ENSAYOS DE RECONOCIMIENTO Las saponinas esteroides se pueden reconocer fácilmente en los análisis...

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Las saponinas pueden ser de naturaleza esteroide o triterpénica, por tanto de carácter poco polar. Se encuentran en plantas y se caracterizan por sus propiedades detergentes. Saponinas esteroidales son de gran interés e importancia por su relación con compuestos como las hormonas sexuales, cortisona, esteroides diuréticos, vitamina D y heterósidos cardíacos. Por este motivo, algunos son utilizados como material de partida para la síntesis de estos compuestos. En este sentido, destaca el uso de la diosgenina, saponina que se obtiene, principalmente a partir de las partes subterráneas de distintas especies de lianas herbáceas tropicales del género Dioscorea. saponinas triterpenoideales Se encuentran extensamente distribuidas, y constituyen la mayoría de las saponinas encontradas en la naturaleza: una gran variedad de ellas difieren únicamente en el número y tipo de unidades de azúcares unidas a las sapogeninas; generalmente pertenecen al grupo de la B-amirina, otras pocas son derivadas de la amirina, del lupeol y del grupo de triterpeno tetraciclios. Reacciones para el reconocimiento de saponinas Teniendo en cuenta la propiedad tensioactiva de las saponinas se pueden reconocer mediante la formación de espuma ,Ya que al agregar agua, las saponinas disminuyen la tensión superficial de ésta, aumentando la capacidad de penetración del agua lo cual facilita la formación de pequeñas gotas y la respectiva formación espuma .en esta prueba se puede reconocer de la presencia de saponinas esteroides. Las saponinas se pueden reconocer a través de reacciones colorimétricas como.

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Las saponinas pueden ser de naturaleza esteroide o triterpnica, por tanto de carcter poco polar. Se encuentran en plantas y se caracterizan por sus propiedades detergentes.Saponinas esteroidalesson de gran inters e importancia por su relacin con compuestos como las hormonas sexuales, cortisona, esteroides diurticos, vitamina D y hetersidos cardacos. Por este motivo, algunos son utilizados como material de partida para la sntesis de estos compuestos. En este sentido, destaca el uso de la diosgenina, saponina que se obtiene, principalmente a partir de las partes subterrneas de distintas especies de lianas herbceas tropicales del gnero Dioscorea.saponinas triterpenoideales Se encuentran extensamente distribuidas, y constituyen la mayora de las saponinas encontradas en la naturaleza: una gran variedad de ellas difieren nicamente en el nmero y tipo de unidades de azcares unidas a las sapogeninas; generalmente pertenecen al grupo de la B-amirina, otras pocas son derivadas de la amirina, del lupeol y del grupo de triterpeno tetraciclios. Reacciones para el reconocimiento de saponinas Teniendo en cuenta la propiedad tensioactiva de las saponinas se pueden reconocer mediante la formacin de espuma ,Ya que al agregar agua, las saponinas disminuyen la tensin superficial de sta, aumentando la capacidad de penetracin del agua lo cual facilita la formacin de pequeas gotas y la respectiva formacin espuma .en esta prueba se puede reconocer de la presencia de saponinas esteroides.Las saponinas se pueden reconocer a travs de reacciones colorimtricas como.Reaccin de Liebermann-Burchard Por la porcin esteroide que poseen las saponinas, esta reaccin puede confirmar su presencia por ejemplo en muestras y extractos vegetales, solamente dan un resultado positivo los que tengan grupos dienos conjugados reales o potenciales. Sin embargo otras saponinas como las triterpenoides tambin dan positiva lareaccion .Por lo general, las esteroidales en esta prueba manifiestan colores que van desde el azul hasta el verde y las triterpnicas, rosado, rojo o violeta. La presencia de carbohidratos ligados puede reconocerse fcilmente mediante reacciones como el de Molisch, el de la Antrona, , por medio de un anlisis por cromatografa en papel, utilizando carbohidratos de referencia.Reactivos para determinar saponina Lieberman-Burchard es unreactivoutilizado en la prueba colorimtricapara detectar la saponina, lo que da un color verde intenso.Este color comienza como u prpura, despus un color de rosa y progresa a travs de un color verde muy oscuro luego un color verde claro.El color es debido al grupo hidroxilo (-OH) de la saponina que reacciona con los reactivos y el aumento de la conjugacin de la insaturacin en el anillo fusionado adyacente.Dado que esta prueba utilizaanhdrido acticoycido sulfricocomoreactivos, Reactivo carr Price , una reaccin de tricloruro de antimonio con vainillina y H2SO4 para la generacin de grupos cromforos en saponinas, los cuales son visibles en longitudes de onda alrededor de 455 a 460 nm. Sin embargo, pese a que se sabe que los cromforos producidos mediante esta reaccin son caractersticos, stos no absorben a la misma longitud de onda.

EXTRACCION Y PURIFICACION Las saponinas por su carcter glicosdico, son insolubles en solventes apolares. Para obtenerlas de las plantas o animales, el material seco y molido se desengrasa previamente con un solvente apolar (generalmente ter de petrleo o n-hexano). El marco se extrae con etanol, metanol, n-butanol, mezclas de diferentes proporciones de estos alcoholes y agua. El extracto acuoso (libre de alcohol) se liofiliza o se concentra en rotavapor, y se hace pasar por resinas de intercambio inico a fin de eliminar sustancias inicas. El eluato acuoso se pasa luego a travs de materiales como el Sephadex LH-20 para separar las saponinas de otras molculas como pptidas y macromolculas que dificultan su purificacin cromatogrfica. Una vez obtenidas las saponinas crudas, se pueden purificar por cromatografa en columna o lquida de alta eficiencia. En el caso de la cromatografa en columna, se puede utilizar slica gel y eluentes como los BAW y mezclas Cloroformo-Metanol-Agua. Para el anlisis por cromatografa en capa fina pueden utilizarse condiciones como las reportadas para el anlisis de saponinas en frutas.

EXTRACCION Y PURIFICACION DE TRITERPENOIDESSiendo en general compuestos neutros se hace difcil planificar una estrategia de separacin su solubilidad varia de acuerdo a los sustituyentes y la relacin de grupos polares va tomos de carbono del esqueleto los representantes pocos oxigenados Sern mas liposlubles Y por lo tanto recuperavle del material vegetal con ter , diclorometano-Los triterpenoides que se encuentra bajo la forma de glicosidos son altamente solubles en agua , lo que dificulta su separacin de azcares , polihideoxifenoles y otros compuestos polares . la seleccin de un solvente de polaridad intermedia etanol ,metanol , permite aislarlos como un crudo total del material biolgico .este crudo deber ser fraccionado y para ellos la tcnica generalmebte aplicada es la cromatografia en sus diferentes variantes , si se trata dw saponinas altamente solubles en agua la separacin puede llevarse a cabo mediante la cromatografa en fase reversa y contracorriente , por otro lado el crudo total se hidrolizar y ka parte no saponificable las geninas se aislan del medio acuoso por extraccin con un solvente orgnico en el aislamiento de triterpenoifes superiores es aconsejable desgrasar previamente el material biolgico y sobre la fraccion de grasa comprobar la ausencia de triterpenoifes antes de desecharla La separacin cromatografca generalmente se lleva a cabo en columna de adsorcin y el proceso se sigue por TLC Y Los reactivos reveladores comprenden vapores de yodo y reactivos de rociado