Espectrofotómetro de arreglo de diodos
El detector de arreglo de diodos (diode array) fue introducido a mediados de los
años1970. Es una variación de los detectores de la región ultravioleta. El desarrollo de
los detectores que cuentan con arreglo de diodos es un gran avance en la
espectrofotometría UV. Poseen un nuevo sistema óptico e introducen el concepto de
integración total del detector, microprocesador y procesamiento de datos. La base del
funcionamiento de los espectrómetros de arreglo de diodos es simple: el haz de
radiación que ha atravesado la columna cromatografía, es dispersado por medio de
una red de difracción fija, siendo recogidas simultáneamente todas las longitudes de
onda dispersadas mediante una matriz de fotodiodos.
Utilizan una óptica invertida respecto del convencional: Toda la luz de la fuente
atraviesa la muestra, y luego es dispersada, en lugar de una ranura de salida, tiene en
el plano focal un dispositivo que integra en un pequeño circuito varios cientos de
detectores tipo fotodiodo de silicio. El número de elementos varía actualmente entre 64
y 4096, siendo los más comunes 512 y 1024 elementos. Este detector se compone de
una serie de diodos fotosensibles lado a lado y aislados unos de otros en forma de
capas múltiples sándwich. Cada diodo tiene un espesor muy pequeño y la salida de
cada uno se puede escanear, almacenar y posteriormente procesadas por un
ordenador en un numero de maneras diferentes.
Las principales ventajas del arreglo de fotodiodos son:
Para obtener un espectro no se necesita mover ningún elemento.
Los espectros se obtienen casi de forma instantánea.
Es particularmente importante cuando no hay información disponible de las
absortividades molares a diferentes longitudes de onda.
Está relacionado con la pureza máxima, ayuda a decidir que pico representa
un solo compuesto, o si es un pico de compuestos.
Presenta la desventaja de ser menos sensible que la detección por
ultravioleta convencional.
Fundamento de la Turbidimetría y Nefelometría
La Turbidimetria y la Nefelometría, se basan en el hecho de que la formación de
inmunocomplejos solubles, con un tamaño de 1000+ Å va acompañada por un
aumento proporcional de la luz difractada y en consecuencia una disminución de
la luz transmitida I (Ecuación de Rayleigh).
Inmunoturbidimetria o Turbidimetria: mide la disminución de la intensidad de la luz
transmitida I a 180º debida a la difracción producida por los complejos inmunes
formados. La disminución de la intensidad de luz (aumento de Absorbancia) es
proporcional a la concentración de analito presente.
Nefelometria cuantifica la luz difractada hacia un detector en determinados
ángulos (normalmente 90º). La misma aumenta proporcionalmente al número y
tamaño de los inmunocomplejos formados.
Resulta evidente que la naturaleza de la reacción inmunoquímica es la misma y lo
que los diferencia es el principio de detección empleado.
Características instrumentales para la Turbidimetría y Nefelometría.
• Se usa para especies de alta concentración, como para el control de calidad en
agua, control químico de su tratamiento y determinación de iones sulfato en ella.
• Tiempo real
• Alta precisión
• Método de medición infrarrojo
• Medición de luz transmitida y luz difundida
• Memoria de los valores máximo y mínimo
• Calibración de 0 y 100 NTU
• Carcasa compacta resistente a golpes
• Desconexión automática (a los 5 min.)