Bioquimica 11 Masa Proteica

7/24/2019 Bioquimica 11 Masa Proteica

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UNIVERSIDAD PRIVADA SAN JUAN BAUTISTA

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD

ESCUELA PROFESINAL DE MEDICINA HUMANA

OBJETIVOS

Objetivo General:

Determinar los mtodos para evaluar las protenas delcompartimiento visceral mediante los niveles de

BIOQUIMICA Y NUTRICION

MASA PROTEICAY VICERAL


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Transferrina, Prealbmina, Protenas totales y Albmina ensuero, que por su relativamente corto tiempo de vida y lasprotenas del compartimiento somtico esqueltico laevaluaremos mediante la relacin entre la ecrecin de lacreatinina urinaria en !" #oras y la talla de la persona,asmismo mediante el Peso y la Talla se evaluar la masa corporaltotal$

Objetivos Espe!"os:

Aprender la importancia de la masa proteica visceral yesqueltica, y reconocer en qu consiste en relacin a labioqumica$

Aplicar adecuadamente los reactivos que intervienen en laprctica$

%eali&ar y veri'car correctamente observaciones que acten en

nuestras muestras, as como dic#o instrumento$

I#TRO$%CI:(as protenas son compuestos or)nicos macromoleculares,ampliamente distribuidos en el or)anismo y esenciales para la vida$Actan como elementos estructurales y de transporte y aparecen ba*ola forma de en&imas, #ormonas, anticuerpos, factores de coa)ulacin,etc$ (a protena ms abundante en plasma es la albmina$ +na de susfunciones ms importantes es la de permitir el transporte de cidos)rasos, #ormonas esteroides, bilirrubina, catecolaminas, que en formalibre son insolubles en medio acuoso$ (a concentracin de albmina

en plasma inuye notablemente en el mantenimiento de la presincoloidosmtica, lo que estara relacionado con su relativamente ba*o



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peso molecular y su )ran car)a neta$ -n condiciones patol)icascomo prdidas renales, desnutricin, infecciones prolon)adas, etc$,suelen presentarse #ipoproteinemias, mientras que en otras comomieloma mltiple, endocarditis bacteriana y #emoconcentraciones dediversos or)enes, se observan #iperproteinemias$ -n )eneral, ambassituaciones se ven acompa.adas tambin por #ipoalbuminemias$ (osaumentos anormales de albmina son ocasionales y se relacionan

casi siempre con des#idratacin que produce el consecuenteaumento en el contenido proteico del plasma$ -l anlisis del nivel deprotenas en san)re es un anlisis que se reali&a por separado o enuna peticin )eneral de bioqumico en la san)re$ /ide la cantidad deprotenas presentes en el suero$ (as protenas son un constituyentemuy importante de las clulas y los te*idos del cuerpo #umano$ 0ecomponen de aminocidos$ 1ay diferentes tipos de protenas condiferentes funciones, son as protenas los en&imas, al)unas#ormonas, la #emo)lobina, el (D( 2transportadora de colesterol3, el'brin)eno, el col)eno, las inmuno)lobulinas, etc$ (as protenas

totales del suero se pueden separar en dos )randes )rupos laAlbmina y las )lobulinas$ (a albmina es la protena de msconcentracin en la san)re$ (a albmina transporta muc#asmolculas peque.as 2bilirrubina, pro)esterona, y medicamentos3, ytiene tambin la funcin de mantener la presin san)unea ya quefavorece la presin osmtica coloidal para mantener lquidos en eltorrente san)uneo y que no pasen a los te*idos, manteniendo unequilibrio

EVAL%ACIO# $E LA MASA PROTEICAVICERAL Y ES'%ELETICA:-valuar el estado nutricional de un individuo consiste en sntesis en elconocimiento de en qu )rado las demandas bioqumicas, 'siol)icasy metablicas estn siendo cubiertas por la in)estin de nutrientes,por lo que ree*ar, si la in)estin, absorcin y utili&acin de losmismos son adecuadas a las necesidades del or)anismo teniendo encuenta su biodisponibilidad, prdidas y las reservas$ -s tal lapreocupacin que eiste de unos a.os a esta parte por el estado

nutricional de los individuos, como un indicador de salud, quedesencaden en la bsqueda de parmetros que siendo fciles de



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medir y de clculo simple, espec'cos, 'ables, no invasivos y pocoscostosos, puedan utili&arse como indicadores nutricionales de formarutinaria en la prctica diaria$ -s fcil entender que muy pocosparmetros van a cumplir todas las condiciones anteriormenteepuestas, por ello es indispensable un profundo conocimiento de sumetodolo)a e interpretacin para que puedan ser utili&ados de laforma ms conveniente$

(a manerams adecuadade abordar la

evaluacindel estudio delestado nutricional es reali&arlo en forma )radual, donde el primerpaso sera conocer si eiste al)n problema nutricional, para en casoa'rmativo proceder a una valoracin ms espec'ca, determinandoque compartimentos corporales pueden estar afectados$ -l primer

compartimento que debe ser evaluado es el compartimento )raso, yaque las )rasas son las primeras reservas que el or)anismo va a



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utili&ar para aprovisionarse de ener)a, y en un se)undo nivelrecurrir a otros sustratos como las protenas, pudiendo establecerse'nalmente el dia)nstico nutricional$

(a primera etapa abordable deestos estudios ser la evaluacindel estado nutricional )lobal, quese basa en determinar mediantemedidas indirectas si lasnecesidades del or)anismo estnsiendo cubiertas, pero comocomentamos anteriormente, noidenti'caremos la parte del cuerpoque puede encontrase afectada$Para este tipo de evaluacinrecurriremos al anlisis de la dieta,la determinacin del peso y a la

capacidad de la repuesta inmunedel or)anismo$



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MARCO TEORICO:

MTODOS DE DETERMINACIN DE PROTENASTOTALES

Los ()to*os para (e*ir la onentrai+n *e prote!nas totales,PT- p.e*en lasi"arse en4

/0 1!sios:

5 Absorbancia del enlace peptdico a 678 nm4 se basa en la propiedadque tiene el enlace peptdico de absorber a esa lon)itud de onda$

5 Absorbancia de los aminocidos aromticos a !98 nm4 suprincipal limitacin es que no todas las protenas tienen lamisma proporcin de estos aminocidos, lo que le resta eactitud$

5 %efractometra4 mtodo de eleccin, pero #oy en da en la prctica

clnica se est de*ando de usar$

2. Qumicos:

%eaccin de :*elda#l4 considerado #istricamente como elmtodo referencia$/todo de (o;ry4 se basa en la reduccin del reactivo deiocalteau provocada por el comple*o unin peptdico=>u!? en medio alcalino con la participacin de restosfenlicos 2tirosilos3$%eaccin de @iuret4 se fundamenta en la formacin de un

comple*o, en medio alcalino, entre el >u!?y los enlacespeptdicos 2absorcin a "8 nm3$ -n la prctica clnica, es unade las metodolo)as ms usada para el dosa*e de PT$/todos turbidimtricos 2precipitacin con cidotricloroactico=T>A o sulfosaliclico3/todo de @radford

-n el Traba*o Prctico se determinar la concentracin deprotenas por el /todo de @radford$



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oomasie @lue B=!83 cuando ste se une alas protenas 2absorbiendo asa 7 nm3$ -sta unin se reali&a atravs de )rupos ioni&ados y se comprueba proporcionalidad conla concentracin de protenas contenidas en la muestra$

(a determinacin del contenido proteico de una muestra requiere lacomparacin del valor de absorbancia de la muestra con losobtenidos a partir de cantidades conocidas de protenas, con losque se construye una curva de calibracin4 a mayor cantidadde protenas, mayor color desarrollado y por lo tanto,mayorabsorbancia$ %ecordar que esta proporcionalidad es slo lineal #astaun cierto lmite de concentracin$

La .rva *e alibrai+n

0e requiere contar con un solucin testi)o de protena de

concentracin conocida 2)eneralmente se utili&a albmina sricabovina o inmuno)lobulina B3$ 0e preparan por lo menos " tubostesti)os con distintas cantidades de protenas 2T6, T!, TC y T"3 y otrotubo denominado blanco 2en el cual el volumen de la solucin deprotenas se reempla&a por a)ua3$ -n forma simultnea, seprocesan las muestras inc)nitas$ (ue)o se a)re)a la mismacantidad del reactivo de @radford a cada tubo 2dado que ende'nitiva se compara el color desarrollado evidenciado por laabsorbancia de la solucin en cada tubo, sus volmenes 'nales debenser i)uales3$

Protoolo eje(plo *e *eter(inai+n *e prote!nasporel ()to*o *e Bra*2or*:

+na ve& preparados los tubos, se lee la absorbancia de cadauno de ellos a la lon)itud de onda de 7 nm$ (a absorbanciaobtenida en el tubo blanco debe ser restada a cada uno de los tubosrestantes$ +na opcin es calibrar el equipo con el tubo blanco4 estoconsiste en asi)nar a la absorbancia del blanco, una lectura i)ual acero$ De esta manera, automticamente esta lectura es restadaEpor el fotocolormetro a todas las muestras posteriormente ledasen el equipo$ (os resultados obtenidos se vuelcan en una tabla comola que si)ue$



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>on las absorbancias de los tubos testi)os obtenidas en elfotocolormetro, se construye el )r'co de Absorbancia a 7 nm enfuncin de la cantidad de protena 2m)3$

-n el e*emplo, los tubos conteniendo testi)os " y muestran una desviacinde la &ona lineal de cumplimiento de la (ey de (ambert= @eer, motivo por elcual no se consideran al tra&ar la recta promedio$

Para determinar la concentracin de protenas en la muestra 2F3, seinterpolan en la curva de calibracin las absorbanciaGs correspondientes aelGlos tuboGs que contenan la muestra$ As, sabiendo la cantidad de protena2F3 contenida en el volumen de muestra utili&ado en la medicin, puedecalcularse la concentracin proteica$

Bases l!nias*e(.estra :

Ban*as prinipales *el proteino3ra(a:

1. Pre!"#$mi%!:



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o Halor normal4 8,C )G688 ml, incluye a la transtiretrina$o (a visuali&acin depende de que todas las condiciones tcnicas

sean las ptimas$o 0u disminucin es un marcador sensible del estado

nutricional reaccin inamatoria$o (a presencia de esta banda no se informa$

40 Alb5(ina:o Halor normal4 C,=,8 )G688 ml$o -s la protena ms peque.a y con mayor nmero de

)rupos car)ados ne)ativamenteI esta caracterstica le permitemi)rar con mayor rapide&$

o >onstituye una banda #omo)nea, puesto que se trata de unanica protena, acta como trasportador activo de diferentescompuestos tales como cidos )rasos, pi)mentos biliares,#ormonas esteroides, frmacos y otros$

o -s un reactante de fase a)uda ne)ativo, por lo que en estados

infecciosos a)udos est disminuida$o -stados asociados con #ipoalbuminemia4 estados de

malnutricin o malabsorcin, enfermedad #eptica severa2por fallas en su sntesis3 o aumento de su catabolismo,no se conoce un estado patol)ico con #iperalbuminemia$

60 A/73lob.lina:

o Halor normal4 8,6=8,C )G688 ml$o @anda formada principalmente por4 J6=antitripsina

2mayoritaria3, )lucoprotena cida J6 u orososeromucoide,transcortina y )lobulina '*adora de tirosina$o +n aumento o disminucin de esta banda se debe a un

aumento o disminucin de J6=antitripsina 2predomina en lafraccin J63 = J6=antitripsina4

o >umple con el 78K de la accin antiprotesica delor)anismoI es el in#ibidor biol)ico de las en&imasproteolticas de los lisosomas3$ -s un reactante de fase a)udapositivo$

o Aumento de J6=antitripsina4 estrs, reactante de fase a)uda,

tumoresI



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o Disminucin de J6=antitripsina4 estados demalnutricinGmalabsorcin, enfermedad #eptica severa, oaumento de su catabolismo 2procesos relacionados con ladisminucin de cualquier protena3$o Blucoprotena cida J64 in#ibe o inactiva a la

pro)esterona, es un reactante de fase a)uda positivo$o Transcortina4 transporta !GC del cortisol y otros

corticoides$ -l cortisol circulante se une tambin2minoritariamente3 a la albmina$ (a transcortina sesinteti&a en el #)ado$

Protena '*adora de tiroina4 une TC 2triyodotironina3 y T"2tiroina3$ (as #ormonas tiroideas circulantes se unen tambin a laprealbmina$

o Tanto la transcortina como la protena '*adora detirosinaaumentan en el embara&o y tras la administracin deestr)enos$

80 A473lob.lina:

o -s una fraccin #etero)nea, valor normal4 8,=8,L )G688 ml$o -st inte)rada por4 #apto)lobina, J!=macro)lobulina y

ceruloplasmina$

= #apto)lobina4

o 0u funcin es captar #emo)lobina 21b34 (a formacin del

comple*o 1b=#apto)lobina impide que la peque.a cantidad de1b liberada por #emlisis normal intravascular sea ecretadapor orina, evitando as el efecto tico de la 1b libre y laprdida de


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o Participa en el metabolismo del #ierro y el >u??, ya que unamolcula puede '*ar #asta 9 tomos de >u??, es un reactantede fase a)uda positivo, y aumenta en tumores y leucemias$

o (a de'ciencia con)nita de ceruloplasmina desarrolla laenfermedad de Milson$

90 73lob.linas:

o Halor normal4 8,N=6,6 )G688 mlo O6=)lobulina4 incluye a la transferrina y la #emopeina$o O!=)lobulina4 incluye a >C = transferrina4o -s una protena que '*a


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monoclonal que stas protenas pueden mi)rar desdeJ! #asta el punto de siembra3, incluye4

o )B4 monmero de 6N8 QDa, se reconocen "subclases, es la mayoritaria, puede atravesar laplacenta y es la principal inmuno)lobulina en larespuesta inmune secundariaI

o )A4 se puede encontrar como monmero, dmero o

trmero, media la inmunidad de mucosasIo )/4 es una inmuno)lobulina pentamrica,

asimtrica, de P/ #asta 6888 QDa, no atraviesa laplacenta y es la inmuno)lobulina que media larespuesta inmune primariaI



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$esarrollo e=peri(ental :MATERIALES

o -spectrofotmetro$o Tubos de ensayoo Pipetas$o A)ua destilada$%eactivo -DTAG>u4 comple*o -DTAG>u 6C mmolGl

en RaS1 9L mmolGl y alquil aril politer 2AAP3$o 5%eactivo @>resolsulfon TO$O0e procede por administrar las determinadas cantidades su)eridaspara cada uno de los tubos de reactivo que son dos, continuacin seaplicaran distintas cantidades que variaran de acuerdo a la indicacindel cuadro representado, el cual se distin)ue debido a lasecepciones que se acentan dependiendo de las sustancias tanto ensuero como en orina$ 0e procede a me&clar cada sustancia aplicadaen los diferentes tubos, y, se lleva a ba.o mara a CL V> durante 66minutos y C8 se)undos y se leer ante el espectrofotomtro a N88 nmcolocando en la celda cada determinada muestra de cada uno de lostubos en el caso del eperimento A que consta de suero, a diferenciadel eperimento @ que traba*amos con orina el cual se incuba atemperatura ambiente y durante !8 minutos$5 %econocer cada uno de los materiales a utili&ar$5 0e)uir de manera ri)urosa las cantidades establecidas por el

profesor en el cuadro de la pi&arra, de lo contrario puede afectar a laeperiencia$5 (os estudiantes se turnan ante todos los miembros de la mesapara reali&ar ste procedimiento$5 >on ayuda de la otra pipeta empe&amos a utili&ar cada una delas soluciones a.adindola de forma eacta para que cada uno de lostubos que ocuparan las muestras$5 0e lleva a cabo el proceso de determinar la diferencia ante elreconocimiento de masa visceral y esqueltica en amboseperimentos$



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Res.lta*os :

-perimento A

$ETERMI#ACI $E PROTEI#AS TOTALES Y

ALB?MI#A E# S%ERO

1.n*a(entos *el ()to*o:

$eter(inai+n *e Prote!nas Totales:(os enlaces peptUdicos de las protenas reaccionan con el in cWprico,en medio alcalino, para dar un comple*o color violeta con mimo deabsorcin a "8 nm, cuya intensidad es proporcional a laconcentracin de protenas totales en la muestra$

$eter(inai+n *e Alb5(ina4

(a albmina reacciona espec'camente 2sin separacin previa3 con laforma aninica de la @romo >resolsulfon


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Calculo A muestra

A stardard n

0.573

0.4486=7.67

DETERMINACIN DE AL,-MINA

,lanco Standard Muestra

Reactivo 3.1ml 3.1ml 3.1ml

Agua destilada 10uL - -

Standard 1.83uL 20uL -Muestra - - 20uL

Mezclar por agitacin! Incu"ar por .) s! Leer en espectro(ot$etro a +''n$!

Calculo A muestra

A stardard n

1.948

1.835=3.32



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-perimento @

$ETERMI#ACI $E CREATI#I#A %RI#ARIA


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Res.lta*os:

(as protenas totales se solicitan frecuentemente en una analticarutinaria$ Proporcionan una informacin )eneral sobre el estadonutricional, por e*emplo si se #a sufrido una prdida de pesoin*usti'cable recientemente$ Tambin se solicita *unto con otraspruebas para proporcionar informacin si se presentan sntomassu)estivos de alteracin #eptica o renal, o si se sospec#a laeistencia de un trastorno de la mdula sea o para investi)ar lacausa de una retencin anormal de lquido en los te*idos 2edema3$

(os resultados de las protenas totales se suelen interpretar *unto conlos de otras pruebas y pueden porporcionar al mdico informacinacerca del estado )eneral del individuo en relacin a la nutricin yGo ala eistencia de trastornos que afecten a r)anos vitales como el#)ado y el ri.n$ 0i los niveles de protenas totales estn alterados,ser necesario reali&ar otras pruebas para alcan&ar eldia)nstico$+nos niveles ba*os de protenas pueden su)erir unaenfermedad #eptica, una enfermedad renal o un trastorno en el quelas protenas no se di)ieren o no se absorben adecuadamente a nivelintestinal$ Pueden observarse concentraciones disminuidas deprotenas en malnutricin severa y en trastornos que causanmalabsorcin, como enfermedad celaca o enfermedad inamatoriaintestinal Pueden observarse niveles elevados de protenas totales enprocesos inamatorios o infecciosos crnicos como #epatitis vricas oinfeccin por el H1$ Riveles elevados de protenas tambin puedenasociarse a trastornos de la mdula sea como el mieloma mltiple

C.estionario :



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/07 Con los *atos obteni*os en los e=peri(entos@realiar la valorai+n n.triional *e *ia personasabien*o .e es var+n@ pesa ;D 3@ s. talla es /@9;( F s. vol.(en .rinario en 48 oras 2.e *e /DDD (l0

1ombre4= Peso4 N8 Q)= Talla4 6$N m= > +4 6888 ml

%elacin > + !"#GTalla1000

1.56=641.02

D-0R+T%>XR %elacin PesoGTalla

60

1.56=38.46

RS%/A( Protenas totales

0.573

0.4486=7.67

RS%/A(

Albmina1.9481.83

5=5.32

RS%/A(



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407 C+(o .biera si*o la valorai+n n.triional en elaso .e la persona .biera si*o (.jerH

/u*er4= Peso4 N8 Q)= Talla4 6$N m= > +4 6888 ml

%elacin > + !"#GTalla1000

1.56=641.02

@AYS %elacin PesoGTalla

60

1.56=38.46

-(-HADS Protenas totales

0.573

0.4486=7.67

RS%/A(

Albmina1.948

1.835=5.32

RS%/A(



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607 Menione las arater!stias 3enerales *e lasprote!nas F s. lasi"ai+n0

(as protenas deben su importancia biol)ica al nmero de funcionesque desempe.an, entre las que podemos citar4

A0 Catal!tiasla prctica totalidad de las re)iones biol)icasestn catali&adas por en&imas espec'cas, de las que eistenunas !$888 distintas en cada clula$ Todas ellas son protenas$

B0 Re3.la*oras#ormonas peptdicas como la insulina 2quere)ula el metabolismo de la )lucosa3, la #ormona delcrecimiento o paratiroidea 2que re)ula el metabolismo del calcioy del fsforo3$

C0 Estr.t.ralesforman parte de las membranas celulares, losmicrotbulos, cilios, etc$ 0on parte importante de las u.as, piel,etc$

$0 Transportecomo la #emo)lobina que transporta o)eno porla san)re$

E0 A.(.lai+n *e s.staniascomo la ovoalbmina de la claradel #uevo y la casena de la lec#e, que actan como protenasde reserva$

10 Movi(ientola contraccin muscular se debe a la interaccinde 'lamentos proteicos de actina y miosina$

G0 $e2ensa in(.nitarialas inmuno)lobulinas dan lu)ar a losanticuerpos, que se forma como respuesta a la presencia de

sustancias etra.as o ant)enos, a los que a)lutinan oprecipitan$

(as protenas pueden clasi'carse en tres )rupos, en funcin de suforma y su solubilidad$

Prote!nas "brosas4 las protenas 'brosas tienen unaestructura alar)ada, formada por lar)os 'lamentos deprotenas, de forma cilndrica$ Ro son solubles en a)ua$ +ne*emplo de protena 'brosa es el col)eno$

Prote!nas 3lob.lares4 estas protenas tienen una naturale&a

ms o menos esfrica$ Debido a su distribucin de aminocidos2#idrfobo en su interior e #idr'lo en su eterior3 que son muy



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solubles en las soluciones acuosas$ (a mio)lobina es un claroe*emplo de las protenas )lobulares$ -stas se clasi'can en4

)lie al2a:esta estructura se desarrolla en forma deespiral sobre s misma debido a los )iros producidosalrededor del carbono beta de cada aminocido$ (a

mio)lobina es un claro e*emplo de protena de #lice alfa$ oja ple3a*a beta:cuando la cadena principal se estira almimo, se adopta una con')uracin conocida comocadena beta$ (a tenascina es un e*emplo de las protenas#o*a ple)ada beta$

Al2aKbeta:(as protenas que contienen una estructurasecundaria que alterna la #lice alfa y la #o*a ple)ada beta$+n e*emplo de protena alfaGbeta es la triosa fosfatoisomerasa$ -sta estructura es conocida como un barril T/$(a #elicoidal alterna y los se)mentos de #o*a ple)ada beta

forman una estructura de barril cerrado$ Al2a Beta:-n estas protenas, la #lice alfa y la #o*a

ple)ada beta se producen en re)iones independientes de lamolcula$ (a ribonucleasa A es un e*emplo de protena alfa? beta

Prote!nas *e (e(brana4 son protenas que se encuentran enasociacin con las membranas lipdicas$ -sas protenas demembrana que estn embebidas en la bicapa lipdica, poseen)randes aminocidos #idrfobos que interactan con el entorno

no polar de la bicapa interior$ (as protenas de membrana noson solubles en soluciones acuosas$ +n e*emplo de protena demembrana es la rodopsina$ Debes tener en cuenta que larodopsina es una protena inte)ral de membrana y se encuentraincrustada en la bicapa$ (a membrana lipdica no se muestra enla estructura presentada$

807 '.) son las 3lob.linas F .les son s.s lasesH



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(as )lobulinas son un )rupo de protenas insolubles en a)ua que seencuentran en todos los animales y ve)etales$

-ntre las )lobulinas ms importantes destacan las4

0ero)lobulinas 2de la san)re3$ (as lacto)lobulinas 2de la lec#e3$ (as ovo)lobulinas 2del #uevo3$ (a le)umina$ -l 'brin)eno$ (os anticuerpos 2)amma=)lobulinas3$

907 $esriba los ()to*os *e *osaje tanto .!(ioso(o eni(tios para prote!nas totales@ alb5([email protected] F reatinina0

(os mtodos para medir la concentracin de protenas totales 2PT3pueden clasi'carse en4

/0 1!sios:

Absorbancia del enlace peptdico a 678 nm4 se basa en lapropiedad que tiene el enlace peptdico de absorber a esalon)itud de onda$

Absorbancia de los aminocidos aromticos a !98 nm4 suprincipal limitacin es que no todas las protenas tienen la misma

proporcin de estos aminocidos, lo que le resta eactitud$

%efractometra4 mtodo de eleccin, pero #oy en da en laprctica clnica se est de*ando de usar$

40 '.!(ios:

%eaccin de :*elda#l4 considerado #istricamente como elmtodo referencia$

/todo de (o;ry4 se basa en la reduccin del reactivo de iocalteau provocada por el comple*o unin peptdico=>u!? en

medio alcalino con la participacin de restos fenlicos 2tirosilos3$



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%eaccin de @iuret4 se fundamenta en la formacin de uncomple*o, en medio alcalino, entre el >u!? y los enlacespeptdicos 2absorcin a "8 nm3$ -n la prctica clnica, es una delas metodolo)as ms usada para el dosa*e de PT$

/todos turbidimtricos 2precipitacin con cido tricloroactico=T>A o sulfosaliclico3

/todo de @radford

M)to*o *e Bi.ret

0e basa en la formacin de un comple*o coloreado entre el>u!?y los )rupos R1 de los enlaces peptdicos en medio bsico$6>u!?seacomple*a con " R1$ (a intensidad de coloracin esdirectamente proporcin a la cantidad de protenas 2enlacespeptdicos3 y la reaccin es bastante espec'ca, de manera quepocas sustancias inter'eren$ (a sensibilidad del mtodo es muyba*a y slo se recomienda para la cuanti'cacin de protenas enpreparados muy concentrados 2por e*emplo en suero3$

M)to*o *e Bra*2or*

0e basa en la unin de un colorante, >omassie @lue B=!82tambin 0erva @lue3 a las protenas$ -l colorante, en solucincida, eiste en dos formas una a&ul y otra naran*a$ (asprotenas se unen a la forma a&ul para formar un comple*oprotena=colorante con un coe'ciente de etincin mayor que elcolorante libre$ -ste mtodo es sensible 26=6 Z)3, simple,rpido, barato y pocas sustancias inter'eren en sudeterminacin$ -ntre las sustancias que inter'eren estn losdeter)entes y las soluciones bsicas$

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