PRACTICA ACCION ENZIMATICA

5/10/2018 PRACTICA ACCION ENZIMATICA - slidepdf.com

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PRACTICA No.5

t'

' ",.}

,IACCION ENZIMATICA

I. iNTRODUCCION.

Cuarido se realizan reacciones quimicas a veces es necesario aqreqar sustancias que ,I

aceleren 0 faciliten la reacci6n, a estas sustancias se \es llama catalizadores. Las i'

enzirnas son proteinas, tambien Ilamadas catalizacores bioloqicos, porque son de I I . 'naturaleza orqanica; producidas par \a celuta para acelerar la velocidad de las ...

reacciones qufmicas, quedando estas intactas al terminar estas reacciones .Las enzimas actuan sabre sustancias Ilamadas sustratos, que es latrnolecula que van a

transformar, son altamente especfficas, variando su actividad coni \a mooificacion del

pH, emperatura, concentraciones de enzima y sustra1o; estas pueden Sl3r inhibidas POI

sus ancias !Iamadas venenos enzimaticos.

Durante as a

atectan 1 :0 acti

ica se (fa era de poner de manitie sto algunos de los tactores que

enzima ica

II. OBJET:VO.

•ierp e ar los mecanisrnos

eciticos .

A I fina liza t ':0 1aboratorio ca

•AI finalizar letpractice cada estudianie sera capaz ~ a a"

la actividad (Ie la catalasa en tejido animal y v _e:al.

los mecanisrnos subyacentes de

Ill. MATERIJ\L

.. 3 Pinzaspara sujetar tubos de ensayo

.. Soluci6n de alrnid6n al 1%

.. Saliva"

.. Lugol enfrasco gotero

.. Reactivo de Benedict

" 1 Docena de tubas de ensayo, resistentes al calor

.. Pastiilas de cuajo (renina)*

.. Hel al 10%

.. 30 CC. de leche*

.. 4 goteros

.. 4 pipetas de 5 ml.

.. Ciuantef, descartables*

Q Crayon graso 0 maskin tape*

.. Vidrio de reloj



Papa y rabano"

• 9 a oxigenada* (Peroxide de hidr6geno)

• Trozo de hfgado y rinon de res"

• Hojas de afeitar (dos)*

u

. J

I.....I

EI material marcadocan asterisco (*) 10 aportan 19 S estudiantes por qrupo.-

JV PROCEDINlIENTO

Acci6n de la Amilasa sobre el almid6nJ

1. Rotule dos tubas con las letras Ay B.

2. Agregue al tuba 1 rnl de saliva. Y al tuba B 3 ml de salivaCaliente el tuba B hasta ebullici6n.

3. Rotule 4 tubos del numero 1 al 4, aqreqandoles 4 ml de soluci6n de almid6n al 1%.

4. Del tuba A extraiga unamuestra, y agregue2 gatas de el al tuba numero 1, Y 10

gatas al tubo nurnero : 2 .

5. Del tubo B extraiga una muestra, y agregue 2 gotas al tubo numero 3, y 10 gotas al

tuba nurnero 4.

6. Despues de 5 minutos, realice pruebas de lugol y benedict, a los 'ubos del nurnero '1

al nurnero 4

7. Observe, anote y analice sus resultados en el cuadro de reports.

l

ACCION DE LA AMIU\SA SOBRE EL ALMIDON

,~~~oE~_lC;~dad-~~;llZima

'I ] AC T IV A '

.2

- --i- =i FI =N =A ~C =C TI : : -V "C C A

.4

PRUEBA A LOS C I N C O MINUTOS

LUGOL BENEDICT

!--------._-._-_- ---.~----------

~==+----------'-----+----"------' ----,,---"

If---~---------·----~-~-------,-----·-'---

. 1. i_ _ Can que objeto calienta la saliva del tubo B?

2. GPorque se hace ne-~esarioesperar cinco minutos para observar el resultado?

CCION l1E LA RENINA SOBRE LA CASEINADE LA LECHE

Accion de la Renina sabre la Casefna de la Leche.

27



-1(L~Ch}~~C~i~'a)=T -DESCHlPCION DE OHSliRVACl_ONES-:::~

I

2 (Lecbe + R - a - Hel) --I

' I'I. ~

" I, ~1 ' 1

. 1

1. Disuelva 'Ii de pastilla de cuajo (renina) en 25 ml de agua destilada.2_ Nurnere 2 tubos de ensayo (1 y 2).

3. En el t ibo # 1 coloque 5 ml de leche.

4. En el tubo # 2 coloque 5 ml de leche mas 2 gotas de Hel 8 1 "10%.

5. Agregl:(, 10 gatas de solucion de renina a cada tubo ni.rnerado

6. Observe anote y analice sus resultados.

IL--------------'- l

Explique los, procesos ocurridos que Ilevaron a los resultaclos obtenidos.

!II

~

A CTIVIDAD DE CATALASA I

LCual es la funci6n del Hel en la reacci6n? I ,

. § 1 termino_peroxisoma fue introducida par De Olive para ideniificar cualquier rnicrocuergo quepresente la secuencia flavin oxidasa-catalasa.

Los peroxisomas son cuerpos delimitados par una membrana y contienen algunas snzrmas.

Son abundanies en las celulas hepaticas y en la de los tubules rsnales, pero muy escasos 0

ausentes en otros tipos de celulas.

Los peroxisomas contienen 3 enzimas que actuan catalizando reacciones en las que se asdel

peroxide de hidroqeno y una enz,imaque con~tituye alrededor de ~Q% del total dee~~~~~o :1

peroxisorna, que degrada el peroxco de hidroqeno en aqua y oxrceno g8S2050, reelnombre de CAfALASA.



Flavin oxidasa

ca aiasa

O :! Cas)

PROCEDIMIENTO:

Para poder estimar la velocidad de reaccion considere una escala !entre 0 y 5 (0- = no •

hay reaccion, 1 = muy lento, 5 = muy rapido), Registre los datos en i ' - m a tabla

A. Actividad de laCatalasa de Tejido Vegetalsobre Agua Oxiqenada.I

1. Haga un corte fino de rabano y uno de papa, cuyas dimensiones sean iguales,

coloquelos cada unc en diferente vidrio de reloj. Agregue tres Dotas de H202

Que observa? .

2 _ Haga un corte fino de rabano y uno de papa, cuyas dirnensiones sean iguales,

coloquelos cad a uno en diferente vidrio dereloj. Agregue tres: gotas Hel espere 1

minuto y 3 de H20:;. Que ocurre en la actividad de la enzima?

B. Actividad de la Catalasa de tejidos animales sobre Agua Oxigenada.

1. Hacer un corte fino de tejido hepatica y renal, cuyas dimensiones sean igua!es,coloquelos sobre diierentes vidrios de reloj, agregue tres gotasdEi agua oxigenada

~Que deduce?

2 _ Haga ~'n corte fino de tejido hepatico y renal, cuyas dimensiones sean iguales,

coloquelos sabre diferentes vidrios de reloj, agregue tres gotas de HC], espere 1

minuto y agregue 3 ml de agua oxigenada_ L,Que sucede?

REPORTE DE LASaRA TORIO No. 14

TEJIDOfESGAU\ 0 1 I 2 3 4 5

Papa

~

Rabano -Hfgado

Rifton __...__

29



V. INTEHPRETACION DE RESULTADOS:

LCual es el tejido eon mayor actividad y cus] el que tiene menor actividad?

GQue tieren en cornun y en que se diferencian?

Cuando es agregado a heridas produce burbujas. L Que indica esto?

En base a sus observaciones que puede concluir acerca de como afecta a la actividad

enzimatica 8 1 tiemp?, la concentraci6n y la temperatura?

.. ' ,

VI. PREGUNTAS COMPLEMENTARIAS

1. GOue cambios pueden sufrir, en relacion a la estructura quimica y el numero inicial

de rnoleculas, el sustrato y la enzima en una reaccion enzirnatica?

2. Si usted hace reaccionar la amilasa con el almidon y esperahasta que termine la

reaccion. Lccmo comprobaria que la ' e Lima 0 ha sufrido alteraci6n catalitica?

3. Cite cinco 8Jemplos de enzimas con sus sustratosrespectivos

VII. BIBlIOGRAFIA.

Avers J., Charlotte. 8iolog(03 Celular. P. Edic. Mexico, Iberoamericana, 1989

CillZTIS, Helena BARt"lES, _Sur. Et At Biologia. Mexico: 2000 1490 P

Audesirk T Audesirk T Bioloqia. 4ta. Edic. Mexico, Prentice Hall. 1996

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