REPRODUCCIÓN. PORCINO
Diluyentes de refrigeraciónpara semen porcinoC. Gómez-Rincón, R. Mozo y S. CabrejasDepatamento Magapor SL
La rentabilidad de la técnica de inseminación artificial (IA) en la especie porcina, ha sido posible engran medida al desarrollo y mejora de los diluyentes para semen. La dilución del semen y suposterior enfriamiento tienen como objetivo reducir la actividad metabólica de la célulaespermática, disminuyendo el consumo de energía y la producción de metabolitos potencialmente
tóxicos como el lactato (Althouse et al, 1998).
1 diluyente, es una soluciónacuosa que permite, ade-más de incrementar el volu-men del eyaculado, mante-ner la funcionalidad de la
célula espermática hasta el momento dela IA. De esta forma, se consigue renta-bilizar al máximo el eyaculado y optimi-zar el manejo en granja. Pero la dilucióndel semen, va más allá de una meramedida económica como demuestra elhecho de que un 33% de los fallosreproductivos estén relacionados con eldiluyente (Flowers, 1997). Por tanto,como se expondrá a continuación laelección de un diluyente de calidad yadecuado a nuestras necesidades, seráde vital importancia para el procesoproductivo.
Principales funciones deldiluyente
• Crear espacio entre los espermato-zoides, disminuyendo la aglutina-ción.
• Proporcionar nutrientes a la célulaespermática.
• Proteger al espermatozoide delshock térmico.
• Evitar la intoxicación celular aso-ciada a la acumulación de desechosmetabólicos gracias a las sustanciasconservantes y quelantes incluidasen sus fórmulas.
• Evitar las fluctuaciones de pHmediante sustancias amortiguado-ras o tampón.
• Controlar la presión osmótica.• Inhibir el desarrollo microbiano
gracias a los antibióticos que con-tienen.
Composición generalLos principales componentes de un dilu-yente y sus funciones pueden observarseen el Cuadro 1.
Fuente de energíaEn cualquier especie, los espermatozoi-des son células con una elevada actividadmetabólica ya que necesitan una impor-tante cantidad de energía para ascenderpor el aparato genital de la hembra. Elplasma seminal, suministra los nutrien-tes necesarios para el mantenimiento dedicha actividad metabólica, pero sólodurante un corto período de tiempo. Elespermatozoide porcino tiene la habili-dad de utilizar una amplia variedad desustratos como fuente de energía. Aun-que en principio, la principal fuente deenergía son los monosacáridos del plas-ma seminal (glucosa y fructosa), tambiénpuede emplear como sustrato energéti-cos lactato, piruvato, glicerol y glicerol-3fosfato (Iones, 1997; Iones y Bubb,2000). En general la mayoría de los dilu-yentes emplean glucosa como sustratoenergético ya que la principal vía deobtención de energía es la glucólisis.Además, estudios in vitro han demostra-do que la glucosa no es un mero sustratoenergético, sino un modulador funcionalespecifico ya que, hay cambios específi-cos en la membrana, dependientes deglucosa, durante la capacitación y lapenetración (Fraser y Herod, 1990).
Agentes tamponadoresPara la correcta preservación del semen,resulta fundamental mantener el pHentre 6,8 y 7,4. Este rango, permitereducir el metabolismo y la motilidad de
la célula espermática alargando así suvida media. Para el mantenimiento dedichos valores, los diluyentes incorpo-ran en sus fórmulas agentes tamponado-res como bicarbonato y citrato sódicos,TES, HEPES o TRIS.
SalesA fin de evitar el shock osmótico y laconsiguiente destrucción celular, el dilu-yente debe ser isotónico o ligeramentehipertónico con el semen (± 300mOsm). Para ello, se emplean sales inor-gánicas como el cloruro sódico o el clo-ruro potásico.
Quelantes de calcioSon sustancias que capturan calcio impi-diendo su utilización por parte delespermatozoide. El calcio, actúa comomediador en los procesos de capacita-ción y reacción acrosómica tras los cua-les el espermatozoide muere. Por tanto,la disminución del calcio disponible enla dosis seminal permite prolongar lavida útil del semen.
AntibióticosExisten numerosas fuentes de contami-nación microbiana del semen a lo largode su proceso productivo (fecal, pelo,humana, agua, etc.). La inclusión deantibióticos en el diluyente resulta devital importancia tanto para la conserva-ción del semen en condiciones óptimas,como para evitar la propagación deagentes patógenos. De hecho, según ladirectiva 90/429/CE para el intercambiointracomunitario de dosis seminales, esobligatorio el empleo antibióticos efica-ces en particular frente a Leptospira spp
Mundo Ganadero Marzo'08
Nutnentes
Agentes tamponadores
Sales
Fuente de energía
Control de pH
Control presión osmótica
Glucosa, galactosa, ribosa
Bicarbonato, citrato sódico, TES, TRIS, MOPSCloruro sódico, cloruro potásico
TOPIGS ES -E-E Confianza-I- Asesoramiento+ Investigación y desarrollo-I- Futuro+ Beneficio▪ CalidadC/ Chile, 8 • 28290 Las Rozas (Madrid) • Tel.: 902 021 437 • Fax: 916 306 482 • [email protected] • www.topigs.es
e TOMOSProgress in Pigs
REPRODUCCIÓN. PORCINO
Figura 1. Proceso de dilución del semen.
y Mycoplasma spp (estreptomicina,penicilina, neomicina, etc).
Tipos de diluyentesLos diluyentes para semen porcino seclasifican según su capacidad de preser-var la calidad del semen en el tiempo:
• Corta duración. Capaces de conser-var el semen durante 1-3 días.
• Media duración. 3-5 días.• Larga duración. Hasta 7 días.• Extra-larga duración. Constituyen
una nueva generación de diluyen-tes. El más ambicioso permite con-servar el semen hasta 12 días.
En cualquier caso, debemos tener encuenta que la elección de un diluyentedebe estar acorde con nuestras necesida-
des. Si el semen va a ser utilizado rápi-damente (24-48 h), lo más económico esemplear un diluyente de corta duracióntipo BTS. Por el contrario si nuestraintención es exportar dosis a largas dis-tancias, realizar pruebas diagnósticas ode calidad del semen previas a su utiliza-ción, nos interesa un diluyente de largao extra-larga duración. Finalmente, hayque tener en cuenta que el gasto en dilu-yente constituye una ínfima parte de losgastos de la explotación (< 1%) (Gadea,2003) y su importancia para el procesoreproductivo justifica con creces dichogasto. •
Bibliografía en poder de la redacción adisposición de los lectores interesados
Cuadro I. Tipo de componente, función y sustancias más frecuentemente empleadasen la formulación de diluyentes para semen porcino.
Componente
Función
Sustancias más empleadas
Ouelantes de calcio
Capturan calcio
EDTA
Antibióticos Inhibición microbiana Penicilina, estreptomicina, aminoglicóxidos