DISTRIBUCIN UNIVERSAL DE MICROORGANISMOS

DISTRIBUCIN UNIVERSAL DE MICROORGANISMOSContenido2OBJETIVOS

3MARCO TERICO

5MORFOLOGA DE LAS COLONIAS BACTERIANAS

5LOS MEDIOS DE CULTIVO

6CONDICIONES GENERALES PARA EL CULTIVO DE MICROORGANISMOS

8MEDIOS DE CULTIVOS MS USADOS EN MICROBIOLOGA INDUSTRIAL

8METODOLOGA

10PROCEDIMIENTO A

10PROCEDIMIENTO B

11RESULTADOS Y OBSERVACIONES:

11* Lugar: Laboratorio microbiologa

12* Lugar: Fotocopiadora de la FIA

14DISCUSIONES

15DETECCIN Y MEDIDA DEL CRECIMIENTO

16CICLO DE CRECIMIENTO DE POBLACIONES.

17FACTORES FSICOS Y QUMICOS QUE INFLUYEN EN EL CRECIMIENTO BACTERIANO.

19CONCLUSIONES

20RECOMENDACIONES

21BIBLIOGRAFA

21ANEXOS

22CUESTIONARIO

22Procedentes del suelo y las plantas

22Procedentes de animales y personas

23Procedentes del aire del mar

OBJETIVOS

Reconocer la importancia que tienen los microorganismos en el cual nos encontramos y saber en que condiciones habitan.

Considerar la importancia que tiene la adecuada preparacin del medio de cultivo en la prctica de microbiologa.

Entender la necesidad de evitar la contaminacin tanto de los medios del cultivo como de los instrumentos utilizados en el laboratorio de microbiologa.

Observar y catalogar los diferentes tipos de microorganismos que se desarrollan en diferentes ambientes de la facultad.

Familiarizarse con los materiales y su uso en el laboratorio de microbiologa para futuros laboratorios.

MARCO TERICO

Cultivar un microorganismo significa promover intencionalmente el desarrollo de ste en medios de cultivo y condiciones de laboratorio controladas. La poblacin de microorganismos desarrollada en un medio se de nominacultivo. Cuando ste contiene una sola especie de microorganismo, se denomina cultivo puro oaxnico, cuandocontiene ms de una especie de microorganismos se denominacultivo mixto. Un cultivo tipo contiene una especieconocida de microorganismos y es conservada en el laboratorio para realizar diversos ensayos y estudios.Un cultivo axnico consiste en una sola especie microbiana, proveniente de una sola clula. Los cultivos axnicosson muy raros en la naturaleza. En los medios naturales -por ejemplo, en el suelo, agua, o en el cuerpo humano-existen cultivos mixtos. En un cultivo mixto, viven muchas y diferentes especies de forma conjunta. Un cultivoaxnico se obtiene artificialmente en el laboratorio. A la hora de obtener un cultivo axnico se han detomarprecauciones especiales, ya que los microorganismos estn por todas partes, en la naturaleza, en el laboratorio yen los instrumentos y recipientes usados en los experimentos. Estos microorganismos no deseados ocontaminantes deben ser eliminados de un cultivo para que ste pueda ser axnico. El segundo paso paraobtener un cultivo axnico es inocular o introducir, una sola clula de un microorganismo en un medio slido oliquido, esterilizado previamente. De esta manera, aislamos un solo microorganismo del resto y se podrmultiplicar en condiciones favorables. Un clon est constituido por una poblacin de clulas descendientes de unsolo microorganismo. Una colonia es un clon lo suficientemente grande como para ser visible sobre la superficiede un medio slido.Un cultivo microbiano que ha estado creciendo por cierto tiempo en el mismo tubo o matraz, debe ser transferidoa un medio de cultivo nuevo, de otra manera el crecimiento y sobrevivencia no pueden continuar. En estatransferencia se deben considerar dos aspectos bsicos referentes a: no introducir microorganismos indeseables(contaminantes) y concentracin o carga microbiana de la muestra (inculo) a sembrar.

Para impedir la contaminacin de los cultivos, es necesario tener plena conciencia de la ubicuidad de los microorganismos, lo que determina que el are y todas las superficies estn densamente pobladas pormicroorganismos, de este modo en la transferencia de una muestra microbiolgica a otro recipiente, se debentener una serie de cuidados que eliminen los riesgos de contaminacin. Estos incluyen el rea de trabajo, ellavado de las manos, la esterilizacin de todos los utensilios y medios de cultivo a emplear y realizar latransferencia del microorganismo en una zona estril, la que se obtiene trabajando cerca de la flama del mechero.Al conjunto de procedimientos realizados para prevenir o evitar la contaminacin se le llama tcnica asptica; elseguimiento cuidadoso y detallado de la misma evita accidentes tales como: o

La contaminacin y prdida del cultivo en estudio o La salida y dispersin de microorganismos del cultivo, lo que ocasionara la contaminacin de utensilios,productos y del personal. Este ltimo aspecto es particularmente importante cuando se trabaja concultivos de microorganismos patgenos.Con relacin a la concentracin del inculo, un error frecuente del principiante consiste en tomar muestrasgrandes, lo que es innecesario. Una colonia de bacterias del tamao de la cabeza de un alfiler contiene variosmillones de microorganismos, es obvio que con una cantidad pequesima (casi invisible) que se adhiera al asa, ser ms que suficiente para efectuar una transferencia exitosa.

Dispositivos empleados en la transferencia de muestras microbianas: hisopo, pipeta (para uso microbiolgico sonterminales y la parte superior o boquilla debe estar protegida con filtro de algodn), pipeta pasteur, cable de Kolleo portasa con alambre de platino dispuesto en forma de: aguja, asa, esptula y/o gancho.En la transferencia de microorganismos se emplean agujas, asas de inoculacin, hisopos, pipetas o pipetaspasteur que debern esterilizarse previamente. La utilizacin de estos dispositivos, as como de los diferentesmedios de cultivo tienen aplicaciones especficas. Por ejemplo: los medios lquidos se preparan en tubos omatraces que se cubren con tapones de algodn o tapones especiales. Un cultivo lquido puede ser transferidomediante un asa microbiolgica, un hisopo, pipeta o pipeta pasteur; el inculo se deposita dentro del caldo omedio lquido. En este tipo de cultivos los microorganismos presentan un desarrollo particular que se manifiestaen la superficie o a travs de todo el lquido. Una de las ventajas que presenta este tipo de cultivo se refiere a laposibilidad de agitarlos acelerando la velocidad de microorganismos anaerobios, por otra parte, en este tipo decultivos, las poblaciones se encuentran suspendidas y e fcil homogenizarlas, lo que permite estandarizar laconcentracin del inculo. La desventaja que presentan, e que en ellos e difcil detectar contaminacin a simplevista.Los medios semislidos e preparan en tubos, se inoculan con aguja de siembra (asa recta) o pipeta pasteur; eneste ltimo caso es necesario calentar el medio y cuando se encuentra en estado lquido y a una temperatura deaproximadamente 42C se agrega el inculo, se homogeniza y se deja solidificar. Estos medios se emplean paraestudiar la movilidad de los microorganismos y para favorecer la separacin de microorganismos con diferentesrequerimientos de oxgeno.Los medios slidos e preparan en tubos o matraces dependiendo de la cantidad o de las necesidades, despusde esterilizarlos, estos se inclinan o vierten en cajas de petri. La siembra se realiza con el asa, inoculando lasuperficie del agar con mucha suavidad; en estos medios, los microorganismos al multiplicarse forman agregadosque se hacen visibles a simple vista; a estos agregados se les denominan colonias, las que presentan caractersticas que varan con el tipo de microorganismo cultivado y el medio de cultivo empleado.En cualquier medio de cultivo es de primordial importancia ajustar el pH, ya que an cuando la mayora de losmicroorganismos crecen mejor en pH neutro, algunos requieren de pH alcalino o cido, por lo que al proporcionarun pH adecuado se favorecer el crecimiento del microorganismo de inters y la obtencin del cultivo. Con estemismo propsito durante la incubacin se deben proporcionar las condiciones adecuadas para el microorganismoen estudio. El crecimiento ptimo de los microorganismos se presenta a temperaturas que la mayora de lasveces estn relacionadas con la de su hbitat natural.Algunos microorganismos crecen por debajo de 15C, otros requieren temperaturas ms elevadas (30 a 45C) yalgunos hasta 80C. Para alcanzar y mantener estas temperaturas se puede usar una incubadora microbiolgicao un bao de agua a temperatura constante, en tanto que para lo microorganismos que presentan su crecimientoptimo a temperaturas entre 20 y 25C se pueden incubar en la gaveta o cajn del laboratorio, a temperaturaambiente.En general las incubadoras microbiolgicas satisfacen las necesidades en cuanto a los rangos de temperaturarequeridas por los microorganismos. La desventaja que tienen es que estos aparatos funcionan con are seco, lo que determina la deshidratacin de los medios de cultivo. Por lo tanto, el crecimiento de cualquier cultivo experimental que se realice en incubadora no debe prolongare por ms de nueve das. Con relacin a las necesidades gaseosas, no todos los microorganismo crecen en presencia de oxgeno atmosfrico; los que slocrecen en presencia de are se llaman aerobios obligados; los que slo crecen en ausencia de oxgeno sedenominan anaerobios obligados o estrictos, un tercer grupo se adapta a las dos condiciones y se le conocecomo facultativos. Existe una cuarta categora que comprende bacterias que requieren oxgeno, pero slo loutilizan cuando ste existe en concentraciones reducidas; a estos se les llama microaeroflicos. El desarrollo deestos diferentes grupos e favorece mediante la agitacin de los cultivos o mediante la exclusin de oxgeno paralo que se emplean sustancias reductoras o equipos especiales.Las bacterias son organismos procariticos, se encuentran ampliamente distribuidas en la naturaleza, habitan enel agua, el suelo, en la superficie o en el interior de plantas y animales incluyendo al hombre. Pueden vivir enforma libre o en simbiosis con otros organismos, ya sea como parsitos, comensales o mutualistas. Fisiolgicamente este grupo presenta caractersticas muy variables, hay bacterias mviles e inmvilesfotosintticas y quimiotrficas, auttrofas y hetertrofas; se desarrollan en un rango muy amplio de temperatura,pH y condiciones gaseosas.En el estudio de cultivos bacterianos algunos de los criterios que se emplean para caracterizarlas incluyen:tamao, morfologa celular, forma de agrupacin, reaccin a la tincin de Gram, formacin de esporas, movilidad,presencia de inclusiones de reserva y caractersticas culturales en medios lquidos y slidos en los que presentan patrones de desarrollo en cuanto a la forma, tamao, elevacin y color de las colonias.MORFOLOGA DE LAS COLONIAS BACTERIANAS

El desarrollo de colonias sobre las superficies de un agar permite al microbiologa identificar las bacterias porque las especies forman a menudo colonias con una forma y aspecto caractersticos.

La identificacin presuntiva o preliminar de una bacteria se basa en la morfologa colonial, para ello se forma en cuenta las siguientes caractersticas:

1. Elevacin:Plana, bajo convexa, convexa rugosa, crateriforme y convexa y cncava.

2. Bordes:liso, dentado, ondulado, lobulado, cremado, ciliado y ramosa (mas comn liso)

3. Superficie:Lisa y Rugosa

4. Forma:Circular, ondulada y obulada.

5. Tamao:puntiforme, pequea, mediana y grande.

6. Transmisin de la luz:opaca o translucida.

7. Reflexin de la luz:Mate y Brillante.

8. Aspecto:Hmedo y Seco.

9. Consistencia:Butirosa (brillante, hmeda y translucida), Mucoide (como moco), Vitrea (opaca, seco) y seca (si es dura).

10. Pigmento:Color (rojas, verdes, etc.) y olor.

La morfologa bacteriana es comparable a una estadstica ya que se deriva de una clula individual pero es la caracterstica de la masa celular. As pues, por ejemplo, la pigmentacin es aparente en la colonia, pero no en la clula individual, en el caso de la consistencia mucosa de algunas colonias esta se deriva de la sustancia capsular en aquellas bacterias con cpsula muy grande.

LOS MEDIOS DE CULTIVO

Uno de los sistemas ms importantes para la identificacin de microorganismos es observar su crecimiento en sustancias alimenticias artificiales preparadas en el laboratorio. El material alimenticio en el que crecen los microorganismos es el Medio de Cultivo y el crecimiento de los microorganismos es el Cultivo. Se han preparado ms de 10.000 medios de cultivo diferentes.

Para que las bacterias crezcan adecuadamente en un medio de cultivo artificial debe reunir una serie de condiciones como son: temperatura, grado de humedad y presin de oxgeno adecuado, as como un grado correcto de acidez o alcalinidad. Un medio de cultivo debe contener los nutrientes y factores de crecimiento necesarios y debe estar exento de todo microorganismo contaminante.

La mayora de las bacterias patgenas requieren nutrientes complejos similares en composicin a los lquidos orgnicos del cuerpo humano. Por eso, la base de muchos medios de cultivo es una infusin de extractos de carne y Peptona a la que se aadirn otros ingredientes.

El agar es un elemento solidificante muy empleado para la preparacin de medios de cultivo. Se lica completamente a la temperatura del agua hirviendo y se solidifica al enfriarse a 40 grados. Con mnimas excepciones no tiene efecto sobre el crecimiento de las bacterias y no es atacado por aquellas que crecen en l.

La Gelatina es otro agente solidificante pero se emplea mucho menos ya que bastantes bacterias provocan su licuacin.

En los diferentes medios de cultivo se encuentran numerosos materiales de enriquecimiento como hidratos de carbono, suero, sangre completa, bilis, etc. Los hidratos de Carbono se adicionan por dos motivos fundamentales: para incrementar el valor nutritivo del medio y para detectar reacciones de fermentacin de los microorganismos que ayuden a identificarlos. El suero y la sangre completa se aaden para promover el crecimiento de los microorganismos menos resistentes.

Tambin se aaden colorantes que actan como indicadores para detectar, por ejemplo, la formacin de cido o como inhibidores del crecimiento de unas bacterias y no de otras (el Rojo Fenol se usa como indicador ya que es rojo en pH bsico y amarillo en pH cido. La Violeta de Genciana se usa como inhibidor ya que impide el crecimiento de la mayora de las bacterias Gram-positivas).

CONDICIONES GENERALES PARA EL CULTIVO DE MICROORGANISMOS

El desarrollo adecuado de los microorganismos en un medio de cultivo se ve afectado por una serie de factores de gran importancia y que, en algunos casos, son ajenos por completo al propio medio.

1- disponibilidad de nutrientes adecuados

Un medio de cultivo adecuado para la investigacin microbiolgica ha de contener, como mnimo, carbono, nitrgeno, azufre, fsforo y sales inorgnicas. En muchos casos sern necesarias ciertas vitaminas y otra sustancia inductoras del crecimiento. Siempre han de estar presentes las sustancias adecuadas para ejercer de donantes o captadores de electrones para las reacciones qumicas que tengan lugar.

Todas estas sustancias se suministraban originalmente en forma de infusiones de carne, extractos de carne o extractos de levadura. Sin embargo, la preparacin de estas sustancias para su aplicacin a los medios de cultivo provocaba la prdida de los factores nutritivos lbiles.

Actualmente, la forma ms extendida de aportar estas sustancias a los medios es utilizar peptona que, adems, representa una fuente fcilmente asequible de nitrgeno y carbn ya que la mayora de los microorganismos, que no suelen utilizar directamente las protenas naturales, tienen capacidad de atacar los aminocidos y otros compuestos ms simples de nitrgeno presentes en la peptona.

Ciertas bacterias tienen necesidades nutritivas especficas por lo que se aade a muchos medios sustancias como suero, sangre, lquido asctico, etc. Igualmente pueden ser necesarios ciertos carbohidratos y sales minerales como las de calcio, magnesio, manganeso, sodio o potasio y sustancias promotoras del crecimiento, generalmente de naturaleza vitamnica.

Muy a menudo se aaden al medio de cultivo ciertos colorantes, bien como indicadores de ciertas actividades metablicas o bien por sus capacidades de ejercer de inhibidores selectivos de ciertos microorganismos.

2- consistencia adecuada del medio

Partiendo de un medio lquido podemos modificar su consistencia aadiendo productos como albmina, gelatina o agar, con lo que obtendramos medios en estado semislido o slido.

Los medios solidificados con gelatina tienen el gran inconveniente de que muchos microorganismos no se desarrollan adecuadamente a temperaturas inferiores al punto de fusin de este solidificante y de que otros tienen la capacidad de licuarla.

Actualmente los medios slidos son de uso universal, por su versatilidad y comodidad, pero hay tambin gran cantidad de medios lquidos cuyo uso est ampliamente extendido en el laboratorio.

3- presencia (o ausencia) de oxgeno y otros gases

Gran cantidad de bacterias pueden crecer en una atmsfera con tensin de oxgeno normal. Algunas pueden obtener el oxgeno directamente de variados sustratos. Pero los microorganismos anaerobios estrictos slo se desarrollarn adecuadamente en una atmsfera sin oxgeno ambiental. En un punto intermedio, los microorganismos microaerfilos crecen mejor en condiciones atmosfricas parcialmente anaerobias (tensin de oxgeno muy reducida), mientras los anaerobios facultativos tienen un metabolismo capaz de adaptarse a cualquiera de las citadas condiciones.

4- condiciones adecuadas de humedad

Un nivel mnimo de humedad, tanto en el medio como en la atmsfera, es imprescindible para un buen desarrollo de las clulas vegetativas microbianas en los cultivos. Hay que prever el mantenimiento de estas condiciones mnimas en las estufas de cultivo a 35-37C proporcionando una fuente adecuada de agua que mantenga la humedad necesaria para el crecimiento de los cultivos y evitar as que se deseque el medio.

5- Luz ambiental

La mayora de los microorganismos crecen mucho mejor en la oscuridad que en presencia de luz solar. Hay excepciones evidentes como sera el caso de los microorganismos fotosintticos.

6- pH

La concentracin de iones hidrgeno es muy importante para el crecimiento de los microorganismos. La mayora de ellos se desarrollan mejor en medios con un pH neutro, aunque los hay que requieren medios ms o menos cidos. No se debe olvidar que la presencia de cidos o bases en cantidades que no impiden el crecimiento bacteriano pueden sin embargo inhibirlo o incluso alterar sus procesos metablicos normales.

7- Temperatura

Los microorganismos mesfilos crecen de forma ptima a temperaturas entre 15 y 43C. Otros como los psicrfilos crecen a 0C y los termfilos a 80C o incluso a temperaturas superiores (hipertermfilos). En lneas generales, los patgenos humanos crecen en rangos de temperatura mucho ms cortos, alrededor de 37C, y los saprofitos tienen rangos ms amplios.

8- Esterilidad del medio

Todos los medios de cultivo han de estar perfectamente estriles para evitar la aparicin de formas de vida que puedan alterar, enmascarar o incluso impedir el crecimiento microbiano normal del o de los especmenes inoculados en dichos medios. El sistema clsico para esterilizar los medios de cultivo es el autoclave (que utiliza vapor de agua a presin como agente esterilizante)

MEDIOS DE CULTIVOS MS USADOS EN MICROBIOLOGA INDUSTRIAL

Caldo nutritivo

Es un medio emprico de uso general para el cultivode la mayora de las bacterias.

Los ingredientes son:

Pluripetona 5gExtracto de carne 3gCloruro de sodio 5 gr.Agua destilada 1000 mlSe pesan los ingredientes y se calientan hasta que se disuelven. Una vez que se ha enfriado, se ajusta el pH a 6.9 +- 0.2. En el autoclave a 1 atmsfera durante 15 minutos para precipitar los fosfatos. Se filtra y se reparte en tubos tapados con algodn o con tapones a rosca (en esta ltimo caso no se ajusta completamente las tapas). Se esteriliza a 1 atmsfera durante 20 minutos. Ajustar las tapas a roscar antes de retirar del autoclave.

Agar nutritivo

ElAgar nutritivoes unmedio de cultivousado normalmente como rutina para todo tipo de bacteria. Es muy util porque permanece solido incluso a relativas altas temperaturas. Adems, el crecimiento bacteriano en este agar lo hace en la superficie, por lo que se distinguen mejor las colonias pequeas.

En un caldo de nutrientes, la bacteria crece en el lquido, y aparece como una sustancia espesa, con colonias dificilmente observables. El agar nutritivo contiene normalmente (w/v):

0.5%Peptona 0.3% extracto de carne/extracto de levadura

1.5%agar 0.5% [[NaCl]

Agua destilada

pHcasi neutro (6.8) a 25CMETODOLOGAEl medio de cultivo constituye el aporte de nutrientes indispensables para el crecimiento de los microorganismos. La composicin precisa depender de la especie que se quiera cultivar, porque las necesidades nutricionales varan considerablemente. Hay microorganismos muy poco exigentes que crecen bien en medios de laboratorio normales y microorganismos muy exigentes que necesitan determinadas sustancias como vitaminas, suero o sangre para crecer.

Preparacin de agar nutritivo1. Pesar 2,4 gr. De agar

2. Verter el agar en un vaso precipitado y agregar 120ml. de agua ,mover con la bagueta.

3. Si el agar que no se disuelve por completo se disuelve por medio de bao mara, hasta que hierva.

4. Calentar hasta 80c y despus colocar en 12 tubos de prueba de 15 ml. Agar tapar los tubos con algodn

5. Colocar los tubos en una rejilla luego llevarlo al autoclave para esterilizarlos.

6. Luego esperar que la temperatura en el autoclave se eleve hasta 120 c despus de 15 min.

7. Despus sacar los 12 tubos y distribuirlos a los respectivos grupos.

Procedimiento para obtener caldo nutritivo 1. Emplear 8gr. por litro de agua destilada.2. Si es necesario calentar hasta disolverlo completamente.3. Distribuir y esterilizar en autoclave a 118C 121C durante 15 min.PROCEDIMIENTO A

Tomar 4 tubos de agar nutritivo.

Vaciar el tubo de agar nutritivo en cada una de las 3 placas Petri estriles y en la placa Petri no estril. Numerar las placas estriles del #1 al #3 y la placa no estril con el #4.

Tubos con agar

Nutritivo fundido

Estril

Placas Petri

#1

#2

#3 #4 estriles #1, #2 y

#3. Placa Petri

No estril #4.

Una vez que el agar se haya solidificado, se debe destapar la placa Petri #1y exponer el agar al aire del laboratorio de microbiologa de la FIA (grupo 2) y (grupo 3) la fotocopiadora por 10 min o 15 min.

//Dividir la placa #2 en 4 partes, trazando lneas perpendiculares (cuatro cuadrantes) con algn marcador.

//A. Pelo

B. Huella Digital

///C. Inoculador Estril

D. Inoculador no Estril Las placas #3 y #4 no se deben abrir.

Invertir las placas petri e incubarlos a 37c por 48 horas.

Examinar las placas y dar la explicacion de lo ocurrido en cada caso

PROCEDIMIENTO B

Pipeta estril pipeta no estril pipeta estril

/// Pipeta estril pipeta no estril pipeta estril

1

2

3 Tubo estril Tubo estril Tubo no estril

///1. Transferencias:

1.1. Usando una pipeta estril, transferir el caldo nutritivo esterilizado de un tubo a un tubo de prueba estril.

1.2. Usando una pipeta no estril, transferir el caldo estril del segundo tubo a un tubo de prueba estril, marcado con el n 2

1.3. Usando una pipeta estril, transferir el caldo nutritivo a un tubo no esterilizado n 3.

2. Poner los tubos en el incubador a 37C e incubarlos por 48 horas.

3. Despus de las 48 horas examinar los tubos y explicar qu ha ocurrido.

RESULTADOS Y OBSERVACIONES:Despus de 48 horas se revisaorn las placas petri para ver la presencia de microorganismos.

Los grupos #2 y #4 que se encargaron del procedimiento A, El grupo #4 se encarg de dejar la placa petri en el laboratorio de microbiologa mientras que el grupo #2 se encarg de llevarlo a la fotocopiadora de la facultad. Se observaron los siguientes resultados a las determinadas condiciones:

* Lugar: Laboratorio microbiologa

* 8 personas

* No limpio

* Ventilacin

* Polvo

*01 de abril del 2014 Hora: 1:45 pm

No se observ crecimiento de colonias en el sector C donde se puse el inoculador estril.

GrupoPlaca N1 estrilPlaca N2 estrilPlaca N3 estrilPlaca N4 no estril

4Ambiente: Laboratorio de MicrobiologaSector A: PeloSector B: HuellaSector C: Inoculador estrilSector D: Inoculador no estrilNo abrirNo abrir

N de Colonias (X)4621041020

TamaoX= 1 mm(1)

X= 3mm(1)

X= 4mm(2)

X= 1 mm(2) X= 2mm(2) X= 3mm(1) X= 4mm(1)1 mm(18)

2 mm(2)

10 mm(1)

-1 mm(41)

-1mm

MargenEntero(4)

Entero(5) Ondulante(1)

Entero(21)

-Entero(41)

-Entero

ElevacinPlana(4)

Plana(6)

Plana(21)

-Plana(41)

-Plana

CromognesisCremas(4)

Cremas(6)

Cremas(21)

-Cremas(41)

-Cremas

Caracteres pticos Opacas(4) Opacas(6) Opacas(21)

-Opacas(41)

-Opacas

* Lugar: Fotocopiadora de la FIA

* 2 personas

* Limpio

* Ventilacin

* Polvo

*Sin Radiacin

*01 de abril del 2014 Fecha: 1:35 pm.

GrupoPlaca N1 estrilPlaca N2 estrilPlaca N3 estrilPlaca N4 no estril

2Ambiente: Laboratorio de MicrobiologaSector A: PeloSector B: HuellaSector C: Inoculador estrilSector D: Inoculador no estrilNo abrirNo abrir

N de Colonias (X)26050 01202

TamaoX= 1 mm(1)

X= 2mm(1)

Xprom= 1 mm 1 mm

2 mm

-1 mm(41)

-10mm

15 mm

MargenEntero(2)

Entero(60) Entero(50)

-Entero(12)

-Lobulado

ElevacinPlana(2)

Plana(60)

Plana(50)

-Plana(12)

-Plana

CromognesisCremas(2)

Cremas(60)

Cremas(50)

-Cremas(12)

-Cremas

Caracteres pticos Opacas(2) Opacas(60) Opacas(50)-Opacas(12) -Opacas

El procedimiento B lo hicieron los grupos #1, #3 y #5. Se observaron los siguientes resultado en los caldos nutritivos.

GRUPO 1TUBO 1 ESTERIL/PIPETA ESTERILTUBO 2 ESTERIL/PIPETA NO ESTERIL (DEBE HABER)TUBO 3 NO ESTERIL/PIPETA ESTERIL

CANTIDAD DE CRECIMIENTONO HAY CRECIMIENTONO HAYESCASO

DISTRIBUCION DE CRECIMIENTONO HAY DISTRIBUCIONNO HAYPOCO TRUBIO

OLORNO HAY OLORNO HAYPUTRIDO

GRUPO 3TUBO 1 ESTERIL/PIPETA ESTERILTUBO 2 ESTERIL/PIPETA NO ESTERIL (DEBE HABER)TUBO 3 NO ESTERIL/PIPETA ESTERIL (DEBE HABER)

CANTIDAD DE CRECIMIENTONO HICIERON EL TUBOABUNDANTENO HAY

DISTRIBUCION DE CRECIMIENTOSEDIMENTONO HAY

OLORPUTRIDONO HAY

GRUPO 5TUBO 3A NO ESTERIL/PIPETA ESTERILTUBO 3B NO ESTERIL/PIPETA ESTERIL

CANTIDAD DE CRECIMIENTOABUNDANTEMODERADO

DISTRIBUCION DE CRECIMIENTOPELICULAPELICULA

OLORPUTRIDOPUTRIDO

DISCUSIONESEl aislamiento de bacterias a partir de muestras naturales se realiza, en la mayora de los casos, mediante la produccin de colonias aisladas en cultivos slidos.

El crecimiento explosivo de las bacterias produce un gran nmero a partir de una nica clula inicial de forma que, tras un periodo de tiempo de incubacin en las condiciones ambientales adecuadas, se produce una colonia de individuos iguales.

Para crecer, un microorganismo necesita nutrientes que le aporten energa y elementos qumicos para la sntesis de sus constituyentes celulares.

Dependiendo de la fuente de carbono que utilizan, los microorganismos se pueden clasificar en:

autotrofos: si es el CO2 atmosfrico (microorganismos que fotosintetizan)

heterotrofos si utilizan carbono orgnico.

Los microorganismos de importancia clnica son todos ellos hetertrofos.

La frmula elemental de un microorganismo es, aproximadamente, C4H7O2N lo que supone que los componentes de las clulas son: carbono que representa alrededor del 50% del peso seco, oxgeno (32%), nitrgeno (14%) y debe estar disponible, normalmente, en forma de NH4 o de aminocidos a los que se pueda tomar su grupo amino; fsforo (3%) y debe estar en forma de PO43-, azufre que representa en torno al 1% y procede de aminocidos sulfurados o de SO42-; y otros elementos traza entre los que se encuentran Fe, K, Mg, Mn, Co, Mb, Cu y Zn.

La elaboracin de medios de cultivo que permitan aislar microorganismos a fin de iniciar posteriores cultivos puros requiere proporcionar los nutrientes antes citados y, en ciertos casos, algunos aminocidos o vitaminas que determinados tipos de microorganismos no pueden sintetizar.

Los medios de cultivo se pueden clasificar en definidos cuando su composicin qumica se conoce totalmente y complejos cuando no es el caso porque estn compuestos por mezclas de extractos de materiales complejos (extracto de levadura, extracto de carne, etc.).

Por otra parte, los medios de cultivo pueden ser lquidos o bien slidos si se aade algn agente solidificante que no sea consumible por los microorganismos (normalmente agar).

En funcin de los microorganismos que pueden crecer en ellos, los medios pueden ser:

selectivos cuando favorecen el crecimiento de ciertos microorganismos mientras suprimen el de otros (por ejemplo, el medio SPS para clostridios),

diferenciales cuando alguno de sus componentes permite identificar las colonias de un tipo de microorganismos (por ejemplo medios con hemates para identificar colonias de microorganismos hemolticos)

selectivo-diferenciales cuando combinan las dos caractersticas anteriores (por ejemplo, el agar de MacConkey para identificar Escherichia coli),

medios de enriquecimiento que permiten aislar un tipo determinado de microorganismo a partir de una mezcla una poblacin mixta de gran tamao.

DETECCIN Y MEDIDA DEL CRECIMIENTO

Existen diferentes sistemas para detectar y medir el crecimiento de microorganismos; los principales son: recuento directo, medida de la masa de las clulas, recuento d viables, medida del nmero de partculas, medida de parmetros bioqumicos y medida de la actividad metablica.

Recuento directo: consiste en la observacin al microscopio de volmenes muy pequeos de suspensiones de bacterias. Se usan unos portaobjetos especiales denominados cmaras de Petroff-Hausser. Para que la medida sea correcta es necesario que la densidad de clulas sea del orden de 105 por ml.

Medida de la masa de clulas: el sistema se basa en que las clulas en suspensin dispersan la luz causando la turbidez del cultivo. La turbidez depende de la masa en suspensin y, por tanto, midiendo esta se puede estimar aquella. Este es el parmetro de medida ms fcil de usar en los cultivos de laboratorio. La densidad de clulas debe ser del orden de 105 por ml.

Recuento de viables: consiste en sembrar un volumen determinado de cultivo o muestra sobre el medio de cultivo slido adecuado para estimar el nmero de viables contando el nmero de colonias que se forman puesto que cada una de estas deriva de una UFC. Para que la medida sea correcta desde el punto de vista estadstico, es necesario contar ms de 300 UFC.

En ciertas ocasiones en las que la densidad de microorganismos es demasiado baja, stos se pueden recolectar por filtracin a travs de una membrana (de 0.2 m de tamao de poro) y posterior colocacin de la membrana en un medio de cultivo adecuado para que se formen las colonias.

Medida del nmero de partculas usando contadores electrnicos de partculas. Estos sistemas no nos indican si las partculas corresponden a clulas vivas o muertas; pero nos pueden dar una idea del tamao de las partculas.

Medida de parmetros bioqumicos tales como la cantidad de ADN, ARN, protenas, peptidoglicano, etc. por unidad de volumen.

Medida de actividad metablica de las bacterias como que respiran producen una disminucin del potencial redox del medio en que se encuentran como consecuencia del consumo de oxgeno (utilizacin de colorantes sensibles a oxidacin-reduccin tales como el azul de metileno).

CICLO DE CRECIMIENTO DE POBLACIONES.

En un cultivo bacteriano en medio lquido, se pueden diferenciar cuatro fases en la evolucin de los parmetros que miden el crecimiento microbiano:

Fase lag o de adaptacin: Durante la que los microorganismos adaptan su metabolismo a las nuevas condiciones ambientales (de abundancia de nutrientes) para poder iniciar el crecimiento exponencial.

Fase exponencial o logartmica: en ella la velocidad de crecimiento es mxima y el tiempo de generacin es mnimo. Durante esta fase las bacterias consumen los nutrientes del medio a velocidad mxima. La evolucin del nmero de clulas durante esta fase se explica con el modelo matemtico descrito anteriormente. Esta fase corresponde a la de infeccin y multiplicacin dentro del organismo del agente infeccioso.

Fase estacionaria: en ella no se incrementa el nmero de bacterias (ni la masa u otros parmetros del cultivo). Las clulas en fase estacionaria desarrollan un metabolismo diferente al de la fase de exponencial y durante ella se produce una acumulacin y liberacin de metabolitos secundarios que pueden tener importancia en el curso de las infecciones o intoxicaciones producidas por bacterias.

/Los microorganismos entran en fase estacionaria bien porque se agota algn nutriente esencial del medio, porque los productos de desecho que han liberado durante la fase de crecimiento exponencial hacen que el medio sea inhspito para el crecimiento microbiano o por la presencia de competidores u otras clulas que limiten su crecimiento.

La fase estacionaria tiene gran importancia porque probablemente represente con mayor fidelidad el estado metablico real de los microorganismos en muchos ambientes naturales.

Fase de muerte: se produce una reduccin del nmero de bacterias viables del cultivo.

Las fases, parmetros y cintica de crecimiento discutidas para el caso de los medios lquidos se presentan tambin en los slidos. La cintica de crecimiento, en este caso, slo se puede seguir utilizando unos sistemas de deteccin especiales siendo el ms sencillo, la medida del nmero de clulas viables por unidad de superficie o por unidad de masa.

FACTORES FSICOS Y QUMICOS QUE INFLUYEN EN EL CRECIMIENTO BACTERIANO. Temperatura: Cada microorganismo tiene una temperatura de crecimiento adecuada. Si consideramos la variacin de la velocidad de crecimiento en funcin de la temperatura de cultivo, podemos observar una temperatura mnima por debajo de la cual no hay crecimiento; a temperaturas mayores se produce un incremento lineal de la velocidad de crecimiento con la temperatura de cultivo hasta que se alcanza la temperatura ptima a la que la velocidad es mxima. Por encima de esta temperatura ptima, la velocidad de crecimiento decae bruscamente y se produce la muerte celular.

El aumento de la velocidad de crecimiento con la temperatura se debe al incremento generalizado de la velocidad de las reacciones enzimticas con la temperatura. Se denomina coeficiente de temperatura a la relacin entre el incremento de la velocidad de reaccin y el de temperatura. En trminos generales, la velocidad de las reacciones bioqumicas suele aumentar entre 1.5 y 2.5 veces al aumentar 10C la temperatura a la que tienen lugar.

La falta de crecimiento a temperaturas bajas se debe a la reduccin de la velocidad de las reacciones bioqumicas y al cambio de estado de los lpidos de la membrana celular que pasan de ser fluidos a cristalinos impidiendo el funcionamiento de la membrana celular.

La muerte celular a altas temperaturas se debe a la desnaturalizacin de protenas y a las alteraciones producidas en las membranas lipdicas a esas temperaturas.

Es importante tener en cuenta que a temperaturas bajas, el metabolismo celular es lento y las clulas paran de crecer; aunque suelen morir. Sin embargo, cuando la temperatura es superior a la ptima, se produce la muerte celular rpidamente y las clulas no pueden recuperar su capacidad de divisin si baja posteriormente la temperatura. Esto permite esterilizar por calor y no por fro.

Hay varios tipos de microorganismos en funcin de sus temperaturas de crecimiento mnima, mxima y ptima.

Tipo de microorganismoTemperatura

mnimaTemperatura

ptimaTemperatura

mxima

Mesfilo5 - 1530 - 4535 47

Psicrfilo-5 + 512 - 1515 20

Psicrtrofo-5 + 525 - 3030 35

Termfilo40 - 4555 - 7560 - 90

Los microorganismos psicrtrofos son mesfilos que pueden crecer a temperaturas bajas. Por tanto, se les puede considerar como psicrfilos facultativos. Esto es importante desde el punto de vista aplicado porque cuando se encuentran contaminando alimentos, son capaces de crecer en condiciones de refrigeracin (4 - 8C) y de producir infecciones en los consumidores del alimento (30 - 35 C).

Desde el punto de vista clnico, los microorganismos capaces de producir infecciones en pacientes son los mesfilos y algunos psicrtrofos ya que sus temperaturas ptimas de crecimiento coinciden con las corporales.

Actividad de agua (aw): Se denomina actividad de agua a la relacin entre la presin de vapor de agua del substrato de cultivo (P) y la presin de vapor de agua del agua pura (P0). El valor de la actividad de agua est relacionado con el de la humedad relativa (HR).

El valor de la actividad de agua nos da una idea de la cantidad de agua disponible metablicamente. Por ejemplo: comparemos el agua pura donde todas las molculas de agua estn libremente disponibles para reacciones qumicas con el agua presente en una disolucin saturada de sal comn (NaCl) donde una parte importante de las molculas de agua participa en la solvatacin de los iones de la sal disuelta. En este ltimo caso, la actividad de agua mucho menor que en el primero. conforme aumenta la cantidad de solutos en el medio, disminuye su actividad de agua.

El agua es un substrato en muchas reacciones bioqumicas (proteasas y lipasas, por ejemplo). Cuando no hay agua disponible, estas reacciones se detienen y el metabolismo se para. Esta falta de agua tambin detiene muchas de las enzimas que podran degradar las estructuras biolgicas. Por ello, las clulas que no crecen por falta de agua no mueren rpidamente: los sistemas de degradacin tampoco funcionan y no las degradan.

Es decir: cuando un microorganismo se encuentra en un substrato con actividad de agua menor que la que necesita, su crecimiento se detiene. Esta detencin del crecimiento no suele llevar asociada la muerte del microorganismo, sino que ste se mantiene en condiciones de resistencia durante un tiempo ms o menos largo. En el caso de las esporas, la fase de resistencia puede ser considerado prcticamente ilimitada.

La gran mayora de los microorganismos requiere valores de actividad de agua muy altos para poder crecer. Los valores mnimos de actividad para diferentes tipos de microorganismos son, a ttulo orientativo, los siguientes: bacterias aw>0.90, levaduras aw>0.85, hongos filamentosos aw>0.80.

Como puede verse, los hongos filamentosos son capaces de crecer en substratos con actividad de agua menor (ms secos) de la que permite el crecimiento de bacterias o de levaduras. Por esta razn se puede producir deterioro de alimentos de baja actividad de agua (por ejemplo, el queso o almbares) por mohos (hongos filamentosos) y no por bacterias.

En funcin de su tolerancia a ambientes con baja aw, los microorganismos que pueden crecer en estas condiciones se clasifican en halotolerantes, halfilos y xerfilos segn toleren o requieran condiciones salinas o hipersalinas, respectivamente.

La reduccin de la actividad de agua para limitar el crecimiento bacteriano tiene importancia aplicada en industria alimentaria. La utilizacin de almbares, salmueras y salazones reduce la actividad de agua del alimento para evitar su deterioro bacteriano.

pH: Es un parmetro crtico en el crecimiento de microorganismos ya que cada tipo de microorganismo tiene un rango de pH en el que puede vivir adecuadamente, fuera de este rango muere.

El pH intracelular es ligeramente superior al del medio que rodea las clulas ya que, en muchos casos, la obtencin de energa metablica depende de la existencia de una diferencia en la concentracin de protones a ambos lados de la membrana citoplsmica.

El pH interno en la mayora de los microorganismo est en el rango de 6,0 a 8,0. Los rangos de pH tolerables por diferentes tipos de microorganismos son, tambin, distintos. Hay microorganismos acidfilos que pueden vivir a pH=1.0 y otros alcalfilos que toleran pH=10.0.

Hay que considerar que, como consecuencia del metabolismo, el pH del medio de crecimiento suele tender a bajar durante el cultivo. Por otra parte, la bajada del pH del medio que producen ciertos microorganismos les confiere una ventaja selectiva frente a otros competidores. As, por ejemplo, las bacterias lcticas que producen grandes cantidades de cido lctico como consecuencia de su metabolismo primario reducen el pH del medio a valores inferiores a los soportables por otras bacterias competidoras (llegan a bajar el pH del medio hasta 4.5). De esta forma, las bacterias competidoras mueren y las lcticas se convierten en la poblacin dominante.

La bajada del pH se puede deber a varios factores, uno de los cuales es la liberacin de cidos orgnicos de cadena corta (frmico, actico, lctico) por ciertas bacterias.

En este sentido, hay que tener en cuenta que la accin bactericida de estos cidos orgnicos de cadena corta es ms potente que la debida nicamente a la bajada del pH que producen. Esto es, los cidos orgnicos de cadena corta son txicos para algunas bacterias por s mismos.

El efecto letal del pH cido sobre los microorganismos tiene aplicacin en la conservacin de alimentos acidificndolos. De esta forma, la adicin de cido actico en forma de vinagre permite la conservacin de alimentos perecederos (escabeches, por ejemplo) y la produccin de cidos en el curso de fermentaciones naturales permite alargar la vida de los alimentos (coles fermentadas, por ejemplo).

Potencial redox: nos indica la capacidad del substrato para aceptar o donar electrones, esto es: sus caractersticas oxidantes o reductoras. Uno de los factores que intervienen en el potencial redox, aunque no el nico, es la concentracin de oxgeno [O2].

Hay microorganismos que requieren ambientes oxidantes para crecer, mientras que otros necesitan ambientes reductores. El metabolismo de ambos tipos de microorganismos presenta diferencias notables. El requerimiento de condiciones oxidantes o reductoras no debe confundirse con la necesidad de presencia o ausencia de oxgeno para que se produzca el crecimiento.

En general, cuando un microorganismo requiere un ambiente oxidante se dice que desarrolla un metabolismo oxidativo (o respirativo) mientras que los microorganismos que requieren ambientes reductores (o menos oxidantes) realizan un metabolismo fermentativo.

Un microorganismo es aerobio cuando necesita oxgeno para vivir y es anaerobio cuando o bien no lo necesita (anaerobios facultativos como las bacterias entricas, o como Saccharomyces cerevisiae; o anaerobios aerotolerantes como las bacterias lcticas) o cuando muere en presencia de oxgeno (anaerobios estrictos como los clostridios).

Hay microorganismos que, aunque viven en presencia de oxgeno, no son capaces de utilizarlo como aceptor final de electrones y deben desarrollar un metabolismo fermentativo (los estreptococos, por ejemplo).

Por otra parte, hay microorganismos que pueden desarrollar ambos tipos de metabolismo. Esto es: en presencia de oxgeno desarrollan un metabolismo oxidativo y en su ausencia, fermentativo. El rendimiento de los procesos fermentativos es menor que el de los respirativos: las bacterias y las levaduras producen menos biomasa cuando crecen fermentando que cuando lo hacen respirando.

En el curso de ciertas reacciones metablicas redox se forman compuestos altamente reactivos (radicales libres, formas superxido) que pueden daar las protenas, membranas y cidos nucleicos produciendo la muerte de las clulas. Las clulas se defienden de estos compuestos reactivos mediante las enzimas de: superxido dismutasa (SOD) y catalasa. Los anaerobios estrictos carecen de SOD y de catalasa o tienen niveles muy bajos de estas enzimas de forma que no pueden sobrevivir en presencia de oxgeno. La deteccin de estas enzimas tiene valor taxonmico.

CONCLUSIONES

El nmero de colonias que crecieron, tanto el tamao como la forma y su dems caracterstica vara segn al ambiente al que fue expuesto ya que las condiciones para el desarrollo no son las mismas. El nmero de colonias que creci en el pelo del grupo #2 fue en exceso ya que probablemente el pelo no ha tenido la debida limpieza. El nmero de colonias que crecieron en la huella se debi al incorrecto aseo de las manos. De acuerdo a lo observado en el laboratorio, los microorganismos estn ms concentrados en algunos ambientes de nuestra facultad, los factores para que haya ms microorganismos en estos lugares pueden ser la humedad, poca iluminacin y poca ventilacin. Por ejemplo en el laboratorio de microbiologa encontramos casi la misma cantidad de colonias que el bao de nuestra facultad, y si vemos las condiciones de estos ambientes, son similares como la humedad, la poca iluminacin y ventilacin en el bao de la facultad (que es evidente), y en el laboratorio de microbiologa que tampoco est demasiado ventilado porque no tenemos ventanas abiertas, tambin est claro que en el laboratorio trabajamos con una gran cantidad de compuestos qumicos y anlisis de aguas servidas que pueden actuar como nutrientes para la formacin de bacterias.

El desarrollo de las bacterias en el caldo nutritivo, se hace notar con la aparicin de precipitados y coloracin de la muestra, esto es porque la pipeta o el tubo de ensayo no estuvieron esterilizados, de aqu concluimos que nuestros instrumentos utilizados en el laboratorio no estn libres de contaminacin a pesar de haberlas lavado con agua destilada.

Cuando se traslada una muestra de un recipiente estril a otro estril el crecimiento de microorganismos es casi nulo o nulo en comparacin, si se usaran recipientes no estriles esto se debe a que los microorganismos no se generan espontneamente como lo dice Pasteur. Pudimos notar que el aire en el ambiente no tiene una concentracin definida de la flora bacteriana, ya que los microorganismos que habitan en l no son autctonos sino que son llevados del suelo o del agua. Tambin se observ (con la teora) que de acuerdo al tipo de bacteria que se requiera sembrar, ser el tipo de medio de cultivo, esto, ya que cada bacteria requiere cierto tipo de nutrientes para subsistir y formar sus colonias, adems de que cierto tipo de medios de cultivo, nos pueden mostrar de acuerdo a su composicin ciertas caractersticas que presentan determinado tipo de bacterias, ya sea por su pH y que este sea indicado por los indicadores de los medios o por que reaccione con ciertos componentes del medio creando colores o formas.RECOMENDACIONES

1. Para realizar un trabajo ms exacto, trate de utilizar materiales de cultivo cuya fecha de vencimiento sea posterior al trabajo de laboratorio.

2. Lavar bien los instrumentos a utilizar para evitar contaminacin.3. El mechero no es eficaz para la esterilizacin del inoculador.4. Esterilizar todo material a utilizar en la preparacin de medios de cultivo.

5. Al introducir las placas Petri a la incubadora, colocarlas invertidas.

6. Tapar bien los tubos de ensayo con algodn al momento de esterilizarlas.

7. Hacer un buen uso del autoclave y horno utilizando todos los instrumentos preventivos para evitar accidentes en el laboratorio.

8. Una vez concluido el laboratorio, lavarse bien las manos y descontaminarlas con alcohol.

9. Se debe tener presente, la adecuada esterilizacin de los instrumentos a utilizar para tener un mejor resultado en los experimentos.BIBLIOGRAFA

MICROBIOLOGIA ROGER STANIER; JOHN INGRAHAM; M. WHEELES; P. PAINTER. Segunda edicin. Editorial Revert S.A. http://es.wikipedia.org/wiki/Conteo_bacteriano http://microbitos.wordpress.com/2010/06/14/morfologia-colonial-bacteriana/ANEXOS

PROCEDIMIENTO A: Agar nutritivo

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PROCEDIMIENTO B: Caldo nutritivo.

/CUESTIONARIO

1. Explique 3 factores que influyen en la flora bacteriana del aire.

Procedentes del suelo y las plantasLa poblacin microbiana del suelo es superior a la de los dems ambientes naturales, por lo que puede considerarse la principal fuente para el aire, en dependencia de la actividad del ambiente y de la cantidad de polvo agitado, entre otros factores. Segn el tipo de suelo variar la microflora del aire.

Los terrenos frtiles y cultivados contienen ms microorganismos que los infrtiles y sin cultivar, por lo que el aire de encima de los primeros ser ms enriquecido microbiolgicamente que el de los segundos. De la misma forma, al aire pueden llegar los microorganismos procedentes de la microflora epiftica de las hojas y tallos.

Entre los microorganismos se tienen:

Bacterias saprfitas pigmentarias: Bacillus subtilis, B. Megaterium, B cereus.

Actinomicetos

Esporas e hifas vegetativas de hongos

Procedentes de animales y personasAl aire pueden llegar, junto con las gotitas de moco, esputo, saliva, etc.; de los animales y de las personas, lanzados al toser, al estornudar y al hablar; los microorganismos que componen la microflora normal de la boca, las fauces, las vas respiratorias superiores de stos o tambin agentes etiolgicos de muchas enfermedades que encuentran un medio propicio para su diseminacin. Los microorganismos suspendidos en el aire estn en forma de aerosol bacteriano (gotas, ncleos goticulares y en polvo).

Entre las enfermedades que se transmiten por esta va se tienen:

Pleuroneumona bovina

Peste aviar

Influenza

Sarampin

Varicela

Rubeola

Tuberculosis

Procedentes del aire del marSe han aislado microorganismos del aire del mar, pero ste suele contenerlos en menor nmero que el de origen continental o terrestre.

Entre los microorganismos se tienen: esporas bacterianas, conidios y fragmentos de hongos, que localizados en estratos superiores pueden ser llevados a grandes distancias y llegan al pas, procedentes de las zonas continentales.

Las composiciones cualitativa y cuantitativa de los microorganismos del aire varan entre grandes lmites y depende de su procedencia, naturaleza y de diversos factores que influyen sobre la misma. El estudio del contenido microbiano del aire debe hacerse al considerar el aire exterior y el aire interior. Adems, la composicin y la cantidad de la microflora del aire varan segn la poca del ao en las diferentes latitudes.

2. Explique 3 enfermedades que son transmitidas por el aire.

La trasmisin area es una va de transmisin estresante para el microorganismo ya que el aire carece de los nutrientes y la humedad neccesarios para permitir una larga supervivencia de muchos patgenos.

Muchas bacterias son transmitidas a travs del aire en gotas o aerosoles producidos al toser, estornudar o hablar. Son especialmente importantes los aerosoles producidos por tos o estornudo porque la gran velocidad con la que se emiten las partculas en estas condiciones reducen mucho el tiempo de trayectoria de la partcula hasta llegar al nuevo husped y, de esta forma, se hace mnima la desecacin.

En general, esta va requiere una estrecha proximidad entre la fuente y el receptor para que se produzca el contagio.

El polvo es un coadyuvante para la transmisin de microorganismos por va area porque permite a stos resistir ms tiempo en suspensin en el aire, y facilitan la entrada en el husped. Este factor (el polvo),es importante en la transmisin de infecciones nosocomiales por esta va.

Enfermedades bacterianas transmitidas por va area: Tuberculosis (Mycobacterium tuberculosis) Faringitis causada por (Streptococcus pyogenes) Neumona causada por (Streptococcus pneumoniae) Difteria (Corynebacterium diphteriae) Legionelosis causada por (Legionella pneumophila) Tosferina causada por Bordetella pertusis.4. Qu grupo de agentes causa la mayor incidencia de enfermedades respiratorias?

Agentes causales%

Rinovirus25-29

Gripe28-35

Parainfluenza8,5-90

Adenovirus22-35

Coronavirus25-63

Mycoplasma pneumoniae3-37

Chlamydophila pneumoniae30

Streptococcus pyogenes2,3-19

Metapneumovirus humano4-91

5. Mencione las caractersticas principales; Rhizompus nigricans ,alternara ,sacharomyze cerevisiae

Rhizopus: Es un gnero de mohos que incluyen especies cosmopolitas de hongos filamentosos hallados en el suelo, degradando frutos y vegetales, heces animales, y residuos.

Las especies de Rhizopus producen esporos asexuales y sexuales. Los esporangiosporos asexuales se producen dentro de una estructura aguzada, el esporangium, y son genticamente idnticos a su padre. En Rhizopus, el esporangio es soportado por una gran columela apofisada, y el esporangiforo asoma entre rizpodes distintivos. Cigosporos negros se producen despus de dos fusiones compatibles de micelios durante la reproduccin sexual. Y hacen colonias que pueden ser genticamente diferentes de sus padres.Diagrama equemtico de Rhizopus spp.

Algunas spp. de Rhizopus son agentes oportunistas de cigomicosis humana. Pueden causar serias (y con frecuencia fatales) infecciones en humanos y en animales debido a su rpido crecimiento a relativamente altas temperaturas. Algunas especies son patgenos vegetales. Dos son usados en fermentacin: Rhizopus oligosporus, en la produccin de tempeh, un alimento fermentado derivado de grano de soja; R. oryzae se usa en la produccin de bebidas alcohlicas, en partes de Asia y de frica.

Alternara: Es un hongo de los que se registran con mayor frecuencia en las muestras de aire atmosfrico de exteriores. Habita en hojas cadas, plantas y material orgnico en descomposicin, y sus esporas flotan en el aire.Se registra todo el ao, pero ms en los das calurosos y hmedos. Su presencia en el interior de las viviendas es reflejo de su concentracin exterior y la proporcin encontrada entre aire exterior e interior es de 4 a 1 aproximadamente.Se le asocia indiscutiblemente con la produccin de cuadros de rinoconjuntivitis alrgica y asma bronquial y aisladamente a neumonitis por hipersensibilidad.A diferencia de los plenes , que producen principalmente rinoconjuntivitis alrgica, la alternaria produce con mayor frecuencia la asociacin de esta con asma , sobre todo en nios y en situaciones de exposicin como lo son lugares hmedos con material orgnico Ej.: pastizales jardines , regados etc.Los sntomas por alergia a este hongo son ms frecuentes en primavera tarda y otoo.

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Alternaria sp S. cerevisiae:es uno de los modelos ms adecuados para el estudio de problemas biolgicos. Es un sistema eucariota, con una complejidad slo ligeramente superior a la de la bacteria pero que comparte con ella muchas de sus ventajas tcnicas. Adems de su rpido crecimiento, la dispersin de las clulas y la facilidad con que se replican cultivos y aslan mutantes, destaca por un sencillo y verstil sistema de transformacin de ADN. Por otro lado, la ausencia de patogenicidad permite su manipulacin con las mnimas precauciones.

-S. cerevisiaees un sistema gentico que, a diferencia de la mayora de los otros microorganismos, presenta dos fases biolgicas estables: haploide y diploide. La fase haploide permite generar, aislar y caracterizar mutantes con mucha facilidad, mientras que en la diploide se pueden realizar estudios de complementacin. Una levadura haploide contiene 16 cromosomas que varan en tamao de 200 a 2200 kilobases (kb).

-Una ventaja adicional de este microorganismo consiste en que se conoce la secuencia completa de su genoma y se mantiene en constante revisin. Ello ha permitido la manipulacin gentica de los casi 6600 genes que codifica el genoma de levadura, el uso extensivo de micromatrices de ADN para investigar el transcriptoma y estudios a escala genmica de, entre otros muchos aspectos, la expresin gnica, localizacin de protenas y la organizacin funcional del genoma y el proteoma.

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DATE \@ "yyyy" \* MERGEFORMAT 2014

LUIS HUAYANAY CONDE20111313A

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