Instituto Tecnológico de SonoraInstituto Tecnológico de SonoraCd. Obregón, Sonora. Octubre del 2013
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Instructores
Dr. Juan Francisco Hernández ChávezDpto. de Ciencias Agronómicas y VeterinariaDpto. de Ciencias Agronómicas y Veterinaria
M. en C. Laura Elisa Gassós OrtegaDpto. de Biotecnología y Ciencias Alimentarias
Yoldia Garibaldi MexíaDpto. de Biotecnología y Ciencias AlimentariasDpto. de Biotecnología y Ciencias Alimentarias
Semblanza de los instructoresEl Dr. Juan Francisco Hernández Chávez es MVZ de formación egresado de la UANL (es tigre decorazón). Es profesor investigador de tiempo completo del Departamento de Ciencias Agronómicas yVeterinaria del Instituto Tecnológico de Sonora, donde imparte cursos relacionados con el área decalidad e inocuidad de alimentos de origen animal. Obtuvo el grado de Maestría en Producción Animalcon especialidad en Ciencia de la Carne en la Universidad Autónoma de Chihuahua. Realizó su
La M. en C. Laura Elisa Gassós Ortega es profesora investigadora en el Departamento de Biotecnología yCiencias Alimentarias del Instituto Tecnológico de Sonora. Realizó una maestría en Ciencias conespecialidad en Alimentos y Nutrición. La maestra Laura, colabora en proyectos de investigación demetabolitos de interés agroalimentario además de investigación en Educación Bioquímica. Ha publicadocapítulos de libro sobre estrategias de aprendizaje virtuales, diseño y aplicación de materiales didácticosWEB utilizando software libre. También tiene publicaciones sobre el uso del las redes sociales(Facebook) como escenarios de aprendizaje cooperativo en cursos de Bioquímica de Alimentos y deNutrición y Salud.
con especialidad en Ciencia de la Carne en la Universidad Autónoma de Chihuahua. Realizó suDoctorado en Ciencias en el Centro de Investigación en Alimentación y Desarrollo, A.C. (Hermosillo) Suárea de investigación es la calidad de la carne relacionado con el bienestar animal. Dirige proyectossobre la caracterización de productos de origen animal.
Yoldia Garibaldi Mexía cursa el séptimo semestre del Programa Académico de Ingeniero Biotecnólogo enel Instituto Tecnológico de Sonora. A la fecha cuenta con un promedio excelente y desde el 2012,participa activamente en proyectos de investigación con el Cuerpo Académico de Biotecnología y CienciasAgroalimentarias. El ITSON reconoce la calidad de su labor académica mediante la beca alumno ARA (AltoRendimiento Académico).
Nutrición y Salud.
Objetivo
Evaluar el color en alimentos mediante el método del triestímulo
L, a, b.
Curso introductorio dirigido a alumnos y maestros Curso introductorio dirigido a alumnos y maestros universitarios, egresados y personal técnico del área de
alimentos.
Contenido
1. ¿Qué es el color?
2. Importancia del color en los alimentos2. Importancia del color en los alimentos
3. Principios básicos de medida y percepción del color
4. Práctica de medición del color en alimentos
¿Qué es el color?
Video: El color de los alimentos 8:05 min
Tesis. Cedecom, S.L., Andalucía
Importancia del color en los
alimentosalimentos
El color en los alimentos
• El color envuelve nuestro medio ambiente cada día. El color de los muebles, el medio ambiente cada día.
• El color de los muebles, el color de la ropa, los colores de las plantas y los colores de los alimentos.
• El color en los alimentos se asocia hasta con el se asocia hasta con el estado de ánimo del consumidor y la elección de los productos.
Downham & Collins (2000).
Desafío para la industria alimentaria
• Factores sociales, técnicos y económicos han hecho que económicos han hecho que la industria alimentaria enfrente un desafío.
• Buscar nuevas formas de satisfacer las necesidades de los consumidores proporcionándoles proporcionándoles productos alimenticios
visualmente atractivos, de
buen sabor, alta calidad y
buen precio.
Downham & Collins (2000).
Historia del color en los alimentos
• En el año 1500 A.C., al parecer los egipcios adicionaban extractos naturales y vino a los dulces para naturales y vino a los dulces para mejorar su apariencia.
• A mediados del siglo XIX, especias como el azafrán se utilizaban para efectos decorativos.
• En los tiempos de la revolución industrial las comidas y los “productos alimenticios” tuvieron “productos alimenticios” tuvieron gran desarrollo utilizando colorantes fabricados a partir de minerales y metales.
Downham & Collins (2000).
Historia del color de los alimentos. Enmascarar la mala calidad
• Algunos de los colorantes se utilizaron para enmascarar la mala calidad y resultaron ser mala calidad y resultaron ser tóxicos, ocasionando muertes.
• Ejemplos: rojo metálico (Pb2O3), bermellón (HgS) utilizados para colorear quesos y dulces.
• En 1856 Sir William Henry Perkin desarrolló el primer colorante sintético: mauveinecolorante sintético: mauveineo púrpura.
• En esos tiempos se carecía de regulación sobre el uso de los colorantes.
Downham & Collins (2000); Flores et al. (1995)
Historia del color de los alimentos. Los colorantes sintéticos
• A inicios de 1900, los colorantes eran derivados de la anilina, un compuesto la anilina, un compuesto obtenido del petróleo, tóxico.
• Los colorantes sintéticos son fáciles de producir y menos costosos. Se necesitan cantidades muy pequeñas, se mezclan fácilmente, no imparten sabores indeseables.
• Por los daños que ocasionan a • Por los daños que ocasionan a la salud los países trabajaron sobre la legislación y uso de los colorantes, actualmente muy restringidos para su uso en productos alimenticios.
Downham & Collins (2000).
El color “vende”
• Cambiar el color del producto trae consecuencias en las ventas.
• Ejemplo: Ketchup Heinz verde vendió más de 10 millones de botellas en 7
• Del 62-90% de la evaluación de un producto alimenticio se basa en el color. más de 10 millones de botellas en 7
meses. Después la novedad pasó y las ventas cayeron. El consumidor asociaba la salsa de tomate con el color rojo.
basa en el color.• El color comunica calidad,
precio y en el caso de los productos alimenticios “sabor”.
• Los colores están asociados con categorías de productos.– Ejemplo, el rojo con pizzas y
carnecarne– El color plata con los productos
lácteos– El verde con lo saludable y los
vegetales.
Pérez, 2009
Si el color no vende: coloreando los productos alimenticios
Colorantes sintéticos
Colorantes “idéntico al natural”
Downham & Collins (2000).
Importancia del color en la calidad de los alimentos
• El color es una cualidad sensorial de los sensorial de los alimentos.
• Los consumidores asocian el color de los alimentos con su sabor y aroma.
• El color es un factor • El color es un factor crítico de calidad en algunos productos frescos y procesados.
Pigmentos naturales de los alimentos
• Carotenoides
• Clorofilas• Clorofilas
• Pigmentos fenólicos
• Betalaínas
• Hemopigmentos
• Otros pigmentos • Otros pigmentos naturales
Badui, 2006
Principios básicos de medida y percepción del color
Ejemplo de medición subjetiva
Media subjetiva del color. Ejemplo con el
jugo de toronja
• El color es uno de los factores críticos de calidad en la críticos de calidad en la clasificación productos cítricos, así como el sabor, y se ha utilizado para clasificar la variedad y la madurez de los cítricos.
• Por ejemplo, el rojo o color de • Por ejemplo, el rojo o color de rosa en los cultivares de toronja (Citrus paradisi Macf.) se asocia con su contenido de carotenoides.
Lee, 2000
Moléculas del color en la pulpa de toronja
• Licopeno y α-carotenoson los principalesson los principalescarotenoides en la pulpa.
• Contiene pequeñascantidades de fitoflueno, fitoeno y ζ-fitoflueno, fitoeno y ζ-
caroteno
Lee, 2000
Degradación del color por procesado y
almacenamiento
• Durante el proceso de obtención del jugo y en su almacenamiento, se puede almacenamiento, se puede desarrollar un color marrón poco apetecible debido a la reacción de Maillard por efecto del calor.
• También es probable que el color cambie por la color cambie por la degradación de los carotenoides y la pérdida de licopeno.
Estándares del color
• En el caso del jugo de toronja, la USDA ha establecido un estándar para la clasificación de los colores para la clasificación de los colores del jugo de toronja: USDA color scoring
• Utilizan 6 tubos de plástico de color de una pulgada de diámetro.
• La medición es visual por tanto es subjetiva, ya que depende de la subjetiva, ya que depende de la percepción del color de la persona.
Kimball, 1991
Desarrollo de espectrocolorímetro
• La medición se hace por comparaciones directas del color.color.
• Los parámetros de medición son Citrus Red (CR) y Citrus Yellow(CY).
• Esta forma de medir el color es subjetiva y sus resultados son inconsistentes.
• Entre 1950 y 1960 la compañía Hunterlab desarrolló un espectrocolorímetro para medir Hunterlab desarrolló un espectrocolorímetro para medir el color de los jugos frescos y concentrados de cítricos y uvas.
• Los nuevos parámetros para medir el color fueron L, a, b.
Percepción del color
Medición objetiva del color
Fuente de Luz
Objeto
ObservadorElementos necesarios para ver el color
D65
CIE Standard Observer
Reflectance
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La LuzLa Luz
Fuente de Luz
•• La luz visible es una pequeña parte La luz visible es una pequeña parte
Distribución espectral de energía de la luz solar
•• La luz visible es una pequeña parte La luz visible es una pequeña parte del espectro electromagnéticodel espectro electromagnético. .
• La longitud de onda de la luz se mide en nanómetros (nm). Un nanómetro son 10–9 metros.
• El intervalo de longitud de onda del espectro del visible está entre aproximadamente 400 y 700 nm.
• El gráfico de la energía relativa de la luz a cada longitud de onda crea la curva de distribución de energía que cuantifica las características espectrales de la fuente de luz.
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El objeto
• Los objetos modifican la luz. Los
Interacción de la Luz con el objeto
• Los objetos modifican la luz. Los colorantes, como los tintes y pigmentos, al aplicarlos al objeto, absorben selectivamente unas longitudes de onda de la luz incidente mientras que reflejan o transmiten sus complementarias.
• La cantidad de luz reflejada o transmitida a cada longitud de transmitida a cada longitud de onda se puede cuantificar. Esto nos dará la curva espectral de las características de color del objeto.
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El observador
• La luminosidad es la sensibilidad
Observador patrón
• La luminosidad es la sensibilidad relativa del ojo humano a ciertas longitudes de onda de la luz.
• Los Bastones del ojo humano son los responsables para la visión nocturna.
• Los Conos son los responsables de la visión del color y la luz de la visión del color y la luz diurna.
• Hay tres tipos de conos: los sensibles al rojo, los sensibles al verde y los sensibles al azul.
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Video: la percepción del color 5:44 min
Para medir el color se requieren tres elementos
Para Ver Color Para Medir Color
Fuente de Luz Fuente de Luz
MuestraObjeto
Observador Espectrómetro
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Medida del color• Un Colorímetro Triestímulo o Colorímetro utiliza una fuente de luz para
iluminar la muestra a medir. La luz reflejada fuera del objeto pasa a través de unos filtros de vidrio rojo, verde y azul para simular las funciones del observador para un iluminante en particular (normalmente el C). Un fotodetector ubicado mas allá de cada filtro (normalmente el C). Un fotodetector ubicado mas allá de cada filtro detecta, entonces, la cantidad de luz que pasa a través de los filtros. Estas señales, por último, se muestran como valores X, Y y Z .
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Escalas de colorOrganización visual del color
• El color tiene un grado de Luminosidad o Valor
Valor, Color y Croma
Luminosidad o Valor
(Value).
• Color (Hue) que es el color del arco iris o espectro de colores.
• Se puede añadir colorante para incrementar la para incrementar la cantidad de Tonalidad
(Chroma) o Saturación.
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Escalas de color
• Ya que los valores XYZ no se entienden fácilmente en términos de color del
• La Teoría de los Colores Opuestos dice que las se entienden fácilmente
en términos de color del objeto, se han desarrollado otras escalas de color para:– Mostrar mejor como
percibimos el color.– Simplificar la comprensión.– Mejorar la comunicación
Opuestos dice que las respuestas de los conos rojo, verde y azul se re-mezclan en sus codificadores opuestos a medida que se desplazan a lo largo del nervio óptico hasta el cerebro.– Mejorar la comunicación
de las diferencias de color.– Ser mas lineales a lo largo
del espacio de color.
óptico hasta el cerebro.
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Teoría de los ColoresTeoría de los Colores--OpuestosOpuestos
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Ejercicio visual: comprobando la teoría de los colores opuestos
• Instrucciones: En la siguiente transparencia se debe fijar la mirada en el punto blanco del debe fijar la mirada en el punto blanco del centro hasta que cambie a la siguiente pantalla después de unos 20 segundos. Cuando la pantalla blanca aparezca, parpadear un poco mientras se fija la mirada en la pantalla.un poco mientras se fija la mirada en la pantalla.
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¿Percepciones visuales?
• ¿Vio la bandera como rojo, blanco y azul?
• Esto ocurre al fijar la mirada en la bandera verde • Esto ocurre al fijar la mirada en la bandera verde negra y amarilla. Se ha sobresaturado la parte verde del codificador rojo-verde, la parte blanca del negro-blanco y la amarilla del azul-amarillo. Al mirar la pantalla blanca, la vista intenta volver al equilibrio y es por lo que vemos el rojo, blanco y azul después de la imagen.equilibrio y es por lo que vemos el rojo, blanco y azul después de la imagen.
• Esta demostración da credibilidad a la Teoría de los Colores-Opuestos.
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Espacio de Color Hunter Lab
• El espacio de color Hunter L,a,b es un espacio de color rectangular de 3-dimensiones basada en la Teoría de los rectangular de 3-dimensiones basada en la Teoría de los Colores-Opuestos.– Eje L (luminosidad) - 0 es
negro, 100 es blanco– Eje a (rojo-verde) – los
valores positivos son rojos; los valores negativos son verdes y 0 es el neutro
– Eje b (azul-amarillo) - los – Eje b (azul-amarillo) - los valores positivos son azules; los valores negativos son amarillos y 0 es el neutro
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Valores L, a, b de una muestra de plátanos
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Espacio de color CIE Valores L* C* h*Espacio de color CIE Valores L* C* h*
Conceptos básicos para la medición del color
Espectrofotometría
Colorimetría
Aspectos teóricos
MedicionMedicionLa fotometríaLa fotometría
La colorimetríaLa colorimetría
La espectrofotometríaLa espectrofotometría
MedicionMedicion
de luzde luz
Luz Luz
monocromática monocromática
Leyes de Leyes de LambertLambert
y y BeerBeer
Lambert y Beer
relacionan
La medida de la absorción
El espesor de la sustancia absorbente
La cantidad de sustancia que absorbe
observando
La cantidad de sustancia que absorbe
crecimiento exponencial de la absorción de
radiación
espesor de la región absorbenteespesor de la región absorbente
En Función deEn Función de
la cantidad de esa especiela cantidad de esa especie
Medio absorbente
Ley de Lambert
IOI = I0 × 10 -K.L log = K × L
I
IO
Intensidad trans.
I
I = intensidad de luz transmitida I0 = intensidad de luz incidente
K = coeficiente de extinción L = espesor de capa
K se refiere a las sustancias en general, sin estar en disolución.
SustanciaSustancia absorbente
Ley de Beer
IOI = I0 × 10 -K'.C log = K' × C
I
Intensidad trans.
I
I = intensidad de luz transmitida I0 = intensidad de luz incidente
C = concentración de la sustancia absorbente K = coeficiente de extinción
K se refiere a las sustancias en general, sin estar en disolución.
Aplicaciones de la Aplicaciones de la ley de ley de LambertLambert--BeerBeer
Industrias de pinturasIndustrias de pinturas
Industria farmacéuticaIndustria farmacéutica
Industrias que tengan que ver Industrias que tengan que ver con la medida de luz de con la medida de luz de sustancias coloreadas o incolorassustancias coloreadas o incoloras.sustancias coloreadas o incolorassustancias coloreadas o incoloras.
Distintos métodos de la Distintos métodos de la espectrofotometría para química espectrofotometría para química analítica.analítica.
Colorimetría…Colorimetría…
LLaa cienciaciencia queque estudiaestudia loslos colores,colores,
caracterizándoloscaracterizándolos mediantemediante números,números, parapara queque unaunavezvez queque sese encuentranencuentran cuantificadoscuantificados poderpoder operaroperarconcon ellosellos yy deducirdeducir característicascaracterísticas dede loslos colorescoloresobtenidosobtenidos mediantemediante mezclas,mezclas, asíasí comocomo paraparaobtenidosobtenidos mediantemediante mezclas,mezclas, asíasí comocomo paraparaaveriguaraveriguar laslas cantidadescantidades queque hayhay queque mezclarmezclar dedevariosvarios colorescolores elegidoselegidos yy consideradosconsiderados comocomoprimariosprimarios parapara obtenerobtener elel colorcolor deseadodeseado..
Sensibilidad espectral de las células Sensibilidad espectral de las células fotorreceptorasfotorreceptoras
Percepción Visual: Ojo Humano
1. Sensibilidad a la Intensidad1. Sensibilidad a la Intensidad
2. Filtrado Espacial2. Filtrado Espacial
3. Procesado Temporal3. Procesado Temporal
LosLos colorescolores tienentienen unasunas propiedadespropiedades inherentesinherentes queque lesles permitepermite
distinguirsedistinguirse dede otrosotros yy acuñaracuñar distintasdistintas definicionesdefiniciones dede tipotipo dede colorcolor..
TodoTodo colorcolor poseeposee unauna serieserie dedepropiedadespropiedades queque lele hacenhacen variarvariar dedepropiedadespropiedades queque lele hacenhacen variarvariar dedeaspectoaspecto yy queque definendefinen susu aparienciaaparienciafinalfinal..
Matiz (Matiz (HUEHUE))
Saturación o IntensidadSaturación o IntensidadSaturación o IntensidadSaturación o Intensidad
Valor o Brillo (Valor o Brillo (VALUEVALUE))
EsEs elel estadoestado puropuro deldel color,color, sinsin elel blancoblanco oo negronegro agregados,agregados, yy eses unun atributoatributo asociadoasociadoconcon lala longitudlongitud dede ondaonda dominantedominante enen lala mezclamezcla dede laslas ondasondas luminosasluminosas..
ElEl MatizMatiz oo HUEHUE,, sese definedefine comocomo unun atributoatributo dede colorcolor queque nosnos permitepermite distinguirdistinguir elel rojorojo
Matiz (Hue)
ElEl MatizMatiz oo HUEHUE,, sese definedefine comocomo unun atributoatributo dede colorcolor queque nosnos permitepermite distinguirdistinguir elel rojorojodeldel azul,azul, yy sese refiererefiere alal recorridorecorrido queque hacehace unun tonotono haciahacia unouno uu otrootro ladolado deldel circulocirculocromático,cromático, porpor lolo queque elel verdeverde amarillentoamarillento yy elel verdeverde azuladoazulado seránserán maticesmatices diferentesdiferentesdeldel verdeverde..
LosLos 33 colorescolores primariosprimarios representanrepresentan loslos 33 maticesmaticesprimarios,primarios, yy mezclandomezclando estosestos podemospodemos obtenerobtener loslosprimarios,primarios, yy mezclandomezclando estosestos podemospodemos obtenerobtener loslosdemásdemás maticesmatices oo colorescolores..
DosDos colorescolores sonson complementarioscomplementarios cuandocuando estánestánunouno frentefrente aa otrootro enen elel círculocírculo dede maticesmatices (círculo(círculocromático)cromático)..
TambiénTambién llamadallamada Croma,Croma, esteeste conceptoconcepto representarepresenta lala purezapureza oointensidadintensidad dede unun colorcolor particular,particular, lala vivezaviveza oo palidezpalidez deldel mismo,mismo, yy puedepuederelacionarserelacionarse concon elel anchoancho dede bandabanda dede lala luzluz queque estamosestamos visualizandovisualizando..
Saturación o Intensidad
LosLos colorescolores purospuros deldel espectroespectro estánestáncompletamentecompletamente saturadossaturados.. UnUn colorcolor intensointenso esesmuymuy vivovivo.. CuantoCuanto másmás sese saturasatura unun color,color,mayormayor eses lala impresiónimpresión dede queque elel objetoobjeto sese estáestámoviendomoviendo..mayormayor eses lala impresiónimpresión dede queque elel objetoobjeto sese estáestámoviendomoviendo..
LaLa cantidadcantidad dede grisgris queque contienecontiene unun colorcolor:: mientrasmientrasmásmás grisgris oo másmás neutroneutro es,es, menosmenos brillantebrillante oo menosmenos"saturado""saturado" eses..
Otra definición…Otra definición…
Igualmente, cualquier cambio hecho a un color puro automáticamente baja su Igualmente, cualquier cambio hecho a un color puro automáticamente baja su saturación.saturación.
SeSe llamanllaman colorescolores cálidoscálidos aquellosaquellos queque vanvan deldelrojorojo alal amarilloamarillo yy loslos colorescolores fríosfríos sonson loslos queque vanvandeldel azulazul alal verdeverde..
EstaEsta divisióndivisión dede loslos colorescolores enen cálidoscálidos yy fríosfríosEstaEsta divisióndivisión dede loslos colorescolores enen cálidoscálidos yy fríosfríosradicaradica simplementesimplemente enen lala sensaciónsensación yy experienciaexperienciahumanahumana..
LaLa calidezcalidez yy lala frialdadfrialdad atiendenatienden aa sensacionessensacionestérmicastérmicas subjetivassubjetivas..
EsEs unun términotérmino queque sese usausa parapara describirdescribir queque tantan claroclaro uu oscurooscuro pareceparece unun color,color, yysese refiererefiere aa lala cantidadcantidad dede luzluz percibidapercibida..
Valor o Brillo (Value)
ElEl brillobrillo sese puedepuede definirdefinir comocomo lala cantidadcantidad dede "oscuridad""oscuridad" queque tienetiene unun color,color, esesdecir,decir, representarepresenta lolo claroclaro uu oscurooscuro queque eses unun colorcolor respectorespecto dede susu colorcolor patrónpatrón..
LaLa luminosidadluminosidad,, oo claridadclaridad,, eses utilizadautilizada enen colorimetríacolorimetría parapara definirdefinir ciertosciertos sistemassistemascolorimétricoscolorimétricos llamadosllamados sistemassistemas cromáticoscromáticos uniformesuniformes talestales comocomo CIECIE L*u*v*,L*u*v*, CIECIE
L*a*b*L*a*b* yy otrosotros..
ComissionComission Internationale de lInternationale de l´́Éclairage (CIE)Éclairage (CIE)
AA medidamedida queque aa unun colorcolor sese lele agregaagrega masmas negro,negro,sese intensificaintensifica dichadicha oscuridadoscuridad yy sese obtieneobtiene ununvalorvalor másmás bajobajo..
AA medidamedida queque aa unun colorcolor sese lele agregaagrega másmás blancoblancosese intensificaintensifica lala claridadclaridad deldel mismomismo porpor lolo queque seseobtienenobtienen valoresvalores másmás altosaltos..
DosDos colorescolores diferentes(comodiferentes(como elel rojorojo yy elel azul)azul)puedenpueden llegarllegar aa tenertener elel mismomismo tono,tono, sisiconsideramosconsideramos elel conceptoconcepto comocomo elel mismomismo gradogradodede claridadclaridad uu oscuridadoscuridad concon relaciónrelación aa lala mismamismadede claridadclaridad uu oscuridadoscuridad concon relaciónrelación aa lala mismamismacantidadcantidad dede blancoblanco oo negronegro queque contengan,contengan,segúnsegún cadacada casocaso
Equipos utilizados en la determinación del color en los alimentos
Minolta
Hunter lab
Otras Técnicas para medir colorOtras Técnicas para medir color
con calidad de artículos indexadoscon calidad de artículos indexados
Aplicaciones en la Aplicaciones en la
industria cárnicaindustria cárnica
Práctica de medición del color
Bibliografía
• AMSA (2012). Meat Color Measurement Guidelines. American Meat Science Association. Champaign, Illinois USA.
• Downham, A. & Collins, P. (2000). Colouring our foods in the last and next millennium. International Journal of Food Science
and Technology, 35(1), pp. 5–22 Consultado el 1 de octubre del 2013 enhttp://www.blacksci.co.uk/products/journals/freepdf/tmp1.pdf
• Flores, E., Roque, C. & Ochoa, R. (1995). Química del color. Revista de Química. Vol. IX(2):99-109
• HunterLab (2001). Principios básicos de medida y percepción del color. Versión 1.2. En: HunterLab. http://www.slideshare.net/jagabaldon/color-s consultado el 17 de octubre de 2013
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• Lee, H. (2000). Objective Measurement of Red Grapefruit Juice Color. J. Agric. Food Chem. 48, 1507-1511.
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