Trabajo practico Nº 3

Cromatografía

DRA. ALEJANDRA SALERNO

DEPARTAMENTO DE QUÍMICAINSTITUTO SUPERIOR DEL PROFESORADO “JOAQUÍN V.

GONZÁLEZ”

CÁTEDRA DE QUÍMICA ORGÁNICA I2013

Objetivo

Separación de los componentes de una muestrabinaria de colorantes mediante cromatografíapreparativa en columna

Azul de metileno+

Rojo de metilo

N

S N+

CH3

N

CH3

CH3 CH3

Cl-

CAS [7220-79-3]C16H18ClN3S . 3 H2O

PF 373.90

Azul de metileno Basic Blue 9

N

CH3

CH3

ONaO

CAS [845-10-3]C15H14N3O2Na

PF 291.28

Rojo de Metilo sal sódica

PASOS A SEGUIR

1. Elección de la FM

2. Preparación de la columna

3. Relleno de la columna

4. Siembra

5. Elución

6. Análisis de las fracciones

obtenidas

Elección de FM por cromatografía analítica en capa fina (tlc, Thin Layer Chromathograpy )

1

Preparamos los capilares para la siembra

FE: gel de sílice

FM: 1) diclorometano2) metanol3) diclorometano: metanol 3:14) diclorometano: metanol 30:1

Calle 1: mezcla de colorantes

Revelado: luz visible

Preparamos cuatro cubas con las FMs 1-4

sembramos cuatro placas con la mezcla de colorantes

Eluímos una placa en cada cuba

Desarrollo del cromatograma:

Extremo sumergido en el solvente

Avance del frente del solvente

Comienza la separación

Continúa la separación

Analizamos los resultados Elección de la FM1

Calculen Rf de cada colorante en cada uno de los cromatogramas

Rf = 0-1

2, 3 Preparación y relleno de la columna

Que necesitamos??

- Se utilizan columnas de vidrio con un estrechamiento inferior- Se coloca un algodón en el extremo inferior- Se agrega la fase estacionaria sola o en suspensión en la fase móvil

Para tener en cuenta en este paso COLUMNA BIEN COMPACTADA

burbujas canalesirregular

QUE EL BORDE DE LA COLUMNA ESTE PAREJO

QUE NO HAYA FRACTURAS NI BURBUJAS, NI SE SEQUE

4 Siembra de la mezcla a separarLa mezcla a separar se deposita sobre la parte superior de la FE (0.5 mL), cuidadosamente, y luego una pequeña cantidad de algodón, si es un sólido se disuelve en una mínima cantidad de FM

5 Elución de la columna

1) FM1 = CH2Cl2: MeOH (30:1)

2) FM2 = CH2Cl2: MeOH:AcH (30:10:4)

- La elución se realiza por gravedad - Las fracciones que tienen el mismo

contenido se juntan en mismo recipiente

Desarrollo FM1

Desarrollo FM2

6 Análisis de las fracciones obtenidas por tlc

Eluato 1 Eluato 2

Localización e identificación de los

componentes:

Testigo de rojo de metilo

Testigo de azul de metileno

Eluato 1

Eluato 2

FE silica gel sin indicadorFM CH2Cl2:MeOH

(30:1)Revelado: luz visible

T1,2 E1 E2

conclusiones

Cálculo Rf