Inmuno Banco 2015
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7/24/2019 Inmuno Banco 2015 http://slidepdf.com/reader/full/inmuno-banco-2015 1/16 Actualización en Inmunohematología Fundación Hemocentro Buenos Aires Noviembre 2011
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Actualización en
Inmunohematología Fundación
Hemocentro Buenos Aires
Noviembre 2011
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El estudio de los antígenos y anticuerpos presentes
en la sangre, tanto en condiciones normales como
patológicas
Es el estudio de los marcadores antigénicospropios de los glóbulos rojos, plaquetas yleucocitos, como así también de las respuestasinmunológicas que estos provocan
Sólo los antígenos de los sistemasRH, KELL MNS y LW, son específicos de lalínea eritroide
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La aglutinación es la agregación, mediada
por anticuerpos, de las partículas queexpresan antígenos de superficie.
Tiene dos etapas• Sensibilización
• Formación de puentes entre las
células sensibilizadas.
01/11/2011 Dr. Silvio Rosell
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La hemólisis es la destrucción de los glóbulos rojos,
con liberación de la hemoglobina intracelular
La hemólisis no ocurre si los antígenos interactúan
con los anticuerpos en sueros sin complemento o
plasma con anticoagulante
La hemólisis constituye un resultado positivo
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La centrifugación promueve el acercamiento físico de las células
La prueba antiglobulínica indirecta emplea suero
antiglobulínico Otros métodos actúan:
reduciendo la carga negativa de las moléculassuperficiales
disminuyendo la capa de hidratación que rodea a lascélulas
introduciendo macro moléculas con carga positivaque las agregan
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Albúmina Humana LISS (Low ionic saline solution)
PEG (Polietilenglicol)
POLYBRENE (BHDM) Técnicas con enzimas proteolíticas
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Disminuye el potencial Z, favoreciendo la 2º fase de
la aglutinación.
En concentraciones de 30% o >favorece la
aparición de rouleaux
En la PCI no aumenta la sensibilidad de la prueba
Por falta de ventajas objetivas está en desuso
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Ante estos polímeros los GR normales exhiben
agregación espontánea, que puede dispersarse consales neutras como el citrato de sodio
El BHDM es un polícatión de amonio cuaternarioque neutraliza las cargas negativas de los GR.
Favorecen la aglutinación por Ig G
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El Polybrene se añade a los GR incubados con
anticuerpos a baja potencia iónica y bajo pH
Si se adiciona citrato de sodio, se restablece lacarga del GR
Si el aglutinado se disocia prueba negativa
Si el aglutinado persiste prueba positiva (aglutinaciónirreversible a los GR sensibilizados con Acs)
Tiene sensibilidad disminuida en la detección de
anticuerpos del sistema Kell
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El PEG es un polímero lineal hidrosoluble que se usa como
aditivo para incrementar la captación de anticuerpos
Su acción principal es eliminar el agua intercelularfavoreciendo el acercamiento de los GR
No debe centrifugarse el PEG con el suero y GR
Se lavan las células con solución salina y luego se efectúa
la prueba antiglobulínica
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El reactivo AGH de elección en laspruebas con PEG suele ser el anti-IgG
evita las reacciones falsas positivas con algunos
agentes poliespecíficos
Precipitados podrían interpretarse como reacciones
positivas
Potenciador de elección para la absorción de Ac
calientes
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Potencia mucho la captación eritrocitaria deanticuerpos en la fase I de la aglutinación
La cantidad de iones +/- del LISS (0,03 M) es menor al de
la SF (0.17M)
En la actualidad la mayoría de los profesionales
usa diluyentes o aditivos LISS
Contiene macromoléculas además de sales
iónicas y amortiguadores
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Puede aumentar hasta 1000 veces la afinidad
entre Ags y Acs
El aumento del volumen de suero acrecienta la
potencia iónica del sistema LISS –
aditivo
Se deben respetar estrictamente las instrucciones
del fabricante
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Ventajas:
Aumenta la sensibilidad de la PCI
para detectar Acs clínicamentesignificativos
Detecta Acs en baja
concentración y los de baja
afinidad que pueden perdersecon los lavados
Reduce el tiempo de incubación
Desventajas:
Debe ser sometido a estricto
control de osmolaridad paraevitar la fijación inespecífica
de C
Los GR suspendidos el LISS
deben ser procesados dentrode las 24 hs
Menor sensibilidad para anti-
K. (1º fase de aglutinación)
LISS
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Bromelina, ficina, papaína y tripsina
(Las más usadas)
Desnaturalizan ciertos antígenos eritrocitarios, en
especial M, N, S, Fya y Fyb, XG
Disminuyen la carga superficial de los GR por
clivaje de las moléculas de ácido siálico de las
cadenas polisacáridas El tratamiento enzimático lleva a la formación de
espículas en los GR y aumenta así el número
potencial de puntos de contacto
