“Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis“ Página 1
UNIVERSIDAD TÉCNICA DE MACHALA
FACULTAD DE CIENCIAS QUÍMICAS Y DE LA SALUD
CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA
LABORATORIO DE TOXICOLOGÍA
Profesor: Bioq. Farm. Carlos García MSc.
Alumno: Daysi Ambuludi Farez
Curso: Quinto Paralelo: A
Grupo N03
Fecha de Elaboración de la Práctica: lunes 23 de junio del 2014
Fecha de Presentación de la Práctica: lunes 30 de junio del 2014
Título de la Práctica: INTOXICACIÓN POR CLOROFORMO
Animal de Experimentación: Cobayo
Vía de Administración: Vía Intraperitoneal.
OBJETIVOS DE LA PRÁCTICA
Distinguir que sintomatología se presenta cuando hay intoxicación por
cloroformo..
Efectuar las reacciones químicas dispensables para detectar intoxicación por
cloroformo.
MATERIALES:
Soporte de hierro
Pinza de nuez
Vaso de precipitación 250ml
Matraz Erlenmeyer 250ml
Equipo de decisión
Bisturí
Perlas de vidrio
Mangueras
Cronometro
Balón de destilación
Agitador
Mechero de alcohol
Tabla de disección
Panema
SUSTANCIAS:
Ácido Tartárico
Cloroformo
Alcohol de 95%
Nitrato de plata.
Ácido clorhídrico.
Potasa alcohólica.
Percloruro de Hierro
Amoniaco diluido.
Resorsinol.
Piridina.
Timol
Legía de sosa.
Cristal de Yodo
Clorhidrato de piperacina.
Reactivo de Benedict
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Jeringa de 10ml
Probeta de 50ml
Refrigerante
Cinta de embalaje
Aro de hierro
Fosforo
Piola
Pipetas
Pinza para tubos
Funda plástica
Tubos de ensayos
Mandil
Mascarilla
Guantes de látex
PROCEDIMIENTO
1. Previamente antes de realizar la práctica se debe desinfectar el área donde se la
realizara y así mismo tener os materiales limpios y secos que se emplearan en la
práctica.
2. Llevamos al cobayo a la campana de gases para aplicar 10 ml de cloroformo
3. Una vez administrado el toxico se procede a colocarlo en el panema.
4. Se observaran toda la sintomalogia que presente por la intoxicación de cloroformo
hasta que muera tomando en cuenta el tiempo transcurrido.
5. Se coloca el cobayo en la tabla de diseccion previamente puesta una funda encima
de la tabala y lo sujetamos por las extremidades con ayuda de unas piolas para
facilitar abrirlo.
6. Una vez correctamente ubicado se procede a rasparar el área donde se realizara
el corte con el bisturí y después se abrirá con cuidado para evitar cortar los
órganos.
7. Luego se observa detenidamente los órganos que se han afectado por la
intoxicación de cloroformo.
8. Seguido se coloca las vísceras afectadas en un balón volumétrico picando lo más
fino posible estas.
9. Luego colocamos NaOH 20%
10. Se arma el equipo de destilación correctamente, abrimos la llave de agua para
empezar el proceso de destilación por 30 minutos.
11. Una vez obtenido el destilado se realizara las respectivas reacciones de
reconocimiento para cloroformo.
12. Culminada la práctica se limpiara y desinfectara el área donde se realizó la
práctica y se dejara los reactivos en el lugar correcto bien cerrados y los materiales
empleados limpios y secos.
Reacciones de reconocimiento:
1. Ensayo a la llama:
En el fondo de un tubo de ensayo se mezclan unas cuantas gotas de cloroformo con
otras tantas de alcohol de 95% que contienen un poco de nitrato de plata, se inflama la
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mezcla y se observa que esta arde con una llama bordeada de verde y que el ácido
clorhídrico formado reacciona con el nitrato de plata disuelto originando un precipitado
de cloruro de plata.
2. Reacción de Dumas:
Al adicionar unas gotas de destilado que contiene cloroformo a unos milímetros de
potasa alcohólica (proporción 1:10), se originan formiatos y cloruro de potasio. CHCl3
+ 4KOH --- 3ClK + HCO2K + 2H2O. Se neutralizan la mezcla, y se separan en dos
proporciones a una proporción se le agrega percloruro de hierro produciendo un color
rojo en frío o un precipitado en caliente. A la otra proporción se le agrega solución de
nitrato de plata produciéndose un precipitado de cloruro de plata que se disuelven en
amoniaco diluido.
3. Reacción de Lustgarten:
Al calentar la muestra con unos miligramos de beta – naftol y una solución alcohólica
concentrada de potasa (preferentemente un trozo de potasa y algunas gotas de
alcohol), se obtiene un franco color azul. Se sustituye el B-naftol por timol el color es
amarillo más o menos oscuro; con Resorsinol la coloración es roja – violácea y con la
piridina rojo.
4. Reacción de Fujiwara:
En un tubo de ensayo, se vierte 2ml de legía de sosa 1:2 con una capa de 2mm de
piridina y luego la muestra que contiene el cloroformo; se agita, ponemos por unos
instantes en baño de María y se deja en reposos; se convierte en una materia
coloreada que varía del rosa al rojo vivo, soluble en piridina. Esta reacción sensible
para unos pocos microorganismos de cloroformo y es aplicable en la orina de algún
sujeto que haya absorbido de 15-20 g de agua clorofórmica.
5. Reacción de Roseboom:
Se disuelve un pequeño cristal de yodo en la solución muestra y se agregan unos
pocos miligramos de clorhidrato de piperacina; si el cloroformo está presente en la
muestra, la coloración violeta inicial cambia a amarilla – rojiza al disolverse al alcaloide
6. Reacción de Benedict:
Si la solución muestra contiene cloroformo, reduce el reactivo de Benedict, y de
acuerdo a la concentración del tóxico puede producirse una gama de colores que van
desde el verde, amarillo, naranja o rojo ladrillo.
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GRAFICOS
Colocación del cobayo
en el panema Administración de
etanol, primera dosis
Manifestaciones físicas
después de la administracion
Administracion de
etanol, segunda dosis
Deceso del cobayo,
después de la 2da dosis
Preparación de cobayo en
la tabla para la disección
Observación de los órganos
afectados por el tóxico
Trituración de las
vísceras
Destilacion del preparado por
30 minutos
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REACCIONES DE RECONOCIMIENTO:
Ensayo a la llama:
Reaccion positivo característico precipitacion
Reacción de Dumas:
FeCl3:
Reaccion positivo caracterisitico cambio de color
FRIO:
Reaccion positivo caracterisitico cambio de color
CALIENTE:
Con AgNO3:
Reaccion positivo caracterisitico precipitado
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Reacción de Lustgarten:
β-naftol
Reaccion positivo caracterisitico cambio de color
Timol:
Reaccion positivo caracterisitico cambio de color
Resorsinol:
Reaccion positivo caracterisitico cambio de color
Reacción de Roseboom:
Reaccion positivo caracterisitico precipitado
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OBSERVACIONES
Hemos observado que al administrar Cloroformo ( 10ml) por vía intraperitoneal al cobayo, se presentaron las siguientes manifestaciones: Inicio de administración metanol (5ml): Fue 8:34 am. Presentando Convulsiones
leves, respiración agitada, perdida de equilibrio
Segunda administración Metanol (5ml) : Respiración lenta,depresión del SNC,
estado de anestesia, hipoxia
Deceso: 9:02am.
CONCLUSIONES
Al concluir la práctica nos dimos cuenta cuales son las manifestaciones que presento
el cobayo ante la administración del toxico; presentando depresión del SNC, perdida
de la movilidad motora, hipoxia, el cual duro 28minutos hasta su deceso, y mediante la
autopsia del animal se observó una inflamación del estómago, al igual que la vesícula,
por lo cual indica que un consumo exagerado de etanol, produce daños graves en el
organismo. A traves de las reacciones de reconocimientos identificamos la presencia
del toxico en el animal.
RECOMENDACIONES
Tener limpia los materiales y área de trabajo
Tomar en cuenta las normas de bioseguridad al momento de manipular los
reactivos.
Al momento de administrar la dosis realizarlo en la vía correcta, para evitar de
esta manera provocar embolias.
Al finalizar práctica desinfectar en área en donde se realizo la practica.
CUESTIONARIO:
¿Qué produce la exposición del cloroformo?
La exposición a cloroformo puede ocurrir al respirar aire contaminado o al tomar agua
contaminada o al tocar sustancias que lo contienen. Respirar cloroformo puede causar
mareo, fatiga y dolores de cabeza. Respirar o ingerir cloroformo por períodos largos
puede causar daño al hígado y a los riñones. El cloroformo puede causar ulceración de
la piel si hay contacto con grandes cantidades.
¿Aplicaciones del cloroformo?
Usado como reactivo relajante por los lípidos orgánicos, el triclorometano es usado
para dormir. El cloroformo es un reactivo químico útil debido a la polarización de sus
enlaces C−Cl, por lo que es una herramienta apreciada en síntesis orgánica, al
proporcionar el grupo CCl2. Además, debido a que es usualmente estable y miscible
con la mayoría de los compuestos orgánicos lipídicos y saponificables, es comúnmente
utilizado como solvente. Es también utilizado en biología molecular para varios
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procesos, como la extracción de ADN de lisados celulares. Asimismo, es usado en el
proceso de fijación de muestras histológicas post mortem.
¿Cuáles son las Fuentes de exposición del cloroformo?
Está disponible como disolvente en laboratorio y en la industria farmacéutica. Se ha
prohibido su uso como sustancia aromática en pastas de dientes y otros productos como
resultado de su efecto cancerígeno en animales después de exposiciones crónicas, la
intoxicación aguda y crónica.
¿Cuáles son las principales características del cloroformo?
El cloroformo, triclorometano o tricloruro de metilo, es un compuesto químico de
fórmula química CHCl3. Puede obtenerse por cloración como derivado del metano o del
alcohol etílico o, más habitualmente en la industria farmacéutica, utilizando hierro y
ácido sobre tetracloruro de carbono. A temperatura ambiente, es un líquido volátil, no
inflamable, incoloro, de olor penetrante , dulzón y cítrico, descripto por Samuel Guthrie
como "de delicioso sabor".5 Se descompone lentamente por acción combinada del
oxígeno y la luz solar, transformándose en fosgeno (COCl2) y cloruro de hidrógeno
(HCl) según la siguiente ecuación: 2 CHCl3 + O2 → 2 COCl2 + 2 HCl por lo cual se
aconseja conservarlo en botellas de vidrio color ámbar y lejos de la luz
¿Cuáles son los usos del cloroformo?
Usado como reactivo relajante por los lípidos orgánicos, el triclorometano es usado para
dormir. El cloroformo es un reactivo químico útil debido a la polarización de sus
enlaces C−Cl, por lo que es una herramienta apreciada en síntesis orgánica, al
proporcionar el grupo CCl2. Además, debido a que es usualmente estable y miscible
con la mayoría de los compuestos orgánicos lipídicos y saponificables, es comúnmente
utilizado como solvente. Es también utilizado en biología molecular para varios
procesos, como la extracción de ADN de lisados celulares. Asimismo, es usado en el
proceso de fijación de muestras histológicas post mortem. También tiene la
particularidad de permitir "saborear colores", dado que los colores vívidos se pueden
saborear gracias a una disrupción entre las neuronas sensitivas del quinto par craneal
(nervio trigémino)quien proporciona el sentido del gusto al tercio posterior de la lengua,
con su nucleo iridioconstrictor y con el segundo par craneal (nervio óptico) que genera
la extraña sensación de saborear colores, ya que ambos nervios poseen los mismos
núcleos cerebrales y son estimulados enérgicamente al entrar el cloroformo en contacto
con ellos. Debido a que interactúa con ciertos receptores del sistema nervioso, el
cloroformo tiene las características de un depresor del sistema nervioso central y genera
de suaves a severas alucinaciones psicodélicas en jóvenes y adultos. Ya se utilizaba
como anestésico en la práctica médica.
GLOSARIO:
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Triclorometan.-El triclorometano, también conocido como cloroformo, es un líquido
claro, volátil, no inflamable y con un olor característico. Se evapora muy rápidamente y posee una solubilidad en el agua escasa, aunque es miscible con la mayoría de los
disolventes orgánicos.
Fosgeno.- Es un importante componente químico industrial utilizado para hacer plásticos y pesticidas. A temperatura ambiente (70 °F / 21 °C), el fosgeno es
un gas venenoso. Si es enfriado y presurizado, el gas de fosgeno puede ser convertido en líquido, de forma que pueda ser transportado y almacenado.
Post mortem.- Que significa «después de la muerte», puede referirse a una autopsia
Disrupción.- Es un término que procede del inglés disruptive y que se utiliza para
nombrar a aquello que produce una ruptura brusca.
Experiencia psicodélica, viaje o vuelo a las vivencias derivadas del uso de
algún fármaco psicodélico o de algún otro tipo de práctica que posibilita el paso de la
mente a un estado alterado de conciencia, como la privación sensorial o el control de la
respiración.
Nervio trigémino o nervio trigeminal (del .: trigeminus, de tres mellizos), también
conocido como quinto par craneal o V par, es un nervio craneal sensitivo. Se suele
confundir con un nervio mixto ya que algunas ramas motoras de otro plexo pasan en
forma conjunta a este, pero el nervio trigémino tiene exclusivamente ramas sensitivas.
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BIBLIOGRAFIA:
o Baeder, C. y Hofmann, T. Chloroform: Supplementary inhalation
embryotoxicity study in Wistar rats.1991. (consultado el 25 de junio del 2014).
Disponible: en:
http://www.insht.es/InshtWeb/Contenidos/Documentacion/TextosOnline/Valore
s_Limite/Doc_Toxicologica/FicherosSerie2/DLEP%2026.pdf
o Komorniski E.; Calistro S. Hospital General De Agudos Juan
Fernandez.Intoicacion con Cloroformo. 2010. (consultado el 25 de junio del
2014). Disponible: file:///C:/Users/Usuario/Downloads/cloroformo.pdf
o
FIRMAS DE RESPONSABILIDAD:
DAYSI AMBULUDI ______________________
KHATHERINE CAYAMBE ______________________
NELLY CEPEDA ______________________
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Toxico utilizado en la práctica (CLOROFORMO)
Animal en el cual se experimentó ( Cobayo )
Resultados de las reacciones realizadas en la práctica
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