Protocolo para-la-preparacin-de-medios-de-cultivo

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LICENCIADO ALBERTO RODRIGUEZ

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LICENCIADO ALBERTO RODRIGUEZ

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OBJETIVO

CONOCER PROCESOS PARA LA PREPARACIÓN DE MEDIO DE CULTIVO A PARTIR DE SOLUCIONES STOCK

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MATERIALES: TUBOS DE ENSAYO O

FRASCOS DE COMPOTA

AUTOCLAVE

BALANZA ANALITICA O DE BRAZO.

PLANCHA DE CALENTAMIENTO.

PAPEL VINIPEL

CINTA INDICADORA DE PH.

ERLENMEYER O BALÓN AFORADO

PROBETA

PIPETA

BEAKERS

PAPEL ALUMINIO

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PROCEDIMIENTO PARA PREPARAR UN LITRO DE MEDIO DE CULTIVO PARA (PAPA)

1. En un erlenmeyer o balón aforado, agregar 500 ml de agua destilada desionizada

500 ml

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• 2. A ésta solución, agregar 20 ml de la solución A,

• 20 ml de la solución B,

• 5 ml de la solución C,

• 5 ml de la solución D,

• 5 ml de la solución E,

• 5 ml de la solución F,

• 5 ml de la solución G.

SOLUCION A

SOLUCION B

SOLUCION C

SOLUCION D

SOLUCION E

SOLUCION F

SOLUCION G

500 ml

20 ml20 ml

5 ml5 ml 5 ml5ml

5 ml

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3. Como es medio de cultivo para papa, agregar:

1 mg de acido fólico

10 ml de agua de coco

10 mg de putresina HCL

30 gr de azucar

500 ml

1 mg de ácido fólico

10 ml de agua de coco

10 mg de putresina

30 gr de azucar

Agua de coco

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500 ml1000 ml

4. Con agua destilada desionizada, llevar la solución a volumen de 1 litro

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5. Utilizando el ph metro o la cinta de PH, medir el PH inicial y llevarlo hasta 5.8-6.0 optimo para el medio de cultivo.

1000 ml

PH 5.8

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6. En un beaker, adicionar 300 ml del mediopreparado y a éste adicionarle 5gr de agar,colocar este medio en la plancha de calentamientohasta ebullir, agitar constantemente y tenercuidado de no dejar pasar mucho tiempo, ya que elmedio se carameliza y pierde sus propiedades.

1000 ml

300 ml

300 ml

5 gr AGAR

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7. Luego de la ebullición se vierte esta solución sobre los 700 ml restantes del medio, agitar para homogenizar y dispensar en los frascos de vidrio , hasta una quinta parte.

700 ml

300 ml

1000 ml

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Otros pasos importantes8. Se tapan los frascos con cuadros de papel aluminio.

9. El medio se somete a esterilización a 121 ° C por 15 minutos.

10. Depositar los frascos en un lugar fresco.

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