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7/25/2019 CORRECCIÓN CROMATOGRAFÍA
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RESULTADOS
Cromatografía de capa fina
Tabla 2. Resultados de la cromatografía.
Muestra Centímetros recorridos (A) Punto de euci!n(")
#icina 0,5 5,3
$cido Asp%rtico 0,3 5,3
&soeucina 2,3 5,5
Muestra pro'ema 0,5 - 2,4 5,5
Calculo del factor de retención Rf:
Rf = A
B
Donde A es la distancia desde el punto de aplicación al centro de la manchadejada por el aminocido ! " es distancia desde el punto de aplicación al frentede elución#
Rf Glicina=0,5
5,3=0,094
Rf Á cido aspá rtico=
0,3
5,3=0,057
Rf Isoleucina=2,3
5,5=0,42
Rf 1 Muestra problema=0,5
5,5=0,091
Rf 2 Muestra problema=2,4
5,5=0,44
Tabla 3: Escala de hidropatía para residuos de aminoácidos [5] .
Amino%cido Cam'io de energía i'repara transferencia ( mo*+)
&soeucina 3,$
#icina 0,%&
$cido Asp%rtico -3,0
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&magen ,- Representaci!n de as pacas cromatogr%ficas.
A/$L&S&S DE RESULTADOS
Cromatografía de capa fina
Antes 'ue nada ca(e aclarar 'ue los resultados 'ue a continuación se
anali)aran fueron o(tenidos por otro *rupo de la(oratorio, !a 'ue de(ido a
errores en el se*uimiento del m+todo estipulado los resultados o(tenidos por
nuestro *rupo fueron (astante incorrectos#
a t+cnica utili)ada en esta prctica permite separar las mol+culas de una
sustancia, en a'uellas 'ue son a(sor(idas por el *el de slice ! las 'ue son
arrastradas por la columna de la me)cla de sol.entes, distin*ui+ndose as entre
la fase estacionaria 'ue la constitu!e la celulosa ! la mó.il 'ue la constitu!en
los disol.entes, dependiendo de la solu(ilidad 'ue tiene cada aminocidos con
respecto am(as fases, as se o(ser.a su mo.ilidad so(re la placa#
a forma en 'ue se reparten los aminocidos respeta la re*la de 'ue los ms
apolares son los 'ue mejor interaccionan con el sol.ente# De esta manera se
pueden relacionar el factor de retención o(tenido /Rf con la polaridad del
aminocido ! su apariencia so(re a placa /ima*en $# 1eniendo en cuenta la
premisa de 'ue entre ma!or sea el .alor de Rf para el aminocido ma!or es su
afinidad por el disol.ente: l 'ue o(tu.o un ma!or factor de retención fue la
isoleucina 'ue arrojó un .alor de 0#42, por lo 'ue se puede decir 'ue tiene
ma!or afinidad por el disol.ente, como se o(ser.a en la en la ima*en 2 la
sustancia en su totalidad se .io arrastrada por la columna del disol.ente, por
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todo lo anterior se puede afirmar 'ue la isoleucina fue el aminocido mas
apolar o hidrofó(ico, lo 'ue concuerda con la información de la ta(la 3 en la
cual aparece con un ndice de hidropata de 3,$ ma!or al de los otros 2
aminocidos tra(ajados, el se*undo aminocido con ma!or factor de retención
fue la *licina con un .alor de 0#04, en la ima*en 2 se .e como una mancha
color pardo solo un poco alejada del punto de siem(ra, de manera 'ue esta
constituira la se*unda sustancia en orden de apolaridad o hidropata, esto
se*n la literatura es correcto ! en la ta(la 3 se asocia a un ndice de
hidropata de 0#%&, menor 'ue el de la isoleucina, pero ma!or al del cido
asprtico, as pues el aminocido con un menor Rf fue el cido asprtico
/0#0$ 'ue en la ima*en 2 se muestra como una mancha de color a)ul oscuro
li*eramente ms cercana al punto de siem(ra 'ue la *licina, de manera 'ue
esta se clasificara como la sustancia menos afn al disol.ente ! por lo tanto la
ms polar de las 3 tra(ajadas, lo 'ue concuerda con la literatura !a 'ue se la
re*istra con un ndice de hidropata de -3#0 /1a(la 3, mucho menor al de losotros dos aminocidos# e*n los ndices de retención ! las manchas
o(tenidas se conclu!e 'ue la muestra pro(lema contena dos de los
aminocidos tra(ajados, uno era la isoleucina !a 'ue una de las manchas
o(tenas tena un factor de retención de 0,44 mu! similar al 0,42 o(tenido para
este aminocido ! tam(i+n de(ido a 'ue las dos manchas eran similares en
forma, tama6o ! color, el otro aminocido identificado para la muestra pro(lema
fue el cido asprtico, ! aun'ue el factor de retención o(tenido para la mancha
fue de 0,0, ms similar al de la *licina 'ue al del cido asprtico pudo ser
identificado por la similaridad en la forma ! los colores de am(as manchas ! ladiferencia en los factores de retención se atri(u!e a al*n error mnimo en el
se*uimiento del protocolo estipulado#
CO/CLUS&O/ES
n el p7, prcticamente el $008 del aminocido se encuentra como ion dipolar
o )9itterión, de forma tal 'ue el aminocido presenta una car*a neta nula /el
aminocido es el+ctricamente neutro#
A p mu! ele.ados, el $008 de las mol+culas de aminocido se encuentran en
forma de ion ne*ati.o o anión
a t+cnica de cromato*rafa de capa fina constitu!e una de las ms sencillas,
cuando se trata de la identificación de aminocidos ! nos permitió anali)ar
satisfactoriamente los aminocidos su*eridos en la prctica de la(oratorio#
De(ido a 'ue el factor de retención Rf depende de la afinidad de los
aminocidos con el disol.ente utili)ado, al i*ual 'ue de la polaridad del
aminocido respecti.o /apolar, neutro, polar, etc#, se puede decir 'ue es mu!
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til !a 'ue podemos o(tener caractersticas cla.es para identificar un
aminocido pro(lema#