NIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO
Facultad de Ciencias Biológicas
Escuela Académico Profesional de
Ciencias Biológicas
Efecto hipoglucemiante de las hojas de Mangifera indica
“mango” en diabetes experimental inducida por aloxano
en Rattus rattus var. albinus
TESIS PARA OPTAR EL TITULO DE
BIÓLOGO
AUTOR: Br. HAROLD HEISON ARQUERO PORTAL
ASESOR: Ms.C. ORLANDO PRETEL SEVILLANO
TRUJILLO – PERÚ
2013
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I
AUTORIDADES UNIVERSITARIAS QUE OTORGAN EL TÍTULO DE
BIÓLOGO
DR. ORLANDO VELASQUEZ BENITES
Rector de la Universidad Nacional de Trujillo
DRA. VILMA MENDEZ GIL
Vicerrector Académico de la Universidad Nacional de Trujillo
DR. PEDRO LUIS LAVALLE DIOS
Secretario General de la Universidad Nacional de Trujillo
DR. HERMES ESCALANTE AÑORGA
Decano de la Facultad de Ciencias Biológicas
DR. CESAR JARA CAMPOS
Secretario de la Facultad de Ciencias Biológicas
DR. ELOY LOPEZ MEDINA
Director de la Facultad Académica Profesional de Ciencias Biológicas
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II
DEDICATORIA
A Dios, el ser más supremo que siempre ilumina mi
camino y que llena de esperanzas y alegrías mi vida,
colmándome de infinitas bendiciones a mi vida.
Harold Arquero
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III
DEDICATORIA
Con mucho amor y una inmensa gratitud en memoria de mi
querida madre:
ISABEL.
Gracias por haber sido ejemplo en mi vida sembrada en mí el
deseo de superación aun en las dificultades, y te llevo siempre
presente en mi corazón.
Gracias por siempre
Con mucho amor, respeto y sobre todo admiración a
mi mejor amigo, mi padre:
HIPOLITO.
Que con su amor, esfuerzo, sacrificio y sabiduría
apoyo a mi vida personal y profesional sabiendo
cuando dirigir una palabra de aliento o rectificación
a un rumbo certero.
Gracias por ser mi mejor amigo.
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IV
DEDICATORIA
A una persona muy especial:
THALIA, que siempre me ha hecho sentir que
puedo contar con ella y ha estado siempre
dispuesta a colaborar conmigo en los momentos
que la he necesitado, Gracias bebita!.
A mis hermanos:
JOSEPH Y EMILY.
por su amor compresión y sobre todo por estar
conmigo en todo momento.
A mi familia en general, por creer en mí siempre y
por su amor y cariño que siempre me han
brindado.
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V
AGRADECIMIENTO
Agradezco profundamente mi asesor:
Ms.C. ORLANDO PRETEL SEVILLANO. Por su apoyo desinteresado,
su amistad sin límite y por contribuir enormemente con sus
conocimientos y enseñanzas a la realización de este proyecto.
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VI
PRESENTACIÓN
SEÑORES MIEMBROS DEL JURADO:
Cumpliendo con las disposiciones establecidas en el reglamento de grados y títulos de la Universidad
Nacional de Trujillo, presento a vuestra consideración y claro discernimiento la tesis titulada: Efecto
hipoglucemiante de Mangifera indica “mango” en diabetes experimental inducida por aloxano en Rattus
rattus var. Albinus; con el propósito de obtener el título profesional de Biólogo.
Esperando que vuestro criterio sea de comprensión por algunos errores u omisiones en su elaboración,
me someto a vuestro dictamen.
Trujillo, Octubre 2013
__________________________
Harold Heison Arquero Portal
Bachiller. En Ciencias Biologicas
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VII
DEL ASESOR
El que suscribe, Asesor de la presente Tesis titulada: Efecto hipoglucemiante de Mangifera indica
“mango” en diabetes experimental inducida por aloxano en Rattus rattus var. Albinus.
CERTIFICA
Que ésta Tesis ha sido ejecutada de conformidad con su correspondiente proyecto y con las debidas
orientaciones brindadas al tesista.
Respecto al informe, éste ha sido revisado y acoge las observaciones y sugerencias pertinentes, por lo
que autorizo al Br Harold Heison Arquero Portal. Continuar con los trámites correspondientes.
___________________________
Ms.C. Orlando Pretel Sevillano
Profesor principal a dedicación exclusiva
Departamento de Química Biológica y Fisiología Animal.
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VIII
MIEMBROS DEL JURADO
____________________
Dr. Félix Castillo Viera
PRESIDENTE
____________________
Dr. Carlos Nomberto Rodríguez
SECRETARIO
_________________________
Ms.C. Orlando Pretel Sevillano
VOCAL
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IX
DE LA APROBACIÓN
Los profesores que suscriben, miembros del jurado dictaminador, declaran que la presente tesis ha
cumplido con los requisitos formales y fundamentales, siendo aprobada por UNANIMIDAD.
____________________
Dr. Félix Castillo Viera
PRESIDENTE
____________________
Dr. Carlos Nomberto Rodríguez
SECRETARIO
_________________________
Ms.C. Orlando Pretel Sevillano
VOCAL
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X
RESUMEN
La diabetes mellitus constituye un problema de salud pública que afecta a adultos, jóvenes y niños a nivel
mundial y se caracteriza por su alta tasa de morbimortalidad, altos costos y complicaciones crónicas. Frente a
ello el hombre para contrarrestar este mal social, busca nuevos recursos, siendo las plantas una fuente inagotable
de compuestos benéficos que tienen un efecto protector en el desarrollo de enfermedades.
Mangifera indica (MI) ha sido utilizada ampliamente en la etnomedicina de los países de zonas tropicales y
subtropicales con diferentes indicaciones de uso, tanto con los extractos acuosos de sus partes aéreas como de las
partes leñosas. Se ha reportado el uso de las decocciones de hojas para el tratamiento de la diabetes y del extracto
acuoso de sus hojas por su acción hipoglucemiante. No obstante, los resultados son contradictorios. El extracto
acuoso de las hojas ha mostrado ser hipoglucémico, pero no el extracto etanólico de las hojas. El objetivo de esta
tesis fue determinar el efecto hipoglucemiante de las hojas de MI en diabetes experimental inducida por aloxano
en Rattus rattus var. albinus haciendo uso del siguiente diseño experimental con tres grupos de Rattus rattus var.
albinus (Control negativo, Control positivo, Experimental). A todos los grupos de ratas se les midió los niveles
de glucemia diariamente mediante el método de las tiras reactivas (al grupo experimental después de una hora
post tratamiento con MI), con un glucómetro ACCV – CHEK ACTVE. Nuestros resultados mostraron que el
tratamiento con MI tiene efecto hipoglucemiante mas resaltantes los niveles de glucosa durante 60 minutos, de
los grupos de Rattus rattus var albinus. Control negativo con 98.3 mg/dl, Control positivo 476.96 mg/dl, tratadas
con 75 mg de aloxano; y Experimental 370.75 mg/dl tratadas con 75 mg de aloxano y con MI con dosis de 1000
mg/kg del peso corporal. Se concluye que el extracto de MI tiene propiedades hipoglucemiantes.
Palabras claves: Mangifera indica (MI), diabetes mellitus (DM).
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XI
ABSTRACT
Diabetes mellitus is apublic health problema that affects adults, youth and children worldwide and is
characterized by its high mortality rate, high costs and chronic complications. Against this manto counter this
social evil, seeking new resources, plants being an inexhaustible source of beneficial compounds that are
protective in the development of diseases. Mangifera indica has been widely used in the ethnomedicine of
countries in tropical and subtropical areas with different indications for use, both with the aqueous extracts of
aerial part sandthe woody parts. It has been reported the use of leaf decoctions for treating diabetes and the
aqueous extract of the leaves for itshypoglycemic action. However,the results are contradictory. The aqueous
extract of the leaves has proved hypoglycemic, but the ethanolic extract of the leaves. The aim of this thes is was
to determine the hypoglycaemic effect of the leave sof MI in experimental diabetes induced by alloxan in Rattus
rattus var. albinus, carrying out the following methodology, with three groups (negative control, positive control,
Experimental. All groups of rats were mea sured daily glucose level susing the test strip method (the
experimental group after one hour treatment post MI), with a glucometer ACCV- CHEKACTVE. Our results
showedt hat treatment with EMI more salient hypoglycemic effect glucose levels for 60 minutes, groups of
Rattus rattus. Negative control with 98.3mg/dl, positive control 476.96mg /dl, 75 mg treated with alloxan, and
Experimental 370.75mg /dl treated with 75 mg of alloxan and MI with 1000 mg/kg of body weight. We conclude
that EMI has hypoglycemic properties.
Keywords: Mangiferaindica (MI), diabetes mellitus (DM).
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ÍNDICE GENERAL
Pág.
AUTORIDADES DE LA UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO…..…...…. ……I
DEDICATORIA…………………………………………..………………………..... ……..II
AGRADECIMIENTO………………………………………………………………... ……V
PRESENTACIÓN………………………………………………………………….……..VI
DEL ASESOR……………………………………………………………………..……..VII
MIEMBROS DEL JURADO ………………………………………………………….....VIII
DE LA APROBACIÓN………………………………………………………..….……....IX
RESUMEN…………………………………………………………………………..…….X
ABSTRACT…………………………………………………………………..…..............XI
I. INTRODUCCIÓN……………………………………………………….......... …….1
II. MATERIAL Y METODO…………………………………………………...............8
2.1. Materiales……………………………………………………………..………....…8
2.1.1. Material biológico…………………………………………………..…….…8
2.1.2. Material químico………………………………………………………….…8
2.1.3. Equipo……………………………………………………………………….8
2.2. Metodología…………………..…………………………………………………….9
2.2.1. Obtención del extracto hidroalcohólico de MI…………………………….9
2.2.2. Evaluación de la actividad hipoglucemiante de Mangifera indica……..…9
2.2.3. Medición de los niveles de glicemia………………………………………..10
2.2.4. Evaluación estadística……………………………………………...……...10
III. RESULTADOS……………………………………………………………………..11
IV. DISCUSIÓN…………………………………………………………………..........13
V. CONCLUSIONES……………………………………………………………….....17
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IV. REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS………………..……………………………18
V. ANEXOS
ANEXO 1: Diagrama de flujo del proceso de obtención del Extracto de MI a utilizar en el
Experimento.
ANEXO 2: Equipo para medir concentración de glucosa.
ANEXO 3: Aplicación del las dosis de solución salina fisiológica, dosis de glucosa y dosis
con el extracto de MI mediante sonda orogástrica de Rattus rattus var. albinus, y
obtención de la muestra para la evaluación de glucosa.
ANEXO 4: Variable Dependiente: Glucosa en suero sanguíneo.
ANEXO 5: Promedio de los niveles de glucosa (mg/dl) en suero sanguíneo presentes en el
grupos de Rattus rattus var. albinus, control negativo, positivo y experimental, con
1000 mg/kg de Mangifera indica “Mango”.
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I. INTRODUCCIÓN
La diabetes mellitus (DM) constituye un problema de salud pública que afecta a adultos,
jóvenes y niños a nivel mundial y se caracteriza por su alta tasa de morbimortalidad, altos
costos y complicaciones crónicas 1,2
. Donde destaca el pie diabético, que es una alteración de
base etiopatogénica - neuropática e inducida por la hiperglucemia sostenida2.Condición que
trae como consecuencia daño a nivel microangiopático (retinopatía, nefropatía y neuropatía) y
macrovascular (enfermedad isquémica del corazón, ataque cerebral y enfermedad vascular
periférica)3.
La DM comprende un grupo de trastornos metabólicos frecuentes que comparten el
fenotipo de la hiperglucemia4. Es una enfermedad, en la cual existe elevada glucosa en la
sangre, esto debido a que el cuerpo es incapaz de convertir la glucosa en energía, como lo
haría normalmente. En la mayoría de los casos, esto se debe a que el páncreas no produce
suficiente insulina o existe una resistencia a la función de la insulina en el organismo5.
Se desconoce la causa exacta de esta enfermedad, siendo los factores más importantes y
críticos: el genético y el ambiental. Asimismo, durante el estrés hay mayor secreción de los
glucocorticoides y las hormonas tiroideas, que tienden a elevar la glucemia, y el glucagón y
las catecolaminas, que estimulan la glucogenolisis hepática y a partir de aminoácidos y lactato
mediante la gluconeogenesis , disminuyendo la aceptación de la glucosa por los tejidos6,7
.
La comprensión de estos factores es imprescindible para el avance en la prevención y
tratamiento de esta enfermedad.
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Existen varios tipos diferentes de Diabetes mellitus (DM) debidos a una compleja
interacción entre genética, factores ambientales y el modo de vida. Dependiendo de la causa
de la DM, factores que contribuyen a la hiperglucemia ya sea por disminución de la secreción
de insulina, una disminución de la incorporación de glucosa y un aumento en la producción de
la misma4.
La diabetes mellitus tipo 2 (DM2) representa un heterogéneo grupo de enfermedades
caracterizado por un aumento en la resistencia a la acción de la insulina en los tejidos
periféricos y un deterioro en la secreción de dicha hormona por parte de la células B
pancreática, ambas anomalías se encuentran íntimamente imbricadas, pero, en la mayoría de
los enfermos la resistencia a la insulina precede a la disfunción manifiesta de las células B.
Además, puede observarse disfunción sub clínica de las células B de familias de primer grado
no diabéticos de pacientes con DM2, lo cual demuestra que el fracaso de la célula B está
determinado genéticamente8. De modo similar a lo que ocurre en los pacientes con diabetes
tipo 1, en la gran mayoría de caos de DM2 el control de la glucemia muestra un deterioro
inexorable con el tiempo, conduciendo a complicaciones tales como ceguera, neuropatía,
nefropatía y enfermedad cardiovascular9.
La forma de diagnosticar esta enfermedad, es a través de los signos y síntomas
(hiperglucemia, hipertensión arterial, polidipsia, polifagia, etc.). Sin embargo, en muchas
ocasiones, la DM2, es asintomática, por lo que para conformar o descartar la presencia de esta
enfermedad, se han desarrollado pruebas del tipo estimulo- respuesta. La más conocida de
estas pruebas, es la Curva de Tolerancia a la Glucosa Oral (CTGO). Prueba que mide la
capacidad que tiene el organismo para metabolizar la glucosa, y en el caso particular de los
sujetos con DM2, esta capacidad se encuentra disminuida10
.
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De acuerdo con el criterio The Expert Committee on the Diagnosis and Classification of
Diabetes (1997)11
.Si el valor glucemia en ayunas es igual o mayor a 126mg/dl, la realización
de la prueba está contraindicada, pues se corre el riesgo de provocar un shock hiperglucémico
y si es menor de 126 mg/dl, entonces se le administra al paciente 75 gr. de glucosa en 250 ml
de agua o 1.75 gr. de glucosa por kilogramo de peso corporal, hasta un máximo de 75 gr,
posteriormente, se toma muestras de sangre a intervalos regulares de tiempo, una muestra
cada hora hasta las dos horas (tres muestras), o en el mejor de los casos, una muestra cada 30
minutos hasta las 2 horas (5 muestras). Si la glucemia en la muestra de las dos horas es igual o
superior a los 200 mg/dl, se diagnostica DM12
.
Se ha estimado que aproximadamente 173 millones de personas en el mundo padecen
diabetes mellitus; y alrededor de dos terceras partes del mundo, de estos pacientes viven en
países en vías de desarrollo13
.
En el año 2006, se estimó que el número de personas que sufrían de diabetes en el
continente americano era de 45 millones, de las cuales 21 millones vivían en América Latina
y el Caribe. Las proyecciones indican que en el 2025 este número se incrementará a 64
millones de los cuáles el 62% vivirán en América Latina y el Caribe que representa un
aproximado de 40 millones de habitantes. Los datos estimados de diabetes en la población
adulta en centro América oscilan entre 3% y 6% siendo Nicaragua y Honduras los países de
menor prevalencia de diabetes tipo 25.
La OMS estimó que para el año 2010, en Latinoamérica el número de diabetes seria de 12
a 14 millones de personas, del mismo modo que lo harán otras regiones, en vías de desarrollo.
Recientes datos de la OPS (Boletín Epidemiológico, Junio 2001), revelan que la incidencia de
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diabetes tipo 1 en el Perú, equivale al 0.4/100000 habitantes, y entre 5.1% y 6%, para la
prevalencia de diabetes mellitus tipo 2 en adultos 6,13
.
En algunos países, 1 de cada 20 personas padece de diabetes, pero menos de la mitad de
los casos son diagnosticados, y se prevé que en el 2030 esa cifra alcance un total de 366
millones, siendo la principal causa de mortandad, y causando aproximadamente el 12% de las
muertes14
.
En el Perú, la prevalencia de diabetes es de 1 a 8% de la población general, siendo Piura
y Lima los departamentos más afectados. Se menciona que en la actualidad la diabetes afecta
a más de un millón de peruanos y de los cuales menos de la mitad han sido diagnosticados15,
16.En el año 2004 en el Hospital II ESSALUD-Cañete, se atendió a 644 pacientes con diabetes
mellitus asegurados residentes en dicha provincia, los cuales corresponden al 1.6% de la
población adscrita a dicho hospital17
.
El tratamiento de ésta se basa en aspectos fundamentales como: educación, dieta,
ejercicio y fármacos. El tratamiento farmacológico más común de diabetes mellitus es con
agentes hipoglucemiantes orales (sulfonilureas y biguanidas) y/o insulinas19
, además las
drogas corrientemente utilizadas para tratar la DM fallan en alcanzar el ideal de
normoglicemia y en la prevención de las complicaciones, siendo la muerte, en muchos casos,
el desenlace final del paciente18
.
En numerosos países, las plantas medicinales poseen un gran impacto cultural y
económico. Los métodos de la Medicina Tradicional se pasan de generación en generación,
heredando claves importantes respecto de la preparación de los remedios derivados de plantas
y especificando la parte a utilizar para el logro del beneficio medicinal20
.
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Frente a ello el hombre para contrarrestar este mal social, busca nuevos recursos
económicos recurren a la naturaleza a fin de encontrar un recurso medicinal para este mal,
siendo las plantas una fuente inagotable de compuestos benéficos que tienen un efecto
protector en el desarrollo de enfermedades como son diversos tipos de cáncer, hipoglucemia,
diabetes, osteoporosis, etc. Entre ellos se encuentran las Anacardiaceae con más de 600
especies21
.
Mangifera indica (mango), de la familia Anacardiaceae, es un árbol moderadamente alto
y ramificado, con hojas alternas, grandes, coriáceas lanceoladas, cuelgan en racimos color
castaño rojizo cuando salen por primera vez, es una planta arbórea de 15 – 30 m de altura
oriunda de la India y se cultiva extensamente casi en todos los países Tropicales del Mundo,
su temperatura óptima de crecimiento es aproximadamente 24º - 27º C, en suelo cuyo pH sea
alrededor de 5.5 – 7. 5 encontrándose tanto en hojas, frutos y corteza propiedades
medicinales22
.
Además los frutos contiene proteínas, sales minerales, vitaminas A, B1, B2, B5, C y la
corteza del mango se emplea contra las hemorragias uterinas, leucorreas; la resina extraída del
tronco como depurativa y también contra la disentería y la sífilis, el jugo de las ramas como
anti diarreico, las hojas tiernas actúan contra el asma y las semillas picadas y tostadas al
horno, contra las lombrices intestinales y la menorragia. Con la pulpa de los frutos se preparan
medicamentos para el dolor de pecho y con su corteza, decocciones recomendadas para el
tratamiento de cólicos en general. La decocción de las hojas combaten la bronquitis y las
enfermedades de la boca y la decocción de la semilla se emplea contra las lombrices
intestinales y los parásitos22
.
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En homeopatías, se aconseja en casos de hemorragias uterinas, problemas renales,
gástricos, pulmonares e intestinales, inflaciones catarrales, varices, leucorrea y blenorragia. La
cocción de las hojas es usada como anticonceptiva y la infusión de las flores como
antiasmática, antitusígena y expectorante22
.
Se han reportado efectos cardiovasculares con extractos de sus hojas, como
antihipertensivo y para aliviar la angina23
. Los extractos metanólicos de las semillas han
demostrado ser biológicamente activos en pruebas antiinflamatorias de edema pedal inducido
por carragenina, serotonina, bradikinina y prostaglandinas24
. Los extractos alcohólicos de la
corteza del tronco inducen actividad espasmolítica en íleon de cobayo, mostrando una
significativa reducción de la actividad inducida por acetilcolina, con un orden de potencia de
un 87% a 34% de acuerdo a la naturaleza del alcohol utilizado en la extracción (extracto en
alcohol isopentanílico, butanólico y metanólico). El extracto butanólico también ha mostrado
ser efectivo en reducir la contracción ideal inducida por soluciones despolarizantes (70 mM a
100 mM K+) 25
.
Trabajos preliminares en el Laboratorio de Farmacodinamia y Fitofarmacología han
mostrado que el liofilizado del extracto acuoso de alta temperatura de la corteza del tronco de
M. indica (EMI), desarrollado por el Centro de Química Farmacéutica26
.
Posee propiedades farmacológicas interesantes, ya que exhibe mayor potencia comparado
a su extracto madre (acuoso), como actividad antiespasmódica en íleon de rata, actividad vaso
relajadora dependiente de endotelio y directa sobre el músculo liso vascular27
. Y actividad
estabilizadora de radicales hidroxilo y anión superóxido28, 29
.
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Mangifera indica, familia Anacardiacea, contiene mangiferina, un componente del cual
se tienen reportes como hipoglicemiante30
. Pero existen resultados contradictorios en relación
a esta propiedad en el tratamiento de la diabetes, como es el caso del extracto acuoso de las
hojas que ha mostrado ser hiperglucémico, pero no el extracto etanólico de las hojas31
.
Por lo que el presente trabajo estuvo orientado a investigar el Efecto hipoglucemiante de
MI en Rattus rattus var. albinus con diabetes experimental inducido con aloxano.
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II. MATERIAL Y MÉTODO
2.1. MATERIALES:
2.1.1. Material biológico:
18 Rattus rattus var. albinus “ratas” machos, de una edad promedio de 3 meses,
obtenidas del bioterio de la facultad de Farmacia de la Universidad Nacional de
Trujillo.
1 Kg de hojas de Mangifera indica que fueron recolectadas en los cultivos de
frutales del Distrito de Moche, Provincia Trujillo, Departamento de La Libertad.
2.1.2. Material Químico:
Aloxano fue obtenido de MERK SA.
2.1.3. Equipo:
Balanza analítica 0.0001 “METTLER – TOLEDO- AB204-5
Estufa.
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2.2. METODOLOGIA
2.2.1. Obtención del extracto hidroalcohólico de Mangifera indica
Para la obtención de extracto hidroalcohólico, las hojas de MIfueron lavadas con abundante
agua potable y enjuagada con agua destilada, se desengrasaron con alcohol al 70% y se
secaron completamente en una estufa entre 45ºC y 50 ºC.
Luego se molió y se pasó por un tamiz de 250 micrómetros de poro por pulgada cuadrada
obteniéndose un polvo fino; 200g de este polvo se procedió a la extracción de los compuestos
activos mediante maceración, en una mezcla del 70% de alcohol etílico y 30 % de agua
destilada, en un frasco ámbar con cierre hermético, con agitación por 5 minutos diarios por 6
días.
Luego se filtró con papel filtro, el líquido obtenido se evaporó el solvente en su totalidad, el
producto resultante se conservó en refrigeración hasta su utilización32
Anexo 1.
2.2.2. Evaluación de la actividad hipoglucemiante de Mangifera indica
Las 16 ratas de 5 meses de edad promedio con un peso promedio de 131.4 gr alimentadas con
maíz, purina y agua a disponibilidad. Fueron distribuidas aleatoriamente formando grupos y
colocadas en jaulas metálicas. Donde se evaluó la actividad Hipoglucemiante de MI siguiendo
el siguiente diseño experimental:
I. Grupo Control negativo: Con 6 ratas que fueron tratados con solución
salina fisiológica (SSF) en un volumen del 3% de peso corporal por 6 días,
administrada vía orogástrica.
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II. Grupo control positivo: Con 6 ratas, que fueron tratadas con aloxano a
una dosis de 75 mg/kg, vía intraperitoneal; después de confirmar el daño
hepático, se los mantuvo por 6 días.
III. Grupo Experimental: Con 6 ratas que fueron tratados con aloxano a una
dosis de 75 mg/kg, vía intraperitoneal; después de confirmar el daño
hepático se les administró diariamente y por 6 días 1000mg/Kg del extracto
hidroalcohólico de MI/Kg del peso corporal diluida en SSF en un volumen
del 3% de peso corporal vía orogástrica.
El tratamiento de todos los grupos fue aplicado a la misma hora cada día.
2.2.3. Medición de los niveles de glicemia
A todos los grupos de ratas se les midió los niveles de glucemia diariamente
mediante el método de las tiras reactivas (al grupo experimental después de una
hora post tratamiento con MI), con un glucómetro ACCV – CHEK
ACTVE33
Anexo 2,3.
2.2.4. EVALUACIÓN ESTADÍSTICA
Los datos obtenidos fueron analizados estadísticamente mediante ANAVA
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III. RESULTADOS
En la tabla 1 y Anexo 6 se aprecia los datos promedio más resaltantes de los niveles de glucosa durante 60
minutos, de los grupos de Rattus rattus var. albinus. Control negativo con 98.3 mg/dl, control positivo 476.96
mg/dl, tratadas con 75 mg de aloxano; y experimental 370.75 mg/dl tratadas con 75 mg de aloxano y con MI
con dosis de 1000 mg/kg del peso corporal.
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Tabla 1: Promedio de los niveles de glucosa (mg/dl) en suero sanguíneo presentes en el grupos de Rattus
rattus var. albinus, control negativo, positivo y experimental, con 1000 mg/kg de Mangifera indica “Mango”.
P>0.05
Glucosa en suero sanguíneo ( mg/dl)
Control 0min 30min 60min 120min X
Negativo 85.44 94.27 98.3 99.2 92.67
Positivo 483.83 483.86 476.96 477.01 481.55
Experimental 482.27 427.73 370.75 370.77 426.91
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IV. DISCUSION
La concentración promedio de glucosa plasmática de los mamíferos sanos está sometida a un
riguroso control. Habitualmente oscila entre 80 y 90 mg/dl de sangre por la mañana antes del
desayuno34, 35
. En el caso de los roedores el promedio es 85,3 ± 4,08 mg/dL36,
dato
aproximado a nuestros resultados en el presente trabajo, dando un promedio de las Ratas
tratadas con solución salina fisiológica es de 92.67 mg/dl a nivel sanguíneo (Tabla 1, Anexo
5). En ayunos prolongados, la glucogenólisis y la gluconeogénesis hepática suministran la
glucosa que se requiere para el mantenimiento de los valores normales37
.
La glucemia es el resultado del equilibrio entre la entrada y la salida de la glucosa en el
espacio intravascular, el primero depende de la absorción intestinal y de la producción
endógena de la glucosa y la segunda se debe a la captación periférica por los tejidos38
.
Este equilibrio refleja la interacción de diversos factores entre los que destacan una serie de
procesos metabólicos regulados por la actividad de varias hormonas39
. Como glucagón;
hormonas del crecimiento, tiroxina (T4), triyodotiroxina (T3), glucocorticoides, adrenalina,
insulina40, 41,42
. Medicamentos, como metformina, sulfonilúreas, rosiglitazona, repaglinida,
acarbosa, glibenclamida, etc43, 44
. O por daño de las células B del páncreas ocasionado por la
administración del aloxano con una dosis de 75 mg/dl vía intraperitoneal en las ratas, en el
presente trabajo experimental ocasionando una elevación de la glucosa promedio de 481.55
mg/dl en el grupo control positivo, es decir un aumento considerable frente al control negativo
(Tabla 1 Anexo 5).
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La DM de tipo 2, también denominada DM no Insulinodependiente (DMNID) está producida
por una sensibilidad muy mermada de los tejidos efectores a las acciones metabólicas de la
insulina, estado conocido como resistencia a la insulina. Este síndrome, al igual que la
diabetes de tipo 1, se acompaña de numerosas alteraciones metabólicas37
.
La DM inducida con aloxano en los animales causa daños en el páncreas, ya que produce la
destrucción selectiva de las células B reduciendo el tamaño y el número de islotes de
Langerhans del pancreas45
, y dado que las células B son sensibles al estrés oxidativo, pueden
causar dímeros excesivas, y la disfunción de estas células46
, la que parece causar depleción de
glutatión en el páncreas (GSH), que se ve en las ratas diabéticas inducidas con aloxano47
. El
agotamiento de estos puede cambiar el estado de las células pancreáticas y las reacciones
redox pueden afectar la síntesis insulina y / o la disfunción severa de las células pancreáticas
así como llevar a complicaciones diabéticas48
, como es el caso de las ratas en el presente
trabajo tratadas con 75mg de aloxano (Tabla 1, Anexo 5).
La disminución de la disponibilidad de glucosa para las células de las ratas diabéticas
inducidas con aloxano finalmente conduce a incapacitación en la conservación de la energía
por los hidratos de carbono, causando utilización de las proteínas con el consiguiente aumento
la urea, una acelerada descomposición de creatina fosfato que son las consecuencias
metabólicas para la generación de ATP49
. Que resulta en una disminución la masa de tejido
muscular50
(Tabla1 Anexo 5).
Una Poca disminución de gránulos en el núcleo y el citoplasma de células beta del páncreas se
detecta a los 5 minutos después de la inyección de la dosis diabetogénica con aloxano51
. Sin
embargo, después de 1 hora, aproximadamente 40% de las células B del páncreas se somete
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a la necrosis, membranas celulares, orgánulos y gránulos secretores, retículo endoplasmatico
rugoso cisternas, aparato de Golgi y mitocondrias están rotos y pierden sus estructuras. La
proporción de las células B y el aumento necrótico después de 2 y 4 horas a aproximadamente
60 y 100%, respectivamente52
. Aunque todas las células beta sufren daño en el tiempo, las
células α y δ permanecen células intactas, así como la parte exocrina y el parénquima no se
ven afectado por aloxano53
(Tabla 1, Anexo 5).
Mangifera indica que se muestra en el presente trabajo experimental; controla la
concentración de la glucosa, debido a los principios activos sobre todo los referidos a
sustancias como: alcaloides (bencil-isoquinolínico, palmatina) 54
, glicósidos, taninos,
coumarinas, saponinas, flavonoides, esteroides, resinas, ácidos orgánicos55
. Mangiferina
presente en MI, que se tiene reportes como hipoglicemiante30
, se confirman en el presente
trabajo experimental al disminuir la concentración de glucosa a nivel sanguíneo en ratas
tratadas con aloxano, especialmente a los 60 minutos después del tratamiento con el extracto
de Mangifera indica, mostrando una diferencia estadísticamente significativa (Tabla 1, Anexo
4).
La hiperglucemia crónica es el principal factor etiológico de las complicaciones diabéticas.
Sin embargo, los mecanismos bioquímicos involucrados en el proceso fisiopatológico no son
del todo claros, que podría estar relacionado con el daño causado por el aloxano en las células
B del páncreas o la procedencia de la glucosa producto de la acción hormonal como
adrenalina, glucocorticoides liberadas por el estrés a los que están sometidos las ratas, que
incrementan la glucosa sanguínea ya sea por glucogenólisis o por gluconeogénesis o por fallas
en las células B del páncreas40
.
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Nuestro modelo experimental nos permite determinar mecanismos de acción, sin embargo,
los resultados obtenidos nos llevan a pensar en el posible mecanismo de acción de MI, que en
primera instancia supondríamos que estaría dado por una disminución de la absorción de
glucosa a nivel intestinal, o por mecanismos celulares que favorecerían la disminución de la
glucosa. Por lo que nos motiva a continuar con los estudios afines de dilucidar dichos
mecanismos.
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V. CONCLUCIONES
El extracto hidroalcohólico de Mangifera indica presentó un efecto hipoglucemiante
estadísticamente significativo a los 60 minutos en Rattus rattus variedad albinus.
La dosis de aloxano de 75 mg/kg del peso corporal indujo diabetes en Rattus rattus var.
albinus.
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56. Gonzáles-Blas M V, Llanos-Ulloa S S. Análisis fitoquímico de las hojas de Persea
americana Mill. y ensayo del efecto diurético de su extracto alcohólico seco [tesis de
pregrado] Trujillo: Universidad Nacional de Trujillo; 1990.
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ANEXOS
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Anexo 1.Diagrama de flujo del proceso de obtención del Extracto de MI a utilizar en el experimento
RECOLECCIÓN DE LAS
HOJAS DE LA PLANTA
LAVADO CON AGUA DE
CAÑO Y LUEGO CON AGUA
DESTILADA
DESENGRASADO CON
ALCOHOL ETILICO AL
70%
DESECACIÓN EN ESTUFA
A 45-50ºC
MOLIDO
TAMIZ (POLVO FINO)
MACERACIÓN EN 400 mL DE UNA
MEZCLA HIDROALCOHÓLICA DE
70% DE ETANOL Y 30% DE AGUA
BIDESTILADA
AGITACIÓN DE 5 MINUTOS
DIARIOS POR 6 DÍAS.
FILTRACION A VACIO CON
PAPEL FILTRO
EVAPORACION
REFRIGERACION
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Anexo 2: Equipo para medir concentración de glucosa
Anexo 3: Aplicación del las dosis de solución salina fisiológica, dosis de glucosa y
dosis con el extracto de MI mediante sonda orogástrica de Rattus rattus var. albinus, y
obtención de la muestra para la evaluación de glucosa.
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Anexo 4: Variable Dependiente: Glucosa en suero sanguíneo
p>0.05
RESUMEN
Grupos Cuenta Suma Promedio Varianza
Control experimental 6 370.758 368.5 5739.25
C. negativo 6 98.30 102.83 190.56
C.positivo 6 476.97 481.08 780.14
ANÁLISIS DE VARIANZA
Origen de las variaciones
Suma de
cuadrados
Grados
de
libertad
Cuadrado
medio
Coeficiente -
F P- Valor
Entre grupos 457803.0 2 228902.0 102.34 0.00000
Dentro de los grupos 33549.8 15 2236.65
Total 491353.0 17
Puesto que el p-valor del test F es inferior a 0.05, hay diferencia estadísticamente significativa entre los
grupos.
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Anexo 5: Promedio de los niveles de glucosa (mg/dl) en suero sanguíneo presentes en el
grupos de Rattus rattus var. albinus, control negativo, positivo y experimental, con
1000 mg/kg de Mangifera indica “Mango”.
p >0.05
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