Instituto Superior del Profesorado “Joaquín V. González”

Departamento de Química.Química Orgánica I. 2013Prof. Dra. Alejandra Salerno- JTP Prof. Claudia Elalle.

La cromatografía es una técnica separativa donde los componentes de una muestra se distribuyen entre dos fases, una móvil y otra estacionaria, como consecuencia de su diferente afinidad hacia dichas fases. La separación se basa en las distintas velocidades de migración de los analitos (compuestos).

Se puede clasificar los distintos tipos de cromatografías según el tipo de interacción entre los componentes de la mezcla y las FE y FM; así también según la naturales de la FM y según el soporte empleado para la FE.

En el trabajo práctico se utilizará la cromatografía en capa delgada (TLC) y la cromatografía en columna. Así también utilizando el tipo de interacción entre los componentes de la mezcla y fase móvil y la fase estacionaria; la cromatografía de adsorción

Cromatografía en capa delgada

Cromatografía en columna

Se la puede utilizar como criterio de identidad pero no como criterio de pureza.

Fase estacionaria.

El adsorbente es un sólido polar poroso, la finamente granulado, inerte y fijado en diversos soportes.El proceso de adsorción es debido a interacciones intermoleculares de tipo dipolo-dipolo o enlaces de hidrógeno entre soluto y el adsorbente.Los adsorbentes polares mas utilizados son:•Sílice: de carácter ácido•Alúmina: puede adquirirse con carácter ácido, básico o neutro.

Fase Móvil.

•Solvente o mezcla de solventes en el que los componentes de la muestra deben ser al menos parcialmente solubles (para que eluyan).•No deben ser muy volátiles para poder controlar la composición de la fase móvil.•La velocidad de elución de un compuesto se incrementa al aumentar la polaridad de la fase móvil.

Como principal objetivo de este practico se busca separar una mezcla de dos componentes en estado liquido.

Como segundo objetivo se pretende identificar las sustancias que componen dicha mezcla.

Se elige una fase móvil por cromatografía TLC

Para ello se confecciona unas pequeñas pipetas

con los capilares de vidrio, que permiten sembrar la mezcla en un punto pequeño.

Luego se preparan cuatro cubas con distintas mezclas de

FM.1)Diclorometano (solvente puro)2)Metanol (solvente puro)3)Diclorometano : metanol 3:14)Diclorometano : metanol 30:1

Se siembran cuatro placas con las mezclas de colorantes.

Se eluye una placa en cada una de las cubas

Al analizar los resultados se elige la FM II compuesta por diclorometano : metanol 30:1 ya que es la que mejor resuelve la muestra como se ve en la siguiente imagen.

Los materiales que se necesitan los vemos en esta foto.

A demás se necesita la FE que en este caso será de silica con un poco de fase FM.

En este punto debemos tener en cuenta que no se formen burbujas, canales en la columna y que la superficie este lo mas pareja posible.

Siguiendo con cuidado estos paso la columna queda confeccionada de la siguiente manera

Se deposita en la parte superior de la columna unos 0,5 ml de la muestra a separar y se la cubre con una pequeña cantidad de algodón

La elución ocurre por gravedad. Juntando en un mismo recipiente las fracciones de igual contenido.

Para poder extraer de la columna el segundo componente con más facilidad se agregó unas gotas de ácido acético ; esto acelera la interacción con la fase estacionaria por aumentar la polaridad. En conclusión la muestra eluye más rápido.

1) Los componentes de la muestra incógnita eran dos.

2) Al correr en mismas placas de TLC las fracciones obtenidas, con testigos de Azul de metileno y Rojo de metilo sal sódica respectivamente, y observar las coincidencias en dichas cromatografías, podemos afirmar, que los componentes de la mezcla eran Azul de metileno y rojo de metilo.

El Azul de metileno recorre 3,7 cm cuando el frente de FM recorrió 5,6cm dando un Rf de 0,66

El rojo de metilo recorre 4,3 cm cuan el frente de FM recorrió 5,6 cm dando un Rf de 0,95