PRUEBAS BIOQUIMICAS

Las pruebas bioquímicas consisten en distintos test químicos aplicados a medios biológicos, los cuales, conocida su reacción, nos permiten identificar distintos microorganismos presentes. Determina la actividad metabólica a partir de un sustrato que se incorpora en un medio de cultivo y que la bacteria al crecer incorpora o no. S e utilizaron las siguientes pruebas bioquímicas y su correspondiente metodología para su realización:

Citrato SimmonsInocular el tubo con agar citrato de Simmons realizando siembra por estría tomando una colonia del microorganismo en estudio. Incubar a 37 grados C por 24 horas. Inocular el medio realizando siembra mixta del microorganismo en estudio, incubar a 37 grados C por 24 horas. DianayJulian Bioquimicas (2016).

UreaInoculación en caldo, incubar a 37º C por 24 horas. DianayJulian Bioquimicas (2016).

SimInocular al medio realizando siembra por picadura hasta la mitad del medio a partir del cultivo del microorganismo en estudio. Incubar 24 horas a 37 grados C. al finalizar este periodo añadir 5 gotas del reactivo de Kovacs por la pared del tubo. DianayJulian Bioquimicas (2016).

LiaInocular realizando siembra mixta con doble picadura a partir de una colonia del cultivo del microorganismo en estudio e incubar 24 horas a 37 grados C. DianayJulian Bioquimicas (2016).

Caldo triptófanoInocular al medio realizando siembra por picadura hasta la mitad del medio a partir del cultivo del microorganismo en estudio. Incubar 24 horas a 37 grados C. al finalizar este periodo añadir 5 gotas del reactivo de Kovacs por la pared del tubo. DianayJulian Bioquimicas (2016).

A las pruebas bioquímicas mencionadas anteriormente se anexan sus resultados, para la determinación del tipo de microorganismo Prueba Resultado Descipcion resultadoCitrato Simmons negativo Escherichia coliTsi A/A Escherichia coli

Urea negativoEscherichia coli, salmonella, shigella

Sim negativo Escherichia coliLia K/A Salmonella

Caldo triptofano negativo Klebsiella pneumoniae

DianayJulian Bioquimicas (2016). ENTEROBACTERIACEAE. Galeón.com: hispavista. http://dianayjulian.galeon.com/

METODOLOGIA BASICA PARA PRUEBAS LAS PRUEBAS BIOQUIMICAS (Citrato Simmons, Urea, Sim, Lia, Clado triptófano)

Inocular realizar siembra en el medio incubar a 37°c

esperar 24 horas

añadir gotasde reactivo Kovacs (solo para Sim y caldo triptofano)

Realizar otra inoculacion con medio realizado (solo para citrato

simmons)

Volver a incubar a 37°c y esperar 24 horas (solo para citrato simons)

obtencion de resultados