Post on 12-Nov-2015
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Tecnologa Mdica
Microbiologa Clnica I
BACILOS GRAMNEGATIVOS NO FERMENTADORES
(BGNNF)
Caractersticas de los BGNNF
Bacilos o cocobacilos gramnegativos que no fermentan hidratos de carbono.
No forman espora.
Generalmente oxidasa (+)
Mviles e inmviles.
Se designa BGNNF a todos los bacilos gramnegativos que muestran desarrollo
en TSI y que no fermentan azcares (K/K)
TSI (Triple Sugar Iron Agar)
K/K K/A -- K/A-+ A/A+- A/A++
Bacilos GRAM (-)
NO FERMENTADORES Pseudomonas
Acinetobacter
Stenotrophomonas
Achromobacter
Alcaligenes
Elizabethkingia
Burkholderia
Shewanella
Myroides
Moraxella
Medio OF (Hugh y Leifson)
Este medio se diferencia de los medios
para fermentacin de hidratos de carbono
dado que la concentracin de:
- peptona est disminuda del 1% al 0,2% -H. de carbono est aumentada del 0,5% a 1%
el agar est disminudo de 1,5 a 0,25 %
OF/glucosa
Fermentativo Oxidativo Inerte
Prueba de oxidasa
BGNNF
DIAGNOSTICO
de BGNNF
Aislamiento: Agar sangre
Agar MacConkey
Morfologa : Tincin de Gram
Identificacin presuntiva: TSI
Batera de identificacin primaria:
- Oxidasa
- OF/glucosa
- Movilidad
Esquema de identificacin de BGNNF
Batera de identificacin secundaria: Agar urea de Christensen
Lisina descarboxilasa
Agar de hidrlisis de esculina
Arginina dihidrolasa de Moeller
Ornitina descarboxilasa
Fenilalanina desaminasa
Hidrlisis de la gelatina
ONPG
Medio OF: fructosa, xilosa, manitol, lactosa, maltosa
Citrato de Simmons
NaCl 6.5%
Desarrollo a 42C
Tipo de flagelacin: Tincin de flagelos
Factores que predisponen a infecciones por
BGNNF
Neoplasias
Hospitalizacin prolongada
Instrumentacin y ciruga
Tratamientos prolongados con antibiticos,
corticoides, antineoplsicos, radiaciones.
Enfermedades crnicas o metablicas.
Quemaduras, heridas abiertas, lesiones exudativas.
Desnutricin
Edades extremas: prematuros y ancianos
Los BGNNF son importantes agentes casuales de
infecciones intrahospitalarias
Familia Pseudomonadaceae
Grupo I de rRNA
Grupo II de rRNA
Grupo III de rRNA
Grupo IV de rRNA
Grupo V de rRNA
-Bacilos Gram negativos
-Aerobios estrictos
-La mayora mviles
con uno o mas flagelos polares
-Oxidan los carbohidratos
-La mayoria son oxidasa positiva
Gnero Pseudomonas
Pseudomonas aeruginosa
Bacilo Gram(-) recto o ligeramente curvo.
Aerobio estricto, oxidasa (+)
OF/glucosa: oxida
Mvil, con un flagelo polar.
HABITAT: Se asla de ambiente acuticos,
alcantarillas, piscinas, del suelo.
Ambiente hospitalario
Pseudomonas aeruginosa tiene tres formas de desplazarse en:
MEDIO LIQUIDO_: Swimming con nico flagelo polar.
SUPERFICIE SOLIDA: Twitching que depende fimbrias o pili tipo IV
Medio SEMI-SOLIDO: Swarming, las clulas se alargan y presentan mltiples flagelos.
En el ambiente hospitalario
se puede aislar e: - Soluciones terapeticas (colirios)
- Desinfectantes (amonio cuaternario, clorhexidina) - Jabn con hexaclorofeno - Cremas de mano - Lociones - Jarras con agua
Catteres Plantas y flores Termmetros Nebulizadores Humidificadores Cepillos Jeringas Piletas Desages pisos
Factores de virulencia de Pseudomonas aeruginosa
Alginato Fimbria (tipo IV)
Proteasas: - Las A elastasa -Las B elastasa - proteasa alcalina Hemolisinas: - Fosfolipasa C - Ramnolpido
Exotoxina A Exotoxina S Enterotoxina Leucocidina Piocianina
Siderforos Pioquelina Pioverdina
Rol del alginato (polmero de acido manurnico y gulurnico)
Obstruye la opsonizacin y fagocitosis.
Neutraliza radicales de oxgeno liberados por PMNs.
Inhibe el complemento.
Limita la difusin de los antibiticos.
Quorum sensing en P.aeruginosa
Implica la activacin de genes especficos a altas densidades de clulas en respuesta a las seales qumicas liberadas (autoinductor) por Pseudomonas aeruginosa.
Es importante para que se exprese la virulencia.
Los factores de virulencia estn bajo en control de dos sistemas de quorum sensing:
las y rhl Sistema las: Las R :(Factor transcripcional) Autoinductor : N-(3-oxododecanoyl)-L homoserina lactona 3 oxo-C12-HSL 8 (PAI-1) Auntoinductor sintetasa: LasI
Sistema rhl: Rhl R : (Factor transcripcional) Autoinductor : N-butyoyl-1 homoserina lactona C4-HSL(PAI-2)
Auntoinductor sintetasa: RhlI
las : elastasa Las A
elastasa Las B
proteasa alcalina
exotoxina A
rhl: ramnolpidos
piocianina
Sistemas de secrecin utilizados por
Pseudomonas aeruginosa Sistema de secrecin tipo I - proteasa alcalina
Sistema de secrecin tipo II - elastasa - lipasa - exotoxina A -fosfolipasas - fosfatasa alcalina
Sistema de secrecin tipo III - exotoxina S - exotoxina T - ramnolpidos
Etapas de la infeccin por P.aeruginosa
Se distinguen tres estados:
1.-Adherencia y colonizacin
-fimbria
-alginato (biofilm)
2.- Invasin local
-elastasas
-proteasa alcalina
-citotoxina (leucocidina)
-fosfolipasa C y ramnolpidos
- sideroforos (pioquelina, pioverdina)
-piocianina
3.-Enfermedad diseminada sistmica
los factores anteriores contribuyen a
la diseminacin de la infeccin agregndose la accin de toxinas:
- Exotoxina A
- LPS (endotoxina)
Cuadros clnicos producidos porP.aeruginosa
-INFECCIONES RESPIRATORIAS: Neumona,
Pacientes con fibrosis qustica
- BACTERIEMIA
- INFECCIONES DEL S.N.C.: meningitis, abscesos cerebrales
INFECCION AL OIDO : otitis
INFECCION A OJOS : queratitis
INFECCION DEL TRACTO URINARIO
INFECCIONES A HUESOS: osteomielitis
INFECCIONES GASTROINTESTINALES: gastroenteritis
INFECCIONES DE HERIDAS QUIRURGICAS
INFECCIONES DE QUEMADURAS Y HERIDAS
Ectima gangrenoso por Pseudomonas aeruginosa
Ectima gangrenoso
Rev Chil Infect 2011; 28 (6): 592-596
Heridas por quemadura
Otitis externa
Endoftalmitis por Pseudomonas aeruginosa
Factores de virulecia:
Exotoxina A ,Proteasas alcalinas,
proteasa IV,
proteasa pequea (PASP)
Foliculitis por P.aeruginosa La foliculitis por Pseudomonas se presenta con
lesiones foliculares, maculosas y papulopustulosas
localizadas en la zona lateral del tronco, muslos,
huecos axilares y rea suprapbica. Habitualmente,
comienza entre 8-48 h trasla exposicin a una
fuente contaminada. En ocasiones, se puede
acompaar de sntomas generales como fiebre,
malestar general, nuseas y vmitos, dolor ocular,
farngeo, de odos, mamas inflamadas y dolorosas,
y linfadenopatas. La aparicin de estos sntomas
no implica diseminacin de P.aeruginosa.
Sndrome de la ua verde causado por Pseudomonas aeruginosa
FIBROSIS QUISTICA
Enfermedad gentica, autosmica recesiva*, causada por una mutacin en el
brazo largo del cromosoma 7. Este gen contiene la informacin para la produccin
de una protena reguladora del intercambio de electrolitos a travs de las
membrana, llamada CFTR, y su anomala produce alteraciones en el transporte de
cloro y sodio en los rganos cubiertos por tejido epitelial.
Afecta diferentes rganos y sistemas, en especial el aparato respiratorio, el pncreas, las glndulas sudorparas y el sistema reproductor
masculino. Crnica y de evolucin progresiva.
* Un trastorno autosmico recesivo significa que deben
estar presentes dos copias de un gen anormal para
que se desarrolle la enfermedad.
Pseudomonas aeruginosa
Agar F (King B)
Agar P (King A)
Resistencia de P.aeruginosa
a los antibiticos
Alginato restringe la difusin de antibiticos.
Disminuye la permeabilidad a antibiticos.
Hidrlisis de antibiticos (ej. betalactamasas)
Sistemas de bomba de eflujo
Estudio de susceptibilidad antibiticos a 85 cepas de Pseudomonas aeruginosa
aisladas de pacientes del Hospital de Talca.
Daniela Prez Leal.,Memoria para optar al grado de Licenciado en Tecnologa Mdica.2009
Pseudomonas oryzihabitans Tambien denominada Flavimonas oryzihabitans
-Bacilo Gram negativo, aerobio no fermentador.
-Movil por un flagelo polar.
-Oxidasa negativa
-Catalasa positiva
-Oxida la glucosa
Crece bien en agar MacConkey y agar Cetrimida (despues de 24 a 48 de incubacion las colonias se tornan arrugadas de color
amarillo).
No producen hemolisis en agar sangre de caballo al 5%.
Crece entre 18C a 42 C.
Agar Cetrimida
Grupo II rRNA Incluye la familia Burkholderiacee que comprende los gneros:
Burkholderia Lautropia Pandoraea Ralstonia Cupriavidus
Las principales especies son: Burkholderia mallei Burkholderia pseudomallei Complejo Burkholderia cepacia
Burkholderia mallei
OF glucosa= oxidativo
Oxidasa (+)
Inmvil.
Parsito obligado de animales.
Agente causal del Muermo.
Antimicrobianos de eleccin:
Cotrimoxazol asociado a:
- fluorquinolonas, ceftazidima .
Burkholderia pseudomallei
Oxidasa (+)
Mvil
OF/glucosa= oxidativo
Agente causal de Melioidosis
Complejo Burkholderia cepacia
Oxidasa : w (+) OF/glucosa: oxidativo
Descarboxilasa de lisina: (+)
Grupo III rRNA
Los miembros de este grupo pertenecen a la familia Comamonadaceae
Comprende los siguientes gneros:
Comamonas
Delftia
Acidovorax
Grupo IV
La familia Caulobacteraceae incluye
el gnero Brevudimonas
Grupo V rRNA
La familia Xanthomonadaceae
Comprende los gneros:
Stenotrophomonas.
Xanthomonas
Caractersticas de Stenotrophomonas maltophilia
Bacilo mvil con flagelos polares
Oxidasa (-)
Dnasa (+)
Descarboxilasa de lisina (+)
Susceptible a : sulfametoxazol-trimetoprim
OF/glucosa: (-) o dbilmente (+) a las 24 hrs.
ANTIBITICOS DE ELECCIN:
Cotrimoxazol, Minociclina, Levofloxacino, Ciprofloxacino.
Shewanella putrefaciens
Oxidasa (+), mvil con flagelos polares OF/glucosa = oxidativo
produce H2S en TSI y KIA
Grupo oxidasa negativo
Acinetobacter (del griego akinetos: inmovil)
Gnero Acinetobacter (del griego akinetos: inmovil)
Las especies de este gnero son:
Cocobacilos Gram negativos, aerobios estrictos,
inmviles, catalasa (+),oxidasa(-).
En 1986 Bouvet y Grimont hicieron una clasificacin que distingua 12 grupos diferentes (genomaespecies) sobre las base de
caractersticas de hibridacin DNA-DNA y nutricionales.
En 1989 Tjernberg y Ursing describieron
tres grupos DNA adicionales, numerados del 13 al 15.
Bouvet y Jeanjean describieron 5 grupos que numeraron del 13 al 17.
Actualmente el gnero contiene 33 genoespecies.
Slo 21 de ellas han sido denominadas y 12 recuperadas de
muestras clnicas.
Complejo Acinetobacter baumannii-calcoaceticus
Acinetobacter calcoaceticus genoespecie 1
Acinetobacter baumannii genoespecie 2
Acinetobacter pitti geneoespecie 3
Acinetobacter nosocomialis genoespecie 13
Especies de importancia clnica
que se aislan de brotes nosocomiales:
Acinetobacter baumannii
Acinetobacter gen.sp. 3
Acinetobacter gen.sp.13 TU
HABITAT
Hospitales y pacientes hospitalizados (Aislamientos multiresistentes) A.baumannii , gen. sp 3 ,gen.sp13 TU
Piel (humanos, animales), Animales (Aislamientos sensibles) A.johnsonii, A.lwoffii
Suelo, medio ambiente y agua. (Aislamientos sensibles) A.calcoaceticus, A. johnsonii
Infecciones por Acinetobacter
Neumona
Bacteriemia
Meningitis
Infeccin del Tracto Urinario (ITU) Endocarditis aguda
Peritonitis
Conjuntivitis
Queratitis
Factores de riesgo
Hospitalizacin prolongada
Edad avanzada
Enfermedad de base: Enf. pulmonar crnica, Neoplasias, Diabetes.
Tratamiento con antibiticos de amplio espectro
Tratamiento con corticosteroides
Instrumentalizaciones: Ventilacin mecnica, Broncoscopio, Catter.
Ciruga mayor
Pacientes quemados
Acinetobacter Colonizacin / infeccin
Piel Tracto digestivo Faringe
Ciruga Catter ITU Endgena Ventilacin mecnica
Broncoscopa
ITU
NEUMONIA
SEPTICEMIA
Rev Chil Infect 2005; 22 (4): 298-320
Factores de virulencia
Polisacrido capsular
Adherencia( fimbrias y polisacrido capsular)
Enzimas
Produccin de Slime
Acinetobacter baumannii multiresistente
(AB-MR): Solo preservan susceptibilidad a: carbapenmicos, amikacina ,
sulbactam y minociclina.
Acinetobacter baumannii pan-resistente
(AB-PR): Son resistente a los carbapenmicos y son susceptible a
polimixinas como colistin.
Mecanismos de resistencia:
Enzimas inactivadoras de antibiticos Amplia variedad de betalactamasas que le confiere resistencia a penicilinas, cefalosporinas,y
carbapenemes.
Limitacin del acceso a las dianas bacterianas
Mutaciones que alteran las dianas o las funciones celulares.
Esquemas de tratamiento
Estudio de susceptibilidad a antibiticos en 25 cepas de
Acinetobacter baumannii aisladas de pacientes del
hospital de Talca
Paula Bravo Nuez, Memoria para optar al Grado de Licenciado en Tecnologa Mdica, 2010
Gnero Achromobacter
A.xylosoxidans
A.piechaudii
A.denitrificans
A.xylosoxidans es resistente a cefalosporinas,aminoglicosidos
fluorquinolonas.
Oxidasa positiva
O F/ glucosa: oxida lentamente
Movil. Flagelacin pertrica
Gnero Alcaligenes
Bacilos gramnegativos, oxidasa positivo,
Mviles con flagelacin pertrica.
Se desarrollan en agar MacConkey
Alcaligenes faecalis OF/glucosa: inerte
NaCl 6.5% (+)
Urea: negativo
endoftalmitis
Alcaligenes faecalis
Gnero Elizabethkingia (Chryseobacterium)
Bacilos gramnegativos inmviles
oxidasa positiva.
Indol (+)
Producen colonias pigmentadas amarillas
en agar sangre.
Se desarrollan poco o nada en agar MacConkey.
OF/glucosa: oxida
La especie ms importante es: E.meningoseptica
agente causal de meningitis neonatal, con alta mortalidad.
En adultos puede provocar neumona.
Weeksella virosa
Bacilo Gram negativo
Inmovil
No sacaroltico
Oxidasa (+)
Catalasa (+)
No crece en agar
MacConkey
Rev. chil. infectol. vol.28 no.5 Santiago oct. 2011
Myroides Se conocen 2 especies: M.odoratus y M.odoratimimus M.odoratus ( Flavobacterium odoratum)
Bacilo Gram , aerobio, Inmvil.
Colonia pigmentada de color amarllo. Olor frutal.
Oxidasa (+)
Dnasa (+)
Ureasa (+)
HABITAT: suelo y agua.
Patologa: celulitis, fascitis necrotizante,infeccin tracto urinario
infeccin de heridia quirrgica,ventricuitis, endocarditis.
Producen metalobetalactamasas de origen cromosomal
Capaces de hidrolizar: penicilinas, cefalosporinas,
carbapenem, aztreonam.
Presentan susceptibilidad a:
Ciprofloxacino y Sulfametoxazol Trimetoprim
Gnero Moraxella
Cocos o cocobacilos gramnegativos, oxidasa (+), inmviles, no tienen accin sobre hidratos de carbono.
No se desarrollan en agar MacConkey.
Las especies ms importante son:
M.catarrhalis M.lacunata, M.osloensis ,M.nonliquefaciens.
M.lacunata produce : conjuntivitis, queratitis, sinusitis crnica, endocarditis.
Para su cultivo requiere de medios especiales enriquecidos con suero de conejo.
Sensible a penicilina G, .
ESQUEMA DE
IDENTIFICACION DE BACILOS
GRAM NEGATIVOS NO
FERMENTADORES
Muchas gracias
por su atencin