8/11/2019 Practica N5 Identificacion de Saponinas.docx

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Practica N5 Identificacin de Saponinas

Propsito

Identificar cualitativamente la presencia de saponinas en un extracto vegetal.

Marco Terico

Las saponinas son metabolitos secundarios, ampliamente distribuidos en las plantas superiores, en las que se presentan

en forma de glucsidos. Es una combinacin de azucares y agliconas o sapogeninas.

La solubilidad en agua de estos compuestos esta facilitada por su alto peso molecular y la presencia de los residuos demonosacridos y de otros grupos polares en la aglicona. Por hidrolisis acida o enzimtica dan origen a una sustancia libre

del o los azucares formando as la sapogenina.

Existen dos clases de saponinas: las de tipo esteroidal,

generalmente triterpenos tetracclicos (base gonano) y las de

tipo terpenoides pentacclicos (saponinas triterpenoides,

derivados del escualeno).

En ambas familias de saponinas el enlace glucosdico se

establece a travs del hidroxilo en posicin 3 del anillo A de la

aglicona. Las esteroidales se localizan en monocotiledneas:

principalmente de la familia de las liliceas, amarilidceas y dioscoreceas; las triterpnicas: en las anteriores y enalgunas dicotiledneas.

Las saponinas son compuestos importantes en la defensa de la planta, algunas son reguladoras del crecimiento, tambin

presentan propiedades alelopticas, as como actividades molusquicidas y fungicidas.

Algunas saponinas triterpnicas presentan actividad biolgica, cardiaca y hemoltica, se usan como veneno para peces

reducen el colesterol, otras tienen actividades espermaticidas, antiinflamatorias, etc. Las saponinas esteroidales tienen

propiedades biolgicas similares a las triterpnicas, pero son menos abundantes en la naturaleza.

Las dos familias de saponinas presentan un grupo de caractersticas generales que sirven de base para su identificacin

rpida:

Prueba de la espuma.

Hemolisis de los glbulos rojos. Toxicidad en animales poiquilotrmicos (parlisis de agallas).

Prueba de Lieberman-Buchard (identificacin de saponinas esteroidales dan colores de azul hasta verde

mientras que las terpnicas presentan coloracin rosada, rojo o violeta).

Solubilidad (la mayora son solubles en etanol al 80%).

Ensayo para carbohidratos (por presencia de carbohidratos ligados).

AgaveAgave Americana

P.A. Gran cantidad de inulina (glcidos complejos), glucsidos esteroideos, entre los que se destaca la hecogenina,

as como saponinas.

ZarzaparrillaSmilax Aspera

P.A. Aproximadamente 2% de saponinas esteroides (sarsaponin, smilasaponin, parillin), zarzasapogenina, smilagenin

diosgenina, tigogenina, asperagenin, fitoesteroles como sitosterol, estigmasterol y pollinastanol, 50% de

almidn, resina, alcohol cetlico, aceite voltil, cido cafeicoshikmico, el cido shikmico, el cido ferlico

kaempferol y quercetina.

Alfalfa Medicago Sativa

P.A. Saponsidos, taninos, sales minerales (10%), vitaminas (400mg/100g), carotenos (67mg), trazas de alcaloides en

semillas (esaquidrina y homoestaquidrina).

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Hiedra Hedera Helix

P.A. Hojas: flavonoides: rutsido, rutinsido. cidos orgnicos: cafico, clorognico. Trazas de alcaloides (emetina)

Poliacetilenos: falcarinona, falcarinol. Fitoesteroles: sitosterol, estigmasterol, campestrol, colesterol

espinasterol. Sesquiterpenos: germacraneno, -elemeno. Toda la planta: saponsidos triterpnicos (5%)

glucsidos de la hederagenina (hederacsido C, -hederina); glucsidos del cido oleanlico (hederacsido B y

-hederina).

PiaAnanas Comosus MerrilP.A. Enzimas proteolticas (bromelina o bromelana). cidos ctrico y mlico. Vitaminas A, B y C. Azcares: glucosa,

sacarosa. Materias grasas. Sales minerales: yodo, magnesio, manganeso, potasio, calcio, fosforo, hierro, azufre

Abundante fibra (celulosa), en el corazn.

Diagrama de Flujo

Licuar el material vegetal con lamenos cantidad de agua posible y

dejar reposar por 12hrs enrefrigeracion.

Flitrar losmacerados.

Indice de Espuma.

Colocar 2mL decada filtrado en

tubos de ensaye.

Tapar el tubo yagitar

vigorosamentedurante 30s.

Observar si apareceo no espuma.

Si la espuma esmayor a 5mm

despues de 15minde su aparicion, la

prueba es positiva.

Prueba deRosenthaler.

Colocar 2mL decada filtrado en

tubos de ensaye.

Agregar 2 gotas devainillina y agitar.

Adicionar a cadatubo 1 o 2 gotas de

H2SO4.

Prueba deLiebermann-

Buchard.

Mezclar 1mL deanhidrido acetico y1mL de cloroformo.

Enfriar a 0C yadicionar una gota

de H2SO4.

Agregar 1mL de estereactivo a 2mL decada uno de los

filtrados.

Observacion dehemolisis al

microscopio.

Neutralizar el pH decada extracto.

Colocar una gota desangre en el

portaobjetos.

Adicionarle unagota del filtrado y

mezclarcuidadosamente.

Observar almicroscopio.

Reportar si hayhemolisis o no,

puede ser total oparcial.

Repetir estaoperacion para cada

filtrado.

Prueba de hemolisisen agar-sangre.

Cortar discos depapel filtro de 1cmde diametro aprox.

Calentar a ebullicionlos extractosneutros.

Impregnar cada unode los discos con losdiferentes extractos.

Colocar los discossobre el agar sangre,

tapar y dejarrefrigerando para

observar al diasiguiente.

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Disposicin de Residuos.

Esterilizar el agar sangre para poderlo desechar.

Los residuos de la prueba de Rosenthaler se neutralizan y se recolectan en recipiente D.

Los residuos de la prueba de Liebermann-Burchard se neutralizan y se recolectan en recipiente B.

Los portaobjetos se la prueba de hemlisis se introducen en solucin de Hipoclorito de sodio para su

inactivacin.

Resultadosndice deEspuma

RosenthalerLieberman-

BuchardHemolisis alMicroscopio

Hemolisis en AgarSangre

Alfalfa + + + + -

Hiedra + + + Parcial +

Pia + - - - -

Zarzaparrilla - + + Parcial -

Referencias

Obtencin De Crudos De Saponinas Hipocolesteromizantes Del Chenopodium Quinoa Willd.

http://scielo.sld.cu/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0138-65571997000100008

Consultado 05/10/2014.

Caracterizacin Y Cuantificacin De Flavonoides, Sapogeninas Esteroidales En Extractos De Tres Plantas

Mesoamericanas Lippia Graveolens(Organo), Passiflora Edulis(Maracuy) Y Smilax Domingensis(Zarzaparrilla).

http://biblioteca.usac.edu.gt/tesis/06/06_2682.pdf

Consultado 05/10/2014.

Saponinas Esteroides.

http://farmacia.udea.edu.co/~ff/saponinasp.pdf

Consultado 05/10/2014.

S.A. Qumica De La Flora Mexicana: Investigaciones En El Instituto De Qumica De La UNAM Sociedad Qumica

De Mxico, 1ed

, 2006: pg. 143.

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