UNIVERSIDAD TÉCNICA DE MACHALA
UNIDAD ACADEMICA DE CIENCIAS QUÍMICAS Y DE LA SALUD
CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA
TRABAJO DE TITULACIÓN
PREVIA LA OBTENCIÓN DEL TÍTULO DE
BIOQUÍMICA FARMACÉUTICA
TEMA:
ANÁLISIS DEL EFECTO ANTIMICROBIANO DE DOCE PLANTAS
MEDICINALES DE USO ANCESTRAL EN EL ECUADOR
ASPIRANTE
ANDREA AZUERO C.
TUTOR
Dra. HAYDELBA D’ ARMAS, PhD
COTUTOR
Dra. CARMITA JARAMILLO JARAMILLO
MACHALA - EL ORO - ECUADOR
2015
2
CERTIFICACIÒN
El presente trabajo de investigación “ANÁLISIS DEL EFECTO ANTIMICROBIANO
DE DOCE PLANTAS MEDICINALES DE USO ANCESTRAL EN EL ECUADOR ”,
realizado por el autor Sra. Andrea Jacqueline Azuero Caamaño, egresado de la carrera de
Bioquímica y Farmacia, ha sido prolijamente dirigido y revisado, por lo tanto autorizo su
presentación previo a la obtención del título de Bioquímico Farmacéutico.
Dra. HAYDELBA D’ ARMAS, PhD
DIRECTOR DEL TRABAJO DE TITULACIÓN
3
UNIVERSIDAD TÉCNICA DE MACHALA
UNIDAD ACADÉMICA DE CIENCIAS QUÍMICAS Y DE LA SALUD
INFORME DE HORAS DE TRABAJO DE TITULACIÓN
Machala, 06 de Abril del 2015.
Dr.
Jhonny Pérez
Decano de la Unidad Académica de Ciencias Químicas y de la Salud
De mi consideración.
La presente sírvase para notificarle a Ud. y por su intermedio al H. Consejo Directivo de la Unidad
Académica, que luego de haber dirigido en calidad de Tutor del Trabajo de Titulación “ANÁLISIS
DEL EFECTO ANTIMICROBIANO DE DOCE PLANTAS MEDICINALES DE USO
ANCESTRAL EN EL ECUADOR”, el mismo que ha sido ejecutado y revisado bajo mi
responsabilidad ha cumplido todas las normas de redacción de la Unidad Académica y el rigor
científico que amerita, incluyendo las normas reglamentarias que exige un trabajo de titulación, lo
cual detallo a continuación:
200 horas de trabajo permanente con la tutora, en asesoramiento de trabajo de titulación y
laboratorio.
200 horas de trabajo permanente en laboratorio, sin el tutor.
240 horas de trabajo autónomo en la elaboración del documento final del trabajo de
titulación.
Detalle que certifica un total de 640 horas de trabajo de titulación, correspondiente a 16
créditos académicos, del aspirante Sra. Andrea Jacqueline Azuero Caamaño.
Esperando que la presente tenga una acogida favorable, le reitero mis agradecimientos.
Atentamente
Dra. HAYDELBA D’ ARMAS, PhD
TUTOR DEL TRABAJO DE TITULACIÓN
4
RESPONSABILIDAD
Yo, ANDREA JACQUELINE AZUERO CAAMAÑO, autor del presente trabajo de
titulación cuyo tema es: “ANÁLISIS DEL EFECTO ANTIMICROBIANO DE DOCE
PLANTAS MEDICINALES DE USO ANCESTRAL EN EL ECUADOR ”, declaro
que la investigación, resultados y conclusiones expuestas en el presente trabajo,
son de mi responsabilidad.
———————————————————————
ANDREA JACQUELINE AZUERO CAAMAÑO
AUTOR
5
CESIÓN DE DERECHO DE AUTORÍA
Yo, ANDREA JACQUELINE AZUERO CAAMAÑO, con cédula de identidad
0704996180, egresada de la escuela de Bioquímica y Farmacia, de la Unidad
Académica de Ciencias Químicas y de la Salud, de la Universidad Tecnica de
Machala, responsable del presente trabajo de titulación con tema: “ ANÁLISIS
DEL EFECTO ANTIMICROBIANO DE DOCE PLANTAS MEDICINALES DE USO
ANCESTRAL EN EL ECUADOR ”, Durante los meses JUNIO DEL 2014 hasta
MARZO del 2015, certifico que la responsabilidad de la investigación, resultados y
conclusiones del presente trabajo pertenecen exclusivamente a mi autoriza, una
vez que ha sido aprobado por mi tribunal de sustentación del trabajo de titulación
autorizando su presentación.
Deslindo a la Universidad Técnica de Machala de cualquier delito de plagio y cedo
mis derechos de autor a la Universidad Técnica de Machala para que ella proceda
a darle el uso que crea conveniente.
---------------------------------------
ANDREA JACQUELINE AZUERO CAAMAÑO
C.I. 0704996180
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DEDICATORIA
Dedico este trabajo primeramente a Dios ya que me ha dado las fuerzas
necesarias para seguir adelante y bendiciéndome día a día, a mi padre Holger
Azuero que no esté conmigo, sé que desde el cielo me ha cuidado y sé que está
muy orgulloso de mí.
A mi madre Rosa Caamaño, a mis hermanos Angélica Azuero y Holger Azuero
quienes estuvieron allí apoyándome y dándome su fortaleza y amor en esos
momentos que sentía que ya no podía más.
A mi esposo Jovanny Chamaidan, quien me apoyo incondicionalmente en mi
carrera universitaria.
7
AGRADECIMIENTO
Primero darle gracias a Dios ya que sin el nada sería posible y por las Bendiciones
que derrama en mi vida.
Gracias a mi querida tutora la Dra. Haydelba D’ Armas, por su paciencia,
dedicación y por sus conocimientos, y ante todo por ser una gran amiga.
Gracias a la Dra. Carmita Jaramillo por sus consejos y por siempre estar dispuesta
a ayudarme.
Gracias a BQF. Diana Sanmartín por ayudarme en mi trabajo de tesis en el
laboratorio de Microbiología y por siempre estar allí despejando todas mis dudas.
Gracias a todos ellos logre una de mis metas de mi vida, que es ser una
Bioquímica Farmacéutica de la Universidad Técnica de Machala.
8
RESUMEN
La actividad antimicrobiana de plantas medicinales es un grande beneficio que se
puede obtener para lograr tener un efecto ya sea antibacteriano o anti-fúngico, y
así lograr sanar alguna patología que se presente con una de estas plantas. En el
ensayo de la actividad antibacteriana se utilizó el medio de cultivo Müller-Hinton y
las cepas de Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa, y Staphylococcus aureus
realizándole dos pocillos mediante los cuales se formaron sus respectivos halos
de inhibición, un pocillo se usó para colocar el medicamento que sirvió para
combatir las bacterias, en este caso ciprofloxacina, y en el otro pocillo el extracto
metanólico de la planta. En el ensayo de la actividad antifúngica se utilizó el medio
de cultivo Agar Papa Dextrosa y se utilizó la cepa de Candida albicans, se
utilizaron dos pocillos, en un pocillo se colocó el medicamento, en este caso
ketoconazol, para controlar el crecimiento de los hongos, en el otro pocillo se
colocó el extracto metanólico. Se le realizó el análisis antimicrobiano a estas doce
plantas medicinales Cymbopogon citratus, Melissa officinalis, Taraxacum officinale,
Artemisia absinthium, Piper carpunya, Moringa oleífera, Coriandrum sativum,
Momórdica charantia, Borago officinalis, Aloysia citriodora, Ambrosia artemisifolia,
Ageratum conyzoides. El análisis de bioactividad antimicrobiana a los extractos
metanólicos de dichas plantas, arrojo que la mayoría de las mismas exhibieron un
efecto antibacteriano y antifúngico contra las cepas de bacterias y hongo
ensayados. Por lo cual, se puede decir que estas plantas constituyen una fuente
promisoria de compuestos antimicrobianos de gran valor farmacológico.
Palabras Clave: Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa, Staphylococcus
aureus, Plantas medicinales, actividad antimicrobiana.
9
ABSTRACT
The antimicrobial activity of medicinal plants is a great benefit that can be obtain in
order to have an effect either antibacterial or anti-fungal, and thus achieve heal any
pathology that is present with one of these plants. In the trial of the antibacterial
activity, medium Müller - Hinton and the strains of Escherichia coli, Pseudomonas
aeruginosa and Staphylococcus aureus were used to culture by bringing two wells
through which formed their respective halo of inhibition, a well was used to place
the medication that was used to combat bacteria, in this case ciprofloxacin, and the
methanolic extract of the plant was placed in the
other well. In the antifungal activity assay, medium of potato dextrose agar was
used for cultivation and the strain of Candida albicans, two wells were used and in
a well was placed the medication, in this case ketoconazole, to control the growth
of fungi, on the other well was placed the methanolic extract. Antimicrobial assays
were made to these twelve medicinal plants Cymbopogon citratus, Melissa
officinalis, Taraxacum officinale, Artemisia absinthium, Piper carpunya, Moringa
oleifera, Coriandrum sativum, Momordica charantia, Borago officinalis, Aloysia
citriodora, Ambrosia artemisifolia, Ageratum conyzoides. The analysis of
antimicrobial bioactivity to methanolic extracts of these plants, showed that most of
the same species exhibited an antibacterial and antifungal effect against the strains
of bacteria and fungus tested. Therefore, we can say that these plants are a
promising source of antimicrobial compounds for pharmacological great value.
Key Words: Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa, Staphylococcus aureus,
medicinal plants, antimicrobial activity.
10
ÍNDICE
CONTENIDO PAGINA
Resumen 8
Abstract 9
Introducción 15
Problema 17
Justificación 18
Objetivos 19
Objetivo General 19
Objetivo Especifico 19
Marco Referencial 20
1. Plantas Medicinales
1.1 Agar Mueller-Hinton
1.2 Agar Papa Dextrosa
1.3 Cepas
1.4 Escherichia coli
1.5 Pseudomonas aeruginosa
1.6 Staphylococcus aureus
1.7 Candida albicans
1.8 Plantas medicinales
Trabajo experimental
20
20
21
22
22
22
23
23
24
2. Diseño Metodológico 31
2.1 Localización Investigación 31
2.2 Universo de Trabajo 31
2.3 Tipo de Muestra 31
3. Materiales y Métodos 32
3.2 Tipo de Investigación 33
3.3 Selección de Muestra 33
3.4 Obtención y Preparación de muestra 33
4. Resultados y Discusión 36
5. Conclusiones 66
6. Recomendación 67
7. Bibliografía 68
11
ÍNDICE DE TABLAS
CONTENIDO PÁGINA
Tabla 1. Actividad antibacteriana del extracto
metanólico de Aloysia citriodora o Lippia
citriodora (Cedrón).
30
Tabla 2. Actividad antibacteriana del extracto
metanólico de Ambrosia artemisifolia
(altamisa).
32
Tabla 3. Actividad antibacteriana del extracto
metanólico de Taraxacum officinale (diente
de león).
34
Tabla 4. Actividad antibacteriana del extracto
metanólico de Ageratum conyzoides
(mastrante).
36
Tabla 5. Actividad antibacteriana del extracto
metanólico de Piper carpunya (guaviduca)
38
Tabla 6. Actividad antibacteriana del extracto
metanólico de Borago officinalis (borraja).
40
Tabla 7. Actividad antibacteriana del extracto
metanólico de Coriandrum sativum (cilantro). 42
Tabla 8. Actividad antibacteriana del extracto
metanólico de Melissa officinalis (toronjil).
44
Tabla 9. Actividad antibacteriana del extracto
metanólico de Cymbopogon citratus (hierba
luisa).
46
12
Tabla 10. Actividad antibacteriana del extracto
metanólico de Artemisia absinthium (ajenjo).
48
Tabla 11. Efecto antibacteriano de achochilla y
Ciprofloxacino contra las cepas de E. coli, P.
aeruginosa y S. aureus.
50
Tabla 12. Efecto antibacteriano de moringa y
Ciprofloxacino con cepa E.coli, P. aeruginosa
y S. aureus.
52
Tabla 13. Actividad antifúngica del extracto
metanólico de Aloysia citriodora (cedrón),
Ambrosia artemisifolia (altamisa) y
Taraxacum officinale (diente de león).
54
Tabla 14. Actividad antifúngica del extracto
metanólico de Ageratum conyzoides
(mastrante), Piper carpunya (guaviduca) y
Borago officinalis (borraja).
54
Tabla 15. Actividad antifúngica del extracto
metanólico de Coriandrum sativum (cilantro),
Melissa officinalis (toronjil) y Cymbopogon
citratus (hierba luisa).
56
Tabla 16. Actividad antifúngica del extracto
metanólico de Artemisia absinthium (ajenjo),
Momórdica charantia (achochilla) y Moringa
oleífera (moringa).
56
13
ÍNDICE DE FIGURAS
Figura 1. Efecto antibacteriano del Cedrón y
Ciprofloxacina contra las Cepas E.coli, P.
aeruginosa y S. aureus
31
Figura 2. Efecto antibacteriano de altamisa y
ciprofloxacino contra las cepas E. coli, P.
aeruginosa y S. aureus
33
Figura 3 . Efecto antibacteriano de diente de
León y ciprofloxacino contra cepas E. coli, P.
aeruginosa y S. aureus
35
Figura 4 .Efecto antibacteriano de mastrante y
ciprofloxacino con cepa E.coli, P.aeruginosa
y S. aureus
37
Figura 5. Efecto antibacteriano de guaviduca y
Ciprofloxacino contra la cepa E.coli, P.
aeruginosa y S. aureus.
39
Figura . Efecto antibacteriano de borraja y
Ciprofloxacino contra las cepas E. coli, P.
aeruginosa y S. aureus.
41
Figura 7. Efecto antibacteriano de cilantro y
Ciprofloxacino contra las cepas E.coli, P.
aeruginosa y S. aureus.
43
Figura 8. Efecto antibacteriano de toronjil y
Ciprofloxacino contra las cepas E. coli, P.
aeruginosa y S. aureus.
45
Figura 9. Efecto antibacteriano de hierba luisa
y Ciprofloxacino contra las cepas E. coli, P.
aeruginosa y S. aureus
47
Figura 10. Efecto antibacteriano de ajenjo y
Ciprofloxacino con cepa E.coli, P. 49
14
aeruginosa y S. aureus.
Figura 11. Achochilla y Ciprofloxacino con
cepa E.coli, P. aeruginosa y S. aureus.
51
Figura 12. Moringa y Ciprofloxacino con cepa
E.coli, P. aeruginosa y S. aureus.
53
Figura 13. Efecto antifungico de cedrón,
altamisa, diente de león, mastrante, guaviduca,
borraja y control etoconazol contra la cepa
Candida albicans
55
Figura 14. Efecto antifungico de cilantro,
toronjil, hierba luisa, ajenjo, achochilla, moringa
y control (ketoconazol) contra la cepa Candida
albicans.
57
15
INTRODUCCIÓN
Hasta los comienzos del siglo XX, los productos naturales ocuparon el principal
lugar en los tratamientos de la salud, pero fueron desplazados por el vertiginoso
desarrollo de drogas sintéticas, en particular por la producción industrial de
antibióticos. Las especie vegetales son una fuente importante de nuevos fármacos,
los que tienen una creciente demanda en compuestos antimicrobianos debido al
aumento de la población y a la creciente resistencia a los antibióticos, lo que
constituye una amenaza mundial según señala la Organización Mundial de la
Salud-OMS (VIVOT et al, 2012).
Las patologías por bacterias y hongos han ido aumentando cada vez más, ya que
estas presentan cierta resistencia a los medicamentos que se les aplican para
contrarrestarlas, provocando la mayoría de las ocasiones efectos secundarios a los
pacientes y como consecuencia de ello no existe ninguna mejoría en el paciente.
En la actualidad existen una gran variedad de plantas medicinales que crecen y
son recolectadas aquí en Ecuador ya que éstas contienen metabolitos que
presentan actividad biológica, además a la mayoría de las plantas que crecen en
nuestro País, no se les ha realizado un estudio profundo para conocer las grandes
propiedades curativas que poseen, algunas de estas plantas son consumidas por
las personas, sin embargo existen otras que lastimosamente no son consumidas
por no ser reconocidas por la población.
La utilización de sustancias naturales en el tratamiento de diferentes
enfermedades, incluidas las de etiología infecciosa, constituye en la actualidad un
16
desafío en la medicina y se ofrece como una alternativa, especialmente en aquellas
dolencias para las que no existe un remedio adecuado (DOMINGO y LÓPEZ-
BREA, 2003).
Después utica se dedicó
s las antiguas
squeda de nuevos
medicamentos de origen herbario (RUIZ y ROQUE, 2009).
17
PROBLEMA
Actualmente, uno de los problemas más comunes es que existen plantas
medicinales que tienen una actividad antimicrobiana conocida por la población sin
embargo no han sido analizadas a fondo, para determinar cuáles son sus
beneficios, pasando muchas veces desapercibidas.
Un número creciente de personas recurren a sus propiedades curativas basándose
en su uso tradicional. No obstante, ciertas plantas medicinales no han mostrado las
propiedades que les atribuye la medicina popular, e incluso han resultado
peligrosas (HERNÁNDEZ, 2006).
Existen reportes en la literatura de que numerosas investigaciones están
encaminadas a la búsqueda de nuevos compuestos con actividades biológicas a
partir de fuentes naturales, mientras otras están destinadas a verificar las
propiedades que se les atribuyen (AVELLANEDA, 2005).
El estudio científico de las plantas medicinales es una fuente relevante para el
descubrimiento de nuevos fármacos que luego se sintetizan, pero también permite
un conocimiento más profundo de los vegetales que conduce a que muchos
productos naturales sean reconocidos como fitofármacos, es decir, compuestos
que igualan el nivel de los fármacos de síntesis (VIVOT et al, 2012).
18
JUSTIFICACIÓN
El control de diferentes patologías ya sea causadas por hongos y bacterias
utilizando estos extractos metabólicos de doce plantas medicinales es algo que
aún no ha sido probado.
Estas plantas de estudio han demostrado poseer efectos antibacterianos y
antifúngicos, muy aparte de que poseen otras propiedades curativas además de
estas, ya que para esta investigación solo se utilizó las hojas de estas doce plantas
medicinales que son recolectadas únicamente en Ecuador.
La solución que se encontraría para evitar consumir tantos medicamentos que no
ejercen una acción curativa se da la alternativa que mediante el estudio realizado
en este trabajo se conozcan la capacidad que tienen estas plantas y así poder
utilizarlas en la elaboración de algún medicamento que pueda ayudar a las
personas que presenten patologías pudiendo ser estas sanadas por la potente
acción de estas maravillosas plantas medicinales.
Con esta investigación se contribuiría a que estas plantas sean reconocidas por
todos y sepan lo valiosas que son y principalmente los benéficios que estas
brindan a la población.
19
OBJETIVOS
OBJETIVO GENERAL
Evaluar el efecto antibacteriano y antifúngico de las hojas de algunas plantas
medicinales recolectadas en la Provincia del Oro.
OBJETIVOS ESPECÍFICOS:
1) Procesar las doce plantas en estudio como es lavado, secado, molienda y
luego extraer los metabolitos secundarios presentes en las plantas, mediante
la obtención de los extractos.
2) Determinar la actividad antibacteriana de los extractos obtenidos, mediante
el método del antibiograma.
3) Ensayar la actividad antifúngica de los extractos de las plantas, haciendo
uso del método de difusión en agar.
20
MARCO REFERENCIAL
1. MEDIOS DE CULTIVO
Uno de los sistemas más importantes para la identificación de microorganismos es
observar su crecimiento en sustancias alimenticias artificiales preparadas en el
laboratorio. El material alimenticio en el que crecen los microorganismos es el
Medios de Cultivo y el crecimiento de los microorganismos es el Cultivo.
Para que las bacterias crezcan adecuadamente en un medio de cultivo artificial
debe reunir una serie de condiciones como son: temperatura, grado de humedad y
presión de oxígeno adecuada, así como un grado correcto de acidez o alcalinidad.
Un medio de cultivo debe contener los nutrientes y factores de crecimiento
necesarios y debe estar exento de todo microorganismo contaminante.
El agar es un elemento solidificante muy empleado para la preparación de medios
de cultivo. Se licúa completamente a la temperatura del agua hirviendo y se
solidifica al enfriarse a 40 grados. Con mínimas excepciones no tiene efecto sobre
el crecimiento de las bacterias y no es atacado por aquellas que crecen en el.
En los diferentes medios de cultivo se encuentran numerosos materiales de
enriquecimiento como hidratos de Carbono se adicionan por dos motivos
fundamentales para incrementar el valor nutritivo del medio y ´para detectar
reacciones de fermentación de microorganismos que ayuden a identificarlos. El
suero y la sangre completa se añaden para promover el crecimiento de los
microorganismos menos resistentes.
El desarrollo adecuado de los microorganismos en un medio de cultivo se ve
afectado por una serie de factores de gran importancia y que en algunos casos son
ajenos al propio medio (CASADO, et al 2012).
21
1.1 AGAR MUELLER-HINTON
Se emplea para ensayos de sensibilidad de los microorganismos frente a
antibióticos y sulfonamidas. También en aislamiento primario de Gonococos y
Meningococos.
Mueller y Hinton tomaron como punto de partida de sus estudios el medio de
Gordon y Hine con el fin de encontrar un medio capaz de resistir el autoclavado. El
primer paso fue sustituir la harina de guisante por el almidón, que a su vez protegía
el medio de las toxinas que pudieran estar presentes. Después sustituyeron la
peptona de carne por la de caseína hidrolizada, que por ser más fragmentada
favorecía más los crecimientos. Finalmente ha sido reconocido como el más
indicado para los ensayos de sensibilidad a antibióticos y sulfamidas por el
procedimiento de los discos.
En la ´reparación de este medio es fundamental que las concentraciones de timina,
timidina y ácido 4-aminobenzoico, sean lo suficiente bajas para no inhibir la
actividad antibacteriana de antibióticos y el ultimo las sulfamidas. El ensayo de
sensibilidad de un microorganismo frente a un antibiótico se puede realizar sobre
placas de agar Mueller-Hinton por procedimientos de difusión, por diluciones
seriadas o por técnicas turbidimétricas en el Caldo Mueller-Hinton. En las técnicas
de difusión se mide el halo de inhibición del crecimiento confluente alrededor del
depósito del antibiótico ya sea discos, torrecillas etc. (AMER, et al 1966).
1.2 AGAR PAPA DEXTROSA
El agar de Papa Dextrosa es un medio comúnmente utilizado para cultivar hongos
y levadura y a este medio se le puede añadir antibióticos para evitar el crecimiento
de bacterias.
El PDA es utilizado por varios investigadores para el aislamiento de especies
Fusarium. No se recomienda este medio para estos propósitos ya que varios
22
hongos saprófitos y bacterias también pueden crecer en el medio e interferir con la
recuperación de hongos del género Fusarium presentes.
Si se utiliza PDA para la recuperación de hongos provenientes de plantas entonces
se debe reducir la concentración de papa y dextrosa entre un 50 y 75% y añadir
antibióticos de amplio espectro para inhibir el crecimiento de bacterias (LESLIE, et
al 2006).
1.3 CEPAS
1.4 Escherichia coli
Es una de las especies bacterianas mas minuciosamente estudiadas y no
solamente por sus capacidades patogénicas sino también como sustrato y modelo
de investigaciones metabólicas, genéticas, poblacionales y de diversa índole
(Neidhardt, 1999).
E. coli puede ser causa de una enfermedad endógena en pacientes debilitados o
en situación de alteración de la pared intestinal como peritonitis, sepsis entre
otras, pero las infecciones entéricas provocadas por este germen no son causadas
por las cepas que habitan normalmente en el intestino, sino por las líneas
especialmente patógenas en esta localización (NATARO, et al 1998).
1.5 Pseudomonas aeruginosa
Es el principal patógeno de la familia Pseudomonadaceae y se identifica por ser un
bacilo gramnegativo ligeramente curvado que crece mejor en aerobiosis es muy
versátil nutritivamente y no fermenta hidratos de Carbono pero produce ácido a
partir de azúcares como la glucosa, fructosa y lactosa o sacarosa.
En relación a la morfología de las colonias puede ser variada y generalmente
pigmentadas se encuentran las típicas colonias que se extienden en la placa con
un brillo metálico y con un aspecto gelatinoso, viscoso especialmente en zonas de
mayor crecimiento y las variantes de colonias con morfotipo enano, coliforme y
muciode frecuentes de observar en las vías respiratorias y en pacientes con
fibrosis quística.
23
P. aeruginosa se caracteriza por estar ampliamente distribuida en la naturaleza
formando parte de la microbióta normal del hombre, la facilidad que muestra P.
aeruginosa para crecer tanto en la naturaleza como a nivel nosocomial le permite
ser una de las principales causas de infecciones hospitalarias graves (MONTERO,
2012).
1.6 Staphylococcus aureus
Es la especie más patógena y virulenta para el hombre, pero también puede
encontrarse colonizando la piel y las mucosas.
Las colonias de S. aureus presentan un color amarillo dorado característico debido
a la producción de carotenoides durante su crecimiento de ahí su nombre se deriva
d ela palabra latina con la que se designa el oro, sin embargo muchas cepas
presentan variantes no pigmentadas S. aureus crece bien a altas concentraciones
de NaCl, es coagulasa, DNAsa y catalasa positivo y fermenta el manitol, lo que
permite diferenciarlo del resto de especies del género Staphylococcus
(BANNERMAN, 2003).
La infección por S. auerus se produce tras lesiones cutáneas, traumáticas o
quirúrgicas que favorecen la penetración del microorganismo desde la piel hasta
los tejidos profundos. Desde estos puntos puede producir bacteriemia y cuadros
metastásicos. Las infecciones causadas por S. aureus generalmente son
supurativas y tienden a la formación de abscesos (PASCUAL, 2005; LOWY, 2006).
1.7 Candida albicans
Es un microorganismo muy versátil por su capacidad para sobrevivir como
comensal en varios sitios anatómicamente distintos como el intestino, cavidad oral
y vagina, y puede causar la enfermedad cuando se le presenta la oportunidad. La
limitación por nutrientes y la competencia entre bacterias y hongos en las
superficies mucosas proporcionan una presión selectiva que ocasiona la
eliminación de los microorganismos menos adaptados.
Candida albicans tiene varios atributos de virulencia para colonizar el huésped y
ocasiona daño de forma directa, al activar, resistir o desviar los mecanismos de
24
defensa del mismo. Los factores de virulencia expresados o requeridos por el
microorganismo para causar infección pueden variar según el tipo, el sitio y la
naturaleza de las defensas del huésped (CASTRILLON, et al 2004).
1.8 PLANTAS MEDICINALES
Se pueden encontrar gran variedad de plantas con usos medicinales que se
expenden en mercados de Costa, Sierra y Amazonia (ORTEGA et al, 1988).
Las causas y el extenso empleo de plantas medicinales entre los ecuatorianos son
el bajo poder adquisitivo de la mayoría que no permite el acceso a medicamentos,
la carencia de un sistema oficial de salud efectivo y principalmente que el
conocimiento medico ancestral es inmenso (ESTRELLA, 1995; BUITRON, 1999).
Hierba luisa cuyo nombre es Cymbopogon citratus, es perteneciente a la
familia Verbenácea, es vivaz, leñosa, arbustiva, que puede alcanzar 1 m y
más de altura. Los tallos son largos, delgados y asurcados por pequeñas
costillas longitudinales. Las hojas están insertas en cada nudo, en vértices
de tres; tienen un peciolo corto y son lanceoladas de borde entero con una
nerviación central muy saliente por su envés de los que parten casi
perpendicularmente numerosas nerviaciones secundarias, las hojas tienen
un característico olor a limón, las hojas y sumidades contienen del 0,20 al
0,25 % de aceite esencial cuyos componentes mayoritarios son: limoneno,
citral, geraniol, 40-45 % de sesquiterpenos , verbenona, aldehído y cetonas.
Su aplicación es que tiene un efecto tónico, estomáquica, digestiva,
antiespasmódica y carminativa (MUÑOZ ,1996). La principal accion del
aceite esencial es sobre el aparato digestivo, por lo que puede aplicarse en
casos de colitis, gastroenteritis y otras afecciones como las gastritis causada
por la bacteria Helicobacter pylori como se demuestra en un estudio en
Kyoto donde se inhibió totalmente el crecimiento de la bacteria mediante la
administración oral del aceite (OHNO et al, 2003).
Toronjil cuyo nombre científico es Melissa officinalis, proviene de la familia
Laminaceae, es una hierba vivaz, perenne de 30 a 80 cm de altura, tallo
cuadrangular, erecto algo velludo y muy ramificado; hojas opuestas,
25
pecioladas ovales, con base amplia, agudas, con pelillos y bordes rizados,
de color verde oscuro por la cara superior más pálidas en el envés, rugosas
al tacto y con intenso olor a limón, se cultiva en huertos y jardines tanto
como ornamental como por su agradable olor y por ser medicinal
actualmente es utilizado en farmacia y perfumería. Sus compuestos
químicos son flavonoides, ácidos fenólicos, mucilagos urónicos, derivados
triterpénicos aceite esencial, glucósidos, taninos y su acción farmacológica
es sedante, carminativa, espasmolítico antibacterial, antiviral, antioxidante y
antihormonal y sus usos medicinales empíricos son desmayos, decaimiento
de ánimo, vértigos, migraña, cólicos nerviosos, espasmos, calambres,
dolores neurálgicos (ARANGO, 2014). El aceite esencial de esta planta
posee marcada actividad antibacteriana, antioxidante y antifúngica (DUKIT
et al, 2004). Se ha demostrado también que el extracto acuoso de M.
officinalis presenta propiedades inmunoestimulante; la esencia de M.
officinalis mostró citotoxicidad frente a diferentes líneas tumorales humanas
y de ratón (SOUSA et al. 2004).
Diente de león cuyo nombre científico es Taraxacum officinale y proviene
de la familia de las Asteráceas, es considerado como una cotiledónea es
decir una planta que produce dos hojas a partir de la germinación de su
simiente. Su tronco sin rama crece de 5 a 45 cm por encima de un ramo de
hojas brillantes toscamente dentadas, sin pelo y que son más anchasen su
parte superior que en la base. Los dientes de las hojas por lo general
tienden hacia abajo y las hojas crecen sobre un rosetón que actúa como
base dado que las hojas tienen una ranura natural que sirve para conducir
el agua a la raíz de la planta. Las plantas de diente de león prefieren suelos
ricos bien drenados enriquecidos con nitrógeno y de pH neutro, la mejor
recolección de esta especie se lleva a cabo en la primavera antes de que
las plantas florezcan, las personas que afirman tener aversión al sabor de
las hojas del diente de león muy probablemente las han recolectado una vez
que la planta ya ha florecido su uso medicinal es como diurético, laxante, así
como para evitar el escorbuto (MARS, 1999). Como tónico digestivo en
26
casos de estreñimiento en afecciones del hígado y la vesícula biliar, para
aumentar la diuresis, afecciones genitourinarias, gota, sobrepeso
acompañado de retención. Por su acción depurativa en el tratamiento de
fondo de enfermedades cutáneas. (LINARES, 2013).
Ajenjo su nombre científico es Artemisia absinthium L, proviene de la
familia Asteraceae es una planta perenne hasta 1 m de altura muy
ramificada tallos erectos con ramas herbáceas, flexibles de olor muy fuerte
característico y agradable para muchas personas, sus hojas alternas
trilobuladas las inferiores y bilobuladas las superiores, las inferiores son más
grandes que las superiores se hacen más pequeñas hacia arriba. Su
composición química son las lactonas sesquiterpénicas responsables del
sabor amargo de la droga, y el aceite esencial y su uso en la medicina
tradicional para el tratamiento de transtornos gástricos y biliares, se usa
como digestivo, como estimulante del apetito y de la secreción de los jugos
gástricos y de la bilis, su actividad terapeútica se lo debe principalmente a
su aceite esencial ya que este presenta acción antihelmíntica,
antibacteriana, vermífugo y también ayuda a regular las funciones digestivas
(FONNEGRA y JIMÉNEZ, 2007).
Guaviduca cuyo nombre científico es Piper carpunya, pertenece a la
familia Piperaceae es un árbol de 8 m de alto, ramillas con nudos
hinchados; hojas alternas, elípticas; las inflorescencias son amentos. Se
usan las hojas como condimento para preparar carnes y sopas también en
sus usos tenemos para aliviar cólicos menstruales, inflaciones estomacales
y cólicos estomacales, también ayuda a suspender la diarrea (VEERLE et
al, 1999). La Guaviduca es ampliamente utilizada en la medicina popular en
los paises tropicales y subtropicales de América del Sur como un remedio
anti-inflamatorio,anti-úlcera, antidiarreico y antiparasitario, asi como una
enfermedad para las irritaciones de la piel. Es una especie endémica de las
regiones del Norte de América del Sur, es un remedio con propiedades anti-
27
inflamatorias y antiulcerosos que se utiliza en la medicina popular del
Ecuador (FONNEGRA, et al 2007)
Moringa cuyo nombre científico es Moringa oleífera, pertenece a la familia
Moringaceae, sus hojas tienen cualidades nutritivas sobresalientes que
están entre las mejores de todos los vegetales perennes el contenido de
proteína es del 27 % además tienen cantidades significativas de calcio,
hierro, fosforo así como vitamina A y C este valor nutricional es importante
en áreas donde la seguridad alimentaria se puede ver amenazada
(FOLKARD y SUTHERLAND, 1996). Las hojas de la moringa pueden
utilizarse como purgante, cataplasma en las heridas, para minimizar los
dolores de cabeza, las hemorroides, la fiebre, el dolor de garganta, la
bronquitis, las infecciones óticas y oculares, el escorbuto y el catarro; el jugo
de las hojas controla los niveles de glucosa y reduce la inflamación
glandular. Las hojas frescas de moringa tienen grandes cualidades
nutritivas: más vitamina A que las zanahorias, más vitamina C que las
naranjas, más calcio que la leche, más potasio que el plátano, más hierro
que la espinaca y más proteína que ningún otro vegetal. También son muy
apetecidas con ellas se pueden preparar infusiones, ensaladas verdes,
pastas para bocaditos, salsas, sopas, cremas, guisos, arroz salteado etc.
Pueden ser mezcladas con cocteles de frutas o con jugos (BONAL et al.
2012).
Cilantro cuyo nombre científico es Coriandrum sativum, pertenece a la
familia de las Apiaceas, es una especie cultivada que integra grupos de
hierbas medicinales, aromáticas y de condimento de mayor consumo esta
es industrializada para la extracción de aceites esenciales y productos
farmacéuticas; así también se destaca por ser utilizada como repelente de
insectos a nivel de campo y almacenaje, entre sus usos medicinales esta
que es eupéptico, elimina los gases, antiespasmódica y ligeramente
tonificante del sistema nervioso, fungicida, antiinflamatorio, antihelmíntico y
analgésico por vía externa (VALDIVIEZO, 2011). La composición química
del cilantro se basa principlamente en sus aceites esenciales, los cuales
28
contienen decanal, dodecanal, decano, huleno, cerofileno, linalol, taninos,
ácido málico y otros componentes activos entre los que se encuentran varios
ácidos, linoleico, oleico, palmítico, ascórbico, que le otorgan al cilantro
propiedades antibacteriales, confiriéndole las mismas a las comidas que
sean preparadas con esta hierba, el cilantro es considerado como una de
las plantas medicinales emergentes no solo por el amplio mercado mundial
que abarca sino porque es una planta muy utilizada en muchos países
donde la han utilizado con múltiples fines terapéuticos. (SALAZAR, 2008).
Achochilla es conocida científicamente con el nombre de Momórdica
charantia y la familia Cucurbitácea, es una planta que se da exclusivamente
en el trópico, es considerada maleza ya que daña los cultivos siendo
arrancada por el campesino, ha sido muy usada en la Amazonía del país,
así como también en el litoral ecuatoriano en donde los nativos de la zona la
usan frecuentemente para curar a dolores abdominales, infecciones, en
tratamientos para parásitos, bajar de peso y bajar el colesterol muchos
sostienen que la planta es abortiva. En algunos lugares del mundo, la planta
ha sido estudiada por laboratorios de alto prestigio es donde se a
determinado que tiene propiedades hipoglucémicas, afrodisíacas, aunque
actualmente la achochilla es usada en tratamientos para personas enfermas
de SIDA, también para personas que padecen de cáncer de colon (FELIX y
CORONEL, 2003). El extracto metanólico provoca disminución de niveles de
glucosa, triglicéridos y lipoproteínas de baja densidad así como un
incremento de lipoproteínas de alta densidad por lo que puede ser efectivo
para el tratamiento de la hiperglucemia además de hipoglucemia (LAGARTO
et al. , 2008).
Borraja pertenece a la familia Boraginaceae y su nombre científico es
Borago officinalis L. Es una planta herbácea anual hasta 80 cm de altura,
tallo ramificado toda planta con pubescencia áspera, glauca. Hojas alternas
anchas decrecen en tamaño hacia el ápice de la rama las hojas basales
29
pecioladas, ovales y las caulinares, sésiles, lanceoladas, su composición
química contiene mucilagos, ácidos orgánicos, ácido láctico, acético y
silícico, heterópsidos, cianogénicos, sapogeninas, taninos 3 % flavonoides y
sales minerales. En medicina tradicional se usa como depurativo,
emoliente, béquico, diurético, laxante, expectorante, antipirético, diaforético,
galactogogo, se emplea también como antiinflamatorio de las vías urinarias,
de las vías respiratorias y afecciones de los bronquios; la decocción de las
hojas se utiliza como sudorífico contra la tos y como expectorante
(FONNEGRA y JIMÉNEZ, 2007). Las hojas de Borraja pueden ser
aplicadas a irritaciones de la piel ayuda a extraer venenos, el calcio líquido y
las proteínas presentes en las hojas se utilizan aplicándolas sobre una rotura
de hueso o sobre los huesos rotos en recuperación (ITZIK, 2007).
Cedrón pertenece a la familia Verbenáceas y sus nombres científicos son
Aloysia citriodora y Lippia citriodora es ampliamente utilizada en el
tratamiento de la diarrea y la disentería común, también para combatir las
lombrices. La manera en que se utiliza es en infusión. Tiene los siguientes
compuestos químicos alcoholes monoterpénicos: geraniol, α- terpinol,
citronelol, 1,8-nerol, cineol, epoxicariofileno, B- cariofilenósido; alcaloide
:cedrina; carbohidratos ; almidón; pigmento: amarillo (TORRES et al.,
2005). El aceite esencial mostró actividad actividad contra. S. Aureus ,
S.epidermidis, Bacillus cereus, Escherichia coli, Klebsiella ozaenae,
Enterococcus sp, Bacillus subtilis y Candida albicans (OLIVA et al., 2010).
Las hojas y tallos del cedrón son ricos en un aceite esencial cuyo
componente principal es el citral, responsable de su aroma y contiene
además limoneno, linalol, cineol, terpineol y cariofileno, un aldehido
sesquiterpénico al que se atribuye acción eupeptica y espasmolítica. Posee
una importante cantidad de malatonina sustancia que se usa como relajante
natural y que favorece el sueño nocturno ayuda al descanso total de la
memoria (ANDONI, 1988).
30
Altamisa cuyo nombre científico es Ambrosia artemisifolia, pertenece a la
familia Asteraceae, de las partes aéreas de esta planta se han aislado
flavonas y alcaloides, es venenosa para conejos y vacas, su forma de uso
se da para el calor en el cuerpo, desinflamar y prevenir el paludismo
(BLAIR y MADRIGAL, 2005). Sus hojas son lobuladas de 4 a 15 cm de
largo la inflorescencia es de color verde y se presenta en forma de racimos
sus frutos son pequeños de 2 – 3 mm de largo ha sido utilizado como
antihelmíntico y antiespasmódico y para regular la menstruación (NUÑEZ,
1982). Sus funciones se han utilizado tradicionalmente para tratar fiebre,
resfriados y diarrea. Cuando se excede su dosificación puede ocasionar
trastornos nerviosos e incluso convulsiones, la plana colocada en el piso si
no mata por lo menos repele las pulgas en lugares infestados por
estas(ABAD et al, 2011).
Mastrante cuyo nombre científico es Ageratum conyzoides, pertenece a la
familia Lamiaceae y se encuentra ampliamente distribuida como maleza de
potreros y campos abiertos, esta es una hierba arbustiva anual erecta, hasta
de 1 m ó más de altura. Tallo erecto cuadrangular ramificado, pubescente
en el apice de las ramas, hojas opuestas aovadas a lanceoladas, margen
dentada, glabras, tiene sus flores blancas, frutos tipo nuececilla de color
café marrón. Su composición química contiene malato y nitrato de potasio,
también triterpenos, ácido hyptático, tormentico y ursólico. Su uso en la
medicina tradicional el zumo o cataplasma de toda la planta se usa como
hemostático, antiséptico para cicatrizar las úlceras varicosas, para tratar
eczemas, alergias e inflamaciones. La fracción de la hoja machacada se
utiliza para la rasquiña, picadura de insectos, reumatismo y para aliviar el
dolor de muelas (FONNEGRA y JIMÉNEZ, 2007).El extracto de esta
especie presenta actividad insecticida, unos de sus usos más importantes
como analgésico, para la fiebre, antiespasmódico, cólicos, disminuyen la
inflamación y el dolor.
31
2. DISEÑO METODOLOGICO
2.1 Localización de la Investigación
El presente proyecto investigativo, se realizó en el Laboratorio de Microbiología y
Planta Piloto de Farmacia de la UCQS de la Universidad Técnica de Machala.
2.2 Universo de Trabajo
Las plantas fueron obtenidas en el Centro Comercial Las Mercedes, en el Cantón
el Guabo en los meses de agosto y septiembre de 2014.
2.3 Tipos de muestra
Para la realización de este proyecto se utilizaron doce plantas medicinales, donde
se obtuvo su extracto metanólico antes de realizarse los ensayos respectivos.
3. MATERIALES Y MÉTODOS
3.1. Materiales
Material de vidrio
• Cajas Petri
• Tubos de ensayo
• Vaso de Precipitación
• Pipeta de Pasteur
• Pipetas graduadas
32
• Embudo
Equipos:
• Rotaevaporador (Heidolph)
• Balanza (Ohaius)
• Cocineta (Haceb)
• Autoclave (Vertical V-3C)
• Esterilizador (Tuttnauer)
• Incubadora (Memmert)
• Estufa (Memmert)
Reactivos
• Metanol (100% puro)
Muestra
• Materia Vegetal ( Hojas)
Agar
• Agar de Papa Dextrosa
• Agar de Müller-Hinton
Microorganismos Analizados
Cepas certificadas obtenidas del IESS-Laboratorio de Biología Molecular (Aislado
de muestras clínicas).
• Escherichia coli
33
• Pseudomonas aeruginosa
• Staphylococcus aureus
• Candida albicans
3.2. Tipo de investigación
El siguiente trabajo, fue realizado como un proyecto investigativo para determinar
la actividad antimicrobiana de doce plantas medicinales que son utilizadas en
Ecuador para fines terapéuticos.
3.3. Selección de la muestra
Las hojas que se utilizaron fueron adquiridas en el centro comercial Las Mercedes
del Cantón El Guabo, que fueron llevadas a la Planta Piloto de Farmacia de la
UCQS en los meses de Agosto y Septiembre.
3.4. Obtención y Preparación de las muestras
▪ Se separaron las hojas de las plantas que se utilizaron, se lavaron con H2O
destilada y se secaron a temperatura ambiente durante un día y luego se las
colocó en la estufa para eliminar rastros de humedad.
▪ Ya obtenidas las hojas secas se molieron finamente y luego se las colocaron
en envases individuales a cada planta debidamente rotuladas.
▪ A las hojas trituradas se les realizó la extracción con metanol 100% puro. Se
obtuvieron los extractos con metanol, porque así se extraen tanto los
metabolitos polares como los no polares, y se quería averiguar la sensibilidad
microbiana ante una gama amplia de metabolitos secundarios, para así poder
34
inferir sobre la actividad antimicrobiana de estos extractos o mezcla de
compuestos químicos presentes en las hojas de estas plantas.
▪ Posteriormente, luego de la maceración se filtró, y a este filtrado se evaporó
en un rotavapor marca Heidolph a presión y temperatura de 40 ºC,
obteniéndose así los extractos fluídos de las drogas vegetales, los cuales se
prepararon según la metodología de MIRANDA et al. (2001). Estos extractos
en metanol eran fluidos y se llevaron a sequedad por evaporación a presión
reducida, eliminándose todo el metanol para obtener los extractos crudos o
secos de las hojas. Luego se retomaron con una mÍnima cantidad de metanol
a una concentración determinada para hacer las pruebas antimicrobianas, es
decir antibacterianas y antifúngicas, esto porque está demostrado que el
metanol no influye en los resultados, es un solvente ampliamente utilizado en
este tipo de bioensayo.
▪ Se prepararon los medios de cultivo para hongos con agar Papa Dextrosa
(PDA) y bacterias con agar Müller-Hinton previamente esterilizados.
▪ Se realizó la siembra en sus respectivos medios de cultivo utilizando las
cepas para bacterias: Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa,
Staphylococcus aureus, y como cepa de hongo Candida albicans.
▪ Posteriormente, a cada uno de los extractos se les ensayó su actividad
antibacteriana y antifúngica contra cepas patógenas de bacterias y hongos
respectivamente, según el método de BAUER et al. (1966).
▪ Actividad Antibacteriana
Para la ejecución de este bioensayo, se empleó la técnica de difusión en agar,
llamada Antibiograma.
1) Se realizó dos pocillos utilizando una pipeta de Pasteur invertida cuya
medida es de 6mm, uno para el extracto y el otro pocillo para el control
(Ciprofloxacino), se colocó 25 ul del extracto a 40 mg / ml, y 25 ul del control
cada uno en su respectivo pocillo.
35
2) Se los colocó en una placa de agar Müller-Hinton, previamente inoculada con
una suspensión bacteriana de concentración conocida (108 células/ml)
3) Se preincubó a 5°C por 12 h, y luego se incubaron a 37°C por 24 h.
4) La acción antibacteriana se midió tomando el diámetro (mm) del crecimiento
bacteriano alrededor del disco.
▪ Actividad Antifúngica
Seguidamente a cada uno de los extractos se les ensayo su actividad
antifúngica contra una cepa certificada y patógena según el método de
MADUBUNYI (1995).
1) Este método consiste en incubar cepas de hongos en tubos, a temperatura
ambiente por una semana.
2) Transcurrido este tiempo, se le agregarán aproximadamente 10 ml de agua
destilada estéril a cada tubo para remover las esporas y se filtrarán sobre
gasas estériles, para obtener la solución esporangial.
3) Utilizando hisopos estériles, se colocará la solución obtenida sobre las
cápsulas o placas de Petri, previamente preparadas con el agar papa
dextrosa (PDA).
4) Seguidamente, se realizará la técnica del antibiograma, la cual radica en
realizar dos pocillos utilizando una pipeta de Pasteur invertida cuya medida es
de 6mm, uno para el extracto y el otro pocillo para el control (Ketoconazol), se
colocó 25 ul del extracto a 40 mg / ml, y 25 ul del control cada uno en su
respectivo pocillo y se incubarán por 48 horas a temperatura ambiente.
5) La actividad será detectada al medir el diámetro (mm) del halo de inhibición
que se observará alrededor del disco.
36
4. RESULTADOS Y DISCUSIÓN
A continuación se presentan los resultados obtenidos (Tablas 1-16 y Figuras 1-
14), sobre los halos de inhibición del crecimiento bacteriano y antifúngico, por
efecto de los extractos metanólicos de doce especies vegetales ensayadas por el
método del antibiograma, con tres cepas de bacterias Gram(+) y (-), y un hongo
patógeno.
- Actividad antibacteriana
Tabla 1. Actividad antibacteriana del extracto metanólico de Aloysia citriodora o
Lippia citriodora (Cedrón).
MUESTRA
CEPA HALO DE INHIBICIÓN ( mm ) a
S BACTERIANA
RÉPLICA 1
RÉPLICA 2
RÉPLICA 3
CEDRON
8,6 7,8 8,2 8,2 0,4
E. coli
7.9 8.0 7.8 7.9 0,1
P. aeruginosa
0
0 0 0 0
S. aureus
Ciprofloxacina
9,4 8,6 9,9 9,3 0,6
E. coli
9,2 9.0 9.6 9.2 0.4
P. aeruginosa
8.9
9.1 9.3 9.1 0,2
S. aureus
a: diámetro del halo de inhibición alrededor del pocillo (6 mm ); ( media ); S (
desviación estándar ). 0,1 < 0,6 = no tiene actividad antimicrobiana.
37
Figura 1. Efecto antibacteriano del Cedrón y Ciprofloxacina contra las Cepas
E.coli, P. aeruginosa y S. aureus
En el gráfico 1 se puede observar que el Cedrón tiene mayor efecto antibacteriano
contra la E. coli, mostrando también que tiene efecto antibacteriano contra la cepa
de P. aeruginosa, dado que para S. aureus su efecto antibacteriano es nulo; en
comparación de este resultado obtenido con un análisis de la misma planta
realizado en otra investigación se determina que el Cedrón mostró un efecto
antibacteriano contra la E. coli , S. aureus, pero no presentó efecto inhibitorio
contra P. aeruginosa ( SANCHEZ et al., 2012).
8,2 7,9
0
9,3 9,2 9,1
E. coli P. aeruginosa S. aureus
CEDRON CONTROL
38
Tabla 2. Actividad antibacteriana del extracto metanólico de Ambrosia
artemisifolia (altamisa).
MUESTRA
CEPA HALO DE INHIBICIÓN ( mm ) a
S BACTERIANA
RÉPLICA 1
RÉPLICA 2
RÉPLICA 3
ALTAMISA
7,2 7,1 7,4 7,2 0,1
E. coli
7,9 7,2 7,4 7,5 0,3
P. aeruginosa
6.8 7.0 6.7 6,8 0,2
S. aureus
Ciprofloxacina
9,8 9,7 9,8 9,7 0,1
E. coli
10.1 10,0 9.7 9.9 0,3
P. aeruginosa
9,4
9,4 10,9 9,9 0,8
S. aureus
a: diámetro del halo de inhibición alrededor del pocillo ( 6 mm ); ( media ); S
(desviación estándar ). 0,1 < 0,6 = no tiene actividad antimicrobiana
39
Figura 2. Efecto antibacteriano de altamisa (Ambrosia artemisifolia) y
ciprofloxacino contra las cepas E. coli, P. aeruginosa y S. aureus
En el gráfico 2, se puede apreciar que altamisa muestra un mayor efecto
antibacteriano contra P. aeruginosa y E. coli, aunque también tiene efecto
bactericida contra la bacteria S. aureus, aunque en menor proporción. Esta especie
vegetal mostró actividad biológica tanto contra bacterias Gram (+) como Gram (-)
demostrándose así que si presentan un efecto antimicrobiano.
Franseria artemisoides conocida también como Altamisa, demostró tener un
efecto inhibitorio frente al S. aureus y también en contra de las cepas demostraron
actividad antibacteriana contra el Bacillus subtilis y el Micrococcus oxford.
(VELASQUEZ L, 2007).
7,2 7,5
6,8
9,7 9,9 9,9
E. coli P. aeruginosa S. aureus
ALTAMISA CONTROL
40
Tabla 3. Actividad antibacteriana del extracto metanólico de Taraxacum officinale
(diente de león).
MUESTRA
CEPA HALO DE INHIBICIÓN ( mm ) a
S BACTERIANA
RÉPLICA 1
RÉPLICA 2
RÉPLICA 3
DIENTE DE LEON
10,2 9,9 10,6 10,2 0,3
E. coli
7,4 7,4 6,8 7,2 0,3
P. aeruginosa
6,6 6 6,4 6,3 0,3
S. aureus
Ciprofloxacina
10,5 10,1 10.0 10.2 0,2
E. coli
10,4 10,3 10,7 10,4 0,2
P. aeruginosa
10,9 10,8 10,5 10,7 0,2
S. aureus
a: diámetro del halo de inhibición alrededor del pocillo ( 6 mm ); ( media ); S
(desviación estándar ). 0,1 < 0,6 = no tiene actividad antimicrobiana
41
Figura 3. Efecto antibacteriano de diente de León (Taraxacum officinale) y
ciprofloxacino contra cepas E. coli, P. aeruginosa y S. aureus
En la Figura 3 se puede observar que el diente de León, al igual que la altamisa,
mostró actividad antibacteriana contra bacterias Gram (+) y Gram (-);
observándose que tiene mayor efecto antibacteriano contra E. coli, y en menor
proporción inhibió el crecimiento de las bacterias P. aeruginosa y S. aureus.
Según en otra investigación ensayando al Diente de León, este no demostró tener
actividad inhibitoria frente a E. coli, P. aeruginosa, B. cereus y S. aureus
(RAMOS A, 2013).
10,2
7,2
6,3
10,2 10,4 10,7
E. coli P. aeruginosa S. aureus
DIENTE DE LEON CONTROL
42
Tabla 4. Actividad antibacteriana del extracto metanólico de Ageratum
conyzoides (mastrante).
MUESTRA
CEPA HALO DE INHIBICIÓN ( mm ) a
S BACTERIANA
RÉPLICA 1
RÉPLICA 2
RÉPLICA 3
MASTRANTE
8 8,4 8,4 8,2 0,2
E. coli
6,6 6,7 6,6 6,6 0,0
P. aeruginosa
6,4 6,5 6,4 6,4 0,0
S. aureus
ciprofloxacina
9,4 9,1 9.0 9,1 0,3
E. coli
8,7 9,9 10,2 9.6 0,7
P. aeruginosa
9,9 9,7 10.0 9.8 0,2
S. aureus
a: diámetro del halo de inhibición alrededor del pocillo ( 6 mm ); ( media ); S
(desviación estándar ). 0,1 < 0,6 = no tiene actividad antimicrobiana
43
Figura 4 . Efecto antibacteriano de mastrante (Ageratum conyzoides) y
ciprofloxacino con cepa E.coli, P.aeruginosa y S. aureus
En el gráfico 4, se puede observar que mastrante, al igual que altamisa y diente de
león, tiene mayor efecto antibacteriano contra E. coli, siendo muy significativo en
relación al control, pero también actúa contra la P. aeruginosa y S. aureus en
menor proporción.
Se reportaron halos de inhibición de hasta 12 mm para A. conyzoides utilizando
un método de extracción similar al que se utilizó en este trabajo (maceración con
etanol), además de utilizar una concentración más baja para la Cepa de E. coli.
ADETUTU et al. (2012).
8,2
6,6 6,4
9,1 9,6 9,8
E. coli P. aeruginosa S. aureus
MASTRANTE CONTROL
44
Tabla 5. Actividad antibacteriana del extracto metanólico de Piper carpunya
(guaviduca)
MUESTRA
CEPA HALO DE INHIBICIÓN ( mm ) a
S BACTERIANA
RÉPLICA 1
RÉPLICA 2
RÉPLICA 3
GUAVIDUCA
10,4 10,2 10,0 10,2 0,2
E. coli
6,4 6,6 6,1 6,3 0,2
P. aeruginosa
0
0 0 0 0
S. aureus
ciprofloxacina
9.9 10.0 10.2 10.0 0.2
E. coli
10,4 10,6 10,4 10,4 0,1
P. aeruginosa
10,4
11,0 10,4 10,6 0,3
S. aureus
a: diámetro del halo de inhibición alrededor del pocillo ( 6 mm ); ( media ); S
(desviación estándar ). 0,1 < 0,6 = no tiene actividad antimicrobiana.
45
Figura 5. Efecto antibacteriano de guaviduca (Piper carpunya) y Ciprofloxacino
contra la cepa E.coli, P. aeruginosa y S. aureus.
El gráfico 5 muestra que guaviduca tiene mayor efecto antibacteriano contra la E.
coli que el control (ciprofloxacina), y una actividad antibacteriana moderada P.
aeruginosa, aunque no muestra un efecto bactericida contra S. aureus, tal como lo
observado para el extracto de cedrón. Se podría decir que el extracto de guaviduca
es una fuente de principios bioactivos, posibles antibióticos contra la cepa Gram (-)
E. coli.
No existen reportes en la literatura sobre la actividad antibacteriana q puedan
poseer esas plantas. Sin embargo, las mismas presentan otras propiedades
terapéuticas.
Poseen una actividad gastroprotectora produciendo una rápida y total recuperación
de la mucosa gástrica evidenciándose en el análisis macroscópico y con el estudio
histopatológicos de los estómagos (QUINTANA, K. 2012).
10,2
6,3
0
10 10,4 10,6
E. coli P. aeruginosa S. aureus
GUAVIDUCA CONTROL
46
Tabla 6. Actividad antibacteriana del extracto metanólico de Borago officinalis
(borraja).
MUESTRA
CEPA HALO DE INHIBICIÓN ( mm ) a
S BACTERIANA
RÉPLICA 1
RÉPLICA 2
RÉPLICA 3
BORRAJA
8,6 7,6 7 7,7 0,8
E. coli
6,2 6,4 7,5 6,7 0,7
P. aeruginosa
8
8,9 8,4 8,4 0,4
S. aureus
ciprofloxacina
9.8 10.4 10.1 10.1 0,4
E. coli
10,9 10,3 10,7 10,6 0,3
P. aeruginosa
10,4
11,0 10,4 10,6 0,3
S. aureus
a: diámetro del halo de inhibición alrededor del pocillo ( 6 mm ); ( media ); S
(desviación estándar ). 0,1 < 0,6 = no tiene actividad antimicrobiana.
47
Figura 6. Efecto antibacteriano de borraja (Borago officinalis) y Ciprofloxacino
contra las cepas E. coli, P. aeruginosa y S. aureus.
El extracto de borraja presentó un efecto antibacteriano moderado en contra de las
dos cepas E. coli y P. aeruginosa, mostrándose una actividad bactericida fuerte
contra de S. aureus, ya que su acción antibacteriana fue mucho mayor y más
potente que el control usado y muy superior al diámetro usado del pocillo (6mm).
No existen reportes en la literatura sobre la actividad antibacteriana q puedan
poseer esas plantas.
7,7
6,7
8,4
10,1 10,6 10,6
E. coli P. aeruginosa S. aureus
BORRAJA CONTROL
48
Tabla 7. Actividad antibacteriana del extracto metanólico de Coriandrum sativum
(cilantro).
MUESTRA
CEPA HALO DE INHIBICIÓN ( mm ) a
S BACTERIANA
RÉPLICA 1
RÉPLICA 2
RÉPLICA 3
CILANTRO
6,6 7,1 7,0 6,9 0,2
E. coli
6,9 7,9 8,0 7,6 0,6
P. aeruginosa
6,4 6,6 6,5 6,5 0,1
S. aureus
ciprofloxacina
10,2 9,8 10.0 10.0 0,2
E. coli
10,0 9.9 10.4 10.1 0,3
P. aeruginosa
10,5
10.6 10,2 10,4 0,3
S. aureus
a: diámetro del halo de inhibición alrededor del pocillo ( 6 mm ); ( media ); S
(desviación estándar ). 0,1 < 0,6 = no tiene actividad antimicrobiana.
49
Figura 7. Efecto antibacteriano de cilantro (Coriandrum sativum) y Ciprofloxacino
contra las cepas E.coli, P. aeruginosa y S. aureus.
En este gráfico se puede observar que el cilantro tiene un mayor efecto
antibacteriano en contra de la P. aeruginosa, y también demuestra una actividad
antibacteriana muy leve contra E. coli y S. aureus.
Coriandrum sativum ha sido utilizado para tratar algunas dolencias no relacionadas
con las enfermedades infecciosas, sin embargo se ha demostrado que tiene
actividad antimicrobiana frente a diferentes géneros de bacterias Gram Positivas
(Listeria monocytogenes y Staphylococcus aureus) y Gram negativas (ARDILA et
al. 2009).
6,9 7,6
6,5
10 10,1 10,4
E. coli P. aeruginosa S. aureus
CILANTRO CONTROL
50
Tabla 8. Actividad antibacteriana del extracto metanólico de Melissa officinalis
(toronjil).
MUESTRA
CEPA HALO DE INHIBICIÓN ( mm ) a
S BACTERIANA RÉPLICA
1 RÉPLICA
2 RÉPLICA
3
TORONJIL
10.0 8,6 9,8 9,4 0,7
E. coli
6,2 6,5 6,4 6,3 0,1
P. aeruginosa
6,6 6,4 6,5 6,5 0,1
S. aureus
ciprofloxacina
9.9 9.9 10.4 10.0 0,4
E. coli
9,6 9,8 10,1 9,8 0,3
P. aeruginosa
9.7
10.2 10.5 10.1 0,5
S. aureus
a: diámetro del halo de inhibición alrededor del pocillo ( 6 mm ); ( media ); S
(desviación estándar ). 0,1 < 0,6 = no tiene actividad antimicrobiana.
51
Figura 8. Efecto antibacteriano de toronjil (Melissa officinalis) y Ciprofloxacino
contra las cepas E. coli, P. aeruginosa y S. aureus.
La Figura 8 muestra que el extracto de toronjil exhibe una actividad antibacteriana
mayor y fuerte contra la bacteria Gram (-) E. coli, y a su vez una actividad muy leve
contra las otras dos cepas Gram (+) ensayadas, al igual que lo observado para el
extracto de cilantro. Similar a guaviduca, ambos extractos de estas plantas poseen
una fuerte actividad bactericida contra E. coli.
No se reportó actividad antibacteriana a Melissa officinalis, pero este extracto
presentó efecto antioxidante, lo cual indica que dicho extracto puede convertirse en
candidato para el aislamiento de compuestos antioxidantes activos.
(CALDERON, 2011).
9,4
6,3 6,5
10 9,8 10,1
E. coli P.aeruginosa S. aureus
TORONJIL CONTROL
52
Tabla 9. Actividad antibacteriana del extracto metanólico de Cymbopogon
citratus (hierba luisa).
MUESTRA
CEPA HALO DE INHIBICIÓN ( mm ) a
S BACTERIANA
RÉPLICA 1
RÉPLICA 2
RÉPLICA 3
HIERBA LUISA
9,0 9,4 9,6 9,3 0,3
E. coli
6,7 6,4 6,7 6,6 0,1
P. aeruginosa
6,4 6,6 6,7 6,5 0,1
S. aureus
ciprofloxacina
9,5 9.4 9.2 9.3 0,2
E. coli
9,8 9,9 10,0 9,9 0,1
P. aeruginosa
10.0
9.9 9.7 9.8 0,2
S. aureus
a: diámetro del halo de inhibición alrededor del pocillo ( 6 mm ); ( media ); S
(desviación estándar ). 0,1 < 0,6 = no tiene actividad antimicrobiana
53
Figura 9. Efecto antibacteriano de hierba luisa (Cymbopogon citratus) y
Ciprofloxacino contra las cepas E. coli, P. aeruginosa y S. aureus
En este gráfico 9 se puede apreciar que el extracto de hierba luisa, al igual que
guaviduca y toronjil, posee una actividad antibacteriana fuerte contra la cepa E.
coli, pero también éste demuestra el efecto antibacteriano aunque un poco mas
muy leve del extracto de hierba luisa en contra de las Gram (+) P. aeruginosa y S.
aureus.
Otra investigación de esta especie mostró tener efecto antibacteriano en contra de
las cepas S.aureus, Sh.flexneri, S.typhi, S.enteritidis, V.cholerae y baja actividad
con P. aeruginosa quien se muestra un poco resistente, indicando que hierba luisa
puede utilizarse para tratamientos de afecciones intestinales como la salmonelosis
y el cólera como también en el tratamiento de procesos respiratorios causados por
la bacteria S. aureus (ALZAMORA et al. 2001).
9,3
6,6 6,5
9,3 9,9 9,8
E. coli P. aeruginosa S. aureus
HIERBA LUISA CONTROL
54
Tabla 10. Actividad antibacteriana del extracto metanólico de Artemisia
absinthium (ajenjo).
MUESTRA
CEPA HALO DE INHIBICIÓN ( mm ) a
S BACTERIANA
RÉPLICA 1
RÉPLICA 2
RÉPLICA 3
AJENJO
9,4 9,8 9,1 9,4 0,3
E. coli
6,5 7,4 6,4 6,7 0,5
P. aeruginosa
6,3 6,0 6,4 6,3 0,2
S. aureus
ciprofloxacina
9.8 9.8 9.9 9.8 0,1
E. coli
9,7 10,4 10,4 10,1 0,4
P. aeruginosa
10,6
10,4 10,7 10,5 0,1
S. aureus
a: diámetro del halo de inhibición alrededor del pocillo ( 6 mm ); ( media ); S
(desviación estándar ). 0,1 < 0,6 = no tiene actividad antimicrobiana.
55
Figura 10. Efecto antibacteriano de ajenjo (Artemisia absinthium) y Ciprofloxacino
con cepa E.coli, P. aeruginosa y S. aureus.
La Figura 10 muestra claramente que el extracto de ajenjo posee propiedad
antibacteriana fuerte en contra de la cepa E. coli, comportamiento similar al
observado para guaviduca, toronjil, hierba luisa, lo cual refleja la importancia de
estas especies en la producción de fitofármacos antibióticos. Para las cepas P.
aeruginosa y S. aureus, se podría decir que debido al promedio del halo de
inhibición mostrado, las mismas no poseen sensibilidad bacteriana ante el extracto
de ajenjo.
El extracto fluido con etanol al 70 % de A. absinthium mostro tanto actividad
antigiardiósica como antimicrobiana, contra E. coli, P.vulgaris, Paeruginosa, K.
pneumoniae, S. aureus, B,subtilis, C. albicans, lo que justifica su uso tradicional.
(GUERRA et al., 2001).
9,4
6,7 6,3
9,8 10,1 10,5
E. coli P. aeruginosa S. aureus
AJENJO CONTROL
56
Tabla 11. Actividad antibacteriana del extracto metanólico de Momórdica
charantia (achochilla).
MUESTRA
CEPA HALO DE INHIBICIÓN ( mm ) a
S BACTERIANA
RÉPLICA 1
RÉPLICA 2
RÉPLICA 3
ACHOCHILLA
10,0 9,8 10,1 9,9 0,1
E. coli
8,2 8,1 8,0 8,1 0,1
P. aeruginosa
6,6 6,8 6,5 6,6 0,1
S. aureus
CIPROFLACINA
10.1 9,7 9,9 9,9 0,2
E. coli
10,2 10,7 10,4 10,2 0,3
P. aeruginosa
10,2
10,0 10,4 10,2 0,1
S. aureus
a: diámetro del halo de inhibición alrededor del pocillo ( 6 mm ); ( media ); S
(desviación estándar ). 0,1 < 0,6 = no tiene actividad antimicrobiana
57
Figura 11. Efecto antibacteriano de achochilla (Momórdica charantia) y
Ciprofloxacino contra las cepas de E. coli, P. aeruginosa y S. aureus.
En la Figura 11 se observa que el extracto de achochilla ejerce su efecto
antibacteriano en contra de las tres cepas bacterianas ensayadas, mostrando un
efecto mayor en contra de la E. coli, actividad antibacteriana moderada contra P.
aeruginosa y leve contra S. aureus.
El extracto etanólico de Momórdica charantia demuestra actividad antibacteriana
sobre Shiguella, P. aeruginosa, Salmonella, E. coli y S. auereus. Además, esta
presenta actividad antitumoral, efecto antimicótico, actividad antiinflamatoria,
actividad antihelmíntica, inhibición de los radicales libres, es decir al extracto de
esta especie posee un potencial terapéutico avalado científicamente que se utiliza
en el tratamiento de múltiples enfermedades en especial la diabetes (LAGARTO et
al., 2008).
9,9
8,1
6,6
9,9 10,2 10,2
E. coli P. aeruginosa S. aureus
ACHOCHILLA CONTROL
58
Tabla 12. Actividad antibacteriana del extracto metanólico de Moringa oleífera
(moringa).
MUESTRA
CEPA HALO DE INHIBICIÓN ( mm ) a
S BACTERIANA
RÉPLICA 1
RÉPLICA 2
RÉPLICA 3
MORINGA
7,6 8,0 8,1 7,9 0,2
E. coli
6,6 6,7 6,9 6,7 0,1
P. aeruginosa
6,5 6,4 5,8 6,2 0,3
S. aureus
ciprofloxacina
9.9 10.2 10.0 10.0 0,2
E. coli
10,4 10,4 9,9 10,2 0,2
P. aeruginosa
10,4
10,2 10,3 10,3 0,1
S. aureus
a: diámetro del halo de inhibición alrededor del pozillo ( 6 mm ); ( media ); S
(desviación estándar ). 0,1 < 0,6 = no tiene actividad antimicrobiana
59
Figura 12. Efecto antibacteriano de moringa (Moringa oleífera) y Ciprofloxacino
con cepa E.coli, P. aeruginosa y S. aureus.
En este gráfico, se puede apreciar que el extracto de moringa presenta mayor
efecto antimicrobiano en contra de la E. coli, y en menor proporción contra las
cepas de P. aeruginosa y S. aureus (actividad antibacteriana leve).
En años recientes se han generado resultados científicos que confirman actividad
antibacteriana como la inhibición del crecimiento de P. aeruginosa y S. aureus.
(Cáceres et al., 1991).
7,9
6,7 6,2
10 10,2 10,3
E. coli P. aeruginosa S. aureus
MORINGA CONTROL
60
- Actividad antifúngica:
Tabla 13. Actividad antifúngica del extracto metanólico de Aloysia citriodora (cedrón),
Ambrosia artemisifolia (altamisa) y Taraxacum officinale (diente de león).
MUESTRA
CEPA HALO DE INHIBICIÓN (mm)a
S FÚNGICA
RÉPLICA 1 RÉPLICA
2 RÉPLICA
3
Cedrón
Candida albicans
10,2 10,4 10,5 10,3 0.1
Ketoconazol
11,3 11,4 11,4 11,3 0,1
Altamisa
10,4 10,3 9,9 10,2 0,2
Ketoconazol
11,3 11,5 11,4 11,4 0,1
Diente de León
9,9 10,4 9,8 10,0 0,3
Ketoconazol
11,0 11,4 11,2 11,2 0,2
: media; S: desviación estándar; a: diámetro alrededor del pocillo (6 mm)
Tabla 14. Actividad antifúngica del extracto metanólico de Ageratum conyzoides
(mastrante), Piper carpunya (guaviduca) y Borago officinalis (borraja).
MUESTRA
CEPA HALO DE INHIBICIÓN (mm) a
S FÚNGI
CA RÉPLICA
1 RÉPLICA
2 RÉPLICA
3
Mastrante
Candida albicans
11,2 11,4 11,1 11,2 0,1
Ketoconazol
11,5 11,6 11,3 11,4 0,2
Guaviduca
10,9 11,3 10,7 10,9 0,3
Ketoconazol
11,3 11,4 11,0 11,2 0,2
Borraja
10,1 11,1 10,9 10,7 0,5
Ketoconazol
11,2 11,4 11,4 11,3 0,2
61
: media; S: desviación estándar; a: diámetro alrededor del pocillo (6 mm)
Figura 13. Efecto anti fúngico de cedrón, altamisa, diente de león, mastrante,
guaviduca, borraja y control ketoconazol contra la cepa Candida albicans
En esta figura indica que el extracto de mastrante posee mayor efecto antifúngico
en contra de la cepa de Candida albicans, de igual manera la guaviduca y borraja
ejercen también efecto fungicida aunque en menor proporción. Los extractos de
cedrón, altamisa y diente de león, también exhibieron actividad antibacteriana
moderada.
10,3 10,2
10
11,2
10,9
10,7
11,3 11,4
11,2
11,4
11,2 11,3
CEDRON ALTAMISA DIENTE DELEON
MASTRANTE GUAVIDUCA BORRAJA
EXTRACTO CONTROL
62
Aun no se han reportado investigaciones científicas sobre el Cedrón, si ejerce o no
actividad contra la cepa C. albicans.
Altamisa y Diente de León no tienen investigaciones científicas que demuestren su
efecto en contra de C. albicans, sin embargo en un estudio reciente se demuestra
que estas dos especies si tienen actividad antifúngica, pero contra Mycosphaerella
fijiensis Morelet conocida como Sigatoka negra (VIVEROS et al., 2006)
El aceite esencial de A. conyzoides demostró tener un potente efecto antifungico,
demostrando así la inhibición total de cuatro hongos Candida albicans,
Cryptococcus neoformans, Sclerotium rolfsii y Trichophyton mentagrophytes
(PATTNAIK et al., 1996)
No se han reportado investigaciones para esta especie Piper carpunya contra
ninguna cepa fúngica.
A la Borraja no se le han realizado este tipo de ensayos que demuestren su
eficacia contra esta cepa, pero según otro tipo de investigaciones se determinó que
el aceite de borraja se recomienda usar ya sea administrado por vía oral como por
vía tópica en el tratamiento de afecciones de la piel.
63
Tabla 15. Actividad antifúngica del extracto metanólico de Coriandrum sativum (cilantro),
Melissa officinalis (toronjil) y Cymbopogon citratus (hierba luisa).
MUESTRA
CEPA HALO DE INHIBICIÓN (mm) a
S FÚNGI
CA RÉPLICA
1 RÉPLICA
2 RÉPLICA
3
Cilantro
Candida albicans
11,1 11,0 11,3 11,1 0,2
Ketoconazol
11,3 11,5 11,2 11,3 0,2
Toronjil
11,0 11,5 11,2 11,2 0,2
Ketoconazol
11,5 11,4 11,4 11,4 0,1
Hierba Luisa
11,1 10,9 11,5 11,1 0,3
Ketoconazol
11,5 11,3 11.4 11,4 0,0
: media; S: desviación estándar; a: diámetro alrededor del pocillo (6 mm)
Tabla 16. Actividad antifúngica del extracto metanólico de Artemisia absinthium (ajenjo),
Momórdica charantia (achochilla) y Moringa oleífera (moringa).
MUESTRA
CEPA HALO DE INHIBICIÓN (mm) a
S FÚNGI
CA RÉPLICA
1 RÉPLICA
2 RÉPLICA
3
Ajenjo
Candida albicans
11,1 11,4 11,2 11,2 0,1
Ketoconazol
11,6 11,4 11,3 11,4 0,1
Achochilla
10,9 11,3 11,2 11,1 0,2
Ketoconazol
11,4 11,3 11,5 11,4 0,1
Moringa
10,3 10,7 10,9 10,6 0,3
Ketoconazol
11,2 11,4 11,5 11,3 0,2
64
: media; S: desviación estándar; a: diámetro alrededor del pocillo (6 mm)
Figura 14. Efecto antifungico de Cilantro, Toronjil, Hierba Luisa, Ajenjo, Achochilla,
Moringa y control (ketoconazol) contra la cepa Candida albicans.
En esta figura se puede observar que todas las especies vegetales analizadas
muestran un efecto antifúngico moderadamente fuerte contra la cepa del hongo C.
albicans.
El cilantro demostró tener un efecto antifúngico en contra de C. albicans, P.
islandicum y Aspergillus flavus, determinando que su actividad antifúngica se fue
reduciendo de acuerdo a los componentes de esta planta (INOUYE et al., 2006).
11,1
11,2
11,1
11,2
11,1
10,6
11,3
11,4 11,4 11,4 11,4
11,3
CILANTRO TORONJIL HIERBA LUISA AJENJO ACHOCHILLA MORINGA
EXTRACTO CONTROL
65
El cilantro demostró tener un efecto anti fúngico en contra de la cepa C. albicans,
realizada en un estudio en pacientes con síntomas de vulvovaginitis, indicando así
la eficacia de esta planta (MARQUEZ, 2012).
El aceite esencial de hierba luisa tuvo efecto contra C. albicans, ejerciendo un
efecto similar al del Micosatin que fue el control utilizado, como dato adicional que
para un tratamiento tópico de una uña del pie afectada por hongos, con gotas de
aceite esencial puro de hierba luisa mostró su potente efecto sanando
rápidamente, esta especie se perfila como una opción en el tratamiento de micosis
ocasionadas por C. albicans (ALZAMORA, et al. 2001).
El análisis realizado al extracto de Ajenjo indicó que tuvo actividad en contra de la
cepa de C. albicans teniendo un rango de 26 mg/dl, lo que justifica su uso
tradicional. (GUERRA et al., 2001).
La Achochilla presento una fuerte actividad antifúngica en contra la cepa de C.
albicans, como también otras actividades como antitumorales,
antiespermatogénico actividad antilipolítica entre otras, pudiendo ser utilizada esta
planta en diversas enfermedades, siempre y cuando sea caracterizado su potencial
tóxico para avalar su empleo como agente terapéutico (LAGARTO et al., 2008).
Se demostró la actividad antifúngica de aceites esenciales de las hojas y de
extractos alcohólicos de las semillas y las hojas contra dermatofitos como
Trichophyton rubrum y Trichopyton metagrophytes, aunque no se han reportado
ensayos con C. albicans (Chuang et al., 2007).
66
5. CONCLUSIONES
Las doce plantas medicinales fueron procesadas como su selección de hojas ,
lavado, secado,molienda y luego se le realizo la extracción de los metabolitos
secundarios luego de haber obtenido los extractos de las plantas con Metanol
siendo este un solvente muy utilizado para este tipo de ensayos quien no influye
en los resultados.
El efecto antibacteriano de las doce plantas medicinales contra la cepa Escherichia
coli determino que todas presentaron efecto con valores que van desde 6.9 mm
hasta 10.2 mm.
El efecto antibacteriano de las doce plantas medicinales contra la cepa
Pseudomona aeruginosa determino que todas estas plantas presentaron efecto
antibacteriano cuyos valores que se presentaron van desde 6.3 mm hasta 8.1 mm.
El efecto antibacteriano de las doce plantas medicinales en contra de la cepa
Streptococcus aureus determino que diez plantas mostraron su efecto a excepción
del Cedròn (Aloysia citriodora) y Guaviduca (Piper carpunya) quien sus efectos
fueron nulos, los valores de las diez plantas fueron desde 6.2 mm hasta 8.4 mm.
El efecto antifúngico de las doce plantas medicinales se lo realizó en contra de la
cepa Candida albicans quienes todas presentaron efecto con valores que van
desde 10 mm hasta 11.2 mm.
Los resultados obtenidos en esta investigación son diferentes a los de otras
investigaciones realizadas con estas mismas plantas por la razón de que estas
plantas crecen en Ecuador están en un medio diferente a los de otros países
influyendo principalmente la condiciones climáticas y el suelo.
Determinando que los análisis de bioactividad antimicrobiana realizado a los
extractos metanólicos de las plantas estudiadas arrojaron que la mayoría de dichas
especies exhibieron un efecto antibacteriano y antifúngico contra las cepas de
bacterias Gram (+) y Gram (-) y la cepa de hongo ensayado. Por lo cual se puede
decir que estas plantas constituyen una fuente promisoria de compuestos químicos
antimicrobianos de gran valor farmacológico.
67
6. RECOMENDACIONES
Por medio de esta investigación se determino que todas estas plantas sean
estudiadas más a fondo ya que además de demostrar que tienen efecto
antimicrobiano estas pueden también presentar otros tipos de beneficios ya
que durante la investigación de cada planta se demostró que cada una tiene
propiedades importantes que pueden llegar a ser útiles para sanar diversas
patologías en las personas.
También se podrían realizar otros análisis con más cepas de hongos y
bacterias para determinar si estas plantas también muestran su efecto, ya
que el objetivo de esta tesis fue descubrir si estas plantas medicinales
mostraban su efectividad para luego de ser demostrado se puedan seguir
realizando investigaciones para llegar a diseñar un medicamento que
contenga estas plantas que aún con el pasar del tiempo fueron
desconocidas por sus propiedades medicinales
68
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Foto 1. Seleccionando las hojas de las plantas medicinales.
Foto 2. Colocando las hojas a secar al medio ambiente
Foto 3. Las hojas secas colocándolas en la estufa
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Foto 4. Las hojas ya secas en la estufa listas para ser trituradas.
Foto 5. Pesando las hojas trituradas para poner a macerar en metanol y obtener el
extracto.
Foto 5. Preparando al extracto para luego pasar al Rotaevaporador.
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Foto 6. Los materiales a utilizar para preparar los medios de cultivo.
Foto 7. Pesando el Medio de Cultivo para prepararlo.
Foto 8. Disolviendo el medio de cultivo hasta observar cambio de coloración
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Foto 9. Esterilizando el medio de cultivo.
Foto 10. Pesando los extractos para realizar la siembra
Foto 11. Rotulando las cajas Petri.
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Foto 12. Realizando la siembra con las respectivas cepas, extracto y control.
Foto 13. Midiendo los halos de inhición
Foto 14. Una siembra con la cepa de E. coli
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Foto 15. Cepas de bacterias y hongos
Foto 15. Siembra con la cepa Pseudomona aeruginosa con extracto de Borraja.
Foto 16. Siembra con la cepa Staphylococcus aureus con extracto de cedrón.
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Foto 17. Siembra con Candida albicans con extracto de achochilla.
Foto 18. Siembra con Candida Albicans con extracto de ajenjo.
Foto 19. Siembra con Candida albicans con extracto de borraja.
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Foto 19. Al terminar la siembra hay que autoclavar todas las cajas Petri.
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