7/24/2019 Acquity H-class Bio System Guide Ra Es
1/98
Gua del Sistema biolgico
ACQUITY UPLC H-ClassRevisin
A
Copyright Waters Corporation 2010Todos los derechos reservados
7/24/2019 Acquity H-class Bio System Guide Ra Es
2/98
ii
Informacin sobre los derechos de autor (copyright)
2010 WATERS CORPORATION. IMPRESO EN LOS ESTADOS UNIDOSDE AMRICA Y EN IRLANDA. RESERVADOS TODOS LOS DERECHOS.QUEDA TERMINANTEMENTE PROHIBIDA LA REPRODUCCIN TOTALO PARCIAL DE ESTE DOCUMENTO POR PROCEDIMIENTO ALGUNOSIN EL CONSENTIMIENTO EXPRESO DEL EDITOR.
La informacin que aparece en este documento est sujeta a modificacionessin previo aviso y no debe interpretarse como un compromiso contractual por
parte de Waters Corporation. Waters Corporation no asume responsabilidadalguna por ningn error que pudiera aparecer en este documento. En elmomento de su publicacin, se considera que este manual es exacto y estcompleto. Waters Corporation no ser en ningn caso responsable de los daosaccidentales o indirectos relacionados con el uso de este documento oderivados de ste.
Marcas comercialesACQUITY, ACQUITY UPLC, UPLC y Waters son marcas registradas deWaters Corporation. AutoBlend Plus, eCord, Empower, i2Valve, LAC/E,MassLynx y THE SCIENCE OF WHATS POSSIBLE. son marcascomerciales de Waters Corporation.
MP35N es una marca registrada de Hamilton Precision Metals.PEEK es una marca comercial de Victrex Corporation.
TRITON es una marca comercial de Union Carbide Corporation.
TWEEN es una marca comercial de ICI Americas, Inc.
Otras marcas registradas o comerciales pertenecen exclusivamente a susrespectivos propietarios.
7/24/2019 Acquity H-class Bio System Guide Ra Es
3/98
iii
Comentarios del cliente
El departamento de Comunicaciones del Servicio Tcnico de Waters agradecela comunicacin de cualquier error que se detecte en este documento, as comolas sugerencias para mejorarlo. Su ayuda para conocer mejor lo que se esperaencontrar en la documentacin nos permite mejorar de manera continua suexactitud y utilidad.
Tenemos muy en cuenta los comentarios enviados por nuestros clientes. Paraponerse en contacto con nosotros, enviar un mensaje a
Contacto con Waters
Contactar con Waterspara presentar solicitudes de mejora o preguntastcnicas relativas al uso, el transporte, la retirada o la eliminacin de
cualquier producto de Waters. El contacto puede hacerse a travs de Internet,telfono o correo convencional.
Informacin de contacto de Waters:
Medio de contacto Informacin
Internet El sitio web de Waters incluye informacin decontacto de las filiales internacionales de
Waters. Visitar www.waters.com.Telfono y fax Desde EE. UU. o Canad, llamar al 800
252-HPLC o enviar un fax al 508 8721990.Desde otros pases, consultar los nmeros detelfono y fax de las filiales internacionales enel sitio web de Waters.
Correo convencional Waters Corporation34 Maple StreetMilford, MA 01757EE.UU.
7/24/2019 Acquity H-class Bio System Guide Ra Es
4/98
iv
Consideraciones de seguridad
Algunos de los reactivos y las muestras que se utilizan con los instrumentos ydispositivos de Waters pueden suponer un peligro radiolgico, biolgico oqumico. Se deben conocer los efectos potencialmente peligrosos de todas lassustancias con las que se trabaja. Hay que seguir siempre las buenas prcticasde laboratorio y consultar las recomendaciones del responsable de seguridadde la organizacin.
Consideraciones especficas para el Sistema biolgico ACQUITYUPLC H-Class
Peligro de alto voltaje
Consejos de seguridad
Consultar elApndice Apara ver una lista completa de advertencias yprecauciones.
Advertencia:
Para evitar descargas elctricas, se recomienda no retirar los paneles
protectores del espectrmetro de masas. Estos paneles no cubrenningn componente que el usuario deba manipular. Para evitar una descarga elctrica no mortal cuando el instrumento
se encuentra en modo Operate (Funcionamiento), no tocar las reasmarcadas con el smbolo de advertencia de alto voltaje. Para tocardichas reas hay que pasar antes al modo Standby (En espera) delinstrumento.
7/24/2019 Acquity H-class Bio System Guide Ra Es
5/98
v
Funcionamiento de este Sistema biolgico ACQUITYUPLC H-Class
Al utilizar este Sistema biolgico ACQUITY UPLCH-Class, se deben seguirlos procedimientos de control de calidad (QC) estndar y las directrices que seindican en esta seccin.
Smbolos aplicables
Destinatarios y finalidad
La presente gua est dirigida al personal encargado de la instalacin,funcionamiento y mantenimiento de los instrumentos del Sistema biolgico
ACQUITY UPLC H-Class. Ofrece una descripcin general de la tecnologa y elfuncionamiento del sistema.
Smbolo Definicin
Fabricante
Representante autorizado en la ComunidadEuropea
Garantiza que un producto fabricado cumple contodas las directivas aplicables de la ComunidadEuropea.
Marca C de cumplimiento de CEM de Australia.
Confirma que un producto fabricado cumple con
todos los requisitos de seguridad estadounidensesy canadienses.
Consultar las instrucciones de uso.
7/24/2019 Acquity H-class Bio System Guide Ra Es
6/98
vi
Uso previsto del Sistema biolgico ACQUITY UPLC H-Class
El Sistema biolgico ACQUITY UPLC H-Class de Waters es para uso
exclusivo en investigacin y no est concebido para utilizarse en aplicacionesde diagnstico.
Calibracin
Para calibrar los sistemas de cromatografa lquida (LC), se deben seguirmtodos de calibracin adecuados y utilizar por lo menos cinco estndarespara generar una curva estndar. El intervalo de concentraciones de los
estndares debe incluir la gama completa de muestras de control de calidad,muestras habituales y muestras atpicas.
Para calibrar los espectrmetros de masas, se debe consultar la seccin decalibracin de la gua de funcionamiento del instrumento que se deseacalibrar. En los casos en los que el mdulo no vaya acompaado de una gua defuncionamiento, sino de una gua de mantenimiento y descripcin general,consultar las instrucciones de calibracin en la Ayuda en lnea del mdulo.
Control de calidad
Se recomienda analizar de forma sistemtica tres muestras de QC querepresenten los niveles por debajo de lo normal, normal y por encima de lonormal de un compuesto. Los resultados del anlisis de estas muestras debenencontrarse dentro de unos lmites aceptables y se debe evaluar la precisin
entre un da y otro, y entre un anlisis y otro. Es posible que los datosobtenidos cuando las muestras de QC estn fuera de los lmites no seanvlidos. Dichos datos no se deben incluir en un informe hasta asegurarse deque el instrumento funciona satisfactoriamente.
Clasificacin ISM
Clasificacin ISM: ISM Grupo 1, Clase B
Esta clasificacin se asigna segn la CISPR 11, que contiene los requisitos delos instrumentos industriales cientficos y mdicos (ISM). Los productos delGrupo 1 contienen energa de radiofrecuencia acoplada conductivamente,generada o utilizada de forma intencionada, necesaria para el funcionamientointerno del propio equipo. Los productos de Clase B se pueden utilizar tanto
en instalaciones comerciales como residenciales, y se pueden conectardirectamente a la red de suministro elctrico de bajo voltaje.
7/24/2019 Acquity H-class Bio System Guide Ra Es
7/98
vii
Representante autorizado en la CE
Waters Corporation (Micromass UK Ltd.)Floats RoadWythenshaweManchester M23 9LZReino Unido
Telfono: +44-161-946-2400
Fax: +44-161-946-2480
Contacto: Gerente de calidad
7/24/2019 Acquity H-class Bio System Guide Ra Es
8/98
viii
7/24/2019 Acquity H-class Bio System Guide Ra Es
9/98
Contenido ix
Informacin sobre los derechos de autor (copyright) .................................. ii
Marcas comerciales .............................................................................................. ii
Comentarios del cliente ...................................................................................... iii
Contacto con Waters ........................................................................................... iii
Consideraciones de seguridad .......................................................................... iv
Consideraciones especficas para el Sistema biolgicoACQUITY UPLC H-Class ............................................................................ iv
Consejos de seguridad ........................................................................................ iv
Funcionamiento de este Sistema biolgico ACQUITY UPLC H-Class ...... vSmbolos aplicables .............................................................................................. vDestinatarios y finalidad..................................................................................... vUso previsto del Sistema biolgico ACQUITY UPLC H-Class......................... viCalibracin .......................................................................................................... viControl de calidad ............................................................................................... vi
Clasificacin ISM ................................................................................................. vi
Clasificacin ISM: ISM Grupo 1, Clase B.......................................................... vi
Representante autorizado en la CE ................................................................ vii
1 Sistema biolgico ACQUITY UPLC H-Class ..................................... 1-1
Cromatografa lquida UltraPerformance .................................................. 1-1
Caractersticas del Sistema biolgico ACQUITY UPLC H-Class ........... 1-3
Inyector de flujo a travs de aguja.................................................................. 1-5Eluyente de lavado........................................................................................... 1-5Eluyente de purga............................................................................................ 1-6Acondicionamiento del eluyente activo........................................................... 1-6Mejoras de software......................................................................................... 1-6
Contenido
7/24/2019 Acquity H-class Bio System Guide Ra Es
10/98
x Contenido
Componentes del sistema ................................................................................ 1-9
Tecnologa de la columna .............................................................................. 1-11Para obtener ms informacin ...................................................................... 1-12
2 Optimizar el funcionamiento .............................................................. 2-1
Directrices generales ....................................................................................... 2-1
Calculadora de columnas ACQUITY UPLC ................................................ 2-4
Dispersin ........................................................................................................... 2-5
Arrastre ............................................................................................................... 2-5
Precisin y exactitud ....................................................................................... 2-6
Tiempo de los ciclos (entre inyecciones) ..................................................... 2-6
Evitar fugas ........................................................................................................ 2-7
Preparacin de las muestras .......................................................................... 2-7Partculas ......................................................................................................... 2-7Diluyentes de muestras compatibles .............................................................. 2-7
3 Preparar el sistema ............................................................................... 3-1
Preparar el hardware del sistema ................................................................ 3-1
Encender el sistema......................................................................................... 3-1Supervisin de las pruebas iniciales............................................................... 3-2Supervisar los indicadores LED de los mdulos del sistema......................... 3-2Indicador LED de encendido ........................................................................... 3-2Indicadores LED de estado.............................................................................. 3-3Activar los sensores de fugas .......................................................................... 3-4Puesta en marcha del sistema ........................................................................ 3-5
Configurar el software de datos cromatogrficos ..................................... 3-8
Paneles de control ACQUITY ......................................................................... 3-8
Panel de control del bioQSM........................................................................... 3-8Panel de control del bioSM-FTN................................................................... 3-11Panel de control del Detector de absorbancia programable (UV variable). 3-13
Puesta en marcha de la Consola ACQUITY UPLC .................................. 3-15
7/24/2019 Acquity H-class Bio System Guide Ra Es
11/98
Contenido xi
A Consejos de seguridad ......................................................................... A-1
Smbolos de advertencia ................................................................................. A-2
Advertencias de peligro asociadas con tareas especficas.............................. A-2Advertencias especficas.................................................................................. A-3
Smbolo de precaucin .................................................................................... A-6
Advertencias que se aplican a todos los instrumentos de Waters ......... A-6
Smbolos elctricos y de manejo .................................................................... A-7
Smbolos elctricos........................................................................................... A-7Smbolos de manejo ......................................................................................... A-8
B Conexiones externas ............................................................................ B-1
Conexiones de los tubos del sistema ........................................................... B-1
Conexiones de los cables externos del instrumento ................................ B-3
Conexiones de los cables externos del instrumento del Sistema biolgicoACQUITY UPLC H-Class ......................................................................... B-3
Conexiones Ethernet ....................................................................................... B-4Conexiones del horno de columnas ................................................................. B-4
Conexiones de la trayectoria del flujo para los compartimentosde columnas ................................................................................................ B-5
Conexiones de seales .................................................................................... B-7
Realizar las conexiones de seales.................................................................. B-7
Conectar a la fuente de alimentacin ....................................................... B-12
C Consideraciones generales sobre los eluyentes ............................ C-1
Introduccin ...................................................................................................... C-2Prevenir la contaminacin............................................................................... C-2Eluyentes limpios............................................................................................. C-2Calidad de los eluyentes.................................................................................. C-2Preparacin de los eluyentes........................................................................... C-2Agua.................................................................................................................. C-2
7/24/2019 Acquity H-class Bio System Guide Ra Es
12/98
xii Contenido
Recomendaciones sobre los eluyentes ........................................................ C-3
Directrices generales sobre los eluyentes ....................................................... C-4Eluyentes no permitidos.................................................................................. C-6
Recomendaciones para el Sistema biolgico ACQUITY UPLC H-Class....... C-7Recomendaciones para el bioQSM .................................................................. C-8Recomendaciones para el bioSM-FTN ............................................................ C-8Recomendaciones sobre el detector................................................................. C-9
Propiedades comunes de los eluyentes ...................................................... C-9
Miscibilidad de los eluyentes ...................................................................... C-11Utilizacin de los valores de miscibilidad (nmeros-M) .............................. C-12
Estabilizadores de eluyentes ....................................................................... C-13
Viscosidad de los eluyentes ......................................................................... C-13
Seleccin de la longitud de onda ................................................................ C-14
Valores de corte de UV para eluyentes comunes ......................................... C-14Fases mviles mezcladas ............................................................................... C-14Absorbancia de la fase mvil......................................................................... C-15
Index ..................................................................................................... Index-1
7/24/2019 Acquity H-class Bio System Guide Ra Es
13/98
Cromatografa lquida UltraPerformance 1-1
1 Sistema biolgico ACQUITYUPLC H-Class
Cromatografa lquida UltraPerformance
En 2004, Watersrealiz avances significativos en el diseo de instrumentos ycolumnas con el fin de introducir la tecnologa UPLCen el campo de laciencia de separaciones. Gracias al uso de esta tecnologa, los Sistemas
ACQUITY UPLCde Waters logran aumentar notablemente la resolucin, la
velocidad y la sensibilidad en aplicaciones de cromatografa lquida, encomparacin con los sistemas convencionales.
La cromatografa lquida UltraPerformance emplea columnas con rellenos departculas redondeadas de 1.7m de dimetro y presiones de funcionamientomximas de 103 421 kPa (1 034 bar, 15 000 psi). La ecuacin de van Deemter,una frmula emprica que describe la relacin entre la velocidad lineal y laeficacia de la columna, considera el tamao de las partculas como una de las
variables. As, la ecuacin se puede utilizar para caracterizar el rendimientoterico a lo largo de un rango de tamaos de partcula.
Contenido:
Tema Pgina
Cromatografa lquida UltraPerformance 1-1
Caractersticas del Sistema biolgico ACQUITY UPLC H-Class 1-3
Componentes del sistema 1-9
7/24/2019 Acquity H-class Bio System Guide Ra Es
14/98
1-2 Sistema biolgico ACQUITY UPLC H-Class
Historia del tamao de las partculas en la cromatografa lquida:
Resulta evidente, a partir de la figura anterior, que la utilizacin de partculasde 1.7 m proporciona una mayor eficacia que conduce a incrementos decaudal (un HEPT menor indica una mayor eficacia). Cuando se trabaja en esterea del grfico, la capacidad del pico y la velocidad de una separacin puede
establecer lmites por encima de los de la tecnologa HPLC convencional.Waters ha definido este nuevo nivel de rendimiento como cromatografaUltraPerformance.
Tecnologa HPLC existente Intervalo de funcionamientode la tecnologa UPLC
Mejor combinacin de eficacia
y velocidad
Velocidad lineal [U, mm/s]
Partculas de 10 m(1970)
Partculas de 5 m(1980)
Partculas de 2.5 m(2000) Partculas de 1.7 m
(2004)
30
HETP
[m]
26
22
18
14
10
6
2
0 1 2 3 4 6 8
7/24/2019 Acquity H-class Bio System Guide Ra Es
15/98
Caractersticas del Sistema biolgico ACQUITY UPLC H-Class 1-3
Comparacin de separaciones cromatogrficas utilizando partculas de5.0m y 1.7 m:
Cada separacin se llev a cabo con una columna de 2.1 50 mm. Lascondiciones cromatogrficas de las separaciones son idnticas, a excepcin delcaudal, que ha sido escalado en funcin del tamao de las partculas.
Caractersticas del Sistema biolgico ACQUITY UPLCH-Class
El Sistema biolgico ACQUITY UPLC H-Class se dise para las
investigaciones biolgicas y biofarmacuticas. Est optimizado para el anlisisde pptidos, protenas, oligonucletidos y carbohidratos. El sistema centralincluye el Sistema biolgico de gestin de muestras de flujo a travs de aguja(bioSM-FTN) y el Sistema biolgico de gestin de eluyentes cuaternario(bioQSM). La funcin AutoBlend Plusdel software proporciona capacidadesmejoradas para el desarrollo de mtodos.
1.7 m, columna UPLC
0
0.050
2,8 4 6 8 10 12 14
0 1 2 3 4 5
0.040
0.030
0.020
0.010
0.000
0.050
0.040
0.030
0.020
0.010
0.000
5 m, columna UPLC
6 min
15 min
AU
AU
7/24/2019 Acquity H-class Bio System Guide Ra Es
16/98
1-4 Sistema biolgico ACQUITY UPLC H-Class
La trayectoria humectada del sistema contiene nicamente materialesbiocompatibles que
No interactan significativamente ni adsorben o modifican a lasbiomolculas como las protenas.
No filtran iones en los eluyentes cromatogrficos recomendados(consultar elApndice C).
No son atacados ni daados significativamente por las fases mviles quese describen en elApndice C, incluidas las siguientes:
Fases mviles cidas que contienen haluros, como HCl (6 mM) y
NaCl (hasta 1 M) en tampn fosfato (de 20 a 100 mM). Tampn fosfato a pH entre 2 y 12 en presencia de NaCl 1M.
Los materiales de la trayectoria humectada son principalmente aleaciones detitanio y la aleacin MP35N, que es una aleacin denquel-cobalto-cromo-molibdeno no magntica.
El sistema admite varios tipos de mdulos de compartimento de columnas. ElHorno de precalentamiento activo de todos los mdulos de compartimento decolumnas tiene superficies humectadas hechas de materiales biocompatibles.Los mdulos de compartimento de columnas pueden ser: un horno decolumnas con un horno de precalentamiento activo; un compartimento decolumnas con un horno de precalentamiento activo y capacidades de cambio decolumnas; un compartimento de columnas auxiliar con un horno deprecalentamiento activo; un termostatizador para columnas de 30 cm; o un
horno de columnas de 30 cm con un horno de precalentamiento activo.El Sistema biolgico ACQUITY UPLC H-Class combina la velocidad y elrendimiento de la UPLC con la capacidad de las separaciones HPLC.
Esta combinacin proporciona muchas ventajas, entre las que se incluyen:
Cromatografa de partculas pequeas y alta presin que permiterealizar anlisis ms rpidamente y con mayor resolucin que con la
HPLC tradicional. Consumo reducido de eluyente (significativamente menos que la HPLC
tradicional)
Flexibilidad en la mezcla de eluyentes con un bioQSM
Un bioSM-FTN que facilita la transferencia de mtodos de HPLC a UPLC.
Mejoras en el diseo del bioQSM y el bioSM-FTN para minimizar ladispersin y reducir la duracin de los ciclos
7/24/2019 Acquity H-class Bio System Guide Ra Es
17/98
Caractersticas del Sistema biolgico ACQUITY UPLC H-Class 1-5
Inyector de flujo a travs de aguja
El bioSM-FTN del Sistema biolgico ACQUITY UPLC H-Class utiliza unmecanismo de flujo a travs de aguja totalmente diferente de los inyectoresbasados en bucles que se utilizan en el Sistema ACQUITY UPLC. Elmecanismo de flujo a travs de aguja aspira una muestra y la retiene en laaguja de muestras para preparar la inyeccin de la muestra en la columna. Laaguja forma parte de la trayectoria del flujo de inyeccin cuando se inyecta lamuestra en la columna.
Gracias al mecanismo de flujo a travs de aguja, el sistema funciona de
manera similar a la mayora de los sistemas HPLC tradicionales, lo quefacilita la transferencia de mtodos HPLC. El mecanismo de flujo a travs deaguja tampoco requiere el aprendizaje de nuevos modos de inyeccin. Adems,mejora la exactitud de la inyeccin y reduce la duracin del ciclo parainyecciones de volmenes pequeos. Los gradientes pasan a travs de la agujadurante el proceso de inyeccin, con lo que se garantiza una completarecuperacin de la muestra.
Eluyente de lavado
El sistema de lavado utiliza un solo eluyente para limpiar la parte exterior dela aguja de muestras y cebar el sistema de lavado. El eluyente no entra en latrayectoria del flujo de inyeccin.
Restriccin:evitar el uso de eluyentes de lavado tamponados.
Precaucin:
No dejar las soluciones tampn almacenadas en el sistema. Lavar todas las trayectorias del flujo, incluido el lavado de la aguja,
con una cantidad suficiente de eluyente no tamponado antes deapagar el sistema.
Si el sistema va a apagarse durante un periodo prolongado (de ms de24 horas), utilizar metanol al 10% - 20% en agua.
Si se utiliza un eluyente de lavado tamponado, cebarlo durante30 segundos como mnimo. El uso de soluciones tampn puede ocasionar la acumulacin de sales
en la aguja y el puerto de lavado, y hacer necesaria una limpiezaperidica.
7/24/2019 Acquity H-class Bio System Guide Ra Es
18/98
1-6 Sistema biolgico ACQUITY UPLC H-Class
Eluyente de purga
La funcin principal del eluyente de purga es transportar la muestra a lo largode la trayectoria de inyeccin. El eluyente de purga ceba tambin la jeringa demuestras y la trayectoria de inyeccin. La inyeccin de eluyente en la columnasolo se produce durante la dilucin automtica, cuando se utiliza comoeluyente de dilucin.
Acondicionamiento del eluyente activo
Las aplicaciones HPLC y UPLC se benefician de un calentamiento adicionalde la precolumna y la fase mvil con el fin de mejorar las separacionescromatogrficas. El Horno de columnas biolgico ACQUITY UPLC H-Classutiliza un Horno de precalentamiento activo para acondicionar el eluyente amedida que entra en la columna. El Horno de precalentamiento activoaumenta la temperatura de la fase mvil entrante (y de la muestra inyectada)hasta la temperatura programada del compartimento de columnas.
Indicacin:el precalentamiento activo es la configuracin predeterminada delSistema biolgico ACQUITY UPLC H-Class.
Mejoras de software
AutoBlend Plus
AutoBlend Plus permite crear gradientes basados en el pH o en laconcentracin de sales de los eluyentes. Los eluyentes que se utilizan con
AutoBlend Plus se instalan habitualmente en las botellas de eluyente de lasiguientes forma:
El eluyente A es cido.
El eluyente B es bsico.
El eluyente C es un tampn salino.
El eluyente D es acuoso. Si el bioQSM dispone de una vlvula deseleccin de eluyentes opcional, es posible seleccionar uno de seiseluyentes (D1 a D6).
Se especifica (o se selecciona de un catlogo) un valor de pKa o una curva decalibracin de pH, que se utilizan para calcular el pH. El catlogo editableincluye soluciones de pH conocido, soluciones salinas, valores de pKa y curvas
de calibracin de pH.
7/24/2019 Acquity H-class Bio System Guide Ra Es
19/98
Caractersticas del Sistema biolgico ACQUITY UPLC H-Class 1-7
El cociente pH/sales de cada inyeccin se mantiene constante. Se especifica laconcentracin de pH, la curva de pH, la concentracin de sales, la curva desales, el caudal y uno de los siguientes parmetros para los segmentos del
gradiente: Time (Tiempo)
Column volume (Volumen de la columna)
Total volume (Volumen total)
Quantum Synchronization (Sincronizacin cuntica)
La introduccin de una muestra de baja presin en el caudal de fluido de altapresin durante una inyeccin ocasiona un pulso de presin que puede afectara los resultados cromatogrficos. La funcin Quantum Synchronization(Sincronizacin cuntica) reduce el impacto de este pulso de presin. ElbioSM-FTN y el bioQSM se comunican para coordinar de manera automticala secuencia de inyeccin, permitiendo as que el bioQSM proporcione mspresin en el momento exacto en que el bioSM-FTN cambia la posicin de la
vlvula de inyeccin a Inject (Inyeccin) para introducir la muestra a bajapresin.
Gradient Smart Start (Inicio inteligente de gradiente)
Antes de cada inyeccin de muestra, el bioSM-FTN normalmente ejecutasecuencias de lavado y aspira el volumen de muestra adecuado. Cuando se
finalizan estas tareas, el bioQSM inicia la distribucin de gradiente hacia lavlvula de inyeccin. El volumen de permanencia del sistema afecta a lacantidad de tiempo que el gradiente tarda en llegar hasta la columna y puedeser un componente significativo del tiempo de ciclos total.
La funcin Gradient Smart Start (Inicio inteligente de gradiente) coordina lasoperaciones previas a la inyeccin y reduce el efecto del volumen de residenciadel bioQSM sobre la duracin de los ciclos. El gradiente se inicia antes o
durante las tareas previas a la inyeccin del bioSM-FTN, lo que permite unahorro de tiempo considerable.
Wash Plungers (Lavar mbolos)
El material precipitado que permanece en los mbolos de la bomba delbioQSM puede ocasionar daos en las juntas de alta presin. La funcin WashPlungers (Lavar mbolos) lava las juntas con eluyente para eliminar cualquierprecipitado. Se puede utilizar la funcin Wash Plungers (Lavar mbolos)
7/24/2019 Acquity H-class Bio System Guide Ra Es
20/98
1-8 Sistema biolgico ACQUITY UPLC H-Class
segn sea necesario o bien utilizarla como parte de la funcin No-FlowShutdown (Apagado sin flujo).
No-Flow Shutdown (Apagado sin flujo)La funcin No-Flow Shutdown (Apagado sin flujo) ejecuta la funcin WashPlungers (Lavar mbolos) despus de que el bioQSM haya permanecidoinactivo durante un intervalo de tiempo especificado. Esta funcin evita que sedepositen precipitados en los mbolos del bioQSM mientras el sistema estinactivo.
Automatic Prime (Cebado automtico)
Cuando se habilita esta funcin del bioQSM, el sistema ceba los tubos cada vezque se selecciona un eluyente nuevo.
Ejemplo:si una primera inyeccin utiliza el conducto D1 y una segundainyeccin utiliza el conducto D2, el sistema de gestin de eluyentes ceba elconducto D2 entre la primera y la segunda inyeccin.
Elevacin del flujo
Esta funcin permite especificar la velocidad a la que el bioQSM incrementa odisminuye el flujo.
7/24/2019 Acquity H-class Bio System Guide Ra Es
21/98
Componentes del sistema 1-9
Componentes del sistema
Mdulos del instrumento:
El Sistema biolgico ACQUITY UPLC H-Class puede incluir un bioQSMequipado con una vlvula de seleccin de eluyentes opcional de 6 puertos, unbioSM-FTN, un mdulo de compartimento de columnas, detectores (de UVvariable, red de fotodiodos o espectrmetro de masas) y una columna
ACQUITY UPLC. Todos los materiales que entran en contacto con la muestrason biocompatibles.
El software para cromatografa Empower o el software para espectrometra
de masas MassLynx de Waters controlan el Sistema biolgico ACQUITYUPLC H-Class.
FRONTAL POSTERIOR
Bandeja de botellas
Detector
Horno de columnas
bioSM-FTN
bioQSM
7/24/2019 Acquity H-class Bio System Guide Ra Es
22/98
1-10 Sistema biolgico ACQUITY UPLC H-Class
bioQSM
El bioQSM es una bomba de alta presin con mezclador a baja presin. ElSistema de gestin de eluyentes cuaternario suministra un flujo constante (sinpulsos) de eluyente a caudales analticos mximos de 1 mL/min a 103 421 kPa(1 034 bar, 15 000 psi) y hasta 2 mL/min a presiones reducidas mximas de62 053 kPa (621 bar, 9 000 psi). El bioQSM puede bombear cuatro eluyentesdesgasificados simultneamente mediante una vlvula generadora degradientes (GPV) para crear de forma dinmica la composicin especificada.
bioSM-FTN
El bioSM-FTN utiliza un mecanismo de inyeccin directa para inyectarmuestras extradas de placas y viales en una columna cromatogrfica. Losbucles de extensin opcionales (que se instalan entre la aguja de muestras y lavlvula de inyeccin) aumentan el volumen de las inyecciones ms all de lacapacidad de la aguja de muestras. El bioSM-FTN tambin puede diluir lasmuestras con la opcin Auto-dilution (Dilucin automtica).
Horno de columnas
Las variaciones en la temperatura de la columna pueden cambiar los tiemposde retencin de los picos y modificar la forma de los picos, con lo que seincrementa la dificultad a la hora de lograr resultados precisos. Loscompartimentos de columnas ayudan a la hora de garantizar separacionesprecisas y reproducibles mediante el control de la temperatura de la columna.
El compartimento de columnas se calienta a cualquier temperatura entre20 C (o al menos 5 C por encima de la temperatura ambiente) y 90 C. Undispositivo de precalentamiento activo calienta el eluyente entrante antes deque llegue a la columna. El horno de columnas admite columnas hasta 4 6 mmde dimetro interno y hasta 150 mm de longitud.
Indicacin:el precalentamiento activo es la configuracin predeterminada del
Sistema biolgico ACQUITY UPLC H-Class.
Controlador de la consola local (opcional)
El controlador de la Consola local ACQUITY UPLC (LCC) complementa elsoftware del sistema de datos cromatogrficos (CDS), lo que permite controlarlos sistemas localmente. La funcionalidad mnima del LCC, diseado para quesimule un teclado sencillo, le impide funcionar como un controlador
independiente. Su instalacin en un sistema no sustituye al control del CDS.
7/24/2019 Acquity H-class Bio System Guide Ra Es
23/98
Componentes del sistema 1-11
Waters ha diseado el LCC para preparar los mdulos del sistema para elfuncionamiento, definir las condiciones iniciales y realizar pruebasdiagnsticas del sistema. Estas funciones bsicas se llevan a cabo
rpidamente, incluso cuando un sistema est fsicamente alejado de laestacin de trabajo de adquisicin y control del software, o del mduloLAC/E32, o cuando el control en red no est disponible.
FlexCart
El elemento opcional FlexCart proporciona una plataforma mvil al Sistemabiolgico ACQUITY UPLC H-Class. Puede contener los mdulos del sistema,as como el PC y el monitor, y proporciona salidas elctricas para los mdulosdel sistema y una gestin de desechos integrada. Cuando se utiliza con unespectrmetro de masas, la altura ajustable del carro permite colocar la salidade la columna cerca de la sonda de entrada, con lo que se minimiza el volumenmuerto del sistema.
Tecnologa de la columnaLas columnas ACQUITY UPLC se rellenan de partculas hbridas de altaresistencia con puente de etilsiloxano de 1.7 m o partculas de slice de altaresistencia de 1.8 m que pueden soportar mecnicamente condiciones de altapresin. El hardware de la columna y los tubos de salida correspondientespueden soportar hasta 103 421 kPa (1 034 bar, 15 000 psi). Las dimensionesde la columna permiten caudales ptimos compatibles con MS y los tubos de
salida correspondientes minimizan el efecto del volumen extra-columna.Aunque el sistema trabaja con cualquier columna para anlisis HPLC, lasespecialmente diseadas para ACQUITY UPLC maximizan su capacidad aalta presin. Si se comparan con las columnas de HPLC tradicionales, lascolumnas ACQUITY UPLC proporcionan una resolucin y una sensibilidadmayores en el mismo tiempo de anlisis o una resolucin equivalente y unasensibilidad mayor en tiempos de anlisis menores.
Tecnologa eCord
Las columnas ACQUITY UPLC incluyen un chip eCord de la columna queregistra el historial de uso de la columna. El chip eCord de la columnainteracta con el software del sistema y registra informacin de un mximo de50 colas de muestras analizadas en la columna. En entornos regulados, el chip
eCord de la columna documenta la columna utilizada en el mtodo devalidacin.
7/24/2019 Acquity H-class Bio System Guide Ra Es
24/98
1-12 Sistema biolgico ACQUITY UPLC H-Class
Adems de los datos variables sobre el uso de la columna, el chip eCord de lacolumna tambin almacena datos fijos sobre el proceso de fabricacin de lacolumna, como:
Identificacin nica de la columna; Certificado de anlisis;
Datos de las pruebas de control de calidad.
Cuando se conecta el chip eCord de la columna al receptculo correspondienteen el compartimento de columnas, el chip registra y almacenaautomticamente la informacin del sistema. No es necesario realizar
ninguna otra accin.
Detectores
La composicin qumica de las partculas pequeas utilizadas en lacromatografa del sistema UPLC genera picos muy estrechos. Los DetectoresTUV, PDA, ELS y FLR para UPLC y los espectrmetros de masas SQ y TQ
obtienen datos a velocidades lo suficientemente rpidas como para definirestos picos sin afectar a la sensibilidad o la exactitud de la medicin de lospicos. Estos detectores utilizan un volumen de cubeta de flujo menor,volmenes de tubos minimizados y conectores especializados para controlar elensanchamiento y mantener estos picos estrechos.
Hay cubetas de flujo hechas de materiales biocompatibles, como titanio,disponibles para los Detectores TUV y PDA para UPLC.
Para obtener ms informacin
La siguiente informacin adicional sobre el Sistema biolgico ACQUITYH-Class se puede encontrar en el CD de documentacin del sistema:
Para el sistema ACQUITY UPLC H-Class
ACQUITY UPLC H-Class
Informacin de mantenimiento y descripcin general del funcionamiento
del compartimento de columnas
Especificaciones del sistema
7/24/2019 Acquity H-class Bio System Guide Ra Es
25/98
Componentes del sistema 1-13
Visitar waters.com para obtener ms informacin y formar parte de lacomunidad en lnea de ACQUITY UPLC, en la que se puede:
Compartir informacin o hacer preguntas a los expertos y cientficos de
ACQUITY UPLC Acceder a las publicaciones de ACQUITY UPLC y a las experiencias de
usuarios de todo el mundo.
Consultar preguntas frecuentes exclusivas, trucos, consejos y tutoriales.
Conocer las aplicaciones ACQUITY UPLC ms recientes y obtenerinformacin.
7/24/2019 Acquity H-class Bio System Guide Ra Es
26/98
1-14 Sistema biolgico ACQUITY UPLC H-Class
7/24/2019 Acquity H-class Bio System Guide Ra Es
27/98
Directrices generales 2-1
2 Optimizar el funcionamientoSeguir los consejos y directrices incluidos en este captulo paragarantizar el funcionamiento ptimo del Sistema ACQUITY.
Directrices generales
Las directrices del Sistema biolgico ACQUITY UPLC H-Class difieren de lasprcticas estndar de HPLC, principalmente debido a las limitaciones delsistema para la cromatografa de partculas pequeas (de menos de 2 m). Lacromatografa en un sistema UPLC produce una separacin de mayorresolucin a una escala mucho menor que la de la HPLC. Adems, la duracindel anlisis es menor con la UPLC, y el consumo de eluyente y muestra se vesustancialmente reducido.
El Sistema biolgico de cromatografa ACQUITY UPLC H-Class requiere elfuncionamiento ptimo del Sistema biolgico de gestin de muestras(bioSM-FTN) puesto que la dispersin de las muestras es ms evidente cuandose utilizan columnas ms pequeas. La reduccin del tiempo de anlisiscromatogrfico tambin hace necesaria una gestin eficaz del tiempo de losciclos.
Contenido:
Tema PginaDirectrices generales 2-1
Calculadora de columnas ACQUITY UPLC 2-4
Dispersin 2-5
Arrastre 2-5
Precisin y exactitud 2-6
Tiempo de los ciclos (entre inyecciones) 2-6Evitar fugas 2-7
Preparacin de las muestras 2-7
7/24/2019 Acquity H-class Bio System Guide Ra Es
28/98
2-2 Optimizar el funcionamiento
Durante los anlisis UPLC rpidos, se debe tener en cuenta que un pico deinters puede ser muy estrecho, de menos de 0.5 segundos. Se recomienda unavelocidad de adquisicin de 25 a 50 puntos a lo largo del pico, lo que
proporciona una buena cuantificacin y representacin de los picos. Lasvelocidades de adquisicin superiores a 20 puntos por segundo producen unaumento del ruido en la lnea base y, en consecuencia, hacen necesario ajustarlas constantes de tiempo del filtro. El caudal ptimo de ACQUITY UPLC esdiferente al de una columna de HPLC convencional. La siguiente tablamuestra las directrices de funcionamiento para columnas de ACQUITY UPLCen condiciones isocrticas y de gradiente. Los valores mostrados sonaproximaciones, y la eficacia ptima para una molcula o separacin puedeobtenerse con un caudal o presin diferentes.
Se deben seguir estas recomendaciones generales a la hora de realizar unanlisis UPLC:
Caudales ptimos por intervalo de peso molecular:
Tamao de lacolumna
Peso molecular Caudal
2.1 50 mm
7/24/2019 Acquity H-class Bio System Guide Ra Es
29/98
Directrices generales 2-3
Utilizar eluyentes, soluciones tampn y aditivos de alta calidad(especficos para HPLC o MS).
Utilizar agua de alta calidad (especfica para HPLC o MS).
Se deben utilizar siempre filtros de eluyentes en los tubos de las botellasde eluyentes.
Filtrar las soluciones tampn con un filtro de membrana de 0.2 m.
Almacenar las soluciones concentradas y utilizarlas para preparar lassoluciones de trabajo.
No superar la cantidad de solucin tampn, lo que puede producir
crecimiento microbiolgico. No bloquear la lnea de purga del desgasificador; recortar el tubo si es
necesario.
No se deben sumergir en lquidos los conductos de evacuacin dedesechos y del desgasificador. (Consultar la Informacin demantenimiento y descripcin general de funcionamiento del sistema de
gestin de eluyentes cuaternario ACQUITY UPLC H-Classpara obtenerinformacin detallada sobre cmo dirigir los tubos).
Mantener cebados los conductos de eluyentes.
Lavar las soluciones tampn del sistema con un eluyente acuoso si se vaa dejar el sistema inactivo durante un periodo prolongado (de ms de 24horas). Utilizar un eluyente orgnico al 10% - 20% en agua comoeluyente de almacenamiento. Cebar el bioSM-FTN con eluyente de
purga durante 10 ciclos como mnimo. El uso de soluciones tampn en los eluyentes de lavado de la aguja puede
ocasionar la acumulacin de sales y hacer necesaria una limpiezaperidica. Cebar el eluyente de lavado durante 30 segundos comomnimo y el eluyente de purga durante al menos 10 ciclos.
Mantener el conducto del lavado de juntas cebado.
El funcionamiento continuo con concentraciones de sales superiores a1 M puede hacer que las juntas de la bomba deban cambiarse con msfrecuencia que la indicada en el mantenimiento peridico programado.Para prolongar la duracin de las juntas y evitar la acumulacin decristales de sales en las juntas de la bomba, se recomienda lavarperidicamente la bomba, los tubos con altas concentraciones de sales yel depsito. La concentracin de sales, el caudal y otros factores pueden
afectar a la frecuencia de los procedimientos de lavado. Algunasaplicaciones pueden requerir un lavado semanal.
7/24/2019 Acquity H-class Bio System Guide Ra Es
30/98
2-4 Optimizar el funcionamiento
Cebar los conductos de eluyente durante la puesta en marcha delsistema.
Supervisar el nivel de desechos para garantizar que nunca llegue a
niveles demasiado altos. Iniciar los gradientes con algo de contenido orgnico (0.1%, por ejemplo)
para lograr la formacin de un gradiente ms homogneo y predecibleque cuando se inicia sin contenido orgnico.
Utilizar la opcin Load Ahead (Carga en cabeza) si se desea utilizar untiempo de ciclos ms corto.
No utilizar la opcin Load Ahead (Carga en cabeza) p Loop offline(Desconexin del bucle) cuando se solucionan problemas de arrastre.
Cuando se instala o se extrae una columna, se debe mantener en su sitio,en todo momento, el conector de compresin reutilizable delprecalentador activo. Rotar la columna o el filtro en lnea opcional parainstalarlo o extraerlo.
Calculadora de columnas ACQUITY UPLC
La calculadora de columnas ACQUITY UPLC es una herramienta de softwareque ayuda en la transferencia de mtodos de un sistema HPLC a un sistemaUPLC, o de un sistema UPLC a un sistema HPLC. La calculadora distingueentre los sistemas con bombas binarias y cuaternarias.
Al introducir los valores de los parmetros para la separacin en curso, elegiruna columna objetivo que tenga un poder de resolucin (L/dp) similar. (Losvalores de L/dp se calculan y se muestran automticamente). Especificar losvolmenes de residencia para los sistemas en uso y de destino (la calculadorarecomienda las condiciones cromatogrficas para el sistema de destino). Estascondiciones se pueden optimizar posteriormente segn los requisitosparticulares.
Consultar tambin: la documentacin de la calculadora de columnasACQUITY UPLC y la Ayuda en lnea de la Consola ACQUITY para obtenerms informacin y mtodos.
Indicacin:la calculadora puede instalarse desde el CD de controladores delSistema ACQUITY UPLC o desde el CD del Kit de asistencia para mtodos.Despus de la instalacin, el icono de la calculadora de columnas ACQUITYUPLC aparece en el escritorio del ordenador.
7/24/2019 Acquity H-class Bio System Guide Ra Es
31/98
Dispersin 2-5
Dispersin
Los sistemas UPLC y los inyectores automticos muestran una dispersin
baja (una caracterstica fija del instrumento que se mide observando lamagnitud del ensanchamiento de picos debida al diseo del sistema).
La cromatografa de partculas pequeas utiliza columnas de alta eficaciapequeas. Una columna UPLC tpica de 2.1 50 mm tiene un volumenaproximado de 174 L, comparado con el volumen de 2.5 mL de una columnaHPLC convencional de 4.6 150 mm. Un tamao de columna y partculasmenor requiere un sistema cuya baja dispersin reduzca la dilucin y el
ensanchamiento de la banda, con lo que se conserva la forma, la altura y lasensibilidad de los picos producidos por la columna de alta eficacia.
El Sistema biolgico ACQUITY UPLC H-Class muestra normalmente unensanchamiento de banda de 20 L (el valor depende de la configuracin delsistema). Las concentraciones mximas para UPLC son ms altas que lasconcentraciones para HPLC. Como los efectos de la solubilidad son msevidentes en los sistemas de baja dispersin y alta presin, es importanteajustar la carga de la columna adecuadamente.
Arrastre
Se puede observar arrastre en los sistemas cromatogrficos cuando un analitoanteriormente inyectado aparece como un pico en el cromatrograma de las
siguientes muestras. El arrastre se suele producir cuando una pequeacantidad de analito permanece en el sistema despus de inyectar unamuestra. El arrastre se puede medir mediante la observacin de los picos deanalito que aparecen cuando se analiza una muestra en blanco justo despusde una muestra analtica.
Consultar tambin:Especificaciones del Sistema ACQUITY UPLC H-Classpara obtener informacin sobre el arrastre en el Sistema biolgico ACQUITY
UPLC H-Class.Una causa frecuente del arrastre es el lavado inadecuado del sistema. Laseleccin de un eluyente de lavado adecuado puede reducir el arrastre en unanlisis particular. El eluyente de lavado debe ser lo suficientemente fuertecomo para disolver cualquier resto de muestra y la duracin del lavado debeser la suficiente como para eliminar los residuos del sistema.
Las condiciones de los mtodos tambin pueden afectar en el arrastre. Untiempo de retencin demasiado corto en las condiciones finales de un
7/24/2019 Acquity H-class Bio System Guide Ra Es
32/98
2-6 Optimizar el funcionamiento
gradiente puede producir un fallo a la hora de eliminar todos los analitos delsistema, en particular si el gradiente es brusco. Es importante lavar porcompleto el sistema y volver a equilibrar la columna antes de proceder a un
siguiente anlisis. Se debe tener cuidado a la hora de seleccionar las opcionesLoad Ahead (Carga en cabeza) y Loop Offline (Desconexin del bucle). Lainicializacin de estas opciones antes de que la parte ms orgnica delgradiente llegue hasta la aguja puede hacer que queden residuos de muestrasen el sistema. A veces, un ahorro de tiempo puede dar lugar a una limpiezainadecuada del sistema.
La hidrofobicidad y la solubilidad de las muestras, as como la limpieza
durante la preparacin de la muestra y la contaminacin causada por lasherramientas de preparacin de la muestra, son factores adicionales a teneren cuenta a la hora de intentar minimizar el arrastre.
Precisin y exactitud
La precisin del volumen de inyeccin cuando se utiliza el Sistema biolgico
ACQUITY UPLC H-Class es inferior al 1% de RSD para volmenes deinyeccin entre 0.2 y 10.0 L. La exactitud del volumen de inyeccin delsistema es de 100 2%. (Consultar las Especificaciones del Sistema ACQUITYUPLC H-Classpara obtener ms informacin).
Tiempo de los ciclos (entre inyecciones)
El tiempo de anlisis corto de una separacin UPLC requiere un uso eficaz deltiempo entre anlisis.
El bioSM-FTN cuenta con una opcin de carga en cabeza que puede ayudar areducir la duracin de los ciclos. Esta opcin indica al bioSM-FTN que aspirela siguiente muestra mientras se analiza otra.
La opcin Loop Offline (Desconexin del bucle) del Sistema biolgico de
gestin de muestras de flujo a travs de aguja reduce el impacto del volumende retardo sobre la duracin de los ciclos mediante la desconexin de la aguja yel bucle de extensin antes de que el gradiente llegue a la vlvula de inyecciny despus de que la muestra se transfiera hasta el puerto de inyeccin.
Una configuracin adecuada de la velocidad de aspiracin de la jeringatambin puede ayudar a reducir el tiempo de los ciclos. De formapredeterminada, el sistema utiliza la informacin que recibe de un
transductor de presin para optimizar la velocidad de aspiracin de la jeringapara obtener un funcionamiento ptimo y el mximo rendimiento.
7/24/2019 Acquity H-class Bio System Guide Ra Es
33/98
Evitar fugas 2-7
Evitar fugas
La prevencin de fugas garantiza que el sistema mantenga una presin
adecuada y una integridad de muestras a lo largo del anlisis.Las fugas se pueden producir en cualquier conexin de los tubos, en la juntatrmica de estanqueidad o en las juntas, pero son ms frecuentes en lasconexiones de los tubos. Las fugas de baja presin (en el lado de entrada de labomba del bioQSM) producen prdida de eluyente e introduccin de airedurante el ciclo de entrada. Las fugas en las conexiones de alta presin(situadas despus de la vlvula i2) pueden hacer que salga eluyente, pero noque entre aire.
Para evitar fugas se deben seguir las recomendaciones de Waters para apretarcorrectamente las conexiones del sistema. Debe tenerse en cuenta que latcnica que se utiliza para volver a apretar las conexiones es distinta a la quese emplea para instalarlas.
Preparacin de las muestrasEl anlisis UPLC impone algunas restricciones adicionales en la preparacinde las muestras.
Partculas
El reducido tamao del fritado de la columna (0.2 m) se puede obstruir msfcilmente que en el caso de los fritados mayores de las columnas HPLC(2.0m). Como resultado, es fundamental que los eluyentes de fase mvil y lassoluciones de muestras estn libres de partculas para el anlisis UPLC.Consultar la seccin Directrices generales en la pgina 2-1para obtenerrecomendaciones sobre cmo seleccionar y manipular eluyentes.
Diluyentes de muestras compatiblesCuando se utiliza la opcin de dilucin automtica en el bioSM-FTN, eleluyente de purga se utiliza como diluyente de muestras. Se debe comprobarque la solucin de muestra es soluble y miscible con el eluyente de purgaseleccionado.
7/24/2019 Acquity H-class Bio System Guide Ra Es
34/98
2-8 Optimizar el funcionamiento
3
7/24/2019 Acquity H-class Bio System Guide Ra Es
35/98
Preparar el hardware del sistema 3-1
3 Preparar el sistema
Preparar el hardware del sistema
Encender el sistema
El encendido del sistema conlleva la puesta en marcha de la estacin detrabajo del Sistema biolgico ACQUITY UPLC H-Class, los mdulos delsistema y el software del sistema de datos cromatogrficos. Cada dispositivo o
instrumento emite tres pitidos y realiza una serie de pruebas de inicializacin.Indicacin:si el sistema incluye un mdulo de compartimento de columnas,ste se encender automticamente al encender el bioSM-FTN.
Para encender el sistema:
1. Encender el bioQSM y el bioSM-FTN pulsando el interruptor de
encendido situado en la parte superior izquierda de la puerta de cadadispositivo.
Consultar tambin:las secciones Indicador LED de encendido en lapgina 3-2y Indicadores LED de estado en la pgina 3-3para obtenerinformacin sobre cmo interpretar los modos del indicador LED delestado de flujo en el dispositivo o el instrumento, o bien para comprobarque las unidades estn encendidas.
Contenido:
Tema Pgina
Preparar el hardware del sistema 3-1Configurar el software de datos cromatogrficos 3-8
Paneles de control ACQUITY 3-8
Puesta en marcha de la Consola ACQUITY UPLC 3-15
2 C d l i di d LED d l bi QSM l bi SM FTN i d
7/24/2019 Acquity H-class Bio System Guide Ra Es
36/98
3-2 Preparar el sistema
2. Cuando los indicadores LED del bioQSM y el bioSM-FTN se enciendande color verde fijo, pulsar el interruptor de encendido situado en la partesuperior izquierda del detector (o detectores).
Indicacin:para evitar errores de inicializacin, solamente se debenencender los detectores cuando la cubeta de flujo est mojada.
3. Iniciar el software cromatogrfico.
Indicacin:se puede observar si en la Consola ACQUITY UPLCaparecen mensajes e indicaciones de LED.
Supervisin de las pruebas inicialesEstas pruebas comienzan al encender la estacin de trabajo del Sistemabiolgico ACQUITY UPLC H-Class:
Tarjeta CPU
Memoria (RAM y ROM)
Sistema de comunicaciones externo (Ethernet)
Reloj
Si las pruebas de puesta en marcha indican un funcionamiento errneo,consultar la Ayuda en lnea de la Consola.
Supervisar los indicadores LED de los mdulos del sistema
Los diodos luminosos (LED) de que dispone cada mdulo del sistema indicancul es su estado de funcionamiento. Los indicadores LED son especficos paracada mdulo, por lo que el significado de sus distintos colores y modos defuncionamiento puede variar de un mdulo a otro.
Indicador LED de encendido
El indicador LED de encendido, situado del lado izquierdo en el panel frontal
de un dispositivo o instrumento, indica si el mdulo est encendido o apagado.El indicador LED es de color verde cuando la unidad recibe corriente y seapaga cuando no la recibe.
Indicacin:con el fin de procurar una ventilacin adecuada, los ventiladoresdel bioSM-FTN funcionan de manera continuo, incluso cuando el interruptorde encendido se encuentra en la posicin off (desconectado). Losventiladores solamente se apagan cuando el cable de alimentacin sedesconecta de la parte trasera del instrumento.
Indicadores LED de estado
7/24/2019 Acquity H-class Bio System Guide Ra Es
37/98
Preparar el hardware del sistema 3-3
Indicadores LED de estado
Indicador LED de flujo (bioQSM)
El indicador LED de flujo, situado a la derecha del indicador LED deencendido en el panel frontal del bioQSM, indica el estado del flujo. Unindicador LED de flujo de color verde continuo indica que circula flujo a travsdel Sistema de gestin de eluyentes cuaternario.
Indicador LED de anlisis (bioSM-FTN)
El indicador LED de anlisis, situado a la derecha del indicador LED deencendido en el panel frontal del bioSM-FTN, indica el estado del anlisis. Unindicador LED de anlisis de color verde continuo indica que se estnanalizando inyecciones.
Indicador LED de la lmpara (detector)
El indicador LED de la lmpara, situado a la derecha del indicador LED de
encendido en el panel frontal del detector, indica el estado de la lmpara. Unindicador LED de la lmpara de color verde continuo indica que la lmparaest encendida.
Indicaciones del LED de estado:
Modo y color delindicador LED
Descripcin
Apagado bioQSM y bioSM-FTN: indica que eldispositivo se encuentra inactivo.
Detector: indica que la lmpara del detectorest apagada.
Verde continuo bioQSM: indica que est fluyendo eluyente. bioSM-FTN: indica que el bioSM-FTN est
funcionando normalmente, intentandoanalizar las muestras pendientes o realizarlas funciones de diagnstico solicitadas.Cuando finalicen las funciones de diagnsticoy de anlisis de muestras solicitadas, elindicador LED volver a apagarse.
Detector: indica que la lmpara del detectorest encendida.
Indicaciones del LED de estado: (continuacin)
7/24/2019 Acquity H-class Bio System Guide Ra Es
38/98
3-4 Preparar el sistema
Activar los sensores de fugas
Regla:al encender el sistema, los sensores de fugas estarn desactivados pordefecto a menos que se hayan activado previamente.
Para activar los sensores de fugas:
1. En la consola, seleccionar Control > Leak Sensors (Control > Sensores defugas).
Verde intermitente bioQSM y bioSM-FTN: indica que eldispositivo se est inicializando.
Detector: indica que el detector se estinicializando o calibrando.
Rojo intermitente Indica que un error ha detenido el instrumento odispositivo. Consultar la consola para obtener
informacin sobre el error.Rojo continuo Indica que se ha producido un fallo en un
instrumento o dispositivo que impide seguirutilizndolo. Apagar la unidad y despus volver aencenderla. Si el indicador LED contina de colorrojo continuo, ponerse en contacto con unrepresentante del Servicio Tcnico de Waters.
Indicaciones del LED de estado: (continuacin)
Modo y color delindicador LED
Descripcin
Cuadro de dilogo Leak Sensors:
7/24/2019 Acquity H-class Bio System Guide Ra Es
39/98
Preparar el hardware del sistema 3-5
Cuadro de dilogo Leak Sensors:
2. Para activar el sensor de fugas para un mdulo concreto, hacer clic en el
estado, a la izquierda de la descripcin del mdulo.Indicacin:para activar todos los sensores de fugas, hacer clic en Enable
All (Activar todos).
Puesta en marcha del sistema
Utilizar la funcin Start up (Puesta en marcha) para cebar el bioQSM trascambiar la fase mvil, la aguja de muestras o bien despus de que el sistemahaya estado inactivo durante un largo periodo de tiempo (por ejemplo, durantetoda la noche). Se debe comprobar que el sistema se encuentra correctamenteconfigurado para su utilizacin antes de realizar este procedimiento.
Recomendacin:cebar el bioQSM durante 5 minutos como mnimo si se va arealizar un cambio de eluyentes por otros que tengan una composicindiferente a la de los que ya se encuentran en el sistema.
Para poner en marcha el sistema:
1. En la consola, hacer clic en Control > Start up system (Control > Puestaen marcha del sistema).
2. Comprobar los ajustes de A/B/C/D Solvents (Eluyentes A/B/C/D) (fasemvil) en la pestaa Prime Solvents (Cebar eluyentes) del cuadro dedilogo System Startup (Puesta en marcha del sistema).
Hacer clic para activar o desactivar cada uno
de los sensores de fugas del instrumento.
Hacer clic para
activar o
desactivar
todos los
sensores de
fugas del
instrumento.
Indicaciones:
7/24/2019 Acquity H-class Bio System Guide Ra Es
40/98
3-6 Preparar el sistema
En el rea A/B/C/D Solvents (Eluyentes A/B/C/D), se puedenseleccionar o desactivar algunos o todos los eluyentes: A, B, C, D.
Se puede modificar la duracin del proceso de cebado de loseluyentes A a D introduciendo un valor diferente en el campoDuration of Prime (Duracin del cebado). Todos los eluyentesseleccionados se cebarn durante el mismo tiempo.
Para volver a establecer los valores originales en cualquier ficha,hacer clic en Set Defaults (Establecer valores predeterminados).
Valor predeterminado:todos los eluyentes se ceban durante 2.0 minutoscada uno. (Intervalo: de 0.1 a 60.0 minutos).
Recomendacin:cebar durante 3 minuto durante 7 minutos despus decambiar de eluyentes.
3. Seleccionar o limpiar el cebado del lavado de juntas, el eluyente delavado y el eluyente de purga. Si es necesario, se debe modificar laduracin especificada para cebar el lavado de juntas y el eluyente de
lavado, as como el nmero de ciclos especificado para cebar el eluyentede purga.
Valor predeterminado:el lavado de juntas se ceba durante 2.0 minutos,el eluyente de lavado durante 15 segundos y el eluyente de purgadurante 5 ciclos.
Precaucin:
No dejar las soluciones tampn almacenadas en el sistema.
Lavar todas las trayectorias del flujo, incluido el lavado de la aguja,con una cantidad suficiente de eluyente no tamponado antes deapagar el sistema.
Si el sistema va a apagarse durante un periodo prolongado (de ms de24 horas), utilizar metanol al 10% - 20% en agua.
Si se utiliza un eluyente de lavado tamponado, cebarlo durante30 segundos como mnimo.
El uso de soluciones tampn puede ocasionar la acumulacin de salesen la aguja y el puerto de lavado, y hacer necesaria una limpiezaperidica.
4. Seleccionar la ficha Equilibrate to Method (Equilibrar segn mtodo)
7/24/2019 Acquity H-class Bio System Guide Ra Es
41/98
Preparar el hardware del sistema 3-7
para comprobar los ajustes del caudal, la fase mvil, la composicin, lastemperaturas y el estado de la lmpara en estado de equilibrio.
5. Hacer clic en Start (Iniciar).
Resultado:se enciende la lmpara en el detector ptico, el sistemaestablece la temperatura de la muestra y de la columna, y comienzantodos los cebados. Al finalizar el cebado, el sistema de gestin demuestras caracteriza la junta y la aguja, si se ha seleccionado estaopcin, y luego registra los resultados de la caracterizacin en la base dedatos. Por ltimo, el sistema establece el caudal del mtodo, las
selecciones de eluyente y la composicin.
Valores de la ficha Equilibrate to Method:
Parmetros de lapuesta en marcha delsistema
Valorespredetermi-nados
Valores permitidos
Caudal inicial delmtodo
0.500 mL/min De 0.1 a 2.0 mL/min
Composicin de A, B, Cy D (la suma debe ser100%)
A: 100%B,C,D: 0%
A: de 0 a 100%B: de 0 a 100%C: de 0 a 100%D: de 0 a 100%
Temperatura de lacolumna
Off(Desconectado)
Depende del tipo de mdulode compartimento de
columnaTemperatura de lamuestra
Off(Desconectado)
Off (Desactivada), o de 4.0 a40.0 C
Lmpara On (Conectado) Encendida o apagadaNota:para las cubetas deflujo con paso de luz, no se
debe conectar la lmparadel detector, ni trabajar conella o encenderla si noexiste flujo a travs de lacubeta o si la cubeta de flujoest seca.
Configurar el software de datos cromatogrficos
7/24/2019 Acquity H-class Bio System Guide Ra Es
42/98
3-8 Preparar el sistema
g g
Configurar el software del sistema de datos cromatogrficos para utilizarlo
con ACQUITY: Iniciar el software del sistema de datos cromatogrficos e iniciar una
sesin.
Seleccionar los instrumentos del sistema y darle un nombre al sistema(consultar la Ayuda de Empower o MassLynx para obtener informacindetallada).
Abrir la consola ACQUITY y los paneles de control.
Paneles de control ACQUITY
Se pueden supervisar los paneles de control del bioQSM, el bioSM-FTN y eldetector desde el sistema de datos cromatogrficos.
Paneles de control:
Si el sistema est controlado por el software Empower, los paneles de controlaparecen en la parte inferior de la ventana Run Samples (Analizar muestras).Si el software MassLynx controla el sistema, los paneles de control aparecenen la ficha Additional Status (Estado adicional) de la ventana Inlet Editor(Editor de entrada).
Panel de control del bioQSM
El panel de control del bioQSM muestra los parmetros de estado del flujo,presin del sistema, caudal total y composicin del eluyente.
Regla:estos parmetros se pueden modificar cuando el sistema est inactivo,haciendo clic en el valor subrayado. Los parmetros del sistema de gestin deeluyentes cuaternario no se pueden modificar durante el anlisis de muestras.
Panel de control del bioQSM:
7/24/2019 Acquity H-class Bio System Guide Ra Es
43/98
Paneles de control ACQUITY 3-9
Elementos del panel de control del bioQSM:
Elemento del panel decontrol Descripcin
Indicador LED de caudal Muestra el LED de flujo real situado en elpanel frontal del bioQSM, a menos que sehaya perdido la comunicacin con el bioQSM.
Estado Muestra el estado de funcionamiento actual.
Presin del sistema Muestra la presin del sistema en kPa, bar opsi. Las unidades de presin se puedenpersonalizar a travs de la consola.
Caudal Muestra el caudal de eluyente que pasa portodos los tubos del bioQSM: de 0.000 a 2.000mL/min en condiciones de funcionamientonormales y de 0.000 a 4.000 mL/min cuandose realiza el cebado.
Composicin de eluyentes Muestra el porcentaje de eluyente que se va aextraer de los conductos de eluyentes (A a D).Los valores de la composicin oscilan entre0.0% y 100.0%.
(Detener flujo) Detiene por completo el flujo procedente delbioQSM.
Estado
Indicador LED de
caudal
Presin del sistema Caudal
Detener flujoComposicin de eluyentes
Se puede acceder a estas funciones adicionales haciendo clic con el botnd h d l t l i l d l l d t l d l bi QSM
7/24/2019 Acquity H-class Bio System Guide Ra Es
44/98
3-10 Preparar el sistema
derecho del ratn en cualquier lugar del panel de control del bioQSM:
Funciones adicionales del panel de control del bioQSM:
Funcin del panel de control Descripcin
Start up system (Poner enmarcha el sistema)
Pone el sistema en funcionamiento despusde un perodo de inactividad prolongado ocuando se cambia a un eluyente distinto.Consultar la seccin Puesta en marcha delsistema del documento Informacin demantenimiento y descripcin general defuncionamiento del sistema de gestin de
eluyentes cuaternario.
Prime solvents (Cebareluyentes)
Muestra el cuadro de dilogo Prime Solvents(Cebar eluyentes).Consultar la seccin Cebar el sistema degestin de eluyentes cuaternario deldocumento Informacin de mantenimiento ydescripcin general de funcionamiento del
sistema de gestin de eluyentes cuaternario.
Prime seal wash (Cebar ellavado de las juntas)
Inicia el cebado del lavado de juntas.Consultar la seccin Cebar el sistema delavado de juntas del documento Informacin
de mantenimiento y descripcin general defuncionamiento del sistema de gestin de
eluyentes cuaternario.
Wash plungers (Lavarmbolos)
Inicia la secuencia de lavado del mbolo, quellena y luego vaca lentamente las cmarasprimaria y del acumulador (con lacomposicin de eluyente utilizada) mientras
se realiza el lavado de juntas de altavelocidad/volumen elevado. De esta manerase evita la acumulacin de precipitados en losmbolos de la bomba, los cuales puedendaar las juntas de alta presin.
Launch ACQUITY UPLCConsole (Ejecutar la Consola
ACQUITY UPLC)
Inicia la consola.
Funciones adicionales del panel de control del bioQSM: (continuacin)
7/24/2019 Acquity H-class Bio System Guide Ra Es
45/98
Paneles de control ACQUITY 3-11
Panel de control del bioSM-FTN
El panel de control del bioSM-FTN indica las temperaturas programadas y reales
del compartimento de muestras y del mdulo de compartimento de columnas.Estos valores se pueden modificar cuando el sistema est inactivo, haciendo clicen el valor subrayado. En cambio, los valores programados del sistema de gestinde muestras no se pueden modificar durante el anlisis de muestras.
Indicaciones:
Para mantener el compartimento de muestras a una temperaturaconstante, abrir la puerta slo cuando sea necesario.
Los ventiladores del bioSM-FTN dejan de proyectar aire cuando se abrela puerta del compartimento de muestras.
Panel de control del bioSM-FTN:
Reset QGM (Reiniciar elQGM) Restablece el bioQSM tras un error.
Ayuda Muestra la Ayuda en lnea de la consola.
Elementos del panel de control del bioSM-FTN:
Elemento del panel de control Descripcin
Indicador LED de anlisis Muestra el indicador LED de anlisis real enel panel frontal, a menos que se produzca unaprdida de comunicaciones.
Estado Muestra el estado de funcionamiento actual.
Funcin del panel de control Descripcin
Indicador LED de anlisis
Temperatura actual del
horno de columnas
Visualizacin de la
Consola ACQUITY UPLCValor programado del
horno de columnas
Estado
Temperatura actual
del compartimento
de muestras
Valor programado
del compartimento de
muestras
Elementos del panel de control del bioSM-FTN: (continuacin)
7/24/2019 Acquity H-class Bio System Guide Ra Es
46/98
3-12 Preparar el sistema
Se puede acceder a funciones adicionales haciendo clic con el botn derecho delratn en cualquier lugar del panel de control del bioSM-FTN.
Temperatura actual delcompartimento de muestras Muestra la temperatura actual delcompartimento de muestras con unaresolucin de 0.1C, aunque estdeshabilitado el control de temperaturaactivo.
Valor programado delcompartimento de muestras
Muestra el valor programado actual delcompartimento de muestras con una
resolucin de 0.1C. Cuando el control detemperatura activo est deshabilitado, estecampo muestra Off (Desactivado).
Temperatura actual del hornode columnas
Muestra la temperatura actual del horno decolumnas con una resolucin de 0.1C,aunque est deshabilitado el control detemperatura activo.
Valor programado del hornode columnas Muestra el valor programado actual del hornode columnas con una resolucin de 0.1C.Cuando el control de temperatura activo estdeshabilitado, este campo muestra Off(Desactivado).
(Visualizacin de laconsola)
Muestra la Consola ACQUITY UPLC.
Funciones adicionales del panel de control del bioSM-FTN:
Funcin del panel de control Descripcin
Prime (Cebar) Muestra el cuadro de dilogo Prime (Cebar).Consultar la seccin Cebar la SM-FTN deldocumento Informacin de mantenimiento ydescripcin general de funcionamiento del
sistema de gestin de muestras con flujo a
travs de aguja.
Elemento del panel de control Descripcin
Funciones adicionales del panel de control del bioSM-FTN: (continuacin)
7/24/2019 Acquity H-class Bio System Guide Ra Es
47/98
Paneles de control ACQUITY 3-13
Panel de control del Detector de absorbancia programable(UV variable)
El panel de control del Detector TUV muestra las unidades de absorbancia ylos valores de longitud de onda, parmetros que se pueden modificar cuando elsistema se encuentra en inactivo haciendo clic en el valor subrayado. Noobstante, los parmetros del detector no se pueden modificar durante elanlisis de muestras.
Los paneles de control de otros detectores funcionan de manera similar. Si el
sistema incluye un detector PDA, se recomienda consultar la Gua deiniciacin al Detector de red de fotodiodos UPLC para ACQUITY.
Panel de control del Detector TUV:
Wash needle (Lavar aguja) Muestra el cuadro de dilogo Wash Needle(Lavar aguja).Consultar la seccin Lavar la aguja delSM-FTN del documento Informacin demantenimiento y descripcin general de
funcionamiento del sistema de gestin de
muestras con flujo a travs de aguja.
Reset SM (Reiniciar elsistema de gestin demuestras)
Restablece el sistema de gestin de muestrastras un error.
Ayuda Muestra la Ayuda en lnea de la consola.
Funcin del panel de control Descripcin
Indicador LED
de la lmpara
(encendida/apagada)
Encender/apagar la
lmpara del detector
Estado
Unidades de
absorbancia
Valor de longitud
de onda A
La siguiente tabla describe los controles e indicadores del panel de control delDetector TUV.
7/24/2019 Acquity H-class Bio System Guide Ra Es
48/98
3-14 Preparar el sistema
Se puede acceder a funciones adicionales descritas en la siguiente tablahaciendo clic con el botn derecho del ratn en cualquier lugar del panel decontrol del detector:
Elementos del panel de control del Detector TUV:
Elemento del panel decontrol
Descripcin
Indicador LED de la lmpara(encendida/apagada)
Muestra el LED de encendido/apagado de lalmpara situado en el panel frontal deldetector, a menos que se haya perdido lacomunicacin con el detector.
Estado Muestra el estado de funcionamiento actual.UA Muestra las unidades de absorbancia.
nm Muestra el valor de la longitud de onda A, ennm. Si el detector se encuentra en el modo delongitud de onda doble, tambin aparece elvalor de la longitud de onda B.
(Encender lmpara) Enciende la lmpara del detector.
(Apagar lmpara) Apaga la lmpara del detector.
Funciones adicionales del panel de control del detector:
Funcin del panel de control Descripcin
Auto Zero (Puesta a ceroautomtica)
Restablece el valor de absorbancia en 0.
Reset TUV (Reiniciar el
Detector de absorbanciaprogramable [UV variable])
Si est disponible, restablece el detector tras
un error.
Ayuda Muestra la Ayuda en lnea de la consola.
Puesta en marcha de la Consola ACQUITY UPLC
7/24/2019 Acquity H-class Bio System Guide Ra Es
49/98
Puesta en marcha de la Consola ACQUITY UPLC 3-15
La Consola ACQUITY UPLC es una aplicacin de software que permite
configurar los valores, supervisar el funcionamiento, realizar pruebas dediagnstico, y mantener el sistema y sus mdulos de manera sencilla.Sustituye a los teclados y a las pequeas pantallas que se encuentranhabitualmente en la parte frontal de los instrumentos del sistema. La Consola
ACQUITY UPLC funciona independientemente a las aplicaciones de datos yno los reconoce ni los controla.
Desde la interfaz de la Consola ACQUITY UPLC se puede acceder
rpidamente a las representaciones grficas de cada mdulo del sistema y desus componentes. Tambin se pueden ver diagramas interactivos en los que semuestran las conexiones que existen entre los mdulos y que permiten utilizarherramientas de diagnstico para resolver problemas.
Para iniciar la Consola ACQUITY UPLC desde el software Empower:
En la ventana Run samples (Analizar muestras), hacer clic en el botn de
visualizacin de la consola del panel de control del bioSM-FTN.
Ventana ACQUITY UPLC Console (Consola ACQUITY UPLC):
Para iniciar la Consola ACQUITY UPLC desde el software MassLynx:
1 En la ventana MassLynx hacer clic en Inlet Method (Mtodo de
7/24/2019 Acquity H-class Bio System Guide Ra Es
50/98
3-16 Preparar el sistema
1. En la ventana MassLynx, hacer clic en Inlet Method (Mtodo deentrada).
2. En la ventana Inlet Method (Mtodo de entrada), hacer clic en la fichaACQUITY Additional Status (Estado adicional de ACQUITY).
3. Hacer clic en el botn de visualizacin de la consola .
A Consejos de seguridad
7/24/2019 Acquity H-class Bio System Guide Ra Es
51/98
A-1
A Consejos de seguridadLos instrumentos de Waters muestran smbolos de peligro cuyafinalidad es advertir al usuario de los peligros implcitos en relacin conel funcionamiento y el mantenimiento de los instrumentos. Estossmbolos aparecen tambin en las guas del usuario correspondientes,acompaados de un texto que describe los riesgos y la manera de
evitarlos. En este apndice se describen todos los smbolos yadvertencias de seguridad que se aplican a toda la lnea de productos deWaters.
Contenido:
Tema Pgina
Smbolos de advertencia A-2
Smbolo de precaucin A-6
Advertencias que se aplican a todos los instrumentos de Waters A-6
Smbolos elctricos y de manejo A-7
Smbolos de advertencia
7/24/2019 Acquity H-class Bio System Guide Ra Es
52/98
A-2 Consejos de seguridad
Los smbolos de advertencia alertan del riesgo de muerte, lesiones o reacciones
fisiolgicas adversas y graves relacionadas con el uso correcto o indebido de uninstrumento. Cuando se instale, se repare o se utilice un instrumento deWaters, se deben tener en cuenta todas las advertencias. Waters no asumeninguna responsabilidad por el incumplimiento de las precauciones deseguridad por parte de las personas que instalen, reparen o manipulen susinstrumentos.
Advertencias de peligro asociadas con tareas especficasLos siguientes smbolos de advertencia avisan de los riesgos que se puedenproducir durante el funcionamiento o el mantenimiento de un instrumento ocomponente. Estos riesgos incluyen quemaduras, descargas elctricas,exposicin a radiacin ultravioleta y otros peligros.
Cuando estos smbolos aparecen en las descripciones o en los procedimientos
de un manual, el texto adjunto identifica el riesgo especfico y explica lamanera de evitarlo.
Advertencia: (riesgo general de peligro. Si este smbolo aparece en uninstrumento, se recomienda consultar la informacin importante sobreseguridad que se incluye en la documentacin del usuario delinstrumento antes de su utilizacin).
Advertencia: (riesgo de quemaduras producidas por contacto consuperficies calientes).
Advertencia: (riesgo de descarga elctrica).
Advertencia: (riesgo de incendio).
Advertencia: (riesgo de lesiones por objetos punzantes).
Advertencia: (riesgo de lesiones por aplastamiento de la mano).
Advertencia: (riesgo de exposicin a radiacin ultravioleta).
Advertencia: (riesgo de contacto con sustancias corrosivas).
Advertencia: (riesgo de exposicin a sustancias txicas).
7/24/2019 Acquity H-class Bio System Guide Ra Es
53/98
Smbolos de advertencia A-3
Advertencias especficas
Las siguientes advertencias pueden aparecer en los manuales del usuario dedeterminados instrumentos, as como en las etiquetas de los instrumentos o desus componentes.
Advertencia de reventn
Esta advertencia se aplica a los instrumentos de Waters con tubos nometlicos.
Advertencia: (riesgo de exposicin a radiacin lser).
Advertencia: (riesgo de exposicin a agentes biolgicos que puedensuponer un grave peligro para la salud).
Advertencia: (riesgo de vuelco).
Advertencia: (riesgo de explosin).
Advertencia: (riesgo de lesiones oculares).
Advertencia: los tubos no metlicos o de polmeros presurizados puedenreventar. Se recomienda tener en cuenta las precauciones siguientescuando se trabaje cerca de estos tubos: Utilizar proteccin ocular. Se debe apagar cualquier llama que pueda haber en las
proximidades. No utilizar tubos que se hayan doblado o sometido a tensiones.
No exponer los tubos no metlicos a compuestos incompatibles, comotetrahidrofurano (THF), o los cidos ntrico o sulfrico.
Algunos compuestos, como el diclorometano y el dimetilsulfxido,producen una expansin de los tubos no metlicos, lo que reduceconsiderablemente la presin a la que pueden reventar los tubos.
Advertencia de eluyentes inflamables en el espectrmetro de masas
Esta advertencia se aplica a los instrumentos que se utilizan con eluyentes
7/24/2019 Acquity H-class Bio System Guide Ra Es
54/98
A-4 Consejos de seguridad
p q yinflamables.
Peligro de descarga elctrica del espectrmetro de masas
Esta advertencia se aplica a todos los espectrmetros de masas de Waters.
Esta advertencia se aplica a determinados instrumentos cuando estn enfuncionamiento.
Advertencia: cuando haya una cantidad importante de eluyentesinflamables, se requerir un flujo continuo de nitrgeno en el interior dela fuente de ionizacin para evitar su posible ignicin en este espaciocerrado.Es importante comprobar que la presin del suministro de nitrgeno nodescienda nunca por debajo de los 690 kPa (6.9 bar, 100 psi) durante un
anlisis en el que se utilicen eluyentes inflamables. Tambin esimportante comprobar que haya una conexin de seguridad para el gasen el sistema de LC, con el fin de detener el flujo de eluyente de LC sifalla el suministro de nitrgeno.
Advertencia: para evitar descargas elctricas, se recomienda no retirarlos paneles protectores del espectrmetro de masas. Estos paneles nocubren ningn componente que el usuario deba manipular.
Advertencia: puede haber voltajes altos en ciertas superficies externasdel espectrmetro de masas cuando el instrumento est enfuncionamiento. Para evitar una descarga elctrica no mortal,asegurarse de que los instrumentos estn en modo Standby (En espera)antes de tocar las piezas con el smbolo de advertencia de alto voltaje.
Advertencia de peligro biolgico
Esta advertencia se aplica a los instrumentos de Waters que se pueden
7/24/2019 Acquity H-class Bio System Guide Ra Es
55/98
Smbolos de advertencia A-5
utilizar para procesar materiales con posible riesgo biolgico, como las
sustancias que contienen agentes biolgicos que pueden producir efectosnocivos en las personas.
Advertencia de peligro qumico
Esta advertencia se aplica a los instrumentos de Waters que pueden procesarmaterial corrosivo, txico, inflamable o cualquier otro tipo de materialpeligroso.
Advertencia: los instrumentos y el software de Waters se puedenutilizar para el anlisis o procesamiento de productos de origen humanopotencialmente infecciosos, microorganismos inactivados y otrosmateriales de origen biolgico. Con el fin de evitar infecciones con estosagentes, se debe considerar que todos los lquidos biolgicos soninfecciosos, as como cumplir con las buenas prcticas de laboratorio yconsultar al responsable de seguridad biolgica de la organizacin paraobtener informacin sobre su uso y manipulacin correctos. La ltimaedicin de la publicacinBiosafety in Microbiological and BiomedicalLaboratories(BMBL) de los NIH (Institutos Nacionales de Salud) deEstados Unidos incluye precauciones especficas.
Advertencia: los instrumentos de Waters se pueden utilizar
para analizar o procesar sustancias potencialmentepeligrosas. Para evitar lesiones con cualquiera de estosmateriales, el usuario debe familiarizarse con los materialesy sus riesgos, cumplir con las buenas prcticas de laboratorio(GLP), y consultar cualquier duda respecto a la utilizacin yla manipulacin correctas de estos materiales al responsablede seguridad de la organizacin. La ltima edicin de la
publicacinPrudent Practices in the Laboratory: Handlingand Disposal of Chemicals, del Consejo Nacional deInvestigacin de Estados Unidos incluye indicacionesgenerales.
Smbolo de precaucin
El b l d i i ifi l t i d bid d
7/24/2019 Acquity H-class Bio System Guide Ra Es
56/98
A-6 Consejos de seguridad
El smbolo de precaucin significa que el uso correcto o indebido de un
instrumento puede causar daos al instrumento o poner en peligro laintegridad de una muestra. El siguiente smbolo y el mensaje asociado son unejemplo tpico de los mensajes que alertan del riesgo de daar el instrumento ola muestra.
Advertencias que se aplican a todos los instrumentos deWaters
Al utilizar este dispositivo se deben seguir los procedimientos estndar decontrol de calidad y las indicaciones de uso del equipo detalladas en esta
seccin.
Precaucin: para evitar que se produzcan daos, no utilizar sustanciasabrasivas ni disolventes para limpiar la cubierta en la que se aloja elinstrumento.
Atencin:los cambios o modificaciones hechos a esta unidad que no hayan sidoexpresamente aprobados y conformados por la entidad responsable puedenanular la autorizacin al usuario para manejar el equipo.
Advertencia:se debe tener cuidado cuando se trabaje con tubos de polmeros
bajo presin: El usuario deber protegerse siempre los ojos cuando trabaje cerca de tubosde polmero sometidos a presin.
Se debe apagar cualquier llama que pueda haber en las proximidades. No se debe trabajar con tubos que se hayan doblado o sometido a altas
presiones. Es necesario utilizar tubos de metal cuando se trabaje con tetrahidrofurano
(THF) o cido ntrico o sulfrico concentrado. Hay que tener en cuenta que el diclorometano y el dimetilsulfxido dilatan
los tubos no metlicos, lo que reduce la presin de ruptura de los tubos.
Advertencia:el usuario deber saber que si el equipo se utiliza de forma
distinta a la especificada por el fabricante, las medidas de proteccin del equipopodran ser insuficientes.
Smbolos elctricos y de manejo
7/24/2019 Acquity H-class Bio System Guide Ra Es
57/98
Smbolos elctricos y de manejo A-7
Smbolos elctricosEstos smbolos pueden aparecer en los manuales del usuario y en los panelesfrontales o posteriores de un instrumento.
Encendido
Apagado
En espera
Corriente continua
Corriente alterna
Terminal de proteccin del conductor
Terminal del chasis o armazn
Fusible
Smbolo de reciclaje: no desechar en loscontenedores de residuos municipales.
Smbolos de manejo
Los siguientes smbolos de manejo y su texto adjunto pueden aparecer en lasetiquetas del embalaje exterior de un instrumento o componente de Waters
7/24/2019 Acquity H-class Bio System Guide Ra Es
58/98
A-8 Consejos de seguridad
etiquetas del embalaje exterior de un instrumento o componente de Waters.
Mantener en posicin vertical
No mojar
Frgil
No utilizar ganchos
B Conexiones externas
7/24/2019 Acquity H-class Bio System Guide Ra Es
59/98
Conexiones de los tubos del sistema B-1
En esta seccin se describen las conexiones externas del Sistemabiolgico ACQUITY UPLCH-Class.
Indicacin:un representante del servicio tcnico de Waters debedesembalar e instalar los instrumentos del Sistema biolgico ACQUITYUPLC H-Class.
Conexiones de los tubos del sistema
A continuacin se muestran las conexiones de los tubos exteriores del sistema,
utilizados para el flujo de eluyente y el drenaje.
Advertencia: para evitar lesiones de espalda, no se debe intentarlevantar los instrumentos sin ayuda.
Precaucin:
Llamar al servicio tcnico de Waters al telfono 902 254 254antes de mover los instrumentos del Sistema biolgico
ACQUITY UPLC H-Class. Si se es necesario transportar el mdulo o dejar de utilizarlo,
llamar al servicio tcnico de Waters al telfono 902 254 254para obtener informacin sobre los procedimientos de limpieza,aclarado y embalado recomendados.
Contenido:Tema Pgina
Conexiones de los tubos del sistema B-1
Conexiones de los cables externos del instrumento B-3
Conexiones de la trayectoria del flujo p
Top Related