EVALUACION DE LA HEMOSTASIA Y LA COAGULACION DE LA SANGRE

TIEMPO DE COAGULACIÓN

METODO DE LEE – WHITE

Reactivos y Aparatos:

Tubos de prueba de 8 mm diámetro, limpios y secos

Agujas y jeringas para uso endovenosos descartables, estériles.

Baño maría 37 °C

Reloj cronómetro

Procedimiento:

Obtenemos 3 ml de sangre venosa y anotamos la hora exacta (Para controlar el tiempo de inicio)

Inmediatamente transferimos 1.5 ml de sangre a cada uno de dos tubos y los colocamos en Baño María a 37°C. Luego de tres min. de reposo ir sacando cada uno de los tubos e ir inclinándolos suavemente en 90° cada minuto, hasta que no se observe desplazamiento de sangre y pueda ser completamente invertido el tubo sin caerse la sangre.

Anotar el tiempo.

Resultado:

Inicio para el tiempo de coagulación en el tubo de prueba:

Tiempo de coagulación en tubo de prueba:

Tiempo de coagulación en la Jeringa:

Tiempo de coagulación en lámina porta objetos:

Valores referenciales:

Con este método de Lee White los valores normales para hombres y mujeres varía entre: 5 a 8 min.

Los valores referenciales dependen del diámetro del tubo empleado:

Usando tubos de diámetro interno de 11 mm: 9 a 15 min. Usando tubos de diámetro interno de 8 mm: 6 a 10 min.

Existen otros métodos para determinar el tiempo de Coagulación por ejemplo el método del portaobjetos: Valor normal de 2 a 8 minutos. Método del Tubo Capilar: Valor referencial de 3 a 7 min.

Análisis:

El tiempo que tarda este proceso está en relación con el sistema de procoagulantes e inhibidores fisiológicos o adquiridos, que influyen en la formación de dicho coágulo.Este tiempo de coagulación in vitro reflejará mejor la eficacia del sistema in vivo, cuanto menos se modifique o manipule esta sangre (contacto con el vidrio, burbujas de aire, detergentes, etc.).El tiempo de coagulación ha sido un método útil en el control de la terapia anticoagulante con heparina, reemplazado actualmente por otras pruebas de mayor sensibilidad y reproducibilidad.Un tiempo de coagulación normal no descarta la existencia de un trastorno de la coagulación, pero un tiempo prolongado es siempre índice de un defecto severo de la misma, que puede deberse a una deficiencia de cualquiera de los factores que intervienen en la formación del coágulo de fibrina, con excepción de una deficiencia pura de los factores VII y XIII. Sin embargo, el método es mucho más sensible a los defectos de los factores que intervienen en la activación por contacto y en la formación del activador intrínseco de la protrombina.

Tiempo de Sangría

METODO DE DUKE

Reactivos y Aparatos:

Cronómetro

lancetas descartables

desinfectante de piel

papel de filtro.

Procedimiento:

Desinfectar el lóbulo de una oreja y punzar con la lanceta descartable standard de manera que la sangre fluya libremente, gota a gota, sin necesidad de exprimir la piel.

Anotar el tiempo de aparición de la primera gota y, luego con el papel de filtro ir secando cada gota, cada 30 segundos sin tocar la piel, hasta que deje de sangrar.

Anotar el tiempo transcurrido.

Resultado:

Valores Referenciales: 1 a 3 MIN

Análisis:

En este examen de sangre se analiza qué tan rápido se cierran los vasos sanguíneos pequeños en la piel para detener el sangrado. El tiempo de

sangrado constituye la mejor prueba para detectar alteraciones de la función plaquetaria y es uno de los principales estudios en los trastornos de la coagulación. La duración del sangrado de un capilar depende de la calidad y cantidad de plaquetas y de la vasoconstricción.

TIEMPO DE PROTROMBINA Y TIEMPO DE TROMBOPLASTINA PARCIAL

Materiales:

Soluplastin (Tromboplastina cálcica) Casa Wiener Lab. (Rosario. Argentina)

Tubos de ensayo de vidrio de 12 x 75 mm.

Cronómetro

Baño María 37°C

Asa de alambre Níquel Cromo Nuevas (Bacteriológicas)

Micropipetas 100 y 200 lambdas.

Tiempo de Protrombina

Pre incubar el plasma: en un tubo de ensayo,marcado (Px) colocar 1 ml del plasma en BM 37 °C, por 3 min. (El saldo del plasma refrigerarlo).(No pre incubar más de 10 min.)

Pre incubar el Soluplastin: en otros dos tubos de ensayo colocar 0.2 ml de Soluplastin en cada uno y colocar en BM a 37°C por 3 min. (No pre incubar más de 10 min.).

Pipetear 100 lambdas del plasma Pre incubado y añadir rápidamente al tubo conteniendo los 0.2 ml de Soluplastin, disparando simultáneamente el cronómetro.

Previo al tiempo estimado de coagulación sacar el tubo del baño e inclinar suavemente por una o dos veces por segundo y detener el cronómetro en el momento exacto de la aparición del coágulo, que se manifestara por la aparición de muy discretos hilos de fibrina, en ese instante precisamente para el cronómetro.

Repetir por triplicado esta prueba. Calcular el valor promedio en segundos.

Valores Referenciales:

11- 12 sgs. + - 2 segs del control Normal El control Normal estará entre 10 a 13 segundos +- 0.5 2DS. Con estos valores en segundos a través de una curva de calibración podemos expresarlos en porcentaje de actividad protrombinica en relación a los valores normales: examinemos el siguiente cuadro que muestra los valores porcentuales:

Resultado:

Tiempo promedio: 14 segundos = 55%

Análisis:

El análisis de TP se puede utilizar para evaluar la actividad de cinco factores de coagulación diferentes (I, II, V, VII y X). El tiempo de coagulación se alarga si alguno de estos factores no se encuentra, es deficiente o defectuoso. Si el proceso de coagulación de la sangre lleva mucho tiempo durante un análisis de TP, puede ser una señal de lo siguiente:

a) una deficiencia hereditaria de los factores de coagulación (tales como trastornos hemorrágicos, hemofilia y la enfermedad de von Willebrand)

b) una enfermedad hepática (ya que la mayoría de los factores de coagulación se generan en el hígado)

c) una deficiencia de vitamina K (ya que la vitamina K es un componente necesario de varios factores de coagulación)

d) una terapia con warfarina, un medicamento anticoagulantee) ciertas afecciones médicas en las cuales el cuerpo utiliza o destruye los

factores de coagulación demasiado rápidof) El tiempo de protrombina sirve para analizar la vía extrínseca.

DETERMINACIÓN DEL TIEMPO DE TROMBOPLASTINA PARCIAL ACTIVADO.

Se procede extraer 4,5 cc de y se le añade 0,5 cc de anticoagulante , luego lo llevamos a centrifugar.

Observación:

Análisis:

Los valores por debajo de 20 segundos o por encima de 40 s (dependiendo de los rangos locales de referencia) generalmente se consideran anormales. Un tiempo de aPTT corto tiene poca relevancia clínica. Un tiempo prolongado de aPTT puede indicar:

a) Uso de heparina (o contaminación de la muestra)b) Presencia de un anticuerpo antifosfolípidos (sobre todo en el lupus

anticoagulante, una afección que paradójicamente aumenta la propensión a la trombosis)

c) Una deficiencia en un factor de coagulación, específica (por ejemplo, el factor VIII en la hemofilia de tipo A) o general (por ejemplo, debido a la carencia de vitamina K).

d) El tiempo de tromboplastina sirve para analizar la vía intrínseca. a)

Grupos Sanguíneos y Factor RH

Materiales

Materiales y Reactivos Suero monoclonal Anti A

Suero monoclonal Anti B

Suero monoclonal Anti AB

Lámina excavada o lámina portaobjetos

Lancetas descartables

Muestra de sangre Algodón y desinfectante

Se extrae sangre del alumno y se coloca una gota de sangre en la Lámina excavada o lámina portaobjetos, luego vemos la reacción a los sueros que le añadimos

Resultado:

Grupo Sanguíneo A, factor RH positivo.

Análisis:

La aglutinación se produce por la actuación de los anticuerpos (Acs) del suero o aglutininas sobre los antígenos (Ags) de los glóbulos rojos o aglutinógenos. De acuerdo a la existencia de los diversos aglutinógenos y aglutininas los individuos pueden clasificarse dentro de 4 grupos sanguíneos básicos.

En el caso del grupo Sanguíneo A, posee Aglutinògeno A y aglutinina beta. Que al entrar en contacto con el suero monoclonal A (suero anti A) produce la aglutinación.

Rh Positivo, lo que significa la presencia del Aglutinógeno D en sus eritrocitos.