BANCO DE SANGRECaracterísticas de los agentes patógenos
• PRESENCIA EN SANGRE
• ESTADO DE PORTADOR CRÓNICO ASINTÓMATICO
• ALTA PREVALENCIA EN LA POBLACIÓN
• VIABILIDAD DEL AGENTE EN LAS CONDICIONES DE ALMACENAMIENTO DE LA SANGRE
BANCO DE SANGREElección de nuevos agentes patógenos
• Prevalencia del agente en la población• Infectividad del agente• Estado de portador crónico asintomático• Prueba de tamizaje confiable• Pruebas confirmatorias• Relación costo/beneficio
AGENTES PATÓGENOS DE IMPORTANCIA TRANSFUSIONAL
• PARASITOS: Tripanosoma cruzi
• BACTERIAS: Brucellas, Treponema pallidum
• VIRUS: HBV,HCV,HIV,HTLVI/II
NORMAS DE LA AAHI
DE REALIZACIÓN OBLIGATORIA EN TODOS LOS DADORES
anti-Tripanosoma cruzi (2 determinaciones)
anti-Treponema pallidumanti-Brucellas
NORMAS DE LA AAHI
DE REALIZACIÓN OBLIGATORIA EN TODOS LOS DADORES
anti-HIVHIV AgHBsAg
anti-HBcAnti-HCV
anti-HTLV I/II
Hacia la seguridad transfusional
• Selección y tamizaje del donante de sangre– Interrogatorio más
exahustivo– Tamizaje de ATT
• Nuevas generaciones de reactivos
• Incorporación de antigenemia
• Detección de nuevos Agentes (WNV, CJD)
– ¿Diagnóstico?
• Inactivación de hemocomponentes:– Plasma: Solvente
Detergente, etc.– Universal: Psoralenos
+ UV.
Nuevos conceptos en la detección de donantes portadores
• Detección de Portadores Crónicos Asintomáticos– Serología florida
– Anticuerpos de clase IgG de alto título
– Concepto de sensibilidad poblacional: Detección de infectados verdaderos (confirmados)
• Detección de Infectados Recientes– Asintomáticos o con clínica indefinida
– Serología incompletamente desarrollada.
– Agente infeccioso en sangre, anticuerpos de clase IgM que pasarán a IgG
– Concepto de sensibilidad en función del período de ventana
Detección de infectados recientes: Concepto de período de ventana
Período de Ventana: Es el tiempo transcurrido desde la inoculación de un agente infeccioso hasta su detección por los métodos disponibles:
• Detección de anticuerpos– Métodos menos sensibles (Ej. ELISA 1.0)– Métodos más sensibles (Ej. ELISA 3.0)
• Detección directa del agente infeccioso– Metología menos sensible (Ej. ELISA)
• Métodos menos sensibles (Ej. ELISAs antiguos para HBsAg)• Métodos más sensibles (Ej. ELISAs modernos para HBsAg)
– Metodología más sensible (Ej NAT)• Estrategias menos sensibles (Ej NAT en pools)• Estrategias más sensibles (Ej. ID-NAT)
Hepatitis B – Rasgos
Clínicos Hepatitis B – Rasgos
Clínicos • Período de incubación: Promedio 60-90 días
Rango 45-180 días• Enfermedad clínica (ictericia): <5 años: <10%
5 años: 30%-50%
• Relación de fatalidad/caso: 0.5%-1%• Infección crónica: <5 años, 30%-90%
5 años, 2%-10% • Mortalidad prematura a partir de la enfermedad
crónica hepática: 15%-25%
Clinical Features of HBV InfectionClinical Features of HBV Infection
Incubation periodIncubation period Average 8-12 Average 8-12 weeksweeks
Range 6-26 Range 6-26 weeksweeks
Acute illness (jaundice)Acute illness (jaundice) 10% <5 yrs old10% <5 yrs old30%-50% 30%-50% >>5 yrs 5 yrs
oldold
Case fatality rateCase fatality rate 0.5%-1%0.5%-1%
Chronic infectionChronic infection 30%-90% <5 yrs 30%-90% <5 yrs oldold
2%-6% 2%-6% >>5 yrs 5 yrs oldold
Chronic hepatitisChronic hepatitis 66%66%
Premature mortality from CLDPremature mortality from CLD 15%-25%15%-25%
Hepatitis B Virus Infections, U.S.Hepatitis B Virus Infections, U.S.
Newly acquired infections 73,000
Acute cases 21,000Deaths from acute liver failure 290Chronic infections 4,400
Persons ever infected (1990) 4.9%
Persons with chronic infection 1.25 million
HBV-related chronic liver disease 4% - 14%
Deaths from chronic disease/year 3,000-5000
Modes of HBV Transmission
• Percutaneous– Injecting drug use– Occupational, household (needle stick, non-intact
skin)– Therapeutic (contaminated equip, unsafe injections)– Transfusions and transplants from infectious donors
• Permucosal– Sex with infected partner– Birth to infected mother (perinatal)– Household (exposure to infected contact)
Exposure to Blood or Body Fluids Containing Blood
Source: Sentinel Counties
Reported Risk Factors for Acute Hepatitis BUnited States 2000-2003
Heterosexual 39%
MSM 26% Injecting drug use 17%
None identified 14%
Other 4%*
* Other - Household contact, occupational exposure, hemodialysis, institutionalization, transfusion
Source: Adapted from Sentinel Counties and NNDSS, CDC
Hepatitis B Aguda: Perfil Serológico Hepatitis B Aguda: Perfil Serológico In
cub
ació
n Síntomas
HBeAg
HBsAg
TiempoCon
cent
raci
ón R
elat
iva
Fase Aguda2-12 semanas
4-12
sem
anas
Infección Aguda Reciente(2-6) semanas
Anti-HBc IgM
Anti-HBc total
Anti-HBe
Ventana
RecuperaciónAños
Anti-HBs
Acute HBV Infection with Recovery
Weeks after Exposure
Rel
ativ
e C
once
ntr
atio
n
Symptoms
HBeAg anti-HBe
Total anti-HBc
IgM anti-HBc anti-HBsHBsAg
0 4 8 12 16 20 24 28 32 36 52 100
Limit of Detection
HBV DNA
HBsAg
Progression to Chronic HBV InfectionProgression to Chronic HBV Infection
Weeks after Exposure
Rel
ativ
e C
once
ntra
tion
of R
eact
ants
IgM Anti-HBc
Total Anti-HBc
HBsAg
Acute(6 months)
HBeAgHBeAg
Chronic(Years)
Anti-HBeAnti-HBe
0 4 8 12 16 20 24 28 32 36 52 Years
HBV DNAHBV DNA
Limit of Detection
Interpretation of HBV Serologic Tests
HBV DNA HBsAg Anti-HBc Anti-HBs Interpretation
- - - - Susceptible
+ - - - Early acute, pre-SC
+ + - - Early acute infection
+ + + - Acute or chronic
- - + + Recovered/immune
+ + + - Chronic infection
Interpretation of HBV Serologic Tests
HBV DNA HBsAg Anti-HBc Anti-HBs Interpretation
+/- - + - Resolving infection, past infection,
"low- level" chronic infection
- - - + Immune (>10 mIU/mL)
- + - - Transient (<21 days) during vaccination
Marcadores de infección por HBV
•Período de ventana de antígenos cercana al NAT
•Baja viremia durante el período de ventana (2000 Cp/ml)
•Baja velocidad de duplicación exponencial (2-4 días)
Pruebas de tamizaje y suplementarias
Las pruebas de tamizaje son utilizadas
• En : Población con serología desconocida
• Para :– Orientación diagnóstica
(sospecha clínica)
– Estudios de prevalencia poblacional (alto y bajo riesgo)
– Descarte de unidades infectadas
Las pruebas suplementarias son utilizadas
• En: Población con pruebas de tamizaje positivas
• Para:– Distinguir entre positivos
falsos y verdaderos
– Diagnóstico del donante seropositivo
– Decisión sobre donaciones futuras
Características de las pruebas
• TAMIZAJE:• Son simples, rápidas, baratas,adaptables a
volúmenes grandes y ampliamente automatizables
• Alta sensibilidad (baja proporción de resultados falso negativos)
• Menor especificidad (mayor proporción de resultados falso positivos)
Características de las pruebas
• SUPLEMENTARIAS:
• Pruebas complejas y caras
• Algunas ya están automatizadas
• Alta especificidad
• Menor sensibilidad
Pruebas suplementarias
• Neutralización de antígeno por anticuerpo especifico: ( HBsAg, p24Ag, HCV CoreAg)
• Western blot (HIV, HTLV)
• RIBA/LIA (HCV, HIV,HTLV)
• Inmunofluorescencia (Sífilis, HIV, Chagas)
• Biología molecular (PCR, NASBA)
Detección de HBsAgDetección de HBsAg
TÉCNICA SENSIBILIDAD
Inmunodifusión (ID) >5000 ng/ml
Contrainmunoelectroforesis (CIE) >1000 ng/ml
Aglutinación (AG ) 100-500 ng/ml
Hemaglutinación rev. pasiva (HARP)
20-50 ng/ml
Enzimoinmunoensayo (ELISA)1-3 ng/ml (0.10-
0.50)
Radioinmunoensayo (RIA) 0.1-1 ng/ml
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