Post on 23-Mar-2020
SalmonellaSalmonella
LaboratorioLaboratorio de de MicrobiologíaMicrobiología AplicadaAplicadaDraDra. Esther Z. Vega . Esther Z. Vega BermúdezBermúdez
SalmonellaSalmonella sp.sp.
SalmonellaSalmonella
Salmonella
entericaSalmonella
bongori
Subs.
enterica
Subs.
salamaeSubs.
arizonaeSubs.
diarizonaeSubs.indica
Subs.houtenae
From: Porwollik, S., et al., 2004. Characterization of Salmonella enterica subspecies I genovars by Use
Of Microarrays. J. of Bacteriol. 186:5883-5898.
IncidenciaIncidencia de Salmonella de Salmonella
CaracterísticasCaracterísticas
EnterobacteriasEnterobacterias
BacilosBacilos Gram (-) Gram (-)
MótilesMótiles con con
flagelaciónflagelación perítricaperítrica
No No esporulanesporulan
No No fermentanfermentan
lactosalactosa
2, 300 2, 300 especiesespecies
CreceCrece entreentre 40-140 40-140ooCC
VariantesVariantes GenéticasGenéticas
MediadaMediada porpor PlasmidiosPlasmidios
–– UtilizaciónUtilización de de lactosalactosa y y sucrosasucrosa
MicroorganismosMicroorganismos atípicosatípicos puedenpueden ““escaparescapar””aa la la
deteccióndetección en en situacionessituaciones clínicasclínicas
Las Las especiesespecies de de SalmonellaSalmonella no son un no son un grupogrupo homogéneohomogéneo
de de organismosorganismos
ReservoriosReservorios / / AlimentosAlimentos RelacionadosRelacionados
Carnes Carnes crudascrudas
AvesAves
HuevosHuevos
LecheLeche y y productosproductos lácteoslácteos
PescadoPescado
CamaronesCamarones
SalsasSalsas
MezclasMezclas parapara bizcochobizcocho
PostresPostres de de cremacrema
otrosotros
PatogénesisPatogénesis
DosisDosis infecciosainfecciosa tan tan bajobajo comocomo 15-20 15-20 célulascélulas ( (depediendodepediendo de de hospederohospedero))
AntígenosAntígenos estructuralesestructurales (pared (pared celularcelular o o
antígenoantígeno O, H- O, H- flagelarflagelar y el IV- y el IV-antígenoantígeno
capsular capsular termolábiltermolábil - -poderpoder frentefrente a a loslos
ácidosácidos))
SustanciasSustancias tóxicastóxicas
EndotoxinasEndotoxinas
ExotoxinasExotoxinas ( (efectoefecto irritanteirritante y y citotóxicocitotóxico
parapara el el tractotracto intestinal) intestinal)
RutaRuta oral-fecal oral-fecal
SintomatologíaSintomatología y y EnfermedadesEnfermedades
PeríodoPeríodo de de incubaciónincubación de 6- de 6-48hrs48hrs
DiarreasDiarreas
Dolor abdominal Dolor abdominal
FiebreFiebre entreentre 8-72hrs 8-72hrs
Dolor de Dolor de cabezacabeza y y
en el en el cuerpocuerpo
EscalofríosEscalofríos
NaúseasNaúseas
VómitosVómitos
SepticemiasSepticemias
BacteremiasBacteremias
CistitisCistitis, , endocarditisendocarditis y yosteomilitisosteomilitis
SíndromeSíndrome de de ReitersReiters quequepuedepuede terminarterminar en en artritisartritiscrónicacrónica
FiebreFiebre tifoideatifoidea ó óparatifoideaparatifoidea
DiagnósticoDiagnóstico y y TratamientoTratamiento
PruebasPruebas de de serologíaserología y de y de hecesheces fecalesfecales
AislarAislar el el pacientepaciente
TratamientoTratamiento parapara todostodos en el en el hogarhogar
AntibíoticosAntibíoticos
MuestreoMuestreo en en AlimentosAlimentos
MétodosMétodos convencionalesconvencionales de de aislaciónaislación queque
requierenrequieren de de cincocinco díasdías parapara confirmarconfirmar resultadosresultados..
CultivoCultivo 37-42 37-4200C o en C o en neveranevera..
SalmonellaSalmonella
MetodologíaMetodología
Pre-Pre-EnriquecimientoEnriquecimiento
–– CaldoCaldo de de lactosalactosa
PermitePermite la la recuperaciónrecuperación de de célulascélulas ““heridasheridas””
AumentaAumenta la la razónrazón Salmonella:Non-Salmonella Salmonella:Non-Salmonella
–– AguaAgua de de dilucióndilución peptonadapeptonada
ProductosProductos AnimalesAnimales
DiluciónDilución 1:10 1:10
–– I.e.. 25 g I.e.. 25 g muesramuesra a 225 ml de a 225 ml de caldocaldo
24 24 horashoras a 35 a 35 ooCC
EnriquecimientoEnriquecimiento SelectivoSelectivo
1 ml de 1 ml de caldocaldo de de LactosaLactosa
–– 10 ml 10 ml SeleniteSelenite CystineCystine
–– 10 ml 10 ml tetrathionatetetrathionate broth broth
PermitePermite el el crecimientocrecimiento de de SalmonellaSalmonella
No hay No hay resultadosresultados despúesdespúes de de esteeste pasopaso
24 24 horashoras a 35 a 35ooCC
PlacasPlacas SelectivasSelectivas
TresTres tipostipos de de mediomedio selectivoselectivo
–– Bismuth SulfiteBismuth SulfiteMarrónMarrón, , grisgris, negro con , negro con ““metallic sheenmetallic sheen””
–– HektoenHektoen Enteric Agar Enteric AgarAzul-verdosoAzul-verdoso con o sin con o sin centrocentro negro o negro o ““glossy blackglossy black””
–– XyloseXylose Lysine Lysine DesoxycholateDesoxycholate
Rosado con o sin Rosado con o sin centrocentro negro negro
EstriadoEstriado de de ““Selective EnrichmentsSelective Enrichments””
IncubaciónIncubación de 18-24 h a 35 de 18-24 h a 35ooCC
ResultadosResultados –– PRESUMPTIVE POSITIVE PRESUMPTIVE POSITIVE
MedioMedio DiferencialDiferencial –– DiscernimientoDiscernimiento
bioquímicobioquímico
Triple Sugar Iron AgarTriple Sugar Iron Agar
–– Streak Slant and Stab ButtStreak Slant and Stab Butt
–– 1% 1% LactosaLactosa
–– 0.1% 0.1% GlucosaGlucosa
–– SulfatoSulfato FerrosoFerroso
IndicadorIndicador de H de H22SS
–– TiosulfatoTiosulfatoProducciónProducción de H de H22SS
–– RojoRojo fenolfenolAlkalinaAlkalina –– RojoRojo, , AcidoAcido –– Amarillo Amarillo
–– IncubaciónIncubación a 35 a 35 ooCC porpor 24 24 horashoras
Triple Sugar Iron AgarTriple Sugar Iron Agar
ReacciónReacción de de SalmonellaSalmonella
–– Red Slant (Red Slant (AlkalinoAlkalino))
–– Acid Butt (Amarillo)Acid Butt (Amarillo)
–– PrecipitadoPrecipitado Negro Negro
Lysine Iron Agar- Lysine Iron Agar- DiscernimientoDiscernimiento bioquímicobioquímico
Stab Butt and Streak SlantStab Butt and Streak Slant
–– Se Se quierequiere condicionescondiciones anaeróbicasanaeróbicas en el en el fondofondo parapara queque ocurraocurra la ladecarboxilacióndecarboxilación
DecarboxilaciónDecarboxilación a a partirpartir de L- de L-LysinaLysina
SulfatoSulfato FerrosoFerroso
BromoBromo Cresol Purple Cresol Purple
–– VioletaVioleta –– AlkalinoAlkalino, Amarillo - , Amarillo - AcidoAcido
GlucosaGlucosa
TiosulfatoTiosulfato
Lysine Iron AgarLysine Iron Agar
ReacciónReacción de de SalmonellaSalmonella
–– Alkaline Butt Alkaline Butt –– Purple Purple
–– PrecipitadoPrecipitado Negro Negro
SóloSólo eses negativonegativo sisi hay hay condicionescondiciones ácidicasácidicas, , puedenpueden
obtenerseobtenerse otrasotras reaccionesreacciones no no típicastípicas
ConfirmaciónConfirmación BioquímicaBioquímica
AglutinaciónAglutinación de de antígenosantígenos superficialessuperficiales con con anticuerposanticuerpos
específicosespecíficos parapara Salmonella Salmonella
AntígenosAntígenos de de SalmonellaSalmonella
–– O O –– SomáticoSomático –– LipopolisacáridoLipopolisacárido
–– H H –– FlagellarFlagellar –– ProteínaProteína
–– K K –– Capsular - Capsular - PolisacáridosPolisacáridos
AglutinaciónAglutinación
MezcleMezcle anticuerposanticuerpos con un con un pocopoco de de cultivocultivo
AglutinaciónAglutinación eses un un resultadoresultado positivopositivo
AislamientoAislamiento vs. vs. EnumeraciónEnumeración
UsualmenteUsualmente sólosólo se se aislaaisla
Se Se enumeraenumera parapara propósitospropósitos de de investigacióninvestigación
–– MétodoMétodo MPN MPN
–– MétodoMétodo de de filtraciónfiltración porpor membranasmembranas
No No ““AccurateAccurate””
OtrosOtros métodosmétodos- kits - kits bioquímicosbioquímicos
IdentificaciónIdentificación basadabasada DNA-DNA DNA-DNA
IdentificaciónIdentificación basadabasada en en deteccióndetección de de antígenosantígenos
IdentificaciónIdentificación basadabasada en la en la utilizaciónutilización de de sustratossustratos