2_JS_Importancia del mantenimiento en cromatografía gaseosa_Tarragona_Zaragoza

Importancia del mantenimiento en cromatografa gaseosa.

Resolucin de problemas tpicos en GC y GC/MSD

Jaume Santamaria

Especialista de producto GC-MS

Objetivo del cromatografista:La Obtencin de Resultados Cromatogrficos Robustos.

Cmo? Tener un buen mtodo cromatogrfico

Realizar un Mantenimiento adecuado

Tener un Excelente cromatgrafo

Cromatografa Robusta

Buenas Prcticas para la Creacin de un Mtodo Cromatogrfico Robusto:

1. Optimizacin del inyector S/SL

- El inyector es la fuente de muchos problemas de un sistema GC o GC-MS

-Requiere optimizacin

-Usar programa FlowCalc

Diagrama de flujo en modosplit:Problema de Sobrecarga del liner

(ENTRADA)VALVULA DE PURGA

(SEPTUM) VALVULA DE PURGA

VALVULA DE SPLIT

FLUJO TOTAL

COLUMNA

Una inyeccin de disolvente de gran expansin de volmen puede provocar una sobrecarga del linerdel portal de inyeccin

Esto puede resultar en la prdida demuestra por la VALVULA DE PURGA as como contaminacin de la lnea de gas portador entrante.

= GAS PORTADOR

= MOLECULAS DE MUESTRA

= MOLECULAS DE DISOLVENTE

Evitar la sobrecarga del

inyector

Si la muestra vaporizada no cabeen el liner :

1.Prdida de repetibilidadcuantitativa

2. Contaminacin (carryover).

VP,T,Y = YVol.Iny V(1bar, 250C, 1l) [2/(1+Pbars) ] [(273+TC) /523 ]

Tabla de los Volmenes de Vaporizacin de los Disolventesms utilizados

Disolvente (1l) Volumen de Vapor (l)Isooctano 131Hexano 165

Ciclohexano 200Tolueno 203

Acetato de Etilo 221Cloroformo 268Isopropanol 284

Acetona 294Cloruro de Metileno 337

Acetonitrilo 413Metanol 535

Agua 1198

La muestra vaporizada NO debe ocupar ms del 80% del volumen del liner

Los volmenes de vapor son valores aproximados del volumen que ocupa 1 l del disolvente con el inyector a 1bar de presin y 250C:

Clculo aproximado del volumen de vapor para otras condiciones de Presin y Temperatura:

Inlet Liners

Diagnsticos Tpicos por Mala Instalacin Columna:

Columna mal instalada en inyector: dar problemas con picos no retenidos o del principio del cromatograma.

Columna mal instalada en detector: suelen dar ms bien problemas los picos del final del cromatograma.

Utilizar un tipo de liner adecuado a las condiciones

de trabajo

FS

PS SPR

Flow limiting frit

Proportional valve 1

Total flow control loop

Trap

Flow sensor

Septum nut Pressure sensor

Septum purge

regulator

Column head pressure control loop

Septum purge vent

Split vent


Purge valve (open)

Modo de Inyeccin SPLIT (con divisin)

Si no se emplean tcnicas de focalizacin de muestra, la relacin de split deber ser lo suficientemente grande como para proporcionar una inyeccin puntual (tiempo de barrido del liner despreciable con respecto al ancho del pico). Mnimo Split ratio recomendado:

0.18- 0.25mm : 1:10 1:200.32mm : 1:8 1:150.53mm : 1:2 1:5

Con un volumen de liner de 300-900 L se recomienda un split flow de al menos unos 20 ml/min para efectuar una inyeccin puntual.

Las frrulas de grafito/vespel se deben de reapretar despus de utilizarlas por primera vez(las de grafito slo no lo requieren)

104 mL/min

100 mL/min

3 mL/min

1 mL/min

pg.: 8

FS

PS SPR

Flow limiting frit


Trap

Flow sensor

Septum nut

Pressure sensor

Septum purge

regulator

Septum purge vent

Split vent


Purge valve

(closed)

Inlet pressure control loop

Modo de Inyeccin splitless (sin divisin)

Vlvula en posicin cerrada (CLOSED) Todo el flujo, excepto el de la purga de septum, va a la columna

En splitless para focalizar la muestra (introducida lentamente en la columna) se deber: trabajar con una temperatura inicial de horno 10-20 C por debajo del punto de ebullicin del disolvente de la muestra (no utilizar mezclas de disolventes). Si la temperatura es demasiado baja (30-60C por debajo del p.eb.) pueden deformarse los picos ms voltiles. y/o bien, los puntos de ebullicin de los analitos estn ms de 150 C por encima de la temperatura inicial de la columna.

El empleo de disolventes no muy voltiles (como el isooctano con p.eb. de 99C), permite acortar los ciclos de enfriamiento al no tener que empezar a temperaturasprximas a la ambiente.

En splitless con el tiempo se requerir cortar de 0.5-1m de columna para restablecer sus prestaciones.

La optimizacin fina (en intevalos 0.1 min) del tiempo de inicio de la purga puede permitir reducir el tamao del pico del disolvente

4 mL/min

1 mL/min

3 mL/min

0 mL/min

pg.: 9

Inyectores : Inyeccin splitless (sin divisin)

Un tiempo de splitless insuficiente afectar a la sensibilidad y reproducibilidad del mtodo El tiempo de splitless deber ser tanto mayor cuanto menor sea el flujo por columna, mayor el volumen que ocupe la muestra vaporizada en el liner y cuanto mayor sea el volumen de ste, por tanto tambin depende del tipo de liner usado.

Cuando se requiere Mxima Sensibilidad Trabajar en modo

Splitless

pg.: 10

Transferencia ms rpida de muestra de inyector a columna

Disminucin de la degradacin trmicaIncrementa la vida media del linerDisminucin de la discriminacinReduce la posibilidad de prdida de voltiles por la purga de septum.Facilita la transferencia a la columna de los compuestos ms pesados.

Posibilidad de mejorar la resolucin cromatogrfica.

Reducir la necesidad de empleo de la tcnica splitless

Mejorar lmites deteccin (poder inyectar volmenes mayores)V = nRT / P (1 ul hexano a 250C y 1 atm ocupa 329 l)

Volumen splitless liner clsico: 250 ul / tapered/split: 800-900 ul.Volmenes iny. mx. splitless liner clsico: 1 ul / tapered/split: 2 ul.1 ul hexano a 250C y 5 atm ocupa 66 ul=> poder inyectar con EPC p.e. hasta 5ul

P

t

200 Kpa.

50 Kpa.

0.3 min.

Cmo Aumentar el Volumen de Inyeccin?Ventajas de la Programacin de Pulsos de Presin durante la Inyeccin

Al poder trabajar con relaciones de split mucho ms pequeas

Poder "ensuciar" menos el "liner" inyectando volmenes ms pequeos.

f. col.= 0.5 split vent = 10 ===> relacin split 1:20f. col.= 2.5 split vent = 8 ===> relacin split 1:3 Se inyecta 6 veces ms

pg.: 11

Beneficios de la Inyeccin en modo Splitless con Pulso de Presin

% Recuperacin de cada pesticida usando inyeccin en modo Splitless y On - column

Correccin por ISTD

2030405060708090

100110120

on column70 psipulsed

splitless22.5 psi splitless

Tipo de Inyeccin

%

R

e

c

u

p

e

r

a

c

i

n

(

o

n

c

o

l

u

m

n

=

1

0

0

) MetamidofosAcefatoAzobencenoOmetoatoDiazinonDimetoatoClorpirifos

splitlesspulsed

1

34

2

567

1

2

34

5

6

7

pg.: 12

Inyectores - Inyeccin Split a Pulsos

Seleccionar el modo "Pulsed Split" Introducir todos los parmetros

Cuanto mayor es la presin del pulso:se puede inyectar un mayor volumen de muestrase efecta una inyeccin ms puntual.

menor degradacin trmica menor discriminacin se puede trabajar con relaciones de split ms pequeas (mejor sensibilidad)*

* SI al terminar el pulso el Total Flow se reduce a menos de 15-20mL/min. activar el Gas Saver justo cuando termine el pulso.

pg.: 13

Establecer el volumen de inyeccin y los lavados de jeringa

Pulsar Configure para fijar el tamao de jeringa

Pusar More para fijar la velocidad de la jeringa

Control del Inyector para una Inyeccin Reproducible: jeringa y lavados

Lavados microjeringa

La muestra vaporizada NO debe ocupar ms del 80% del volumen del liner

Subir a 2 - 3 segundos para disolventes con una cierta

viscosidad

Solvent A (wetting solvent): Metanol, Tolueno, Isooctano, o mezcla miscible con disolvente inyeccin. Evitardry solvents tipo: Acetona, Diclorometano o Hexano. Acortan la vida de la jeringaSolvent B : disolvente de la muestra utilizado en la inyeccin

pg.: 14

Reproducibilidad en los Tiempos de Retencin: Retention Time Locking, RTL

La posibilidad de reproducir de manera muy precisa los tiempos de retencin de un sistema Agilent 6850, 6890 o 7890 a otros cromatografos Agilent 6850, 6890 o 7890 con el mismo tipo y dimensiones de columna e incluso con distintos detectores o inyectores.

Con la misma configuracin de instrumento las desviaciones entre distintos GCs sern de tan slo unas pocas centsimas de minuto. Permite utilizar bases de datos de tiempos de retencin: se dispone de bases de pesticidas (567-HP5ms), PCBs (209-HP5ms), organo-estnnicos (15--HP5ms), aromas (409-HP5ms), toxicolgica (277-DB-17MS.), cidos grasos (37-DB-Wax y DB-23), VOCs ,...., y propias. Facilita muy considerablemente la operacin con muestras complejas:

Mantenimiento de programaciones en el tiempo (condiciones de Integracin / tablas calibracin / SIM con MSD) Envejecimiento / Recortes de columna.

2. Mantenimiento Bsico en GC (S/SL-FID).Problemas habituales

pg.: 16

Mantenimiento Inyector de CapilaresOperacin en modo split Mantenimiento Bsico Inyector:"

Cambiar Peridicamente Septum Cambiar Peridicamente Liner Cambiar Peridicamente los Filtros de Gases Cambiar /limpiar Gold Seal (y arandela de cierre) Cambiar trampa del inyector

Sensor de presin

Sensor de flujo Regulador de

Purga de septum

Vlvula Proporcional

Vlvula on/off

Split Vent

Septum Vent

Iny. de capilares

Trampa

Flujo bajo

Flujo alto

Al Detector

Vlvula Propocional

Fuente de gas

ON

Columna

Filtros Purificacin

Gases

SeptumLiner

Gold Seal

pg.: 17

Extremo de salida de la columna

JetH2+ gas auxiliar

Detector FID

aire

Extremo columna capilar(1-2 mm desde la parte superior del jet)

Mantenimiento de detector de Ionizacin de Llama (FID)

Recomendaciones: No encender Llama si T

Flujos habituales del FID

Gas Type Flow Range Typical Flow

Carrier Gases

(H2, He, N)

Packed columns 10 60 ml/min30 ml/min

(1/8 column)

Capillary columns 0.5 5 ml/min1.5 ml/min

(0.32 mm column)

Detector

Gases

Hydrogen 24 60 ml/min 40 ml/min

Air 200 600 ml/min 400 ml/min

Column + Makeup 10 60 ml/min 30 ml/min

Problemas habituales del FID La llama se apaga o no se enciende Comprobar los valores de los parmetros del detector (teclado)

Flows (Flujos) Flame ON (llama encendida) Detector ON (detector encendido)

Comprobar el jet Comprobar el encendedor (ignitor) Comprobar las conexiones de la columna Comprobar las presiones de suministro de los gases Comprobar el disolvente y el volumen de inyeccin

Ruido Poca sensibilidad Deriva

Resolucin de problemas de ruido del FID

Cerrar H2 y aire

Siguehaciendo

ruido?

Comprobar/limpiar/sustituir:

Filtros, trampas y gases

Jet del FID

Columna y sus conexiones

Inyector y fungibles

Comprobar/limpiar/sustituir:

Conexin de interconexin o del colector

Colector y aislantes

Interconexin del detector

Tarjeta del detector

NoS

Problema de contaminacinProblema elctrnico

Mantenimiento rutinario del FID

Controlar la seal de fondo Comprobar presiones y flujos Limpiar o cambiar el jet Inspeccionar el encendedor (ignitor) Limpiar el colector Retirar, cortar y volver a instalar la columna

3. Mantenimiento Bsico en GC/MS. Problemas habituales

pg.: 23

Consejos generales:

En la medida de lo posible, deberamos conocer los niveles de concentracin de los analitos que queremos analizar y siempre inyectar la menor cantidad posible. Si no es posible y disponemos de un sistema GC-FID, analizarlo previamente en ste.

Evitar columnas de dimetro ancho Evitar columnas de gran espesor de pelcula. Usar patrones para evaluar el sistema Realizar tareas de mantenimiento preventivo para minimizar los posibles

problemas. Mantener un registro (logbook)

pg.: 24

Revisin y Mantenimiento MSDFrequency Part # Remarks

Autotune Weekly Keep as record of system performance

PFTBA Monthly check 05971-60571 Refill as necessary. DO NOToverfill.

Mechanical Pump Oil Weekly: check level and appearance.

Semi-annually: change oil and foreline trap.

Litre: 6040-0834

Gallon: 6040-0789

Foreline trap pellets: 9301-1104

(5971 & 5972 only)

Replace as scheduled

Diffusion Pump Oil Annually 6040-0809 Replace if needed

Ion Source As needed Clean as necessary. Keep under vacuum.

Electron Multiplier As needed 05971-80103 Use lowest possible voltage

HED As needed G1099-80001 Replace if needed

Vent plug O-ring As needed 0905-1217 Replace if needed

Filaments As needed 05972-60053, G2590-60053 Use solvent delay to prolong filament use

pg.: 25

Espectro Perfluorotributilamina (PFTBA: C12F27N PM:671)

650

Scan: 10.00 - 650.00 Samples: 16 Thresh: 500117 peaks Base: 69.00 Abundance: 1974784

Mass Abund Rel Abund Iso Mass Iso Abund Iso Ratio

69.00 1974784 100.00 70.00 20344 1.03219.00 1161216 58.80 219.95 45968 3.96502.00 56648 2.87 503.00 5690 10.04

50 100 150 200 250 300 350 400 450 500 550 600

0

50

100

131

219

264

69

414 (GCD) 502 614

N CF2 - CF2 - CF2 - CF3..

F3 C - F2C - F2C - F2 C

F3 C - F2C - F2C - F2 C

Sintonizado (Tuning) MS con PFTBA

Vial/Electrovlvulapara introduccin vapores de

solucin de sintonizado:PFBTA

Peridicamente (y al poner en marcha) se deber efectuar un sintonizado del MSD.

pg.: 26

Revisin del Informe Sintonizado Automtico (Atune)

Aspectos a controlar

El chequeo automtico que se obtiene despus del sintonizado revisa todos estos aspectos a controlar

Asignacin correcta de masas

Adecuada abundancia absoluta

Tpica abundancia relativa

Adecuada relacin de istopos

Bajo backgroundBajo contenido en agua y aire (

Evaluacin / Verificacin del Sintonizado

Early Maintenance Feedback (EMF)

Set limits and counters Each time a method is run, the limits will

be checked An alert box is displayed if the EMF check

indicates a limit has been reached If the system is running a sequence, any

EMF alerts will be logged into the sequence log

pg.: 29

Remember to use the MSD Hardware Manual's Troubleshooting section!)

Problemas comunes en GC/MSProblema Causa ProbableBaja sensibilidad GC conditions/problems

Nivel de ruido altoProblemas de vacoTuning

Contaminacin MuestraCarrier gasGCMS

Problemas de vaco Fugas de aireFlujo de columnaBombas

Usuario ImpacienteNo entrenado

pg.: 30

Determine source of contamination from spectraVerify site of contamination by isolating MS from GC

Troubleshooting: Baja sensibilidad y contaminacin

Baja sensibilidad GC: Septum, liner, gold seal, temperatura de la columa, parmetros de

split/splitless, jeringa, etc. MS: Revisar tune reports, parmetros de data acquisition

(tune file, EM voltage), vaco. Contaminacin

Conexin y estado de Inyector/columna- puntos activos! Septum/column bleed Disolventes de limpieza Huellas dactilares (guantes!)

pg.: 31

Troubleshooting: Problemas de Vaco

Cmo se mide el vaco? Qu vaco es normal? Mediante un tubo de vaco y un medidor. La presin debe estar en el rango bajo de

10-5 torr. Debemos conocer el vaco de nuestro sistema en condiciones standard. Con qu eficiencia funciona el sistema de vaco?

Velocidad de eliminacin PFTBA despus de un tune Fugas

Examinar Standard Spectra Tune report (masa 28

pg.: 32

Troubleshooting: Prdida de sensibilidad y/o contaminacin.Cmo identificar un fuente sucia?

Mala reproducibilidad El equipo no sintoniza con Standard Spectra Tune (STUNE.U): STUNE es el

tune de control de calidad de nuestro espectrmetro de masas STUNE.U presenta:

Low high-mass abundance (502) Improper isotope ratios (M + 1) High background High EM voltage

Cunto tiempo hace que no se ha limpiado la fuente? Cuntas muestras hemos analizado?

Procedimiento de Limpieza de la Fuente de Iones

1.- Hacer una pasta slurry de MicroGrit con agua

2.-Usando los bastoncillos suministrados con el MS, aplicar la pasta y pulir cada parte hasta eliminar de su superficie todo resto de material y coloracin(este tratamiento no rayar la superficiemetlica).

3.-Lavar minuciosa!!! y repetidamente!!! con AGUA

USAR LOS VIDEOS DE MANTENIMIENTO!

Limpieza de la Fuente de Iones

NO EXPONER a Disolvente

Enjuagar con Disolvente

pg.: 35

Limpieza de la Fuente de Iones

Agua Metanol Acetona Hexano

Sonicar 5 min

Sonicar 5 min

Sonicar 5 min

Sonicar 5 min

Elimina sales Elimina compuestos polares

Los disoventes deben estar muy limpios! Especiamente el hexano !!

Elimina compuestos apolares

Iones tpicos procedentes de contaminacin y background en GC/MS

Para reducir background (H2O,N2,O2,..) es til empezar los brridos desde masa 29 o 33

15,

, 68, 69, 76, 77

94, 168, 170, 186, 262, 278, 354, 446 Diffusion Pump Oil

GC Problem 1 - Tuning

Mass 207

Column bleed

Increasing no of peaks

Isolation !!

GC Problem 2 - Tuning

Mass 502 low

Vacuum down

Column flow ?

4. Instalacin, Cuidado y Mantenimiento de Columnas Capilares para Cromatografa de Gases

o...

No es lo que tu columna pueda hacerpor t, sino lo que tu puedas hacer portu columna"

Mantenimiento Bsico de la Columna GC

Acondicionar la columna antes de usarla Cortar cuando se requiera (p.e. por colas en picos) un trozo de

cabeza de columna (p.e. 50cm). Tpico en splitless. Uso de RTL! Los cortes en los extremos de la columna deben ser adecuados Limpiar trmicamente o con disolvente cuando se requiera

Corte de la Columna

Cortar con cuidado el recubrimiento de poliimida.No intentar cortar el vidrio.

Herramientas recomendadas: Lpiz con punta de diamante o de carburo, herramienta de zafiro para cortes

o cortador cermico Proteccin ocular

No usar:Tijeras, lima, etc.

Bien cortada

Instalacin de la ColumnaMidiendo la distancia correcta

Marcar con Tipp-ex o Septum (mejor)

GC/MS

Colocar la columna hasta que sobresalga 1 mm de la punta de la interfase.

INYECTOR: la columna debe sobresalir unos 4 o 5 mm del extremo de la conexin

Comprobacin de Fugas y de la Instalacin de la Columna:Inyectar un compuesto no retenido

El pico debe ser estrecho y simtrico(sino se inyecta un exceso)

* Inyectar una baja concentracin

Detector Compuesto (para columnas apolares)

FID Metano o Butano

ECD CH2Cl2 (headspace o disuelto*)

NPD CH3CN (headspace o disuelto*)

TCD Aire

MS Aire o Butano

Formas de Picos No Retenidos

Buena InstalacinInstalacin no apropiada

o fuga en el inyector

Comprobar: Fuga en el inyector o en el septum

Una relacin de split demasiado baja

Problemas en el liner (roto, fugas, mal colocado)Posicin de la columna en el inyector y en el detector

Las impurezas del gas portador se preconcentran en la columna cuando sta se mantiene a bajas temperaturas durante periodos de inactividad

1.- Si el cromatgrafo estaba parado: para eliminar el oxgeno de su interior, dejar durante 10-20 minutos la columna a temperatura ambiente con el gas portador abierto y asegurarse que ste fluye a travs de la columna.

2.- Abrir gases del detector y empezar a calentar inyector y detector.

3.- Incrementar la temperatura de la columna hasta 20-25 C por encima de la temperatura mxima de trabajo (sin llegar a superar la temperatura mxima de la columna) y mantenerla durante 15-30 min.

Acondicionado Diario de la Columna

Despus de largos perodos de inactividad de la columna o si sta no est limpia convendr aumentar considerablemente el tiempo de acondicionado.

pg.: 46

Perfil Tpico de Sangrado de la Columna Hacer un programa de temperaturas a la columna sin inyectar*

*DB-1 30m x .32mm I.D., .25mPrograma de Temperatura // 40C, esperar 1 min // 20/min a 320C, esperar 10 min.

Tiempo (min.)0 5 10 15 20 25

6000

7000

8000

9000

1.0e4

1.1e4

1.2e4

1.3e4

Si la columna est limpia y en buen estado, el perfil NO debe contener picos y debera ser repetitivo

Sangrado: seal de fondo normal generada por la elucin de los productos de una degradacin normal de la fase estacionaria de la columna

Tpico sangrado GC/MS de columnas apolares

1

22

1

Evaluacin del Rendimiento de la Columna

THEORETICAL PLATES/METER: MIN SPEC ACTUAL

COATING EFFICIENCY:

RETENTION INDEX:

PEAK HEIGHT RATIO:

MIN SPEC MAX SPEC ACTUAL

PENTADECANE

PENTADECANE

1-UNDECANOLACENAPHTHYLENE

4-CHLOROPHENOL/METHYL NONANOATE

4-PROPYLANILINE/METHYL NONANOATE

0.83

1.14

1371.04 1372.04 1371.431459.34 1460.34 1459.53

3900 4389

90.0 95.5

COMPOUND RETENTION TIME

PARTITION RATIO (k)

PEAK WIDTH (W 1/2)

1,6-HEXANEDIOL

4-CHLOROPHENOL

METHYL NONANOATE

4-PROPYLANILINE

TRIDECANE

1-UNDECANOL

ACENAPHTHYLENE

PENTADECANE

Approximately 5-10 ng on column

To

2.51

2.95

3.21

3.81

4.20

5.52

8.00

9.58

0.9

1.3

1.5

1.9

2.2

3.3

5.2

6.4

0.019

0.022

0.022

0.026

0.027

0.036

0.053

0.062

1.29

PART NO:COLUMN I.D. NO.:LIQUID PHASE:FILM THICKNESS:COLUMN DIMENSIONS:

m X mmTEMPERATURE LIMITS:

C TO C

12250323303121DB-50.25 m

30 0.252

-60 325 ( C PROGRAM)350

Compuestos PropsitoHidrocarburos Eficacia y Retencin

Alcoholes Actividad

FAMEs, PAHs Retencin

Acidos Carcter cido

Bases Carcter Bsico

Para usos especficos evaluarlo con un patrn de los compuestos analizados

Causas Comunes de la Degradacin del Rendimiento de una Columna

Deterioro del recubrimiento de poliamida

Dao trmico

Oxidacin (deterioro por O2)

Dao qumico debido a muestras

Contaminacin

Dao TrmicoDao Trmico: Degradacin rpida de la fase estacionaria debido a temperaturasexcesivamente elevadas

Cmo evitarlo?: no superar lmites de temperatura

Lmite isotrmico = se puede aplicar un tiempo indefinido

Lmite para programacin de temperaturas = mx. 5-10 min. /mta

Cmo intentar solucionarlo?

Desconectar la columna del detector

Acondicionar durante toda la noche en el lmite isotrmico

Cortar 10-15 cm del final de la columna (suele ser la zona de la columna sometida a mayor temperatura).

Dao debido al OxgenoDao por Oxidacin: el oxgeno en el gas portador degrada rpidamente la fase estacionaria. El dao se acelera a temperaturas elevadas.

Se puede solucionar?: Dao rpido a la columna . Normalmente se trata de un dao irreversible a la columna.

Cmo prevenirlo?: Gas portador de elevada calidad (99.999 mnimo).

Trampas para impurezas de gases adecuadas.

Inyector, septum y lneas libres de fugas.

Purgar la lnea si ha entrado aire (p.e. durante cambio botellas)

Mantenimiento de la instalacin y de los reguladores de gas.

Dao Qumico debido a las muestras

Las columnas ligadas y entrecruzadas tienen una resistencia qumica excelente exceptopara cidos y bases inorgnicas:

El dao qumico se hace evidente mediante un sangrado excesivo, prdida de sucapacidad inerte o prdida de resolucin/retencin

Cmo intentar solucionarlo? Cortar 1/2 - 1 metro del inicio de la columna

Los casos severos es posible que requieran un corte de hasta 5 metros

HCl NH3 KOH NaOHH2SO4 H3PO4 HF etc.

Los no voltiles afectarn mayoritariamente al liner

Sntomas de Contaminacin: Colas en los picos

Prdida de separacin (resolucin)

Cambios en la retencin

Reduccin del tamao y ensanchamiento del pico

Distorsiones en la lnea de base (causadas por semivoltiles)

Cmo solucionar la contaminacin por Semivoltiles?: Efectuar una limpieza del inyector, liner,

Limpiar trmicamente la columna.

Contaminacin de la ColumnaTodas las muestras contienen residuos!

pg.: 53

Contaminacin por NO-VoltilesCmo intentar evitarla? Utilizar liners con lana de vidrio silanizada. Cambiar frecuentemente el liner

Cmo intentar solucionarla? No acondicionar la columna Efectuar mantenimiento:

limpiar o cambiar el liner del liner del inyector limpiar el inyector cortar 1/2 -1 metros de cabeza de columna

Dar la vuelta a la columna Lavar la columna con disolvente ltimo recurso: cortar la columna en dos y evaluar la parte final de la columna.

Troubleshooting Chromatograms 1

No hay picos

Pasa autotune Concentracin de muestra inadecuada

No hay analitos presentes

Jeringa mal instalada, daada o no instalada en el inyector automtico

Inyeccin realizada accidentalmente en split mode en lugar de splitlessmode

Sin muestra o poca muestra en el vial

Inyector muy sucio

Inyector con fugas

Columna desonectada de inyector/rota

No pasa autotune No hay muestra de calibracin (PFTBA)

Presin muy alta en el sistema de vaco


Picos con colas

Puntos activos en el camino que recorre la muestra

(sample path)

Volumen de inyeccin muy grande

Temperatura del inyector incorrecta

Flujo de columna inadecuado

Temperatura de la interfase GC/MSD muy baja

Temperatura de la fuente iones demasioda baja


Espesor de pelcula de la columna inadecuado a la concentracinde los analitos (column overload)

Temperatura inicial de la columna demasiado baja

Puntos activos (Active sites in the sample path)

Volumen de inyeccin muy elevado

Presin GC inlet demasiado elevada

Insuficiente flujo de columna

Picosfrontales


Picos saturados

Insuficiente solvent delay

Incorrecta escala

Inyeccin demasiado grande

Voltaje del multiplicador demasiado elevado

Picos dobles

Mala tcnica de inyeccin

Inyeccin demasiado grande

Inyeccin lenta


Linea de base con deriva

Linea de base alta

Sangrado-Column bleed

Contaminacin diversa

Sangrado-Column bleed

Contaminacin diversa

Voltaje del multiplicador demasiado elevado


Linea de base con deriva negativa

(drift)

Linea de base oscilante

(Baseline wander)

Indicativo de que la contaminacin est desapareciendo.

Esperar hasta que se estabilice.

Causas:

Agua y aire residual (hace poco que el equipo se ha encendido despus de un venting)

Column bleed

Septum bleed

Tiempo de inyeccin Splitless demasiado largo (el inyector no se ha purgado con gas adecuadamente, transfirindose demasiado disolvente a la columna)

Presin baja (Insufficient carrier gas supply pressure)

No funciona el control de presin o flujo adecuadamente

Fuga intermitente en el inyector


Los tiempos de retencin de

todos los picosse adelantan

Los tiempos de retencin de

todos los picosse atrasan

La columna se ha cortado

Cambio en la temperatura inicial del horno (aumento)

La columna ha envejecido

Mal funcionamiento del horno

Mal funcionamiento del control de presin

Obstruccin en la linea de split/liner sucio

El flujo ha cambiado (disminucin)

Cambio en la temperatura inicial del horno (disminucin)

Puntos activos en el sistema

Fugas en el inyector

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Importancia del mantenimiento en cromatografa gaseosa.Resolucin de problemas tpicos en GC y GC/MSDObjetivo del cromatografista: La Obtencin de Resultados Cromatogrficos Robustos. Cmo?Buenas Prcticas para la Creacin de un Mtodo Cromatogrfico Robusto: 1. Optimizacin del inyector S/SLDiagrama de flujo en modosplit:Problema de Sobrecarga del linerSlide Number 5Inlet LinersModo de Inyeccin SPLIT (con divisin)Modo de Inyeccin splitless (sin divisin)Inyectores : Inyeccin splitless (sin divisin)Slide Number 10Slide Number 11Inyectores - Inyeccin Split a PulsosControl del Inyector para una Inyeccin Reproducible: jeringa y lavadosReproducibilidad en los Tiempos de Retencin: Retention Time Locking, RTL2. Mantenimiento Bsico en GC (S/SL-FID).Problemas habitualesMantenimiento Inyector de Capilares Operacin en modo splitMantenimiento de detector de Ionizacin de Llama (FID)Flujos habituales del FID Problemas habituales del FIDResolucin de problemas de ruido del FIDMantenimiento rutinario del FID3. Mantenimiento Bsico en GC/MS. Problemas habitualesConsejos generales:Revisin y Mantenimiento MSDSlide Number 25Revisin del Informe Sintonizado Automtico (Atune)Evaluacin / Verificacin del SintonizadoEarly Maintenance Feedback (EMF)Problemas comunes en GC/MSTroubleshooting: Baja sensibilidad y contaminacinTroubleshooting: Problemas de VacoTroubleshooting: Prdida de sensibilidad y/o contaminacin.Cmo identificar un fuente sucia?Procedimiento de Limpieza de la Fuente de IonesLimpieza de la Fuente de IonesLimpieza de la Fuente de IonesIones tpicos procedentes de contaminacin y background en GC/MSGC Problem 1 - TuningGC Problem 2 - Tuning4. Instalacin, Cuidado y Mantenimiento de Columnas Capilares para Cromatografa de Gases Mantenimiento Bsico de la Columna GCCorte de la ColumnaInstalacin de la Columna Midiendo la distancia correcta Comprobacin de Fugas y de la Instalacin de la Columna: Inyectar un compuesto no retenidoFormas de Picos No Retenidos Slide Number 45Perfil Tpico de Sangrado de la Columna Evaluacin del Rendimiento de la Columna Causas Comunes de la Degradacin del Rendimiento de una Columna Dao TrmicoDao debido al OxgenoDao Qumico debido a las muestrasContaminacin de la ColumnaContaminacin por NO-Voltiles Troubleshooting Chromatograms 1Troubleshooting Chromatograms 2Troubleshooting Chromatograms 3Troubleshooting Chromatograms 4Troubleshooting Chromatograms 5Troubleshooting Chromatograms 6Troubleshooting Chromatograms 7Pgina Web MyGCColumns Un unico sitio donde encontrar todo www.agilent.com/chem/myGCcolumnsSlide Number 62MuchasGracias

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