FASE II: DETERMINACIONES ANALÍTICAS DE LA CAPACIDAD ANTIOXIDANTE EN EL
PLASMA DE LOS ACEITES DE PALMA HIBRIDA Y OLIVA EXTRA-VIRGEN EN
INDIVIDUOS DE LA LOCALIDAD DE USME EN BOGOTÁ.
ANA MILENA SIERRA GOMEZ
TRABAJO DE GRADO
Presentado como requisito parcial para optar al título de
NUTRICIONISTA DIETISTA
MYRIAM LUCIA OJEDA ARREDONDO
PONTIFICIA UNIVERSIDAD JAVERIANA
FACULTAD DE CIENCIAS
CARRERA DE NUTRICIÓN Y DIETÉTICA
Bogotá, D. C. de Junio de 2013
NOTA DE ADVERTENCIA
Artículo 23 de la Resolución N° 13 de Julio de 1946
“La Universidad no se hace responsable por los conceptos emitidos por sus alumnos en sus
trabajos de tesis. Solo velará por que no se publique nada contrario al dogma y a la moral
católica y por qué las tesis no contengan ataques personales contra persona alguna, antes
bien se vea en ellas el anhelo de buscar la verdad y la justicia”.
FASE II: DETERMINACIONES ANALÍTICAS DE LA CAPACIDAD ANTIOXIDANTE EN EL
PLASMA DE LOS ACEITES DE PALMA HIBRIDA Y OLIVA EXTRA-VIRGEN EN
INDIVIDUOS DE LA LOCALIDAD DE USME EN BOGOTÁ.
ANA MILENA SIERRA GOMEZ
APROBADO
__________________________ __________________________
Ingrid Schuler García Martha Lievano Fiesco
Título profesional, Bióloga. MSc. PhD. Título profesional, Nutricionista Dietista. MSc
Decano Académico Director de Carrera
v
Agradecimientos:
A Dios, por bendecir mi camino,
A Myriam Ojeda, directora de este trabajo, y a Paolo Lucci por permitirme hacer parte de
este proyecto,
A mi familia, por su inmenso amor,
A Diego Patiño, por su apoyo incondicional,
A Vivian Castro por su interés en la orientación de la metodología de esta investigación.
A mis colegas, Milena Márquez y Paola Arévalo por su colaboración en el procesamiento de
las muestras.
vi
TABLA DE CONTENIDO
1. INTRODUCCIÓN ............................................................................................................ 10
2. MARCO TEÓRICO ......................................................................................................... 11
2.1 EPIDEMIOLOGÍA ENFERMEDAD CARDIOVASCULAR ............................................. 11
2.2 OXIDACIÓN Y ANTIOXIDANTES ................................................................................ 11
2.3 POLIFENOLES ............................................................................................................. 11
2.4 MEDICIÓN DE LA CAPACIDAD ANTIOXIDANTE EN EL PLASMA ............................ 12
2.5 CAPACIDAD ANTIOXIDANTE EQUIVALENTE AL TROLOX (TEAC) ......................... 12
2.6 FOLIN-CIOCALTEU (RFC) ........................................................................................... 12
2.7 ACEITE DE PALMA ...................................................................................................... 12
2.8 ACEITE DE PALMA HIBRIDA ...................................................................................... 13
2.9 ACEITE DE OLIVA VIRGEN ......................................................................................... 14
2.10 ACEITE DE OLIVA EXTRA-VIRGEN ......................................................................... 14
3. FORMULACIÓN DEL PROBLEMA Y JUSTIFICACIÓN ................................................. 15
3.1 FORMULACIÓN DEL PROBLEMA .............................................................................. 15
3.2 JUSTIFICACIÓN ........................................................................................................... 15
4. OBJETIVOS .................................................................................................................... 16
4.1 OBJETIVO GENERAL .................................................................................................. 16
4.2 OBJETIVOS ESPECÍFICOS ......................................................................................... 16
5. HIPÓTESIS ..................................................................................................................... 17
6. MATERIALES Y MÉTODOS ........................................................................................... 17
6.1 DISEÑO DE LA INVESTIGACIÓN ................................................................................ 17
6.1.1 POBLACIÓN DE ESTUDIO Y MUESTRA ............................................................. 18
6.1.2 CRITERIOS DE INCLUSIÓN ................................................................................. 18
6.1.3 CRITERIOS DE EXCLUSIÓN ................................................................................ 18
6.1.4 VARIABLES DEL ESTUDIO .................................................................................. 18
6.2 MÉTODOS .................................................................................................................... 18
6.2.1 MATERIALES ........................................................................................................ 18
6.3 RECOLECCIÓN DE LA INFORMACIÓN ...................................................................... 19
6.4 ANÁLISIS DE INFORMACIÓN .................................................................................... 20
7. RESULTADOS ................................................................................................................ 21
8. DISCUSIÓN DE RESULTADOS ..................................................................................... 25
9. CONCLUSIONES ........................................................................................................... 28
10. RECOMENDACIONES ................................................................................................... 29
11. REFERENCIAS ............................................................................................................... 29
12. ANEXOS ......................................................................................................................... 32
vii
INDICE DE TABLAS
TABLA 1. PERFIL DE ÁCIDOS GRASOS DEL ACEITE DE PALMA ELAEIS OLEIFERA,
ELAEIS GUINEENSIS Y ACEITE DE PALMA HIBRIDA. 14
TABLA 2. CONTENIDO DE ANTIOXIDANTES DEL ACEITE DE PALMA ELAEIS
OLEIFERA, ELAEIS GUINEENSIS Y ACEITE DE PALMA HIBRIDA. 14
TABLA 3. PERFIL DE ÁCIDOS GRASOS DEL ACEITE OLIVA EXTRA-VIRGEN. 15
TABLA 4. CONTENIDO DE ANTIOXIDANTES DEL ACEITE OLIVA EXTRA-VIRGEN. 15
TABLA 5. MÉTODO TEAC: PRUEBAS POST-HOC (TUKEY Y SCHEFFE) PARA ACEITE
DE PALMA HÍBRIDA Y ACEITE DE OLIVA EXTRA-VIRGEN. 22
TABLA 6. MÉTODO FRC: PRUEBAS POST-HOC (TUKEY Y SCHEFFE) PARA ACEITE
DE PALMA HÍBRIDA Y ACEITE DE OLIVA EXTRA-VIRGEN. 24
viii
INDICE DE FIGURAS
FIGURA 1. MÉTODO TEAC: CONCENTRACIÓN MMOL/TROLOX DEL ACEITE DE PALMA
HÍBRIDA VS ACEITE DE OLIVA EXTRA-VIRGEN SEGÚN TIEMPO. 21
FIGURA 2. MÉTODO TEAC: GRÁFICO DE MEDIAS PARA EL TIEMPO Y GRUPOS DE
CONSUMO DE ACEITE DE PALMA HIBRIDA Y ACEITE DE OLIVA EXTRA-VIRGEN. 22
FIGURA 3. MÉTODO FRC: CONCENTRACIÓN MG/ÁCIDO GÁLICO DEL ACEITE DE
PALMA HÍBRIDA VS ACEITE DE OLIVA EXTRA-VIRGEN SEGÚN TIEMPO. 23
FIGURA 4. MÉTODO FRC: GRÁFICO DE MEDIAS PARA EL TIEMPO Y GRUPOS DE
CONSUMO DE ACEITE DE PALMA HIBRIDA Y ACEITE DE OLIVA EXTRA-VIRGEN. 24
RESUMEN: Actualmente se conocen los beneficios del consumo de aceites vegetales como
el aceite de oliva extra-virgen sobre la salud, debido a su balance entre ácidos grasos
saturados e insaturados y su alto contenido de antioxidantes como carotenos, tocoferoles,
tocotrienoles y compuestos fenólicos, los cuales evitan el daño oxidativo y previenen el
desarrollo de enfermedades cardiovasculares. Otro tipo de aceite vegetal es el aceite de
palma híbrida que resulta del cruce entre Elaeis oleifera y Elaeis guineensis, esta variedad
de aceite muestra en su composición un aporte de acidos grasos saturados en 33% y un alto
contenido de ácidos grasos insaturados en 66% como el ácido linóleico, linolenico y
antioxidantes que le confieren propiedades similares al aceite de oliva extra-virgen. Hoy en
día los estudios no reportan análisis en la aplicación de técnicas analíticas para la
determinación del beneficio de los componentes en este tipo de aceite. Por lo cual el objetivo
de este estudio fue determinar y comparar las diferencias en el contenido de fenoles y la
capacidad antioxidante en el plasma empleando los métodos (RFC) y (TEAC) después de
dos y tres meses de consumo de aceites de palma híbrida y oliva extra-virgen en individuos
residentes de la localidad de Usme en Bogotá. Los resultados muestran que el contenido de
fenoles y la capacidad antioxidante en plasma en los dos grupos incrementan posterior a los
dos y tres meses de intervención (p<0.05), sin embargo el aceite de oliva extra-virgen mostro
un mejor comportamiento; mayor concentraciones de capacidad antioxidante expresado en
mmol trolox/ L plasma y contenido de fenoles expresado en mg de ácido gálico/L plasma que
el aceite de palma hibrido (p<0.05).
ABSTRACT: Currently know the benefits of consuming vegetable oils such as olive oil extra
virgin health because of its balance between saturated and unsaturated fatty acids and its
high content of antioxidants such as carotenoids, tocopherols, tocotrienols, and phenolic
compounds, which prevent oxidative damage and prevent the development of cardiovascular
diseases. Other vegetable oil is palm oil hybrid from crossing Elaeis oleifera and Elaeis
guineensis, this variety of sample oil in its composition a contribution of saturated fatty acids
by 33% and a high content of unsaturated fatty acids by 66% as linoleic acid, linolenic acid
and antioxidants that confer similar properties to olive oil extra virgin. Today analysis studies
do not report on the application of analytical techniques for determining the benefit of the
components in this type of oil. Therefore the aim of this study was to determine and compare
the differences in content of phenols and plasma antioxidant capacity using methods (RFC)
and (TEAC) after two and three months of consumption of hybrid palm oils extra-virgin olive
residents individuals Usme in Bogota. The results show that the phenolic content and
antioxidant capacity in plasma increased in both groups after two and three months of
intervention (p <0.05), however the oil extra-virgin olive showed a better performance, greater
10
concentrations antioxidant capacity expressed trolox mmol / L plasma and phenol content
expressed in mg gallic acid / L plasma hybrid palm oil (p <0.05).
1. INTRODUCCIÓN
Según la Organización Mundial de la Salud, la enfermedad cardiovascular es la principal
causa de muerte a nivel mundial. Sus principales factores de riesgo se clasifican como
modificables y no modificables, siendo los primeros aquellos que se pueden cambiar, ya sea
a través de tratamiento farmacológico o mediante cambios en el estilo de vida como la dieta
y el ejercicio y los no modificables como aquellos que no se pueden cambiar como el
género, la edad o causas hereditarias. Como factor modificable el consumir una dieta
saludable es la clave del éxito en la prevención y abordaje de la enfermedad cardiovascular;
esta debe ser variada con alimentos ricos en ácidos grasos insaturados y antioxidantes.
Los antioxidantes y polifenoles actúan como un mecanismo de defensa para enfrentar el
daño causado por los radicales libres, los cuales juegan un papel fundamental en la
oxidación del colesterol LDL, contribuyendo al desarrollo de la placa aterosclerótica,
causante de la enfermedad cardiovascular. Por lo tanto el aumentar la ingesta de
antioxidantes a través de la dieta puede estabilizar la oxidación previniendo reacciones que
pueden ser nocivas para las células y por ende para la salud.
En las últimas décadas se ha demostrado que los aceites vegetales que se obtienen de
semillas u otras partes de las plantas, siendo de principal interés el aceite de oliva extra-
virgen y el aceite de palma híbrida, ya que son ricos en ácidos grasos monoinsaturados
como el ácido oleico y ácidos polinsaturados, antioxidantes como carotenos, tocoferoles y
polifenoles. Los anteriores compuestos se han evaluado en el aceite de oliva-extravirgen por
medio de la aplicación de los métodos analíticos (TEAC-RFC-ORAC-DPPH) que permiten
detectar la concentración de moléculas antioxidantes presentes en este tipo de aceite. A
diferencia el aceite de palma hibrida actualmente no reporta análisis para la determinación
del beneficio de sus componentes.
Por lo anterior el objetivo de esta investigación fue determinar las diferencias en el contenido
de fenoles y la capacidad antioxidante en el plasma sanguíneo ocasionadas por el consumo
de aceite de palma híbrida y oliva extra-virgen a partir de la aplicación de métodos analíticos:
(TEAC) medición de la capacidad antioxidante equivalente al trolox y (RFC) Folin Ciocalteau
contenido total de fenoles en individuos residentes de la localidad de Usme en Bogotá.
11
2. MARCO TEÓRICO
2.1 EPIDEMIOLOGÍA ENFERMEDAD CARDIOVASCULAR: Según la Organización Mundial
de la Salud, la enfermedad cardiovascular (ECV) es uno de los riesgos de mayor importancia
para la salud pública, ya que es la principal causa de muerte a nivel mundial. Cada año
mueren más personas por este tipo de enfermedad que por cualquier otra causa (OMS,
2002). En 2005 el Dane estimó que las muertes cardiovasculares aportaron para Colombia
un 29,3% y para Bogotá un 28,8% de las muertes totales (Cáliz, 2006). Este tipo de
enfermedad es más común en países en vía de desarrollo, en personas de bajos recursos,
con poca educación formal y con ocupaciones o profesiones humildes. Los principales
factores de riesgo son la inactividad física, una dieta inadecuada, el consumo de tabaco y
alcohol, hipertensión arterial e hiperlipidemias (OMS, 2002).
Actualmente estos factores de riesgo han sido clasificados en dos grupos, modificables y no
modificables. Los modificables son aquellos factores que son susceptibles de cambio ya sea
a través de tratamiento farmacológico o mediante cambios en el estilo de vida. Los no
modificables corresponden a factores de riesgo imposibles de cambiar como el género, la
edad o causas hereditarias (Díaz, Muñoz & Sierra, 2007).
2.2 OXIDACIÓN Y ANTIOXIDANTES: La oxidación se define como la pérdida de electrones,
de hidrógenos o la ganancia de oxígeno en una molécula (Quintanar & Calderón, 2009).
Para evitar dicha oxidación el organismo debe mantener un mecanismo de defensa
antioxidante para enfrentar el daño por medio de macromoléculas como las proteínas, entre
esas las transferrinas, oxígeno, hemoglobinas y mioglobinas; enzimas protectoras como el
superoxido dismutasa, catalasas y glutatión peroxidasa; antioxidantes endógenos como el
glutatión, NADPH, albúmina, ácido úrico, coenzima Q y bilirrubina; antioxidantes exógenos
los cuales provienen de la dieta como la vitamina E (α tocoferol), vitamina C (ácido
ascórbico), vitamina A, cobre, selenio, zinc, polifenoles, licopenos y flavonoides. Se cree que
la dieta aumenta la defensa antioxidante del organismo evitando el daño oxidativo
(Quintanar & Calderón, 2009).
2.3 POLIFENOLES: Son un grupo de compuestos presentes en hojas, frutos y corteza de
los vegetales. Estos poseen anillos fenólicos unidos por diferentes radicales
hidrocarbonados, que les otorgan su especificidad. (Mendivil, Sierra, Pérez & Hernández,
2002). Los principales fenoles son ácidos fenólicos, alcoholes fenólicos, flavonoides,
secoiridoises, caracterizándose por su alta actividad antioxidante (Arantza, 2009).
12
2.4 MEDICIÓN DE LA CAPACIDAD ANTIOXIDANTE EN EL PLASMA: Las técnicas
desarrolladas para determinar la capacidad antioxidante se basan en demostrar como un
agente oxidante induce daño oxidativo a un sustrato oxidable, dicho daño es inhibido en
presencia de un antioxidante (Quintanar & Calderón, 2009).
2.5 CAPACIDAD ANTIOXIDANTE EQUIVALENTE AL TROLOX (TEAC): Método que se
fundamenta en la reducción del catión ABTS+; este es un compuesto utilizado para observar
las cinéticas de reacción de enzimas y la capacidad antioxidante de los alimentos (Ayse,
Ozcelik & Saner, 2009). Dicha capacidad antioxidante se mide en la reducción del radical
catiónico ABTS+ que a causa de la presencia de moléculas antioxidantes cambia el color
obteniendo una disminución en los valores de su absorbancia, la cual puede ser fácilmente
medida con un espectrofotómetro. Los resultados que se obtienen de esta técnica son
expresados como inhibición y llevados a una concentración relativa de trolox (Ayse, Ozcelik
& Saner, 2009).
2.6 FOLIN-CIOCALTEU (RFC): Método basado en la reacción de óxido-reducción entre
compuestos reductores y el reactivo de Folin-Ciocalteu (RFC), dicha reacción al producir una
transferencia de electrones en un medio alcalino de compuestos fenólicos, da como
resultado un cromógeno azul el cual puede ser monitoreado mediante espectrofotometría
(Ayse, Ozcelik & Saner, 2009).
2.7 ACEITE DE PALMA: El fruto de la palma de aceite (Elaeis guineensis Jacq) (Amado,
2010), es una nuez con cascara dura rodeada por una pulpa exterior que contiene el aceite
de palma. La nuez contiene una almendra de donde se extrae un tipo diferente de aceite, (el
aceite de almendra de palma o palmiste). La palma, es cultivada en zonas ecuatoriales o
intertropicales como África, Asia, Sur Oriental, América del Sur y Central (Corley & Tinker,
2009).
En Colombia para el 2008 se contaba con 336.956 hectáreas sembradas con palma de
aceite, representadas en 777.548 toneladas de aceite de palma y 178.302 toneladas de
aceite de palmiste (Amado, 2010). La principal aplicación del aceite de palma en Colombia
se encuentra en el mercado de alimentos debido a la obtención de los proceso de fritura,
fabricación de grasas y alimentos nutraceuticos (Amado, 2010).
En la actualidad diversos agentes externos como hongos, virus y parásitos afectan la
productividad de la plantación de la palma. Para reducir el impacto de las enfermedades
13
causadas por estos microorganismos se ha introducido una nueva variedad comercial
conocida como palma hibrida OxG, la cual ha mostrado mayor tolerancia a las enfermedades
(Amado, 2010).
2.8 ACEITE DE PALMA HIBRIDA: Según normatividad colombiana se le conoce como
aceite de palma alto oleico OxG. Este aceite de palma resulta del cruce de Elaeis oleifera y
Elaeis guineensis (Fedepalma). Nació a principios de la década del setenta, cuando el IRHO
(Instituto francés de investigación de aceites y oleaginosas), realizó cruzamientos científicos,
usando palma Elaeis oleifera de la zona del Sinú en Colombia (Fedepalma, 2009).
Es una planta monocotiledónea y monoica, esto quiere decir que su semilla tiene un solo
cotiledón o almendra, las flores masculinas y femeninas se producen en forma
independiente, pero en la misma palma respectivamente (Fedepalma, 2009). El ciclo de
cosecha de la Palma hibrida es de 21 a 28 días a diferencia de la africana que es de 7 a12
días (Fedepalma, 2009).
Raíces: El sistema radicular de la palma se expande a partir de la radícula, debajo del tallo,
produciendo raíces primarias, secundarias, terciarias y cuaternarias. Se ha observado que
las raíces primarias profundizan un poco más que las de E. guineensis.
Tronco o estípite: En este material genético, el tallo o tronco de la palma tiene un
crecimiento reducido (entre 17 y 22 cm/año) lo que le permite una vida útil para la cosecha
más larga.
Hojas: A diferencia de la palma africana, las hojas de este material son más largas y sus
foliolos más anchos y largos, razón por la cual tiene un menor número de foliolos.
Desde el punto de vista nutricional, esta variedad de aceite muestra propiedades intermedias
entre el aceite que proveniente de Elaeis guineensis jacq. y Elaeis oleífera, proporcionando
una menor cantidad de ácidos grasos saturados (33%) y un mayor contenido de ácidos
grasos insaturados (66%) (Amado, 2010); como el ácido oleico (48% - 58%), linoleico (10% -
14%), linolenico (< 0.6%) (Amado, 2010). Además la estabilidad del aceite está asociada a
una fuente importante de fitonutrientes poco disponibles en otros alimentos, como son los
tocotrienoles y tocoferoles (600 - 800 ppm) y es el aceite vegetal más rico en carotenos
(1250-1450 ppm), estos compuestos actúan como antioxidantes evitando el daño oxidativo
(Amado, 2010), ya que ayudan a disminuir los niveles de (LDL) lipoproteínas de baja
14
densidad y equilibran los niveles de (HDL) lipoproteínas de alta densidad previniendo así la
arterioesclerosis (Fedepalma, 2009).
El aceite de Palma hibrido tiene un gran potencial de utilización para el consumo humano,
usos industriales, farmacéuticos y cuidado de la salud. Ha sido catalogado por algunos
expertos como el “equivalente tropical del aceite de oliva” (Fedepalma, 2009).
Tabla 1. Perfil de ácidos grasos del aceite de palma Elaeis oleifera, Elaeis guineensis y
aceite de palma hibrida.
Ácido graso
Aceite de palma (%)
(Elaeis oleifera)
Aceite de palma (%)
(Elaeis guineensis jacq)
Aceite de palma hibrida (%)
(Elaeis oleifera x Elaesis guineensis)
Laurico C12:0 -- < 0.5 0.11 - 0.38
Miristico C14:0 0.2 0.5 – 20 0.40 - 0.70
Palmítico C16:0 18.7 39.3 - 47.5 25 - 34
Palmitoleico C16:1 1.6 < 0.6 < 0.75
Esteárico C18:0 0.9 3.5 - 6.0 2.0 - 3.8
Oleico C18:1 56.1 36.0 - 44.0 48 - 58
Linoleico C18:2 21.1 9.0 - 12.0 10 - 14
Linolenico C18:3 1 < 0.5 < 0.6
Araquidico C20:0 -- < 0.1 < 0.4
Tomado y adaptado (Amado, 2010).
Tabla 2. Contenido de antioxidantes del aceite de palma Elaeis oleifera, Elaeis guineensis y
aceite de palma hibrida.
Antioxidantes Aceite de palma (ppm)
(Elaeis oleifera)
Aceite de palma (ppm) (Elaeis guineensis jacq)
Aceite de palma hibrida (ppm) (Elaeis oleifera x
Elaesis guineensis)
Carotenos 4300-4600 500-700 1250-1450
Vitamina E 700-1000 600-1000 600-800
Tomado y adaptado (Amado, 2010).
2.9 ACEITE DE OLIVA VIRGEN: El aceite de olvida virgen es obtenido del fruto de Olivo por
procedimientos mecánicos o físicos como el lavado, decantación, centrifugación y filtrado
(Osada, 2010). Debe tener como máximo una acidez de 2 g por 100 expresada en ácido
oleico (Samaniego, 2006).
2.10 ACEITE DE OLIVA EXTRA-VIRGEN: Presenta una acidez igual o menor a 0,8 g por
100 expresada en ácido oleico (Samaniego, 2006). Este aceite conserva la mayor cantidad
de la fracción insaponificable y antioxidantes, como los alfa-tocoferoles y derivados fenólicos
15
(Litridoua, Linssen, Schols, Bergmans, Posthumus, Tsimidoua, & Boskoua, 1997). A su vez
contiene ácidos grasos insaturados como el ácido oleico (55- 83%) y linoleico (3.5 - 21%)
(Osada, 2010). El consumo de este aceite es tan importante porque los ácidos grasos
monoinsaturados disminuyen la oxidación de las lipoproteínas de baja densidad (LDL)
evitando la formación de placas ateromatosas (Covas, Nyyssonen, Poulsen Kaikkonen, Zunft
Kiesewetter & 2006).
Tabla 3. Perfil de ácidos grasos del aceite de oliva extra-virgen.
Ácido graso Aceite oliva extra-virgen (%)
Laurico C12:0 --
Miristico C14:0 0.0 – 0.05
Palmítico C16:0 7.5 – 20
Palmitoleico C16:1 0.3 - 3.5
Esteárico C18:0 0.5 - 5.0
Oleico C18:1 55 -83
Linoleico C18:2 3.5 – 21
Linolenico C18:3 0.0 - 0.9
Araquidico C20:0 0.0 - 0.6
Tomado y adaptado (Osada, 2010)
Tabla 4. Contenido de antioxidantes del aceite oliva extra-virgen.
Antioxidantes Aceite oliva extra-virgen (ppm)
Carotenos --
Vitamina E (Tocoferoles) 100-150
Fenoles 117
Tomado y adaptado (Osada, 2010)
3. FORMULACIÓN DEL PROBLEMA Y JUSTIFICACIÓN
3.1 FORMULACIÓN DEL PROBLEMA: La enfermedad cardiovascular es la principal causa
de muerte a nivel mundial (OMS, 2002), considerándose como uno de los riesgos de mayor
importancia para la salud pública. Como prevención y abordaje de esta enfermedad se debe
consumir una dieta saludable, con alimentos ricos en ácidos grasos insaturados y
antioxidantes como los aceites vegetales que debido a su composición contribuyen a reducir
el riesgo de desarrollar esta patología.
3.2 JUSTIFICACIÓN: Diversos factores de riesgo se han asociado con el desarrollo de
enfermedades cardiovasculares, entre ellos el estrés oxidativo que conduce a elevadas
concentraciones de productos de peroxidación lipídica (Zamora, 2007). Los radicales libres
16
juegan un papel fundamental en la oxidación del colesterol LDL contribuyendo al desarrollo
de la placa aterosclerótica, causante de la enfermedad cardiovascular.
La elevación del daño oxidativo y la disminución de los niveles plasmáticos de antioxidantes,
pueden ser modificados al aumentar la ingesta de estos compuestos, dado que a través del
plasma sanguíneo se puede estabilizar la oxidación previniendo reacciones nocivas para las
células (Avello & Suwalsky, 2006).
Por lo tanto es importante consumir alimentos con alto contenido de antioxidantes, como los
aceites vegetales que se obtienen por extracción química de semillas u otras partes de las
plantas (Generalidades Aceites). Es de principal interés en este estudio, el aceite de oliva
extra-virgen y aceite de palma híbrida ya que son fuente de ácidos grasos monoinsaturados
como el ácido oleico, ácidos polinsaturados, carotenoides, tocoferoles, tocotrienoles y
polifenoles (Samaniego, 2007) (Corley & Tinker, 2009).
Debido a lo anterior, este estudio pretende evaluar la capacidad antioxidante y el contenido
total de fenoles en plasma, después de dos y tres meses de intervención nutricional de
aceites vegetales: oliva extra-virgen y palma hibrida en individuos mayores de 50 años.
Los resultados obtenidos en este estudio, le permitirá a la comunidad científica, médicos y
nutricionistas encargados de los programas nutricionales en adultos con riesgo
cardiovascular, usar como elementos dietarios los aceites vegetales: oliva extra-virgen y
palma hibrida como efecto cardioprotector sobre la salud, minimizando los riesgos de
oxidación y por ende el desarrollo de enfermedad cardiovascular.
4. OBJETIVOS
4.1 OBJETIVO GENERAL: Determinar diferencias en el contenido de fenoles y la
capacidad antioxidante en plasma ocasionadas al consumo de aceite de palma híbrida y
oliva extra-virgen de individuos residentes de la localidad de Usme en Bogotá.
4.2 OBJETIVOS ESPECÍFICOS:
Establecer el contenido de fenoles y la capacidad antioxidante en el plasma de
individuos después de dos y tres meses de consumo de aceite de palma híbrida y oliva
extra-virgen comparados con datos previos de consumo de un mes de intervención.
17
Determinar si los cambios plasmáticos en la capacidad antioxidante son similares tanto
en el grupo que consumió aceite de palma híbrida como en aquellos individuos que
recibieron aceite de oliva extra-virgen.
Determinar si los cambios plasmáticos en el contenido de fenoles son similares entre los
grupos que consumieron los dos tipos de aceite durante el período experimental.
5. HIPÓTESIS
Para variable tiempo
Ho= La medición en plasma de la capacidad antioxidante por el método (TEAC) y el
contenido total de fenoles por el método (RFC) no cambia con el transcurso el tiempo.
Hi= La medición en plasma de la capacidad antioxidante por el método (TEAC) y el
contenido total de fenoles por el método (RFC) cambia con el transcurso el tiempo.
Para variable grupo de intervención
Ho= Al comparar los dos grupos de intervención (grupo control: aceite de oliva extra-virgen)
(grupo experimental: aceite de palma hibrido) no existen diferencias en el cambio de
capacidad antioxidante al terminar el estudio.
Hi= Al comparar los dos grupos de intervención ((grupo control: aceite de oliva extra-virgen)
(grupo experimental: aceite de palma hibrido) existen diferencias en el cambio de capacidad
antioxidante al terminar el estudio.
6. MATERIALES Y MÉTODOS
El presente trabajo corresponde a la fase de determinaciones analíticas de la investigación
titulada “Efecto del consumo de aceite de palma híbrido y aceite de oliva extravirgen sobre
los factores de riesgo cardiovasculares tradicionales y emergentes” financiada por la
vicerrectoría académica de la Pontificia Universidad Javeriana para optar por el título de
nutricionista.
6.1 DISEÑO DE LA INVESTIGACIÓN: Esta investigación es de tipo experimental analítica,
realizada en una intervención comunitaria con el objetivo de determinar diferencias en el
contenido de fenoles y la capacidad antioxidante en el plasma debido al consumo de aceite
de palma híbrida y aceite de oliva extra-virgen en pacientes adultos residentes en la
localidad de Usme en Bogotá para recomendar modificaciones dietarías que disminuyan su
riesgo cardiovascular.
18
6.1.1 POBLACIÓN DE ESTUDIO Y MUESTRA: El estudio inicio con 152 individuos, de los
cuales se retiraron 12 debido a la inasistencia a la toma correspondiente del mes 2 y 3. Por
lo tanto la muestra final estuvo conformada por 140 individuos. De los cuales 73 individuos
consumieron aceite de oliva extra-virgen conformando el grupo control y 67 consumieron
aceite de palma hibrido conformando el grupo experimental.
Los participantes pertenecían al Programa Adultos Mayores del Instituto Departamental de
Recreación y Deporte (IDRD), denominado: Seres Saludables y Activos, de la localidad de
Usme, barrió La Andrea en Bogotá.
6.1.2 CRITERIOS DE INCLUSIÓN: Los pacientes cumplían con el criterio de edad (igual o
mayor a 50 años), administración de tratamiento farmacológico con dosis estables de
estatinas o hipolipemiantes.
6.1.3 CRITERIOS DE EXCLUSIÓN: Individuos con adicción a drogas, alcohol o con historia
de alergia al aceite de palma y/o aceite de oliva extra-virgen. La asignación aleatoria de los
participantes, la recolección de la información nutricional, la intervención y el seguimiento
durante tres meses, se realizó en el segundo semestre del 2012 (Agosto a Diciembre).
Específicamente la fase II del trabajo, se denominó fase de determinaciones analíticas que
consistió en realizar mediciones de la capacidad antioxidante mediante las técnicas Folin-
Ciocalteu y TEAC en el plasma congelado a -70°C de 140 pacientes en muestras tomadas a
los dos y tres meses posteriores al consumo de aceite de palma híbrida y de aceite de oliva
extravirgen.
6.1.4 VARIABLES DEL ESTUDIO: Para el análisis de los datos, se tuvo en cuenta como
variable independiente: edad de los individuos; así como, dos variables dependientes que
correspondieron a la concentración de fenoles plasmáticos expresados en equivalentes de
mg de Acido Gálico / L de plasma y la capacidad antioxidante en el plasma expresados en
mmol de equivalentes trolox / L de plasma.
6.2 MÉTODOS:
6.2.1 MATERIALES: Viales con fluido corporal plasma. Aceite de Oliva extra-virgen,
(Rómulo España, 1000 cc) y Aceite de Palma Hibrida.
19
6.2.1.1 MÉTODO TEAC: 2,2´ azinobis (3-etilbenzotiazolin-6-sulfonato) acid (ABTS), 20mg.
Presentación en pastillas, (6-Hydroxy-2,5,7,8-tetramethylchroman-2-carboxylic) acid, 97%
Trolox, marca (Sigma Aldrich). Persulfato de Potasio (K2S2O8), 2.45 mg.
6.2.1.2 MÉTODO RFC: Carbonato de Sodio Anhydrous, 99% (Na2CO3), marca (Sigma
Aldrich). Folin & Ciocalteu‟s reagent (Reactivo de Folin – Ciocalteau), 2N, marca (Sigma
Aldrich). Ácido 3,4,5-trihidroxibenzoico. Acido gálico, marca (Sigma Aldrich). Acido
Perclórico, (HClO4) 70 %, marca (Sintorgan).
6.2.1.3 EQUIPOS: Ultracongelador marca (Revco), modelo VX. 350 serie 2. -70ºC.
Espectrofotómetro, marca (Thermo scientific), modelo Genesys 10 UV. Centrifugadora
refrigerada, marca (Biofuge Primo-R Sorvall). Agitador Vórtex, marca (Speed Mixer II).
Ultrasonicador, marca (Branson 1510). Balanza digital (peso máximo de 120g), marca
(Scientech). Micropipeta de 1000uL transferpepette, marca (Brand). Micropipeta de 100uL
transferpepette, marca (Brand).
6.2.1.4 MATERIAL DE LABORATORIO: Tubos Falcon 50 ml. Eppendorf 1,5 ml. Puntas
para micropipeta, capacidad de 1000 uL y 100 uL. Vaso de precipitado 1000 ml y 50 ml.
Agua desionizada. Celdas para espectrofotometría.
6.3 RECOLECCIÓN DE LA INFORMACIÓN: El procedimiento experimental de las muestras
de plasma correspondientes al mes 2 y 3 de consumo de los aceites oliva-extravirgen y
palma hibrida se basaron en la estandarización de los métodos analíticos TEAC y RFC, a
partir de la construcción de curvas de calibración en diferentes concentraciones y
mediciones en los cambios de la absorbancia. Este esquema se encuentran documentado
en el trabajo de investigación „‟Efecto del consumo de oleína de palma roja y del aceite de
oliva extra-virgen sobre la capacidad antioxidante del plasma en pacientes dislipidemicos de
la localidad de Usme‟‟ realizada durante el II semestre del 2012.
6.3.1PROCESAMIENTO DE LAS MUESTRAS: El experimento se inició en febrero con el
procesamiento de las muestras correspondientes al mes 2 y en abril con el procesamiento
de las muestras correspondientes al mes 3.
Antes de iniciar la ejecución del experimento, las muestras del plasma de cada individuo se
descongelaron durante 10 minutos a temperatura ambiente, se marcaron los tubos
Eppendorf con la numeración asignada para cada uno, para posteriormente dosificar el
volumen para los dos métodos.
20
MÉTODO TEAC:
-CALIBRACIÓN DEL REACTIVO ABTS: Se realizó por medio de espectrofotometría a
Longitud de Onda 804 nm y Absorbancia de 0,720 +/- 0,2.
-DILUCIÓN 1:1 PLASMA Y AGUA DESTILADA: se tomaron con la micropipeta alícuotas de
100 uL de la muestra del plasma y se mezclaron con alicuotas de 100 uL de agua
desionizada en tubos Eppendorf, consecuentemente se agito por vortex.
Previamente calibrado el ABTS, se adicionaron a las celdas de espectrofotometría alicuotas
de 980 uL del reactivo y alicuotas de 20 uL de la dilución preparada anteriormente. Este
procedimiento se realizó por triplicado para cada una de las muestras de cada participante.
-LECTURA DE ABSORBANCIA: Las muestras fueron leídas por medio de
espectrofotometría a los 3 y 6 minutos de la reacción a Longitud de Onda 804 nm.
-INTERPOLACIÓN DE LOS DATOS: Los datos obtenidos en las absorbancias se
traspolaron a la curva de calibración de Trolox en el programa Microsoft Office Excel 2007
expresando los resultados en equivalentes mmol Trolox / L plasma.
MÉTODO RFC:
-DESPROTEINIZACION DEL PLASMA: se tomaron con la micropipeta alícuotas de 50 uL
de muestra del plasma y 50 uL de acido gálico en tubos Eppendorf, este se llevó a
centrifugado durante 10 minutos, posteriormente de desecho la fracción proteica y al
sedimento desproteinizado se le adiciono 250 ml de RFC. Se continúo con ultrasonicacion
por 5 minutos, después de adicionar 250 uL de (Na2CO3), finalmente se dejo en oscuridad
durante 2 horas. Este procedimiento se realizó por triplicado para cada una de las muestras
de cada participante.
-LECTURA DE ABSORBANCIA: Las muestras fueron leídas por medio de
espectrofotometría a Longitud de Onda 760 nm.
-INTERPOLACIÓN DE LOS DATOS: Los datos obtenidos en las absorbancias se
traspolaron a la curva de calibración de ácido gálico en el programa Microsoft Office Excel
2007 expresando los resultados en equivalentes mg de ácido gálico / L de plasma.
6.4 ANÁLISIS DE INFORMACIÓN: El análisis estadístico de los resultados se realizó por
medio del programa estadístico SPSS versión 21. Para los triplicados obtenidos por los dos
21
métodos TEAC y RFC se aplicaron pruebas de homogeneidad de varianza y de normalidad
(Ver anexo).
HOMOGENEIDAD DE VARIANZA: por medio del grafico de residuales se determinó la
homogeneidad de varianza, por lo tanto se estableció que las varianzas son similares o
iguales en los dos métodos.
NORMALIDAD PARA FACTOR TIEMPO Y GRUPO: la prueba de normalidad de Shapiro-
Wilk y Kolmogorov-Smirnov mostro que todos los valores fueron p > 0.05, esto quiere decir
que siguen una distribución normal, por lo tanto se estableció que existe un comportamiento
normal en los datos de los dos métodos.
En general los datos obtenidos por los dos métodos TEAC y RFC siguen los supuestos de
homogeneidad de varianzas y los de normalidad, por lo cual se hizo una prueba de ANOVA
con arreglo factorial, con el fin de establecer diferencias significativas entre el tiempo y
concentración de mmol/trolox para TEAC y tiempo y concentración de mg de ácido gálico
para RFC. Así mismo, se realizaron comparaciones múltiples entre los tiempos mediante la
prueba de Tukey y Scheffe, para identificar el mejor tiempo entre los dos grupos
(experimental y control) para los dos métodos.
7. RESULTADOS
MÉTODO TEAC
Figura 1. TEAC expresado en mmol de Trolox/L plasma en individuos: inicio, mes, dos y tres
meses de intervención con Aceite Palma Hibrida y Aceite Oliva Extra-virgen
22
La figura 1 muestra un aumento de la concentración de mmol/trolox en relación al tiempo
(mes 0, 1, 2 y 3), presentando diferencias significativas (p<0.05). Este comportamiento es
igual para los dos tipos de aceites palma hibrida y oliva extra-virgen.
Tabla 5. Método TEAC: Pruebas post-hoc (Tukey y Scheffe) para aceite de palma híbrida y
aceite de oliva extra-virgen.
Tiempo
N
Subconjunto
1 2 3 4
DHS de Tukey
a,b
tiempo1 390 1,7070
tiempo0 390 1,9005
tiempo2 390 2,3053
tiempo3 390 2,5724
Sig. 1,000 1,000 1,000 1,000
Scheffea,b
tiempo1 390 1,7070
tiempo0 390 1,9005
tiempo2 390 2,3053
tiempo3 390 2,5724
Sig. 1,000 1,000 1,000 1,000
La tabla 5 muestra las pruebas post-hoc (Tukey y Scheffe) para el efecto del tiempo (0, 1, 2
y 3) según concentración en mmol/trolox de las muestras tras las combinaciones realizadas
con los dos grupos de consumo de aceite palma hibrida y aceite oliva extra-virgen,
evidenciando que el tiempo 3 fue el mejor.
Figura 2. Método TEAC: Gráfico de medias para el tiempo y grupos de consumo de aceite
de palma hibrida y aceite de oliva extra-virgen.
p<0.05 = Estadisticamente significativo
23
La Figura 2 muestra el gráfico de medias para el tiempo y los grupos de consumo de aceite
de palma hibrida y oliva extra-virgen, estableciendo que los tratamientos son directamente
proporcionales respecto a las medias. A comparación del aceite de palma hibrida, el aceite
de oliva extra-virgen, mostró un mejor comportamiento en las concentraciones de capacidad
antioxidante expresado en equivalentes mmol Trolox/L.
MÉTODO FRC
Figura 3. Método FRC: Contenido fenólico expresado en mg de ácido gálico/L plasma en
individuos: inicio, mes, dos y tres meses de intervención con Aceite Palma Hibrida y Aceite
Oliva Extra-virgen.
La figura 3 muestra aumento de la concentración de mg/ácido gálico en relación al tiempo
(mes 0, 1, 2 y 3), presentando diferencias significativas (p<0.05). Este comportamiento es
igual para los dos tipos de aceites palma hibrida y oliva extra-virgen.
24
Tabla 6. Método FRC: Pruebas post-hoc (Tukey y Scheffe) para
aceite de palma híbrida y aceite de oliva extra-virgen.
Tiempo
N
Subconjunto
1 2 3 4
DHS de Tukey
a,b
Tiempo0 411 359,9226
Tiempo1 411 389,3916
Tiempo2 411 419,5095
Tiempo3 411 428,9345
Sig. 1,000 1,000 1,000 1,000
Scheffea,b
Tiempo0 411 359,9226
Tiempo1 411 389,3916
Tiempo2 411 419,5095
Tiempo3 411 428,9345
Sig. 1,000 1,000 1,000 1,000
La tabla 6 muestra las pruebas post-hoc (Tukey y Scheffe) para el efecto del tiempo (0, 1, 2
y 3) según concentración en los mg/ácido gálico de las muestras tras las combinaciones
realizadas con los dos grupos consumo de aceite palma hibrida y aceite oliva extra-virgen,
evidenciando que el tiempo 3 fue el mejor.
Figura 4. Método FRC: Gráfico de medias para el tiempo y grupos de consumo de aceite de
palma hibrida y aceite de oliva extra-virgen.
p<0.05 = Estadisticamente significativo
25
La figura 4 muestra el grafico de medias para el tiempo y los grupos de consumo de aceite
de palma hibrida y oliva extra-virgen, estableciendo que los tratamientos son directamente
proporcionales respecto a las medias. A comparación del aceite de palma hibrida, el aceite
de oliva extra-virgen, mostró un mejor comportamiento en las concentraciones de contenido
de fenoles expresado en equivalentes de mg de ácido gálico/L plasma.
Sin embargo la concentración de contenido de fenoles en el aceite de oliva extra-virgen a
partir del mes 2 no aumento, a diferencia del aceite de palma hibrida.
8. DISCUSIÓN DE RESULTADOS
La aterosclerosis es una enfermedad crónica, caracterizada por endurecimiento y pérdida de
elasticidad de las paredes arteriales. Esta patología es la responsable, de enfermedades
cardiovasculares como la angina de pecho, infarto de miocardio, enfermedad
cerebrovascular y arteriopatía periférica (Hernández, Mendivil, Pérez & Sierra, 2002). Existen
mecanismos que se asocian para iniciar y desarrollar la arterosclerosis, como disfunción
endotelial y oxidación de las lipoproteínas de baja densidad (LDL). En el plasma humano y
en el interior de las células del organismo existe un amplio repertorio de antioxidantes; se ha
comprobado para el ácido ascórbico y el alfatocoferol que tiene una capacidad de inhibir la
iniciación de la peroxidación lipídica en las LDL. A raíz de este hecho ha surgido un gran
interés por el comportamiento real de los antioxidantes en condiciones fisiológicas y en las
eventuales variaciones del mismo (Hernández, Mendivil, Pérez & Sierra, 2002).
El objetivo de esta investigación, fue determinar diferencias en el contenido de fenoles y la
capacidad antioxidante en el aceite de palma híbrida y oliva extra-virgen en plasma de
individuos residentes de la localidad de Usme en Bogotá después de dos y tres meses de
consumo.
DETERMINACIÓN CAPACIDAD ANTIOXIDANTE
En este estudio, el método TEAC demostró cambio en la capacidad antioxidante del plasma
después del consumo de aceite de oliva extra-virgen y aceite de palma híbrida en relación al
tiempo (p <0,05) (Figura 1).
Así como también la Tabla 5 mostro un claro aumento en las concentraciones de mmol/trolox
en relación al tiempo de consumo de los dos tipos de aceites; evidenciando como menor
concentración 1,7070 mmol/trolox correspondiente al mes inicial o basal del estudio donde
no hubo ninguna intervención nutricional. Para la semana 4 de consumo 1,9005 mmol/trolox,
para la semana 8 de consumo 2,3053 mmol/trolox y para la semana 12 de consumo 2,5724
26
mmol/trolox. De acuerdo a esto y como lo muestra la Figura 2 existe una correlación lineal
entre el tiempo de consumo exceptuando la semana 4 y estableciendo como mejor la
semana 12 para los dos tipos de aceites. A comparación del aceite de palma hibrida, el
aceite de oliva extra-virgen, mostró un mejor comportamiento en las concentraciones de
capacidad antioxidante expresado en equivalentes mmol Trolox/L. (p <0,05).
En relación a lo anterior, estudios documentados por (Hernández, Mendivil, Pérez & Sierra,
2002) han encontrado que la suplementación de antioxidantes como alfatocoferol por
períodos de tiempo tan cortos como dos semanas ya logra una disminución de la
oxidabilidad de las LDL, además de hallarse un efecto dosis-respuesta.
Para conocer los efectos de respuesta del aceite de oliva-extravirgen sobre la salud, se
realizo un estudio con ratones carentes de apoproteina E, donde se administraron dietas
ricas en aceite de oliva extra-virgen y sin colesterol durante 12 semanas, y al cabo de ese
periodo, se sacrificaron a los animales cuantificando el grado de lesión aterosclerótica
presente. En dicho estudio, la administración de ese porcentaje de aceite de oliva en la dieta
retrasaba el desarrollo de la aterosclerosis. (Acín, Arnal, Guillén, Lou-Bonafonte, Martínez,
Muniesa, Navarro, Surra & Osada, 2013).
El aceite de palma ha creado un interés en la investigación sobre su posible papel en la
reducción del riesgo de enfermedad cardiovascular. Este contiene antioxidantes cuya
función es reducir el estrés oxidativo y por ende el riesgo de enfermedades crónicas como la
enfermedad cardiovascular, el cáncer, entre otras. (Natural Health Research Institute).
Como preocupación para la salud, se cree que por su alto contenido de ácidos grasos
saturados (50%), el aceite de palma contribuye induce el desarrollo de enfermedades del
corazón y enfermedades crónicas. Sin embargo, estudios muestran que debido a su
proporción de ácidos grasos saturados y ácidos grasos insaturados y su alta concentración
de antioxidantes reducen los niveles de colesterol, la presión arterial, endurecimiento de las
arterias debido a la presencia de antioxidantes como tocotrienoles (Natural Health Research
Institute).
Un estudio reciente que se realizó en ratas tuvo como objetivo analizar el efecto de la
suplementación con aceite de palma en el tamaño del infarto, después de un ataque al
corazón. Las ratas en el estudio se dividieron en aquellos que fueron alimentados con una
dieta normal y los que fueron alimentados con una dieta enriquecida en colesterol al 2%
durante nueve semanas. En la semana 4, la dieta en cada grupo fue suplementado con
27
aceite de palma. Las ratas fueron sometidas a 30 minutos con el fin de reducir el flujo de
sangre al corazón conllevando a la lesión cardiaca. Los resultados indicaron que la
suplementación con aceite de palma redujo significativamente el daño del corazón, tanto
para el grupo de ratas alimentadas con un dieta normal (23,5% a 9,2%) (p <0,05) así como
las ratas alimentadas con una dieta rica en colesterol (37,2% a 26,9%) (p <0,05) (Csont,
Csonka, Bester, Esterhuyse, Ferdinandy, Kupai, Szucs & Van Rooyen, 2011).
Sundram, (1994) realizó un estudio de intervención dietética en la población holandesa que
normalmente consumen dietas altas en grasas. El cual consistió en dos períodos de seis
semanas de alimentación, donde la ingesta de grasa normal de un grupo de 40 voluntarios
de sexo masculino fue reemplazada con 70% de aceite de palma. La dieta de aceite de
palma no elevo el colesterol sérico total y el colesterol LDL, y causó un aumento significativo
en el colesterol HDL.
DETERMINACIÓN DEL CONTENIDO DE FENOLES TOTALES
El método Folin-Ciocalteu, mostro cambios en el contenido total de fenoles en el plasma
después del consumo de aceites oliva extra-virgen y palma híbrida en relación con el tiempo
(p <0,05), (Figura 3).
Así como también, la tabla 6 muestra un aumento en la concentración de mg/ácido gálico en
relación con el tiempo de consumo en los dos tipos de aceites, evidenciando una menor
concentración de 359,9226 mg/ácido gálico para el mes de inicio del estudio donde no hubo
ninguna intervención nutricional, para la semana 4 de consumo 389,3916 mg/ácido, para la
semana 8 de consumo 419,5095 mg/ácido gálico y para la semana 12 de consumo 428,9345
mg/ácido gálico. De acuerdo a esto y como lo muestra la Figura 4 hay una correlación entre
el tiempo de consumo estableciendo como mejor la semana 12 para los dos tipos de aceite.
A comparación del aceite de palma hibrida, el aceite de oliva extra-virgen, mostró un mejor
comportamiento en las concentraciones de contenido de fenoles expresado en equivalentes
de mg de ácido gálico/L plasma (p <0,05). Sin embargo la concentración de contenido de
fenoles en el aceite de oliva extra-virgen a partir del mes 2 no aumento, a diferencia del
aceite de palma hibrida, esto puede indicar que para mediciones a mayor tiempo del
evaluado (mes 2 y tres de intervención), el comportamiento del aceite de palma pueda ser
mejor que el del aceite de oliva extra-virgen.
Diversos estudios documentados por (Baez, Bravo, Cid, Fuentes & Labra, 2012) (Bergmans,
Boskou, Linssen, Litridou, Posthumus, Schols & Tsimidou, 1997), (Bendini, Carrasco,
28
Cerretani, Lercker & Vecchi , 2006) han determinado un alto contenido de fenoles totales en
el aceite de oliva-extra-virgen a través de la aplicación de técnicas analíticas, demostrando
presencia de ácidos fenólicos, flavonoides y en particular derivados de la oleuropeína
pertenecientes a la familia de los secoiridoises correlacionados con la estabilidad oxidativa
del aceite.
Estos compuestos tienen como mecanismo de acción prevenir reacciones de oxidación
mediante la donación de electrones o hidrógenos a los radicales libres; además presentan
capacidad de inhibir, activar o proteger determinadas enzimas en el organismo, como lo es
la inhibición de enzimas inductoras de la agregación plaquetaria que participan en la
formación de la placa ateromatosa causante de la enfermedad cardiovascular (Arantza,
2009). Por lo tanto, el efecto cardioprotector del aceite de oliva y del aceite de oliva extra-
virgen permite prevenir la oxidación de las LDL desempeñando un papel clave para prevenir
la arteroesclerosis.
Según lo anterior, los resultados presentados en este trabajo concuerdan con la evidencia
científica, ya que se demostró que la capacidad antioxidante y el contenido total de fenoles
aumentan después de la ingesta de aceites vegetales: oliva extra-virgen y palma hibrida lo
cual se le atribuye a su composición, ya que son fuente de antioxidantes como carotenoides,
tocoferoles, tocotrienoles y polifenoles como ácidos fenólicos y flavonoides. Estos
compuestos son benéficos para la salud y la prevención de enfermedades crónicas como la
enfermedad cardiovascular.
9. CONCLUSIONES
El contenido de fenoles y la capacidad antioxidante en el plasma de individuos aumento
después de dos y tres meses de consumo de aceites palma híbrida y oliva extra-virgen.
A diferencia del aceite de palma hibrida, el aceite de oliva extra-virgen mostro mayores
concentraciones plasmáticas en la capacidad antioxidante expresadas en equivalentes
mmol Trolox/L plasma y contenido de fenoles expresadas en equivalentes mg de ácido
galico/L.
El incluir aceite de palma híbrida en la dieta puede tener efectos beneficiosos para la
salud, esto se atribuye al contenido de compuestos antioxidantes y fenoles que pueden
prevenir la enfermedad cardiovascular.
29
10. RECOMENDACIONES
Es recomendable realizar una investigación más extensa que evalué el comportamiento
a largo plazo de las concentraciones plasmáticas de capacidad antioxidante y contenido
de total de fenoles del aceite de palma hibrida.
Es recomendable realizar una investigación más amplia que permita evaluar diferentes
regiones de Colombia para verificar si el comportamiento después de la ingesta del
aceite de palma hibrida es igual al reportado en esta investigación.
En este estudió la cantidad de aceite de palma hibrida ofrecida para el consumo diario
fue de 25 ml; sería interesante evaluar si con menor cantidad el efecto dosis respuesta
es el mismo.
11. REFERENCIAS
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32
12. ANEXOS
Resultados estadísticos
Diseño Factorial para TEAC (Experimental y Control)
Estadísticos descriptivos
Variable dependiente: Rta
Tiempo Grupo Media Desviación típica N
tiempo0 experimental 1,8556 ,40887 192
Control 1,9441 ,38667 198
Total 1,9005 ,39971 390
tiempo1 experimental 1,7147 ,41923 192
Control 1,6994 ,34042 198
Total 1,7070 ,38084 390
tiempo2 experimental 2,2866 ,38123 192
Control 2,3233 ,32403 198
Total 2,3053 ,35337 390
tiempo3 experimental 2,5515 ,36816 192
Control 2,5926 ,34461 198
Total 2,5724 ,35653 390
Total experimental 2,1021 ,51691 768
Control 2,1399 ,48959 792
Total 2,1213 ,50342 1560
Tabla 1. Estadísticos descriptivos
En la Tabla 1 se puede analizar que en el experimento el factor tiempo tiene 4 niveles
(tiempo 0, 1, 2 y 3), el factor grupo 2 (experimental y control) y la variable respuesta es
absorbancia (antioxidante). Así mismo se analizan las medias las cuales no son disimiles,
presentando un rango de (1,85 a 1,94) para tiempo 0, (1,69 a 1,79) para tiempo 1, (2,28 a
2,32) para tiempo 2 y (2,55 a 2,59) para tiempo 3, todos los anteriores combinados con
grupo (experimental y control).
33
Figura 1. Gráfico de residuales (homogeneidad de varianza).
El gráfico de residuales muestra que al evaluar la relación entre pronosticado (eje x) y Tip.
Residual (eje y) existe homogeneidad de varianzas, ya que los puntos están disgregados de
igual forma y se encuentran en orden uno tras otro. Por lo tanto se acepta la Ho que
establece que las varianzas son similares o iguales.
Pruebas de normalidad
Tiempo Kolmogorov-Smirnova Shapiro-Wilk
Estadístico gl Sig. Estadístico Gl Sig.
Rta tiempo0 ,035 390 ,200* ,994 390 ,156
tiempo1 ,063 390 ,801 ,982 390 ,270
tiempo2 ,077 390 ,400 ,982 390 ,090
tiempo3 ,043 390 ,082 ,976 390 ,080
a. Corrección de la significación de Lilliefors
*. Este es un límite inferior de la significación verdadera.
34
Tabla 2. Normalidad para el factor tiempo.
La prueba de normalidad de Shapiro-Wilk y Kolmogorov-Smirnova muestran que todos los
valores son > a 0.05, esto quiere decir que siguen una distribución normal, por lo tanto se
acepta la Ho estableciendo que existe un comportamiento normal en los datos.
Pruebas de normalidad
Grupo Kolmogorov-Smirnova Shapiro-Wilk
Estadístico gl Sig. Estadístico gl Sig.
Rta experimental ,059 768 ,355 ,989 768 ,320
control ,052 792 ,278 ,987 792 ,140
Tabla 3. Normalidad para el factor grupo.
La prueba de normalidad de Shapiro-Wilk y Kolmogorov-Smirnova muestran que todos los
valores son > a 0.05, esto quiere decir que siguen una distribución normal, por lo tanto se
acepta la Ho estableciendo que existe un comportamiento normal en los datos.
-En general los datos siguen los supuestos de homogeneidad de varianzas y los de
normalidad. Por lo cual se hizo una prueba de ANOVA con arreglo factorial.
Origen Suma de cuadrados
tipo III gl
Media
cuadrática F Sig.
Modelo corregido 179,588a 7 25,655 184,758 ,000
Intersección 7016,121 1 7016,121 50526,776 ,000
Tiempo 178,391 3 59,464 428,229 ,000
Grupo ,556 1 ,556 4,002 ,046
Tiempo * Grupo ,527 3 ,176 1,264 ,285
Error 215,510 1552 ,139
Total 7414,802 1560
Total corregida 395,098 1559
a. R cuadrado = ,455 (R cuadrado corregida = ,452) Tabla 4. Prueba de ANOVA para el efecto del tiempo (0, 1, 2 y 3) en la absorbancia de
las muestras tras las combinaciones realizadas con los dos grupos (Experimental y
control).
Los datos de ANOVA reflejan que el F calculado general es de 184,758 > Ft 2,01 (Alfa:
o.o5), por lo cual se rechaza la Ho que establece que las medias son iguales. El ANOVA
muestra que para el factor Tiempo el Fc es de 428,229 >Ft 2,6 (Alfa: o.o5), por lo cual se
35
rechaza la Ho que establece que los niveles de este factor producen lo mismo en la variable
respuesta (absorbancia); además se debe tener en cuenta que la significancia es menor a
0.05 (0,000), lo que indica que existen diferencias significativas entre los niveles y que estos
no producen la misma respuesta en la variable absorbancia. En cuanto al factor Grupo el Fc
fue de 4,002 >Ft 3,84 (Alfa: o.o5), por lo cual se rechaza la Ho que establece que los
niveles producen lo mismo en la variable respuesta. Además se debe tener en cuenta que la
significancia es menor a 0.05 (0,046), lo que indica que hay diferencias significativas entre
los niveles y que estos no producen lo mismo en la variable respuesta. Finalmente en la
interacción de A y B (tiempo y grupo) el Fc fue de 1,264< Ft 2,61 (Alfa: o.o5), por lo cual se
acepta la Ho que establece que no hay interacción entre los factores. Además se debe tener
en cuenta que la significancia es baja (0,285), lo cual indica que no existe una interacción
entre el tiempo y los grupos estudiados.
Diseño Factorial para FOLIN (Experimental y Control)
Estadísticos descriptivos
Variable dependiente: Rta
Tiempo Grupo Media Desviación típica N
Tiempo0 Experimental 358,9919 44,57749 192
Control 360,7385 45,41435 219
Total 359,9226 44,97900 411
Tiempo1 Experimental 381,3726 51,14877 192
Control 396,4220 47,95157 219
Total 389,3916 49,97862 411
Tiempo2 Experimental 411,3839 43,03665 192
Control 426,6333 51,30141 219
Total 419,5095 48,16871 411
Tiempo3 Experimental 428,8077 40,00921 192
Control 429,0458 44,00739 219
Total 428,9345 42,13615 411
Total Experimental 395,1390 52,25444 768
Control 403,2099 54,70199 876
Total 399,4395 53,70758 1644
36
Tabla 5. Estadísticos descriptivos.
En la Tabla 6 se puede analizar que en el experimento el factor tiempo tiene 4 niveles
(tiempo 0, 1, 2 y 3), el factor grupo 2 (experimental y control) y la variable respuesta es
absorbancia (antioxidante). Así mismo se analizan las medias las cuales no son disimiles,
presentando un rango de (358,9 a 360,7) para tiempo 0, (381,3 a 396,4) para tiempo 1,
(411,3 a 426,6) para tiempo 2 y (428,8 a 429,0) para tiempo 3, todos los anteriores
combinados con grupo (experimental y control).
Figura 2. Gráfico de residuales (homogeneidad de varianza).
El gráfico de residuales muestra que al evaluar la relación entre pronosticado (eje x) y Tip.
Residual (eje y) existe homogeneidad de varianzas, ya que los puntos están disgregados de
igual forma y se encuentran en orden uno tras otro. Por lo tanto se acepta la Ho que
establece que las varianzas son similares o iguales.
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Pruebas de normalidad
Tiempo Kolmogorov-Smirnova Shapiro-Wilk
Estadístico gl Sig. Estadístico gl Sig.
Rta Tiempo0 ,049 411 ,080 ,978 411 ,900
Tiempo1 ,031 411 ,200* ,996 411 ,377
Tiempo2 ,064 411 ,780 ,982 411 ,500
Tiempo3 ,042 411 ,079 ,996 411 ,306
a. Corrección de la significación de Lilliefors
*. Este es un límite inferior de la significación verdadera. Tabla 6. Normalidad para el factor tiempo.
La prueba de normalidad de Shapiro-Wilk y Kolmogorov-Smirnova muestran que todos los
valores son > a 0.05, esto quiere decir que siguen una distribución normal, por lo tanto se
acepta la Ho estableciendo que existe un comportamiento normal en los datos.
Pruebas de normalidad
Grupo Kolmogorov-Smirnova Shapiro-Wilk
Estadístico gl Sig. Estadístico Gl Sig.
Rta Experimental ,029 768 ,155 ,997 768 ,292
Control ,034 876 ,077 ,994 876 ,083
a. Corrección de la significación de Lilliefors Tabla 7. Normalidad para el factor grupo.
La prueba de normalidad de Shapiro-Wilk y Kolmogorov-Smirnova muestran que todos los
valores son > a 0.05, esto quiere decir que siguen una distribución normal, por lo tanto se
acepta la Ho estableciendo que existe un comportamiento normal en los datos.
-En general los datos siguen los supuestos de homogeneidad de varianzas y los de
normalidad. Por lo cual se hizo una prueba de ANOVA con arreglo factorial.
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Variable dependiente:Rta
Origen Suma de cuadrados
tipo III gl
Media
cuadrática F Sig.
Modelo
corregido
1,254E6 7 179098,896 84,063 ,000
Intersección 2,608E8 1 2,608E8 122422,507 ,000
Tiempo 1198799,118 3 399599,706 187,559 ,000
Grupo 26656,603 1 26656,603 12,512 ,000
Tiempo * Grupo 20623,207 3 6874,402 3,227 ,022
Error 3485547,474 1636 2130,530
Total 2,670E8 1644
Total corregida 4739239,749 1643
a. R cuadrado = ,265 (R cuadrado corregida = ,261) Tabla 8. Prueba de ANOVA para el efecto del tiempo (0, 1, 2 y 3) en la absorbancia de
las muestras tras las combinaciones realizadas con los dos grupos (Experimental y
control).
Los datos de ANOVA reflejan que el F calculado general es de 84,063 > Ft 2,01 (Alfa:
o.o5), por lo cual se rechaza la Ho que establece que las medias son iguales. El ANOVA
muestra que para el factor Tiempo el Fc es de 187,559 >Ft 2,61 (Alfa: o.o5), por lo cual se
rechaza la Ho que establece que los niveles de este factor producen lo mismo en la variable
respuesta (absorbancia); además se debe tener en cuenta que la significancia es menor a
0.05 (0,000), lo que indica que existen diferencias significativas entre los niveles y que estos
no producen la misma respuesta en la variable absorbancia. En cuanto al factor Grupo el Fc
fue de 12,512 >Ft 3,84 (Alfa: o.o5), por lo cual se rechaza la Ho que establece que los
niveles producen lo mismo en la variable respuesta. Además se debe tener en cuenta que la
significancia es menor a 0.05 (0,000), lo que indica que hay diferencias significativas entre
los niveles y que estos no producen lo mismo en la variable respuesta. Finalmente en la
interacción de A y B (tiempo y grupo) el Fc fue de 3,227> Ft 2,61 (Alfa: o.o5), por lo cual se
rechaza la Ho que establece que hay interacción entre los factores. Además se debe tener
en cuenta que la significancia es alta (0,022), lo cual indica que existe una interacción entre
el tiempo y los grupos estudiados.
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