Congreso mundial de genética 11SEP Conocer los pasos para realizar la construcción de una nueva...
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Congreso mundial de genética 11SEP
Conocer los pasos para realizar la construcción de una nueva
molécula de ADN para combinar la información genética de 1 o
más especies
Construcción de una molécula de ADN recombinante
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Situación problemática
• ¿QUÉ ES EL ADN RECOMBINANTE?• ¿QUE ES UN VECTOR?• ¿PARA QUÉ SE PRODUCEN MOLÉCULAS
DE ADN RECOMBINANTE?• ¿QUÉ ES UN PLÁSMIDO?• ¿QUÉ SON LAS ENZIMAS DE
RESTRICCIÓN? • EXPLICA LOS PASOS EN FORMA DE
DIAGRAMA DE FLUJO
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MATERIAL:1 Tijera (representa la enzima de restricción) 4 cajas plásticas con tapa (representan las células a las cuales le vamos a introducir el gene de interés) 4 Limpia pipas (alambres felpados) de 3 colores diferentes: - un fragmento pequeño amarillo de una pulgada (representa el gen de interés) - cuatro fragmentos color rojo de una pulgada cada uno (secuencia reconocida por la enzima de restricción) -1 limpia pipas grande de color azul (representa el plásmido)
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MÉTODO• 1. Obtener el gen deseado. Este ADN se
conoce como el ADN pasajero. Se • representa por el fragmento amarillo
pequeño. • 2. Se prepara el ADN pasajero: a los dos
extremos del fragmento de ADN • pasajero se le coloca la secuencia de
nucleótidos que reconoce la enzima de • restricción. (Con la tijera se corta por la mitad
uno de los fragmentos rojos. Cada • mitad que se genera se le añade a los
extremos del fragmento amarillo) • 3. El ADN pasajero es unido al plásmido o
vector. Para esto el plásmido que es • circular debe tener una secuencia que
reconoce la enzima de restricción que • estamos usando. Se abre el plásmido con
esta enzima y se le añade el ADN • pasajero. Por complementaridad de las
nucleotidos del ADN los extremos de • uno se unirán al otro. El resultado es una
molécula de ADN recombinante. (El • fragmento azul se une por un extremo al
fragmento rojo y se forma un círculo. El • plásmido constará de una región roja que
reconoce la tijera. • La tijera corta en el centro de la región roja.
Se unen las regiones rojas del • plásmido con el del ADN pasajero. La
molécula quedará como un círculo de • color azul---rojo—amarillo—rojo--azul)
• 4. Las moléculas recombinantes son introducidas a la célula huésped (un
• proceso llamado transformación). Esto puede hacerse con un choque de
• temperatura o utilizando una pistola genética o por microinyección. (Colocamos
• las cuatro cajas en el piso y tratamos de encestar nuestra molécula de ADN
• recombinante). • 5. Se necesita la identificación de las
célula con el ADN recombinante. Muchos • de estos plásmidos poseen genes que
otorgan resistencia antibióticos. Las • bacterias suelen crecerse en medio de
cultivo con antibiótico. De esta forma las • células transformadas (que poseen el
plásmido con el ADN recombinante) son • las que sobreviven. Las que no poseen
el plásmido modificado genéticamente • mueren en presencia del antibiótico. La
caja que obtenga el plásmido con el • ADN recombinante se le coloca la tapa
que representa la protección del • antibiótico. • 6. La colonia de células que contienen el
gen de interés es escogida o • separada del resto de las célula.
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MATERIAL DE LAB.• 150 GR DE CHÍCHARO
SECO O CONGELADO ( NO ENLATADO)
• JABÓN DE TRASTOS LÍQUIDO
• ABLANDADOR DE CARNE
• 1 LICUADORA CON VASO
• 1 COLADERA DE PLÁSTICO
• POR PERSONA
• FOTOCOPIA DE LA PRÁCTICA
• PREREPORTE• CONTESTAR
CUESTIONARIO