PRACTICA N 3 CINTICA DE LA PRODUCCIN DE METABOLITOS
tiempo(h)
DO (600nm biomasa)
DO(500nm glucosa)
DO (550 nm)Actividad enzimatica
endo exo
0 0,46 0,209 0,092 0,169
2 0,48 0,084 0,348 0,295
3 0,59 0,08 0,38 0,309
4 0,665 0,077 0,403 0,31
5 0,672 0,075 0,484 0,15
24 0,67 0,063 0,721 0,352
tiempo(h) X(g/L)
BIOMASA S(g/L)
GLUCOSA P
UAE(END Y EXO)
0 1,089 0,3938 185,55
2 1,16 0,0326 798,72
3 1,55 0,0211 872,55
4 1,816 0,0124 911,08
5 1,841 0,0066 784,27
24 1,834 0,0000 1488,92
0
0,2
0,4
0,6
0,8
1
1,2
1,4
1,6
1,8
2
0 5 10 15 20 25 30
X(G
/L)
(H)
X(g/L)
y = 40,038x + 586,61
tiempo(h) X(g/L) S(g/L) rx rs u 1/s 1/u rs/x
0 1,089 0,3938 2,539
2 1,16 0,0326 0,154 0,124 0,132 30,629 7,549 0,132
3 1,55 0,0211 0,328 0,010 0,212 47,412 4,726 0,212
4 1,816 0,0124 0,146 0,007 0,080 80,491 12,481 0,080
5 1,841 0,0066 0,001 0,001 0,000 150,483 2045,556 0,000
24 1,834 0,0000
0,000 0,000
0,00
200,00
400,00
600,00
800,00
1000,00
1200,00
1400,00
1600,00
0 5 10 15 20 25 30
PU
AE(
END
Y E
XO
)
(H)
0,00000,0500
0,1000
0,1500
0,20000,2500
0,3000
0,3500
0,4000
0,4500
0 5 10 15 20 25 30
S(g/
L)
(h)
y = 0,1422x + 0,0144R = 0,0595
0
0,02
0,04
0,06
0,08
0,1
0,12
0 0,1 0,2 0,3
rs/x
u
rs/x
Lineal (rs/x)
y = 17,7x - 849,82R = 0,8491
-500
0
500
1000
1500
2000
2500
0,000 50,000 100,000 150,000 200,000
1/u
1/s
MTODOS
MTODOS DE ANLISIS
X: Materia seca S: Realizado con el reactivo DNS 1.- sal rochelle 40% 2.- o.5ml Rx Ebullicin LECTURA 550nm 5min 3ml DNS 1ml sal Rochelle H20 15ml P: Determinacin de la actividad enzimtica de la invertasa: Mezclar con 5ml de solucin 1 ml solucin enzimtica Buffer acetado 0.1 M pH = Sacarosa 4%
Incubacin 50C x 10 min
Inactivacin ebullicin 100C x 2 min
Luego mediremos la cantidad de azucares reductores por el mtodo DNS.
PROCEDIMIENTO:
Preparacin del pre cultivo: Levadura (saccharomyces cerevisiae) con un medio adecuado en 30C x 24 horas Preparacin de la curva de produccin de biomasa , consumo de sustrato (glucosa ) y produccin de invertasa vs tiempo.
t = 0 t = 2 t = 2 t = 3 t = 4 t = 5 t = 6 t = 7 t = 8 t = 10 t = 24 t=48 Llenar 20ml Medio de cultivo
Esterilizado
Inocular con 5% pre- cultivo
Incubacin cada cierto tiempo ser sacado un earlenmeyer
Centrifugacin
Sobrenadant
Sobrenadante
Precipitado Enrasar a vol. conocido con sol. buffer 20ml LECTURA D.O. 600nm.
1.-DNS 2.-Actividad enzimatica
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