RENCUENTO DE HETEROTROFOS

RECUENTO DE MICROORGANISMOS HETEROTROFOSI. INTRODUCCIN:

Las bacterias heterotrficas (hetertrofas) se definen como aquellas bacterias que usa compuestos del carbono orgnico como fuente de energa y el carbono para su crecimiento, en contraposicin con las bacterias autotrficas que utilizan los compuestos inorgnicos como fuente de energa y el C02, como fuente de carbono. Esta definicin de bacteria hetertrofa es amplia e incluye tanto a las bacterias saprofticas como a las patgenas. Por lo tanto, tanto las bacterias que causan como las que no causan enfermedades son hetertrofas.

Un organismo hetertrofo es aquel que obtiene sus elementos alimenticios y estructurales de otros organismos y tambin en la mayora de los casos obtiene su energa de esta manera. Algunos de estos elementos son;carbonoynitrgenode lamateria orgnica-glcidos, lpidos, protenas y cidos nucleicos. Al grupo hetertrofo pertenece elreino animal, loshongosy gran parte de lasbacteriasy de lasarqueas.

En el organismo hetereotrofo las sustancias nutritivas son materias orgnicas ricas enenergacarbohidrato,lpido,protena, pues los seres hetertrofos son incapaces de transformarmateria inorgnicaen orgnica. Estos organismos por tanto, dependen de la materia orgnica viva o muerta sintetizada por los organismos auttrofos, o de otros seres hetertrofos.

II.- OBJETIVOS

Conocer el procedimiento de recuento de hetertrofos mediante el mtodo de la placa fluida.

Conocer el nmero de microorganismos heterotrficos viables que contiene una muestra de agua.

Contribuir con el procesamiento del proyecto social.III.- FUNDAMENTO:Historia de la tcnica de recuento en placas En los Estados Unidos se han usado mtodos para detectar y enumerar las bacterias en el agua desde el inicio de la microbiologa sanitaria a principios del siglo XX. Adems de enumerar las bacterias indicadoras (coliformes totales y fecales, Escherichia coli), se ha usado un procedimiento del recuento de bacterias para calcular la densidad general de la poblacin bacteriana en el agua.El mtodo de placa difusa (MPD) Este mtodo, que es un procedimiento alternativo al RHP, evita la tensin del calor del agar licuado temperado usado en el mtodo de placa fluida. Las colonias de bacterias crecen en la superficie del agar en lugar de estar contenidas en el agar, como sucede en el procedimiento de placa fluida, lo cual favorece la reproduccin de bacterias aerobias que no se podran desarrollar bien o no se desarrollaran del todo si estuvieran contenidas en el agar. Por lo general, cuando se aplica un perodo de incubacin no mayor de 3 das, se produce un mejor desarrollo de la pigmentacin en las colonias de bacterias, independientemente del medio usado. Las placas se pueden preparar previamente y almacenar hasta por una semana mientras que el escape de agua por placa no exceda los 2 3 g. El volumen mximo de muestra que se puede examinar es 1,0 ml, pero generalmente es recomendable examinar un volumen de 0,1 ml a 0,5 ml. Cuando se dispone de medios de crecimiento ms ricos, el crecimiento disperso de colonias de algunos tipos de bacterias puede ser un problema, pero esto no sucede si se usa el medio R2A (2).El mtodo de placa fluida para el anlisis del RHP de las muestras de agua presenta algunas desventajas que limitan la recuperacin de las bacterias. Como usa agar licuado a una temperatura de 44 a 46 C, las bacterias en la muestra de agua estn expuestas a la presin del calor, lo cual puede hacer que los microorganismos no sean viables. Adems, como se emplea un medio rico en nutrientes, es probable que las bacterias fisiolgicamente estresadas o daadas no se desarrollen debido a alguna forma de inhibicin metablica. Tanto la presin del calor como el medio de crecimiento rico producen una recuperacin reducida de las bacterias. Otra desventaja es que mediante este mtodo slo se puede analizar un mximo de 1,0 ml de muestra.IV. MATERIALES:

Muestra: Agua de Pileta comunal del distrito de San Francisco de Paredones.

Pipetas de 1 ml 10 ml

Placas

Frascos

Botellas

Agar Plat CountV. PROCEDIMIENTOS:Se realiz el mtodo de placa fluida

1. Homogenizar la muestra (agitar 25 veces la muestra de agua antes de verter en placa)2. Con una pipeta estril aplicar la cantidad de muestra respectiva para cada dilucin.

Para la dilucin 10-1 se toma 0.1 ml de la muestra original y se vierte en placa

Para la dilucin 10-2 se diluye 0.5ml de la muestra en 50ml de agua destilada estril luego se vierte 1ml de la dilucin en placa

Para la dilucin 10-3 se diluye 0.5ml de la muestra en 50ml de agua destilada estril luego se vierte 0.1ml de la dilucin en placa.3. Inmediatamente verter el medio de cultivo (Agar de recuento-Agar Plate-Count).

4. Mover las placas homogneamente para que la muestra se extienda por toda la placa. Luego dejar que se solidifique el medio.

5. Incubar a temperatura ambiente y a 37C x 24 a 48 horas6.Luego se midi el pH de la muestra de agua.

V. RESULTADOS:Para el recuento se toma las placas cuyo nmero de colonias este en entre 30-300 y se multiplica por el factor de dilucin.

TAmbiente37C

DilucinUFCUFCUFC/ml

10-1493638--

10-2507964,565 x103

10-3165--

VI.- CONCLUSIONES:

Teniendo en cuenta los objetivos de la prctica se logr determinar la presencia de hetertrofos en el agua.

Se logr determinar la calidad higinica del agua no es apta para el consumo humano ya que sobrepasa el nivel mximo de concentracin de hetertrofos que establece la norma. Se logr determinar la alcalinidad en la que se encontraba la muestra de agua.VII.-REFERENCIA BIBLIOGRAFICA:

Madigan, M., J. Martinko y J. Parker, BROCK BIOLOGIA DE LOS MICROOORGANISMOS-8va Edicin-Ed. Prentice May-1064pp.

Donald J. Reasoner, Ph.D. Recuento heterotrfico en placas Divisin de Contaminantes Microbiolgicos, WSWRD, NRMRL Agencia de Proteccin Ambiental de los Estados Unidos Cincinnati, Ohio 45268. Tomada el 12 de junio del 2015 de http://www.bvsde.paho.org/bvsala/e/fulltext/recuento/recuento.pdf RENCUENTO DE HETEROTROFOS

MICROBIOLOGIA ACUATICA

2015-I

UNIVERSIDAD NACIONAL

PEDRO RUIZ GALLO

FACULTAD DE CIENCIA BIOLOGICAS

ALUMNA:HERNANDEZ CUEVA LIZ

CODIGO : 110057- H

DOCENTE: FRANCIA ARANA OLGA

pH:

8

PLACAS INCUBADAS A TEMPERATURA AMBIENTE

PLACAS INCUBADAS A 47 C