CITOTOXICIDAD

Maripaz Lemus MonteroCITOTOXICIDAD

Evaluacin de extractos vegetales.Metodologa establecida en microplacas de 96 pozos en la evaluacin de diferentes agentes qumicos.Para cada ensayo es indispensable realizarlo mnimo por triplicado.Sirve para determinar la concentracin del extracto optima que mata mayor clulas en un menor tiempo.

Ensayos de citotoxicidad

Sistema formado por clulas provenientes de un rgano o un tejido, normal o tumoral, mantenidas en medios de cultivo de composicin qumica definida y en condiciones de temperatura, pH, aireacin y humedad controladas.

Con dichas condiciones se aseguran su supervivencia y multiplicacin, manteniendo todas sus funciones metablicas de una manera semejante a las que tenan en el husped.Ensayos de toxicidad in vitro, con clulas y sistemas alternativos al uso de animales de laboratorio.

Cultivos de celulas in vitro

Metodos para medir la supervivenvia y proliferacion de celular ENSAYO DE MTT

Es el quizs el ms empleado y es realizado

El MTT es un ensayo colorimtrico basado en la reduccin del Bromuro

Este proceso se basa en la reduccin metablica del Bromuro de 3-(4,5dimetiltiazol-2-ilo)-2,5-difeniltetrazol (MTT) que es realizada por la enzima mitocondrial succinato-deshidrogenasa que es metabolicamente activa.

Dicha enzima transforma al MTT de un compuesto hidroflico de color amarillo a un compuesto azul, hidrofbico (formazn).

La cantidad de clulas vivas es proporcional a la cantidad de formazn producido.

Permite determinar la funcionabilidad mitocondrial de las clulas tratadas.

La lectura de densidad ptica (DO) se realiza en un espectrofotmetro.

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