8/17/2019 GUÍA DE LABORATORIO N° 2 MITOSIS

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GUÍA DE LABORATORIO N° 2MITOSIS

OBJETIVO: Identificar etapas de la mitosis mediante la observación de los meristemos de la raíz de la cebolla

INTRODUCCIÓN

La mitosis es una forma de reproducción celular en la cual se originan dos células hijas de una sola célula madre,las células hijas reciben el mismo número de cromosomas que tiene la célula madre.

FASES DE LA MITOSIS

FASE ESQUEMA CARACTERISTICAS

PROFASE

- El material cromosómico se condensa y empieza a aparecer comobarras cortas.- Cada cromosoma consta de dos hebras llamadas cromátidas, cadapar de cromátidas se mantiene unido por un centrómero.- A medida que los cromosomas se hacen visibles, la membrananuclear y el nucléolo se desintegran gradualmente y aparece unanueva estructura: el huso mitótico, que es una estructura tridimensional

de forma elíptica.- El huso mitótico son microtúbulos que se extienden por la célula,estas guían a los cromosomas en sus movimientos durante la mitosis.

METAFASE

- Etapa durante la cual los pares de cromátidas se mueven hacia elcentro de la célula.- Las cromátidas se disponen en una fila formando ángulos rectos conlas fibras del huso mitótico.- El centrómero de cada par de cromátidas se pega a una fibra del husomitótico.- Durante la metafase las cromátidas son gruesas y a menudo seenroscan unas sobre otras.

 ANAFASE

- El centrómero de cada par de cromátidas se divide.- Los pares de cromátidas se separan en cromosomas individuales.

- Los cromosomas separados se dirigen hacia los polos o extremos delhuso mitótico.- Cada cromosoma se mueve con el centrómero al frente. - Todos loscromosomas se mueven hacia los polos casi al mismo tiempo.- Un mismo número de cromosomas se moverá hacia cada polo de lacélula.

TELOFASE

- Los cromosomas toman nuevamente forma de hilos, se alargan yquedan como estaban al inicio de la profase.- El huso mitótico se rompe, reaparece el nucléolo y se forma unamembrana nuclear alrededor de cada masa de cromatina.- Se forman dos células hijas idénticas a la madre (células diploides).- CITOCINESIS: Es la división o rompimiento del citoplasma parapermitir de las nuevas células y ocurre durante la telofase.

MATERIALES

Bulbos de Allium cepa (cebolla) germinados, microscopio óptico, cápsulas de Petri, porta objetos, cubre objetos,agujas de disección, bisturí, tijera, pinzas, papel absorbente o toalla, ácido acético, colorante aceto-orceína, ácidoclorhídrico (HCL) al 10% y agua destilada.

PROCEDIMIENTO ANTES DE LA PRACTICA: Tres o cuatro días antes de hacer la práctica se pone un bulbo de cebolla en un vasode precipitados lleno de agua, de tal manera que la parte inferior del mismo esté en contacto con el agua. no

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permita que la cebolla caiga dentro del recipiente sino que quede suspendida sobre el agua (si es necesario, inserteunos palillos de dientes en los lados de la cebolla para que la sostengan).

Al cabo de esos tres o cuatro días se habrán formado numerosas raicillas, cuyos ápices se utilizarán en estapráctica. Conviene realizar la práctica cuando las raicillas todavía no han crecido demasiado. Se d ebe cambiar elagua del frasco por agua limpia, al menos dos veces, a los 3 y 4 días. La raíz de la cebolla debe de estar sumergidaen agua hasta el momento de realizar la práctica.

EN LA PRÁCTICA:

1. Con una tijera se corta el extremo de varias raicillas, procurando que su longitud sea de unos 2 a 3 mm.,ya que es en esta zona de la raíz donde se encuentran las células en división

2. Enjuague los ápices de cebolla (fijados) en agua destilada por 30 segundos.3. Coloque las raíces en un plato Petri que contenga unos 3mL de HCl 1% por 7-8 min. (esto se hace para

romper la pared celular).4. Mientras transcurre el tiempo anterior, corte y conserve la porción del ápice de raíz que posea un tejido

blanquecino (casi 2-3 mm del extremo de la raíz) y deseche el resto.5. Transferir los ápices a agua destilada y dejarlos allí 30 segundos (enjuague).6. Coloque el tejido sobre un portaobjetos e inmediatamente agregue dos gotas de azul de metileno sobre

éste.7. Coloque un cubreobjetos sobre el tejido y caliente la muestra suavemente por 1 minuto, por medio detoques intermitentes sobre la superficie de un plato de calentamiento (durante este tiempo vigile que eltejido permanece humedecido con el colorante, no permita que hierva ni que se seque; agregue máscolorante si es necesario). Esta etapa es opcional (el calentamiento intensifica la tinción)

8. Coloque un trozo de papel absorbente sobre el cubreobjetos; presione fuerte y cuidadosamente por mediode un borrador de lápiz (esta técnica se llama "extendido por aplastamiento"). Recuerde que mientras estémás aplastado, las células se separarán más unas de las otras y se encontrarán en el mismo plano,distinguiéndose mejor las distintas etapas de mitosis

9. Después del aplastamiento, si es necesario, levante el cubreobjetos con la ayuda de una aguja dedisección y agregue una gota adicional de azul de metileno; coloque nuevamente el cubreobjetos sobre lamuestra

10. Observe al microscopio (primero con el objetivo 10x localice el área adecuada, luego pase a 40x paraobservar con detalles).

11. Encuentre las cuatro etapas de la mitosis, además observe la apariencia de las células que se encuentranen interface (aquellas que no están en mitosis). Realiza un conteo de campo.

INFORME DE LABORATORIO  – HOJAS BLANCAS

  PRIMERA HOJA:o  Copia el título del laboratorioo  Nombre y cursoo  Copia el objetivo del laboratorioo  Lee y copia la introducción dibuja con colores cada una de las fases del ciclo celular

  SEGUNDA HOJAo  PROCEDIMIENTO: Construye un mapa conceptual donde se evidencien el procedimiento a

desarrollar.

 TERCERA, CUARTA Y QUINTA HOJA

o  RESULTADOS Y DISCUSIÓN: Dibuja lo observado en cada uno de los objetivos, identificandocada fase de la mitosis.

  SEXTA HOJAo  CONCLUSIONES: construye como mínimo tres conclusiones de lo que aprendiste en la práctica

de laboratorioo  BIBLIOGRAFÍA: enuncia como mínimo tres bibliografías que usaste para desarrollar el informe de

laboratorio.