altas de acetona en el cuerpo. Generalmente, estas mayores cantidades de acetona no causan
problemas. Además, la acetona puede prevenir las convulsiones.
La mayor parte de la información sobre la forma en que la acetona afecta a la salud humana
proviene de exámenes médicos realizados a los trabajadores durante un solo día laboral; de
experimentos de laboratorio realizados en seres humanos expuestos a la acetona en el aire
durante unos cuantos días; y de los casos de personas que han ingerido pegamento a base de
acetona o removedor de esmalte de uñas.
Los trabajadores y las personas expuestas a la acetona en el laboratorio se quejaron de que la
acetona les irritaba la nariz, la garganta, los pulmones y los ojos. Algunas personas sienten esta
irritación a niveles de 100 ppm de acetona en el aire y más personas sienten irritación a medida
que aumentan los niveles de esta sustancia en el aire. Los trabajadores que se quejaron de
irritación estuvieron expuestos a niveles de 900 ppm o mayores. Los trabajadores expuestos a la
acetona a niveles de 12,000 ppm o mayores también se quejaron de dolor de cabeza, vértigo,
mareo, inestabilidad y confusión dependiendo del tiempo al que estuvieron expuestos (de 2
minutos a 4 horas). Dos trabajadores expuestos durante 4 horas perdieron el conocimiento.
Además, algunas personas a quienes les colocaron yesos con acetona estuvieron expuestos a la
acetona que se evaporó al aire durante y después de la colocación del yeso. A estos pacientes les
dio náuseas, vomitaron sangre y perdieron el conocimiento. Estos casos ocurrieron hace
muchos años. Los hospitales modernos utilizan métodos diferentes que no utilizan acetona para
la colocación de yesos. Algunas personas expuestas en el laboratorio a concentraciones
aproximadas de 250 ppm en el aire durante varias horas sufrieron dolor de cabeza y pérdida de
energía y también algunos efectos leves en el comportamiento. Estos efectos se reflejaron en las
pruebas que determinan qué cantidad de tiempo toma para reaccionar a estímulos visuales o la
capacidad de escuchar diferentes sonidos. Algunas personas expuestas a concentraciones de
500 ppm en el aire durante varias horas en el laboratorio sufrieron efectos en la sangre, pero
otros estudios no mostraron efectos en la sangre aún a exposiciones a niveles más altos.
Algunas mujeres expuestas a concentraciones de 1,000 ppm durante aproximadamente 8 horas
en el laboratorio dijeron que les llegó el período antes de lo esperado. Por lo general, los
trabajadores ya no están expuestos a niveles mayores de 750 ppm debido a las regulaciones
actuales del gobierno.
Las personas que ingirieron acetona o sustancias que contenían acetona perdieron el
conocimiento, pero se recuperaron en el hospital. No siempre se supo la cantidad de acetona
que estas personas ingirieron, pero un hombre ingirió aproximadamente 2,250 miligramos de
acetona pura por kilogramo de peso corporal (2,250 mg/kg). Además de perder el
conocimiento, esta persona sufrió daño de los tejidos de la boca y más adelante sufrió de cojera,
la cual finalmente superó y también mostró síntomas similares a la diabetes (sed excesiva,
micción frecuente). La cantidad de acetona en el agua o en los alimentos nunca sería lo
suficientemente alta como para causar estos efectos, pero en las personas, especialmente los
niños, la ingestión accidental de suficientes cantidades de acetona de los removedores de
esmalte de uñas o de algunos limpiadores podría causar estos efectos de salud.
En una experimento de laboratorio, las personas a quienes se les aplicó acetona líquida
directamente en la piel y se les dejó la sustancia puesta durante media hora sufrieron irritación
de la piel. Al observarse la piel a través de un microscopio se vio que algunas de las células de la
piel habían resultado dañadas.
El Departamento de Salud y Servicios Humanos ha determinado que el cloruro de vinilo es una
sustancia reconocida como carcinogénica. La Agencia Internacional para la Investigación del
Cáncer y la EPA han determinado que el cloruro de vinilo es carcinogénico en seres humanos.
Los animales expuestos brevemente a niveles altos de acetona en el aire también sufrieron
irritación de los pulmones y perdieron el conocimiento. Algunos murieron. La exposición a
bajos niveles durante períodos cortos de tiempo también afectó el comportamiento de los
animales. Las hembras de los animales embarazadas que estuvieron expuestas a niveles altos de
acetona en el aire tuvieron hígados de mayor volumen que lo normal y un menor número de
fetos. Los fetos pesaron menos que lo normal y sufrieron retraso en el desarrollo de los huesos.
No sabemos si la exposición a la acetona en el aire durante períodos mayores a 2 semanas afecta
a los animales.
A los animales que se les dieron grandes cantidades de acetona para ingerir o tomar durante
períodos cortos de tiempo sufrieron hipoplasia de la médula ósea (reducción en la producción
de nuevas células), degeneración de los riñones, aumento del peso del hígado a niveles mayores
que los normales, aumento del tamaño de las células del hígado, colapso y apatía. Las ratonas
embarazadas que ingirieron acetona tuvieron pesos corporales más bajos y produjeron menor
cantidad de crías. Las crías recién nacidas de las ratonas que habían ingerido acetona murieron
en un número mayor que las crías recién nacidas de las ratonas a las que no se les dio acetona.
Los ratones macho que ingirieron o tomaron aún cantidades pequeñas de acetona durante
períodos más largos de tiempo contrajeron anemia y enfermedad de los riñones. Las ratas
hembra no tuvieron anemia, pero contrajeron enfermedad de los riñones cuando ingirieron una
cantidad mucho mayor de acetona que las ratas macho. Las ratas hembra tuvieron hígados y
riñones que pesaron más que lo normal. Lo mismo ocurrió con las ratas macho, pero solamente
cuando ingirieron cantidades mayores de acetona que las ingeridas por las ratas hembra. Las
ratas macho también tuvieron espermatozoides anormales. Las ratas hembra no sufrieron
ningún efecto en sus órganos reproductivos. Las ratas también mostraron signos de que la
acetona causó efectos en el sistema nervioso.
La acetona irrita la piel de los animales cuando se coloca directamente en la piel y causa ardor
en los ojos cuando se coloca en los ojos. Un tipo de animal (las cobayas) hasta contrajo cataratas
en los ojos cuando se le colocó acetona en la piel.
No sabemos si muchos de los efectos observados en los animales podrían ocurrir en los seres
humanos. Las personas expuestas a la acetona no fueron examinadas para determinar algunos
de los efectos producidos ni para determinar la presencia de efectos que sólo pueden
descubrirse observando los órganos internos a través de un microscopio. Los hallazgos en
animales demuestran que las ratas macho tienen mayor probabilidad que las ratas hembra de
contraer enfermedad sanguínea y de los riñones y de sufrir efectos en los órganos reproductivos
después de la exposición a la acetona. Esto parece indicar que los hombres podrían tener mayor
probabilidad de sufrir los efectos de la exposición a la acetona que las mujeres.
Un efecto de la acetona observado en los animales es un aumento en la cantidad de ciertas
enzimas (sustancias químicas en el cuerpo que ayudan a degradar las sustancias naturales en el
cuerpo y las sustancias químicas que entran al mismo). El aumento en el número de estas
enzimas causado por la exposición a la acetona puede hacer que algunas sustancias químicas
sean más perjudiciales. Esta es una razón por la cual las personas deberían preocuparse por la
exposición a la acetona. La exposición a mezclas de sustancias químicas es muy probable en el
medio ambiente, en lugares cercanos a los sitios de desechos peligrosos y en el lugar de trabajo.
La acetona no causa cáncer de piel en los animales cuando se aplica en la piel. No sabemos si la
acetona podría causar cáncer después de respirarla o ingerirla durante períodos largos de
tiempo porque no se han hecho pruebas para determinar si esto ocurre. El Departamento de
Salud y Servicios Humanos y la Agencia Internacional para la Investigación del Cáncer no han
clasificado la acetona según sus efectos carcinógenos. La EPA ha determinado que la acetona no
se clasifica como un carcinógeno en los seres humanos.
BIBLIOGRAFÍA
1. Baskin SI, Horowitz AM, Nealley EW: The antidotal action of sodium nitrite and sodium
thiosulfate against cyanide poisoning. J Clin Pharmacol 32:368-375, 1992.
2. Berlin CM: The treatment of cyanide poisoning in children. Pediatrics 46:793-796, 1976
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